从1-50mg植物组织中提取高纯度RNA，对多糖多酚植物有特效
货号 | 规格 | 价格 |
HG407-01 | 5次 | 点击申请试用装 |
HG407-02 | 50次 | 1250元 |
HG407-03 | 250次 | 5000元 |
http://www.hyqbio.com.cn/index.php?case=archive&act=show&aid=52
操作步骤
*以下所有的操作步骤，未特别说明的，都在室温下进行。
1. 本试剂盒可以从50 mg植物组织中提取高质量的总RNA，过量样品会极大降低裂解效率，导致RNA得率和质量大幅降低。
2. 将800 μL Buffer RY/β-巯基乙醇加入到经液氮研磨的植物样品中，加入40μL plantaid，充分混匀，室温静置2 min。
*使用前在800μL Buffer RY中加入20 μL β-巯基乙醇。正常情况下，Buffer RY足以从绝大多数植物中提取出高质量的RNA，所以plantaid不是必须添加的。但当目标植物中含有太多的多糖、酚类以及次生代谢物时，加入plantaid可以取得令人满意的效果。
3. 将混匀的裂解液转移到DNA除去柱中，12,000 rpm离心30s，将过柱后的产物转移到一个无RNA酶的1.5mL 离心管。
*该步骤为可选步骤，可以有效地降低基因组DNA的污染。
4. 向裂解液中加入70%体积的无水乙醇(例如：500 μL裂解液中加入350 μL无水乙醇)，充分混匀。
5. 将加入无水乙醇的混合液转移到RNA吸附柱，室温静置1min，12,000 rpm离心30s，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
6.加入500 μL Buffer R2，室温静置1min，12,000 rpm离心30s，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
7. 加入600 μL Buffer RWS（确保已加入无水乙醇），室温静置1min，12,000 rpm离心30s，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
8. 再次加入600 μL Buffer RWS，室温静置1min，12,000 rpm离心30s，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
9. 12,000 rpm离心2 min，除去吸附柱上残留的乙醇。
*此步骤中开盖离心将会更有效的去除残留的乙醇。
10. 将吸附柱转移到一个无RNA酶的1.5 mL离心管中，加入30-50 μL DEPC-treated ddH2O，室温静置2min，12,000 rpm离心1min洗脱RNA。
*洗脱下来的RNA短期保存于-20℃，长期保存于-70℃。