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无需同源重组的基因敲入

晨光_Borneosun  发布于:2015/12/30  阅读量:1075  来源:Asian Scientist

亚洲科学家 研究员们已为一个不依赖同源重组的DNA修复机制基因嵌入方法开发了改进的工序。

 

称为PITCh (精确嵌入目标染色体),该工序在《自然工序》由特别委任讲师Tetsushi Sakuma, Takashi Yamamoto教授, 特别委任副教授,Ken-Ichi T Suzuki及他们在广岛大学的同事所报道。

 

根据该研究团队,PITCh 系统比现有的用基因组编辑工具将外源DNA嵌入目标基因组位点的方法更方便和有效。他们相信新技术将协助快速前进的研究领域,比如筛选新药和创建人类疾病的细胞或动物模式。

 

基因组编辑让研究员能在一目标位点而不是随机位点改造基因组。现有的编辑方法采用改造的核酸酶为分子剪刀,其在基因组的目标位点制造DNA断裂。当DNA断裂点被修复途径修复时,外源DNA嵌入基因组和替代或目标基因组位点的去除被诱导。

 

PITCh 系统是敲入方法的替代方案,其不依赖同源重组,DNA断裂修复途径之一,不像现有的用基因组编辑工具如TALENCRISPR-Cas9的敲入技术,后者用同源重组技术,”Sakuma说。

 

Sakuma解释说现有的敲入技术不能用在每一种细胞和生物,因为同源重组的频率多变。因此,研究团队目标另一修复途径, 微同源重组介导-尾端连接(MMEJ),和开发了PITCh系统。

 

研究员们描述了创建载体,转染至细胞,选择敲入细胞,检查嵌入的细致的步骤。一个简化的基因嵌入青蛙胚胎的方法也被描述。


全部评论(1)

  • 1楼
    2016/1/4 10:40:02泡菜豆芽汤

    好神奇的样子呢~虽然基因工程一直都在被各种质疑,但是研究的脚步是不会停止的。

    [0]

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