T4 DNA连接酶/T4 DNA Ligase
英文名称：T4 DNA Ligase
CAS号：9015-85-4
级别：BR
分子量：55.3kDa，单体
来源：含有T4噬菌体克隆基因30的大肠杆菌
浓度：1u/ul(200CEU/ul）
活性定义：是指在ATP-PPi交换反应中，37℃、30分钟内将1nmol [32PPi]转换为Norit可吸收形式所需的酶量（weiss单位，1个weiss单位相当于约200个粘性末端连接单位。1个粘性末端连接单位：20ul反应体系（50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端）中，在16℃、30分钟内连接50%连接HindIII酶切的Lambda DNA 产物所需的酶量）
酶活性分析混合物：66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液组分：20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT，0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase缓冲液（#B69）：400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
50% PEG溶液：50%（w/v）聚乙二醇4000
抑制剂：当反应体系中NaC1或KC1的浓度超过200 mM时，可强烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活：65℃加热10分钟或70℃加热5分钟
注意：聚乙二醇（PEG）可极大地增加平末端DNA的连接效率，PEG4000在反应体系中的推荐浓度为5%（w/v）；T4 DNA Ligase与DNA结合会改变条带的琼脂糖凝胶电泳迁移率，为避免此现象，电泳前需处理样本或分子量标准。样本处理如下：样本与Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液（#R1151）混合，75℃加热5分钟或65℃加热10分钟后冰浴保存；转化时，连接产物的体积不得超过感受态细胞体积中的10%；电转化之前，先用氯仿抽提方法除去连接混合物中的T4 DNA Ligase，然后经乙醇沉淀纯化抽提产物
质量控制：测试表明无内切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能检测：粘性末端或平末端DNA的连接能力
T4 DNA连接酶/T4 DNA Ligase
用途：生化研究。粘性末端或平末端双链DNA的连接；双链寡核苷酸接头与双链DNA连接；双链DNA、RNA或DNA-RNA复合体中缺口的修复；连接酶介导的RNA检测；位点特异性突变；扩增片段长度多态性
保存： -20°C
T4 DNA连接酶/T4 DNA Ligase
上海卒瑞生物科技有限公司是一家专门从事生物科技领域内的技术开发、技术咨询、销售为一体的科学技术服务公司。为国内外科研院所、学校、实验室、制药、化工、环境保护及卫生检疫部门等相应企业提供科研实验技术服务。 公司与多家零售商和代理商建立了长期稳定的合作关系。上海卒瑞生物科技有限公司经销的各种品种齐全、价格合理。主要经营生化试剂(进口国产)、培养基、动物血清、抗原、抗体、实验试剂、Elisa试剂盒、实验室仪器等、氨基酸类、实验室耗材、低温恒温槽、雪花制冰机、恒温油槽等产品。我们拥有先进的研发技术和雄厚的科学实力，我们以诚信为本，顾客至上，合理的价格、优质的产品以多品种经营特色和薄利多销的原则，赢得了广大客户的信任，欢迎新老客户致电。
地址：上海浦东新区三林镇薛家宅236号
邮编：200124
联系人：销售部
电话：86-21-50824970，33789605,33933886
传真：86-21-50824970
手机：15821232702，15821454195
QQ： 2396306055，2353220159，2290434496，593241495
emall：yuanheping18@.163.com 593241495@QQ.com
网址：www.zrsw-sh.com