人骨桥蛋白ELISA试剂盒
【简介】
骨桥蛋白（OPN）来源于骨基质，是一种分泌型糖蛋白。目前已发现多个细胞分泌高酸性的钙结合的糖基化磷蛋白，包括骨细胞，肾小管细胞，巨噬细胞，活化的T细胞和血管平滑肌细胞。分子量的大小取决于其糖基化和磷酸化程度，范围为66~44kDa
OPN的一个重要特点是含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）序列，如纤维蛋白，连蛋白和其他胞外蛋白，通过该序列可与细胞表面整合素受体结合，如αvβ3
另一重要特点，由于RNA连接，糖基化，磷酸化，硫酸化和对蛋白酶的敏感度不同，OPN在机体内以多种分子形式存在。OPN和凝血酶同时存在于受伤，炎症，血管再生和肿瘤组织位点。OPN易水解，这一过程可能有着重要的生理学意义。OPN片段的氨基末端含有一个隐藏的结合位点，可识别整合素α9β1，而且OPN还含有多个细胞结合位点，与多个受体反应；这些反应都有着不同的功能
【实验原理】
人骨桥蛋白ELISA试剂盒根据酶免法的夹心原理，利用两种不同的高特异性抗体，TMB作为着色剂，颜色强度与人OPN的量成正比
两种抗体如下：
包被抗体：抗人OPN(O-17)兔IgG，抗体反应部分，人OPN的N-端标记抗体
HRP标记的抗人OPN（10A16）小鼠IgG Fab’， 抗体反应部分，人OPN凝血酶裂解位点的右侧
【检测范围】
5~320ng/mL(76.9~4920pmol/mL)
【预期用途】
人骨桥蛋白ELISA试剂盒仅供研究，不能用于诊断
可用于EDTA-血浆，尿液或细胞上清中人OPN的体外定量检测。由于OPN分子是不稳定的蛋白，请在使用前将其储存于-80℃，放置室温或反复冻融会使检测值降低
建议EDTA-血浆样品用EIA缓冲液或PBS5~10倍的稀释，如果5~10倍的稀释还是超出了最高标准品值，则需进一步稀释
血清或肝素血浆样品的检测结果可能不是正确值，因为OPN不稳定，易被凝血酶裂解，而且OPN分子上有若干个肝素结合位点，所以肝素血浆也会影响试验
建议尿液样品用EIA缓冲液或PBS200倍稀释，但各实验室应最优化稀释率。由于尿液样品易分解，建议加入PMSF（蛋白酶抑制剂）等。样品采集后不能立即检测，应贮存于-80℃或更低，避免反复冻融，否则其检测值降低。尿液中OPN的量与尿液的体积成反比，建议用肌酸酐补偿进行检测
细胞上清的稀释比例因细胞而异，各实验室以最优化稀释比例稀释
不能检测凝血酶裂解的人OPN
重组的和天然的人OPN都可用此人骨桥蛋白ELISA试剂盒检测
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