QuickShuttle-BHK-21 转染试剂（BHK-21 细胞专用）
货号：KX0110046
含量：0.8 ml
用途：用于BHK-21 细胞的瞬时转染和稳定细胞系构建（立传立转）。
注意事项：
1. 质粒DNA：请用能够去除内毒素的方法制备高质量的质粒DNA。
2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒素纯水配制，高压消毒或除菌过滤。
3. 培养基：经过DMEM、RPMI-1640 和M199 等常规培养基测试，推荐使用含5~10%牛
血清的DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。
4. 以24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒素质粒DNA 用量为2μg、转染试剂用量
为3~5μl，请在正式实验前根据不同培养基用报告基因进行优化。
5. 立传立转要求使用生长旺盛的细胞，即细胞生长至80-90%成片或刚长满。若使用生长
过老的细胞，将明显影响立传立转的效率。
6. 立传立转对细胞状态要求较高，如果转染效果不理想，可按QuickShuttle-Enhanced 的
转染方法（见本说明书第4 页），在细胞贴壁后进行标准转染操作。
使用方法
1. 将新鲜消化的BHK-21 细胞接种到24 孔细胞板中，每孔1~2×105 细胞，1ml 完全培养
基。备注：可在生长旺盛的细胞传代后直接按下述步骤2~5 进行转染，无需18~24 小
时的等候时间。
2. 将2μg 质粒DNA 和3~5μl 转染试剂分别稀释到50μl 生理盐水中。备注：质粒DNA 和
转染试剂的最适用量需要根据不同培养基来优化，但理论上不超出1~2μg 和3~5μl 范围。
3. 合并上述两溶液并混匀。备注：无需其它转染试剂所需的10~30 分钟的等候时间。
4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中，用加样器吸打混匀。备注：转染复合物可直接
加入含血清的细胞培养基中进行转染。
5. 将细胞板移至37oC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注：无需在转染后4~6 小时补加血清或
更换培养基。
6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。