描述:考马斯亮蓝蛋白定量法又称Bradford法,是最常用的蛋白质快速定量方法之一。考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue G-250)与蛋白质结合后染料的最大吸收峰由465nm变为595nm,溶液的颜色由棕色变为兰色,在595 nm波长下测定的吸光度值与蛋白含量成正比。灵敏度比Lowry法高4倍,与BCA法相当。反应迅速,2分钟达到平衡并在1小时内保持稳定。操作简便,只需要一种反应试剂。干扰物质少,K+、Na+、Mg2+离子、Tris、葡萄糖和蔗糖、甘油、巯基乙醇、(NH4)2SO4、乙醇、EDTA等均不干扰此测定法。本试剂盒采用改良Bradford法和优化的试剂组成以及优化的测定方案,对0.5-4000 μg/ml浓度范围的蛋白进行线性检测,显著提高了蛋白检测灵敏度。提供5 ′ 染料浓缩液可进行400次标准2 ml比色杯检测,或2666次microplate检测。
组成与储存: 1) 5 ′ Coomassie浓缩溶液 100 ml; 室温或4oC 1年;
2) 牛血清白蛋白标准品(BSA):4.0 mg/ml溶液 1 ml。?20oC保存。
所需设备:比色计或酶标仪、微板比色仪,工作波长为595 nm ± 5 nm (见说明1)。