RNA97011河豚毒素检测试剂盒…

RNA97011河豚毒素检测试剂盒
产品简介
详细介绍
  • 参考报价:电议 产地:广东 品牌:Abraxis 型号:RNA97011 更新时间:2018/8/8

RNA97011河豚毒素检测试剂盒用直接竞争免疫分析法定量测定河豚鱼中的河豚毒素(TTX)。RNA97011河豚毒素检测试剂盒反应孔可拆卸,可测单份样品,也可测多份样品。定量分析时需有含450nm波长的微孔板酶标仪。

1 概要

河豚毒素(TTX)是一种强神经毒素,其性质稳定,加热、盐腌及高温烹煮均不能使其破坏。对人的最小致死量约为0.5mg/60公斤体重,毒性比氰化钠大1000倍。因误食或食用加工不当的河豚鱼而发生人畜中毒的事件每年都有发生。故准确检测河豚鱼中的河豚毒素对预防和控制河豚毒素中毒,具有重要意义。本检测方法具有灵敏、快速、简便、特异性好、取样量小、不破坏鱼体结构,并可同时检测大量样品等优点。

2 测定原理

RNA97011河豚毒素检测试剂盒利用固相酶联免疫吸附原理,采用间接竞争ELISA法进行测定。用抗原包被微孔板,加入河豚毒素标准品或样品、抗河豚毒素酶标单克隆抗体进行免疫反应后,将未与包被抗原结合的抗体洗去;再加入酶标记的抗鼠IgG抗体孵育,加入显色液,经终止液终止后,用酶标仪在450nm处测定OD值。

 样品处理

新鲜鱼肉

----称取5g河豚鱼样品(肌肉、皮或内脏),剪碎,组织匀浆器打碎,加入25mL 0.1%的乙酸,用烧杯在电炉上煮沸搅拌10min。此步骤应注意不要让液体沸出容器,应控制加热温度,并不断搅拌。

----待冷却至室温后,上清用快速 定性滤纸过滤于50ml的离心管中

----沉淀用20mL 0.1% 乙酸洗到烧杯中,再煮沸3min

----待冷却至室温后,所有液体及煮沸的样品都加到离心管中,3000rpm离心10min

----取上清,量体积,置分液漏斗中

----加入等体积乙醚脱脂,震荡1min,静置分层,放出水层,量体积后置至另一分液漏斗中,再加入等体积的乙醚,震荡1min,静置分层。

----将水层放入50mL量筒中,用1mol/L氢氧化钠调节pH6.5-7.4,然后加入1x PBST50ml,每孔取50微升用于检测,并4摄氏度保存备用。

鱼干

----称取5g鱼干样品,剪碎,组织匀浆器打碎,加入45mL 0.1%的乙酸,加热到80°C后超声波(80%功率)萃取20min

----待冷却至室温后,所有液体及样品都加到离心管中,3000rpm离心10min

----0.9ml上清液,加入约20-40uL 1mol/L氢氧化钠调节pH6.5-7.4,然后加入PBS定容到1ml

----室温下3000rpm离心5分钟,取上清液进行检测。


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