BCA蛋白检测试剂盒
BCA Protein Assay Kit
货号规格
BDIT0101-500 500
BDIT0101-2500 2500
Components 500次2500次
Protein Standard, BSA (5 mg/ml) 1 ml 1 ml × 3
Solution A 100 ml 500 ml
Solution B 2 ml 10 ml
简介
二价铜离子在碱性的条件下，可以被蛋白质还原成一价铜离子，一价铜离子和独特的
Solution A（含有BCA）相互作用产生敏感的颜色反应。两分子的BCA螯合一个铜离子，形
成紫色的反应复合物。该水溶性的复合物在562nm处显示强烈的吸光性，吸光度和蛋白浓度
在广泛范围内有良好的线性关系，因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。BCA法只需一步，
比传统的Lowry法两步法更快更简单，建议取代Lowry法用于蛋白定量。
特点
1. 一步反应，可在45分钟内完成，比Lowry法快4倍。
2. 高灵敏度，蛋白浓度检测下限为25μg/ml，蛋白量检测下限为0.5μg，样品体积低至
1-20 μl。
3. 可耐受大多数去污剂的干扰，如5% SDS、5% Triton X-100、5% Tween20/60/80。
4. 蛋白浓度在20-2000 μg/ml范围内线性良好。
5. 对不同蛋白质的检测结果的变异系数远小于考马斯亮蓝
保存
Solution A、Solution B：室温保存；BSA Protein Standard：室温运输，-20℃长期保存。
步骤（孔板法）
1. 标准品准备：将BSA protein standard 稀释成4-6 个梯度（浓度范围200-2000 μg/ml）。
注意：每次实验均需重新准备标准品，并制作标准曲线.
2. 准备Working Solution：将BCA Solution A 和Solution B 按50:1 比例混合（比如取
1 ml Solution A 和20 μl Solution B 混合)。Working Solution 在室温下能稳定保存至
少24 hr。
3. 取25 μl 标准品或待测样品至96 孔板中（复孔）。
4. 每孔分别加入200 μl Working Solution，用移液器轻轻吹打几下充分混匀。或在平
板振荡器上振荡30 sec。
5. 加盖，37℃放置30-60 min。或室温放置2 hr，或60℃放置30 min。
6. 将孔板冷却至室温，在酶标仪中用562 nm 检测。
7. 根据标准曲线计算样品的蛋白浓度。