OCT冰冻切片包埋剂冰冻切片…

OCT冰冻切片包埋剂冰冻切片免疫组化需要抗原修复吗?
产品简介
详细介绍
  • 参考报价:170 产地:浙江 品牌:西奈山 型号:125ml 更新时间:2012/8/23

 专业生产OCT冰冻切片包埋剂,适用于徕卡系列冷冻切片机,山顿系列冷冻切片机,美康系列冷冻切片 国产龙首冷冻切片机

冰冻切片是一种在低温条件下使组织快速冷冻到一定的硬度,然后进行切片的一种方法。冷室、组织块、包埋剂、切片之间的温度平衡于优化切片温度(Optimum Cutting Temperature, O.C.T.)附近,是获得高质量冰冻切片的先决条件。冰冻组织在接触刀刃的瞬间,局部温度短暂升高,发生局部融化,切开组织薄片暴露于冷室,被再次速冻,这种融化-冰冻温度变化是切片皱褶或断裂的原因。冰冻包埋液是由高分子聚合物组成的透明粘稠液体,速冷时固化,其冰冻速度和软硬韧度与组织细胞相近,因此能保证最佳O.C.T.,并具有支持填充、减少皱褶和断裂的作用。

OCT冰冻切片包埋剂是由高分子聚合物组成的无色透明粘稠液体,骤冷时固化,其冰冻速度和软硬韧度与组织细胞相近,因而能保证优化的OCT温度,具有支持填充、减少皱褶和断裂等作用。可任意添加于切片机的样品架以支持和固定样品。西奈山冰冻包埋液的突出优点是支持超薄和超厚(2-100μm)冰冻切片并减少皱褶。不影响后续免疫组化、原位杂交等病理染色操作,可用水或PBS冲洗完全去除,是理想的组织冰冻包埋剂。
 

冰冻切片需要抗原修复吗?
冰冻切片一般不需要抗原修复,石蜡切片需要抗原修复。目前进行的常规石蜡切片标本,一般均用甲醛固定。事实上经甲醛固定的部分组织细胞,免疫组化标记敏感性明显降低,其原因为:

(1)在用甲醛固定过程中形成醛键而封闭了部分抗原决定簇;

(2)甲醛在保存过程中会形成羧甲基,而封闭抗原决定族;

(3)在用固定剂固定时,会使蛋白与蛋白之间发生交联,也可能会封闭抗原决定族。因此在染色时为取得良好的染色效果,必须对有些抗原进行预先修复。

对于冰冻切片用西奈山环保组织固定液固定效果较好,可省去抗原修复步骤。如果是用4%PFA固定还是要考虑做抗原修复的。修复抗原的方法很多,一常用的抗原修复方法有微波修复法,高压加热法,酶消化法,水煮加热法等,常用的修复液是pH6.0的0.01mol/L的柠檬酸盐缓冲液。也有人用蒸馏水修复抗原,方法如下:将脱蜡水洗过的切片放入盛有蒸馏水的容器中,置微波炉内高中火5 min煮沸,中低火维持沸腾状态10 min。自然冷却,取出切片,滴加3%的H2O2,室温孵化15 min,PBS液洗3次,每次5 min,其它按说明书染色步骤进行。

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