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96 DNA凝胶回收试剂盒采用优化的96孔板选择性吸附的方法，从琼脂糖凝胶或PCR反应产物中回收纯化DNA片段，回收长度在100bp-10kb的DNA片段。根据长度不同，凝胶DNA回收率在60-85%。本试剂盒可有效清除小于50mer的引物、酶蛋白、单核苷酸、荧光染料或放射性同位素标记的单核苷酸。而且本试剂盒采用独特的缓冲液体系，不仅可以保证凝胶的完全融化，同时也可防止DNA片段的损坏和降解。纯化回收后的DNA保持了完整的生物活性，适用于多种用途：如连接、体外转录、PCR、测序等分子生物学研究。
产品特性：
1. 高通量：可以一次性同时完成96个PCR样品的纯化，实现高通量纯化；
2. 快速：30分钟内可从TAE或TBE缓冲的琼脂糖凝胶中回收到超纯的DNA;
3. 高质量：纯化的DNA适用于DNA测序、DNA连接、PCR等多种下游分子实验操作。
以20ul 100bp Marker进行凝胶回收效果测试，从50ul洗脱液中取15ul进行凝胶电泳（随机取8个孔点样）。
使用说明书
AxyPrep-96 DNA 凝胶回收试剂盒
本试剂盒适合从各种琼脂糖凝胶中回收多至8 μg 长度在70 bp-10 kb 的片段，回收率为60-85%。
琼脂糖凝胶在温和的缓冲液（DE-A 溶液）中熔化，其中的保护剂能防止线状DNA 在高温下降解，然后在DE-B 溶液的作用下使DNA 选择性地结合到膜上。
纯化的 DNA 纯度高，并保持片段完整性和高生物活性，可直接用于连接、体外转录、PCR 扩增、测序、微注射等分子生物学实验。
一、试剂盒组成、贮存、稳定性
说明书
96-well DNA plate- A：96 孔DNA 制备板。
Buffer DE-A：凝胶熔化剂，含DNA 保护剂，防止DNA 在高温下降解。室温密闭贮存。
Buffer DE-B：结合液（促使大于70bp 的DNA 片段选择性结合到DNA 制备膜上）。室温密闭贮存。
BufferW2 concentrate：去盐液。首次使用前，必须按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇（可用100%
乙醇或95%乙醇），充分混合后使用。每次使用后需将瓶盖盖紧，以保持W2 中的乙醇含量。
Eluent：洗脱液，室温密闭贮存。
二、注意事项
1. Buffer DE-A（含有β-巯基乙醇）和Buffer DE-B 含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和防护眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。
2. 在步骤 1 中，将凝胶切成细小的碎块可大大缩短凝胶熔化时间（线性DNA 长时间暴露在高温条件下易于水解），从而提高回收率。勿将含DNA 的凝胶长时间地暴露在紫外灯下，减少紫外线对DNA造成的损伤。
3. 在步骤 2 中凝胶必须完全熔化，否则将严重影响DNA 回收率。
4. DNA 分子呈酸性，建议在2.5 mM Tris-HCl，pH7.0-8.5 的洗脱液中保存。
三、实验准备
1. 准备无核酸和核酸酶污染的Tip 头。
2. 第一次使用前，在BufferW2 concentrate 中加入指定体积的无水乙醇。
3. 准备 75°C水浴。
4. 使用前，检查Buffer DE-B 是否出现沉淀，若出现沉淀，应于75 °C 温浴加热至沉淀完全溶解并冷却至室温后再使用。
四、操作步骤
1. 用干净锋利的刀片从琼脂糖凝胶中切下含有目的DNA 条带的凝胶块，用纸巾吸尽凝胶表面液体并切碎。计算凝胶重量，该重量作为一个凝胶体积（如100 mg=100 μl 体积），然后依次放入96孔2.2 ml 深孔板（试剂盒内提供）孔中。
* 观察DNA 条带位置时，请尽可能缩短紫外照射时间，以减少紫外诱导突变。电泳时间可适当延长，从而使目的DNA 片段与其他DNA 片段尽可能分开，从而提高回收纯度。
2. 加入3 个凝胶体积的Buffer DE-A，用硅胶片密封各孔（试剂盒内提供），混合均匀后于75 °C 温浴，间断混合（每3-5 min），直至凝胶块完全熔化（15 min 左右）。3,000×g 简短离心使硅胶片上的溶液到96 深孔板中。
* 温浴及混匀过程中，要确保硅胶片与深孔板贴紧，以免孔间样品污染。
* Buffer DE-A 为红色溶液。在熔化凝胶的过程中，可以帮助观察凝胶是否完全熔化。
3. 弃硅胶片。每孔加0.5 个Buffer DE-A 体积的Buffer DE-B，用不干胶片（试剂盒内提供）密封各孔，混合均匀。3,000×g 简短离心使不干胶片上的溶液到96 深孔板中。当分离的DNA 片段小于400 bp 时，应在此溶液中再加入1 个凝胶体积的异丙醇。
* 加Buffer DE-B 后混合物颜色变为黄色，充分混匀以保证形成均一的黄色溶液。
4. 将 96 孔DNA 制备板（试剂盒内提供）置于新的96 孔2.2 ml 深孔板（试剂盒内提供）上，然后将样品转移至96 孔DNA 制备板中，用不干胶片密封各孔，3,000×g 离心5 min，弃滤液。
5. 将 96 孔DNA 制备板置回深孔板上，每孔加800 ml BufferW2，3,000×g 离心1 min，弃滤液；以同样的方法，再用800 ml BufferW2 洗涤一次，3,000×g 离心1 min。
* 确认在Buffer W2 concentrate 中已按试剂瓶上的指定体积加入无水乙醇。
* 两次用Buffer W2 冲洗能确保盐分被完全清除，消除对后续反应的影响。
6. 将 96 孔DNA 制备板置回96 孔2.2ml 深孔板上，3,000×g 离心5 min。
7. 将 96 孔DNA 制备板置于洁净的96 孔V 型底板（试剂盒内提供）上，在膜正中央加50 ml Eluent 或去离子水，用不干胶片密封各孔，室温静置5 min。3,000×g 室温离心5 min 洗脱DNA。
* 将Eluent 或去离子水加热至65℃，可提高洗脱效率。
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