QuikChange® 多点突变试剂盒
进行基因突变以研究基因表达或基因功能?蛋白质结构和功能研究?定向进化突变、寻找改善蛋白质活性的突变?现在,你可以采用Stratagene的QuikChange® 多点突变试剂盒即可在一个基因中引入多个点突变,简并性引物的使用使你构建较小的文库以筛选寻找特定性质突变。
Stratagene公司独创的QuikChange™ 定点突变试剂盒是市场上现有同类产品中的No. 1。没有任何产品可以象QuikChange™ 突变试剂盒那样快速、高效、简便地实现定点突变。用户使用我们的产品获得极大成功,这在越来越多的发表文献中可以得到证明。新的QuikChange 多点突变试剂盒可以在一轮次突变操作中同时引入多达5个位点突变。与原试剂盒相同,新的多点突变试剂盒适用于所有双链质粒,不需单链DNA模板,不需亚克隆,是市场上唯一可以在一个质粒上同时引入5个不同位点突变的产品。每个突变位点使用一个带突变的寡核苷酸引物,节约了合成引物的费用,并可使用简并引物构建文库。QuikChange家族的产品应用范围更加广泛,以满足客户不断变化的需要,在竞争中始终领先于其它产品,商业组织需得到许可方能将此技术应用于他们的研究中。具体请向我们查询,021-62483388-116。
· 同时进行多达5个点突变
· 采用高保真PfuTurbo® DNA聚合酶,确保扩增过程的高准确性,无预期外的随机突变错误
· 快速简单的3步操作,一天内完成
· 每个突变位点使用一个带突变的寡核苷酸引物,节省引物费用
· 可使用简并寡核苷酸引物
· 含有高转化效率的XL-10 Gold® 超级感受态细胞
1. 突变链合成:1)模板DNA变性2)与含有预期突变的引物退火(所有引物与同一条模板链配对)3)引物延伸及缺刻修复
2. DpnI消化甲基化/半甲基化亲本模板
3. 转化:将带有预期突变的单链DNA转化XL10-Gold细胞,完成由突变闭环单链DNA向双链的转换。
QuikChange 点突变技术适用于任何双链质粒,不需亚克隆。与基于PCR技术的突变不同,QuikChange 技术采用PfuTurbo DNA 聚合酶对模板DNA进行线性扩增。
与最初的QuikChange技术相比,多点突变系统仅需针对每个点突变设计一个带有预期突变的引物,通过温度循环步骤使引物延伸,从而在新合成的链中引入突变。随后使用Dpn I ,选择性消化掉亲本模板链。由于大多数大肠杆菌菌株中提取的质粒模板为dam甲基化,DpnI的消化对甲基化和半甲基化的DNA是特异的,所以可以用Dpn I 消化亲本DNA模板来选择含有突变的合成DNA。合成DNA带有缺刻,由QuikChange multi混合酶修复,随后被转化进入XL10 Gold 超级感受态细胞,在细菌细胞中形成双链。从转化细胞中纯化质粒,测序确定带有目标突变的克隆。The QuikChange 多点突变试剂盒非常高效,整个操作只需一天,引入突变的效率从30%到超过90%。
突变位点数 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
平均突变效率% |
91 |
91 |
60 |
58 |
30 |
常见问题 |
本试剂盒特点 |
产品优势 |
难以诱变的质粒 |
提供独特配方的混合酶,XL-10 Gold超级感受态细胞和其它优化组分,适用于任何质粒
|
任何质粒模板,一天内可快速引入5个点突变,可使用简并引物 |
意外错误突变 |
采用高保真的PfuTurbo 聚合酶 |
减少了意外随机突变的可能 |
耗用一周甚至更多时间 |
独特的一天突变技术,不需亚克隆 |
节约时间,减少了连续试验和亚克隆操作 |
QuikChange Multi Site-Directed Mutagenesis Kit(#200514, 30 reactions)
试剂盒组成:
可完成30个反应,包括5次对照反应。
包含:Pfu DNA酶混合物, 10 x 反应缓冲液, QuikSolution, dNTP, Dpn I 限制酶, 对照质粒, 3个对照引物, XL10-Gold超级感受态细胞, b-ME, pUC18对照质粒
参考零售价:RMB12,943.00
相关产品 (请参考Novagen 2002-3目录) |
His•Bind Resin
His•Bind Resin & Buffer Kit
4X Strip Buffer Thrombin
8X Charge Buffer
Chromatography Columns
Perfect Protein™ Markers
pET Expression Systems
pBAC™ Transfer Plasmids |
Restriction Grade Thrombin
Biotinylated Thrombin
Cleavage Capture Kit
Recombinant Enterokinase
Enterokinase Cleavage Capture Kit
Restriction Grade Factor Xa
Factor Xa Cleavage Capture Kit
Protease Inhibitor Cocktail Set III (without EDTA) |
产品名称 |
用途 |
包装 |
货号 |
建议零售价(RMB) |
QuikChange定点突变试剂盒 |
任何双链质粒单点突变,模板<8kb |
10 rxn |
#200519 |
2956 |
30 rxn |
#200518 |
8083 |
QuikChange XL定点突变试剂盒 |
任何双链质粒单点突变,模板>8kb |
10 rxn |
#200517 |
3307 |
30 rxn |
#200516 |
8951 |
GeneMorph™ PCR Mutagenesis Kit |
随机突变 |
30 rxn |
#600550 |
5995 |
上海启发生物科技有限公司 上海起发实验试剂有限公司
敬请关注:
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