circRNA（环状RNA）过表达载体构建服务
一、背景介绍：
环状RNA（circRNA）是mRNA在剪接的过程中，上游exon的5’端与下游exon的3’端剪接到一起，从而形成的首尾相接的环状RNA分子。 近来的研究表明，高等动物中环状RNA的种类和含量远远超过预期。 最近的研究发现circular RNA可以作为“microRNA海绵”，竞争结合microRNA从而解除这些microRNA对其他靶标的调控；同时保守型分析发现环状RNA上潜在 具有多种RNA结合蛋白的结合位点，暗示circular RNA可以调控RNA结合蛋白的功能。更为重要的是，circular RNA的表达呈现出很强的组织特异性，暗示这些circular RNA具有重要的生物学功能。但目前对circular RNA的研究刚刚起步，这类RNA的生物学功能还有待挖掘，因此是一个值得深入的研究方向。
二、特点：
目前对于 circRNAs 的功能性过表达（Gain of function）研究，研究者多基于 circRNAs 的侧翼序列特征，PCR 分段扩增目标 circRNAs 的侧翼 Alu 序列或内含子互补序列上下游各 200-1000bp 序列和目标 circRNAs 序列，构建 CMV 启动子的表达载体。其分段扩增步骤复杂，构建周期长，且过表达倍数有限。
鼎赛基因利用特异性高效过表达circRNA载体，为研究者提供简便高效的 circRNAs 过表达服务。载体 含有特殊的circRNAs 环化表达框架，能高效成环且过表达量高（平均5倍以上，最高可达500倍），且无碱基插入缺失。适用于普通真核表达，慢病毒包装等多方面实验研究。
三、样品要求：
1.样品类型：细胞、全血或新鲜组织或RNA样品或cDNA。
2.样品总量：细胞样品请提供至少1×106个细胞，组织样品请提供绿豆大小的组织块，全血样本2.5ml，RNA样品请提供5 μg以上的总RNA或cDNA。
3.样品质量：RNA无明显降解，提取的总RNA OD260/280值在1.8~2.2之间，浓度 ≥ 500 ng/μl，28S:18S ≥ 1.5，RIN ≥ 7。
4.客户需提供原始载体、新插入的调控元件和最终构建完成后的载体的DNA序列。
四、最终提供产品：
1.不少于2 ug的含目的序列的重组质粒一份
2.含上述重组质粒的甘油菌一份
3.原始测序报告一份
4.说明书一份
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