分析磷酸化分子新方法——Phos-tag系列产品
Phos-tag技术
Phos-tag指由日本广岛大学医药分子功能科学研究室开发的在中性pH（生理性pH）条件下捕捉磷酸单酯阴离子的功能性分子。Phos-tag技术是指用Phos-tag分离、纯化、检测磷酸化物质（蛋白、肽等）的方法，这方法具有划时代的意义。
磷酸化蛋白指：
·细胞内的蛋白中有30%被磷酸化。
·磷酸化蛋白在在细胞信号转导中占有极其重要的地位。
·蛋白磷酸化是重要的蛋白翻译后修饰，蛋白的磷酸化和去磷酸化，在调控基因表达和细胞功能方面具有重要作用。
参考文献
"Recognition of phosphate monoester dianion by an alkoxide-bridged dinuclear zinc(II) complex", E. Kinoshita, M. Takahashi, H. Takeda, M. Shiro, and T. Koike,DaltonTrans.,2004, 1189-1193.
提供生物素标记的Phos-tag
——适用于免疫印迹法、表面等离子体共振及分馏。
提供Phos-tag丙烯酰胺
——适用于电泳实验。
提供Phos-tag琼脂糖
——适用于浓缩、分离、纯化的试剂
提供Phos-tag质谱分析试剂盒
——适用于质谱分析的试剂
Phos-tag
Phos-tag指的是能识别带阴离子基团的天然化合物或合成化合物的物质。而这次开发并商品化的产品对含有磷酸基的化合物特别有效。
Phos-tag是指在中性条件下（生理条件下），可与阴离子取代基结合、特别是与二价的磷酸单酯阴离子结合的化合物。该方法取代传统的酶免疫法与放射性同位素法，用作阴离子取代基、特别是含二价的磷酸单酯阴离子的捕捉剂，改善了以往检测磷酸化的结果不是特别稳定的缺点。
Phos-tag技术
蛋白的磷酸化和去磷酸化是生物体内信号转导重要研究项目之一，与生命功能有重要联系。探索了解这两个过程已成为后基因组研究的主要课题和新药开发的目标。
传统技术与问题点
·酶免疫法
利用抗体与目标物特异性结合的作用。
必需先制备目标物的抗体，得到抗体还需要纯化。
制备抗体需要注射动物，提取和纯化比较复杂，抗体活性不稳定。
不能生成成几kDa以下的磷酸化抗体。
·放射性同位素法
使用放射性同位素处理放射线和废液手续比较繁琐。
Phos-tag技术利用了Phos-tag特点，即利用它在中性条件（生理条件）下能与阴离子取代基结合，特别是与二价的磷酸单酯阴离子结合的性质，取代传统的酶免疫法和放射性同位素法，用来捕捉带有阴性取代基，特别是二价磷酸单酯阴离子的物质，是迄今为止检测磷酸化合物比较稳定的技术。被捕捉的化合物处于pH3～4的环境下时，其阴离子化合物一般处于游离状态。
用途
在生物化学领域，蛋白、核酸等物质分子内几乎都有磷酸基的化合物，利用Phos-tag可以识别这些化合物的性质，可用作以下用途：通过对磷酸化合物的磷酸基加帽、核磁共振、质谱分析比较样品的自旋差、质量差，从而发现新的供体（Donor）。使Phos-tag与板、树脂、有机玻璃、纤维等结合，然后捕获供体（Donor），从而分辨出已被磷酸化和未被磷酸化的化合物。再通过选定与Phos-tag结合的板、树脂或纤维，按照磷酸基团数进行分离。
1、核磁共振(NMR)
2、质谱分析（MS）
3、电泳
4、浓缩、分离、纯化
5、减活化剂
6、酶抑制剂
7、表面等离子体共振(SPR)
8、免疫印迹等等产品质谱分析用试剂
Phos-tag Mass Analytical Kit
试剂盒内容 包装 分子量
MS-101L 5 mg 581.4
MS-101H 5 mg 589.4
MS-101N 10mg 584.3
浓缩。分离。纯化用试剂
Phos-tag Agarose
试剂盒内容 包装 结合量
AG-501 0.5 mL 3~ 5 μmol Phos-tag/mL-gel
AG-503 3 mL 3~ 5 μmol Phos-tag/mL-gel
电泳试剂
Phos-tag Acrylamide
试剂盒内容 包装 分子量 载体量
AAL-107 10 mg 594.7 Phos-tag/Acrylamide=1/1(Mn2+-unbound ligand)
免疫印迹法·表面等离子体共振·分馏用试剂
Phos-tag Biotin
试剂盒内容 包装 分子量 载体量
BTL-104 10 mg 767.0 Phos-tag/Biotin = 1/1(Zn2+-unbound ligand) Protocol(Ver.5)InstructionsImage
BTL-105 10 mg 880.1 Phos-tag/Biotin = 1/1(Zn2+-unbound ligand) Protocol(Ver.5)InstructionsImage
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