多肽合成-生物素（biotin)标…

多肽合成-生物素标记肽

    亲和素与生物素之间非常稳定的、非共价作用在化学和生物学领域是最常运用的工具之一。生物素是复合维生素B2的组成部份。它与鸡清蛋白、亲和素、真菌蛋白、链霉亲和素均有较高亲和性和结合力。

    生物素标记可通过各种不同的linker或spacers与多肽隔离。一般建议引入linker如Ahx（一个6碳linker)让生物素更稳定或更灵活。

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•         1、金源科提供N端或C端生物素标记：Biotin (N端), Lys(Biotin)(middle), Lys(Biotin)(C端)。

•         2、带有linker(Ahx)的生物素标记: Biotin-Ahx (N端), Lys(Ahx-Biotin)(middle), Lys(Ahx-Biotin)(C端)。 

蛋白研究领域的应用

    在许多蛋白研究领域中，生物素标记肽通常与亲和素结合而被检测或纯化：: 免疫印迹（WB）、ELISA、免疫沉淀 (IP)、多肽亲和纯化、免疫组化 (IHC)、细胞表面标记、流式细胞术/荧光激活细胞分类(FACS)。

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•         1、锁定蛋白或其他蛋白复合物，使用生物素化多肽作为诱饵可从某样品中捕获某一假定的结合成份。其中一个策略就是使用链霉亲和素一步法捕获体内生物素化蛋白和串联亲和纯化，即传统亲和标签（FLAG或6HIS）外加一个生物素多肽。

•         2、生物素-亲和素的亲和力越高，对洗脱条件的要求越严。这一特点将有效减少其他亲和标签或天然抗体的背景结合。所以它很方便地用来确定两个纯化蛋白质在各种缓冲液中的相互影响（结合）能力。

•         3、仅有很少的天然生物素蛋白。所以交叉反应的机率非常低。生物素酰化从而可以用来从细胞裂解液中获得蛋白质相互作用信息。

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