产品名称:人免疫缺陷病毒(HIV1/2,2条带)抗体胶体金法诊断试剂盒
型号: 诊断试纸
规格:1人份,25份/盒
检测介质:血清/血浆/全血
适用于体外诊断
用途
人免疫缺陷病毒(HIV1/2,2条带)抗体胶体金法诊断试剂盒是基于免疫层析法的体外快速诊断。它定性测定人血清,血浆,全血中HIV-1和HIV-2抗体,从而对艾滋病毒感染提供诊断依据。
概述
人类免疫缺陷病毒(HIV)可引起获得性免疫缺乏综合征(AIDS-艾滋病),艾滋病相关复合体(ARC)和前-艾滋病。从艾滋病患者和艾滋病高危健康人上已分离出了第一个艾滋病相关病毒,HIV-1(也称为HTLV-III,LAV-1和ARV)。HIV-1分离体的遗传分析证实了存在许多亚型。迄今为止,8个HIV-1亚型(A-H),定义为M组已在世界范围发现。此外,Cameroon艾滋病患者有高度变异的HIV-1分离体,定义为O组。一种和HIV-1密切相关但又有区别的第二种人类免疫缺陷逆转录病毒,定义为HIV-2(以往称为LAV-2) 已经从西非艾滋病患者身上分离到。HIV-2和HIV-1共享许多类似基因序列,但是两者血清交叉反应因不同样本而有变化。
性接触,血接触(包括共同污染的针头和注射器)或污染的血制品可传染艾滋病,或者怀孕时有感染的母亲传给胎儿。艾滋病患者产生抗艾滋病毒蛋白抗体。检查体液(包括血液,唾液,和尿液) 中抗艾滋病毒抗体的存在可以准确诊断艾滋病毒感染。但是,血清阳性必须和临床症状一起综合考虑。例如,新生儿HIV抗体阳性表明曾接触过艾滋病毒,但并非本身患艾滋病。抗体可能来自母源抗体,可持续18个月之久。相反,HIV抗体阴性并非就能排除艾滋病感染,或者认为无传递病毒的能力。抗体对近期接触的反应有时需几个月才达到检测得到的水平。接触后血清转化前无症状并且血清阴性的个人身上也能分离到艾滋病毒。
标准HIV测试首当酶免筛选,重复阳性的若要最终确认,需要作免疫印迹法(Western-Blot,WB)试验。但是,出报告需48小时至2周以后,不能满足HIV快速诊断的需要。人免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体胶体金法诊断试剂作为床边检查克服了以上的不足。
应用HIV快速测试增加了艾滋病患者的查出人数。具美国疾病控防中心(CDC)估计,美国大约900万艾滋病患者中1/3的感染者对自身情况毫无所知。结果,失去了早期抗病毒治疗的机会。快速HIV测试使患者立即知道检查结果,从而及时咨询和治疗。此外,对分娩时自身HIV情况不明的孕妇,快速HIV测试床边检查的优越性使孕妇和胎儿在分娩时就得到抗病毒治疗,从而大大减少了新生儿艾滋病感染的机会。另外,快速HIV测试对意外接触艾滋病患者体液的医务人员也极有帮助。在美国每年估计有600-1000万针头刺伤事件发生,快速HIV测试快速和准确的结果对作出正确的治疗方案有重大意义。
原理
人免疫缺陷病毒(HIV1/2,2条带)抗体胶体金法诊断试剂盒是将夹心式免疫测定方法与免疫层析的检测手段应用于同一个检测当中。血清加入样本孔(Sample Port, S)后,它渗入联结垫片(Conjugate Pad),如果样本中有HIV1/2抗体,那么联结垫片里用金标记重组HIV抗原蛋白就会和其结合形成金标抗原-抗体复合物。这个复合物侧向流动,随后被固定于检测膜测试带(Test Line, T带)上的另一个重组HIV抗原蛋白所捕获, 从而在膜上形成一个肉眼可见的粉红色色带。色带颜色的深浅取决于样品中HIV1/2抗体的浓度。与此同时, 不管样品中是否有HIV1/2抗体,联结垫片里cTnI或Myo或CK-MB的浓度是否高于试剂盒检测敏感性水平,联结垫片里包埋的金标记鼠IgG均会被固定于检测膜质控带(Control line, C带)上的抗鼠IgG抗体所捕获,从而出现另一个色带,以表明试剂盒工作正常。
试剂盒组份
每个人免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体胶体金法诊断试剂盒含有:
1. 25个检测装置。
2. 1瓶显色液(1ml)。
3. 1份使用说明。
未提供但需要的材料
样本收集容器
定时钟
微量加样枪或者一次性微量取样吸管
保存条件
4-30 oC贮存检测装置。禁止冷冻。
有效期
有效期(18个月)过后作废。
样本收集和准备
按常规收集血清,肝素抗凝血浆和全血。
采样后立即测试效果最好。全血应在2小时之内测试。如果样本不能立即测试,可2-8℃贮存72小时,如果样本不能在72小时内测试,须冷冻保存。实验前得让样本恢复至室温。
血清中可加不超过0.1%叠氮钠(Sodium azide)作为防污染,这不影响实验结果。
实验步骤
将检测装置和样本平衡至室温。
从锡簿袋中取出检测装置。
将病人姓名或编码标记在检测装置上。
用取样吸管或微量加样枪吸取样本。
垂直加样20 ml (全血)或10 ml (血清/血浆)到样本孔(S)中。
加1滴或40 ml显色液。
10分钟时目测结果。
结果判定
阳性:
如果10分钟时见二条色带,则结果HIV-1或/和HIV-2阳性且有效。
阴性:
如果10分钟时测试区无色带,但质控区有带,则为阴性结果。
无效:
如果10分钟时质控区无色带形成,则结果无效。建议用新的检测装置重新检测。
质量控制
内部控制-不管结果是阳性还是阴性,质控区C带都应该出现。否则,检测装置无效。
外部控制-HIV1/2抗体胶体金法诊断试剂盒质控对照包括阳性对照和阴性对照。
局限性
1. HIV1/2抗体胶体金法诊断试剂盒仅适用于体外诊断。
2. HIV1/2抗体胶体金法诊断试剂盒仅仅检测样本中的HIV抗体,不能作为HIV-1和/或HIV-2感染的唯一标准。
3. 最终确认需要酶免和免疫印迹法(Western-Blot,WB)试验。所有检测结果必须和临床症状和其他检验报告一起综合使用来诊断艾滋病感染。
4. 检测阴性但是有临床症状,也不能排除艾滋病感染的可能性。对近期感染的抗体反应有可能需要几个月时间才能检查出来。
5. 就阳性结果而言,色带颜色的深浅并不完全和样本中的抗体滴度成正比关系。
预期价值
HIV1/2抗体胶体金法诊断试剂盒和共认的HIV酶免比较,两有相关性达99%。
表现特征
准确性: HIV1/2抗体胶体金法诊断试剂卡已通过抗HIV 1低滴度测试标准(PRB106),抗HIV 1血清转化标准(PRB910),抗HIV 1/2测试标准(PRZ202)(Boston Biomedica, Inc.),和国标HIV测试标准(WWRB303)。HIV1/2抗体胶体金法诊断试剂卡还和市场主要的HIV酶免测试进行比较。结果表明HIV1/2抗体胶体金法诊断试剂卡对抗HIV抗体特异性极高。总共比较了676份临床样本,两者吻合高于99%(674/676)。
测试 |
HIV酶免 |
本法HIV1/2检测 |
阳性 |
阴性 |
总计 |
阳性 |
238 |
2 |
240 |
阴性 |
0 |
436 |
436 |
总计 |
238 |
438 |
676 |
相对敏感性: 100% (238/238)
相对特异性: 99.5% (436/438)
精确性:
- 批内测试-一次实验三个样本(阴性,弱阳性和强阳性),每个样本20份。结果符合达100%(批内精确性)。
- 批间测试-20次实验,每次三个样本(阴性,弱阳性和强阳性),用三个不同批号的HIV1/2抗体胶体金法诊断试剂卡测试3个月之久。结果符合达100%(批内精确性)。
参考文献
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