特点
阳性率高:高纯度酶切型线性T载体,重组效率更高,蓝斑率低于10%
方便灵活:可于4℃运输;可与任何DNA连接酶配合使用
插入对照:提供纯化的PCR片段(800 bp)作为阳性对照
无NdeI或NcoI位点,利于重组表达基因的亚克隆
蓝白筛选:高表达活性的b-半乳糖苷酶,显色更快更深
批次稳定:遵循标准化生产流程,经过严格的质量检测
组分 |
体积 |
ez-t载体 (40 ng/μl) |
20 μl |
插入dna对照 (40 ng/μl) |
10 μl |
EZ-T载体是高效、便利的PCR产物克隆专用载体。该载体是基于pBlueScript II SK(+) 质粒,在EcoRI识别位点处添加了适当序列,经酶切处理后获得具有突出的3’-端T碱基的线性载体。EZ-T载体可与Taq 或Tth 等DNA聚合酶催化的携带3’-端A碱基的PCR产物互补连接,以利于下一步克隆或测序。由Pfu、Pwo、Vent或KOD等高保真DNA聚合酶催化反应的PCR产物,也可经Taq DNA聚合酶添加3’-端A碱基后,与EZ-T载体连接。
EZ-T载体多克隆位点区插入位点两侧均设计了EcoRI酶切位点,因此既可使用EcoRI单酶切,也可使用其他适当的内切酶双酶切,释放插入片段进行检测或亚克隆。EZ-T载体不含NdeI或NcoI限制性内切酶位点,故可用于克隆含上述酶切位点的基因。DNA测序建议使用M13 Forward和M13 Reverse或T7 promoter和T3 promoter 通用型引物。