HYQ血液RNA提取试剂盒

HYQ血液RNA提取试剂盒
产品简介
详细介绍
  • 参考报价:1050 产地:美国 品牌:HYQ 型号:HG405 更新时间:2014/11/27

本品提供了一种快速、稳定的方法,可以从细胞、动物组织、细菌和真菌、血液、植物等样品中快速提取RNA,在20-30 min内即可完成小量提取。只有微量的基因组DNA存在于纯化的RNA中,必要时可以通过DNase I消除。HYQspinTM总RNA试剂盒可直接用于RT-PCR、Northern杂交,cDNA文库构建等应用。

货号

规格

价格

HG405-01

5

点击申请试用装

HG405-02

50

1050

HG405-03

250

4200

http://www.hyqbio.com.cn/index.php?case=archive&act=show&aid=36

操作步骤:

使用前计算10 x Red Blood Cell Lysis Buffer 的用量,.然后用9倍体积的ddH2O稀释。

1.在合适的RNase free的离心管中加入1倍体积的人全血细胞和 5 倍稀释的 Red Cell Lysis Buffer ,颠倒混匀。

*加入适量的血样,健康血样(一般4000–7000白细胞/μL )不要超过1.5 mL ,若白细胞数量多,适量减少血样处理量。

2.冰上静置10–15 分钟,静置期间涡旋2次混匀。

浑浊的悬浮液变得澄清说明红细胞裂解完全,否则冰上静置时间增加到20分钟。

3.4°C离心机3000rpm离心10分钟, 完全移除上清。

离心后管底形成白色细胞团沉淀, 确保完全移除上清,细胞团有少量红色,说明有红细胞残留,在洗涤步骤可以除去,如果看到大部分的红色细胞团,再加1 mL Red Cell Lysis Buffer冰上静置5-10分钟。

4.加入等体积的Red Cell Lysis Buffer  (Red Cell Lysis Buffer 的体积=步骤1中血样的体积),涡旋重悬细胞。

5.4°C离心机3000rpm离心10分钟, 完全移除上清。

6.加入500 μL Buffer RY ,最大速度涡旋2分钟。

*确定Buffer RY的用量,使用前每毫升Buffer RY中加入20 μL2-mercaptoethanol (2-ME) 含有2-MEBuffer RY 室温可以储存1个月。

7.加入1倍体积的70% 乙醇,(例如: 500 μL 70% 乙醇= 500 μL 裂解液)

8.将加入无水乙醇的混合液转移到RNA吸附柱,室温静置1min12,000 rpm离心30s,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

9.加入500 μL Buffer R2,室温静置1min12,000 rpm离心30s,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

10.加入500 μL Buffer RWS(确保已加入无水乙醇),室温静置1min12,000 rpm离心30s,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

11.再次加入600 μL Buffer RWS,室温静置1min12,000 rpm离心30s,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

12.12,000 rpm离心5 min,除去吸附柱上残留的乙醇。

*此步骤中开盖离心将会更有效的去除残留的乙醇。

13. 将吸附柱转移到一个无RNA酶的1.5 mL离心管中,加入30-50 μL DEPC-treated ddH2O,室温静置1分钟,12,000 rpm离心1min洗脱RNA

*洗脱下来的RNA保存于-20℃

单位名称:苏州胜创生物科技有限公司
详细地址:苏州工业园区星湖街218号生物纳米园A2
QQ:8294889114
联系手机:
联系电话:
我要咨询:我要咨询
传真:0512-82177100
Email:sales@dmdbiomed.com
询价热线在线客服QQ咨询