Graves病(GD)系一种器官特异性自身免疫性疾病，可引起甲状腺自身各种特异性抗体的增高。某些自身免疫性疾病，除出现自身特异性抗体外，同时可出现非自身器官的非特异性抗体。本研究应用酶联免疫吸附分析(ELISA)方法对GD患者血清谷氨酸脱羧酶(GAD)自身抗体进行了测定，并对其临床价值进行了初步探讨。
一、对象和方法
1.对象：(1)GD组：确诊为GD的患者共51例，男25，女26。年龄(34.0±7.8)岁。病程(6.2±2.3)年。均排除1型糖尿病、系统性红斑狼疮等其他自身免疫性疾病。(2)正常对照组(NC组)：正常健康者46名，男23，女23，年龄(35.0±8.7)岁既往无慢性病史。
2.方法：所有患者及正常对照者均在清晨空腹无菌静脉采血10 ml，分离血清，-20℃保存，集中测定GAD抗体、游离T3(FT3)、游离T4(FT4)、促甲状腺激素(TSH)、抗甲状腺球蛋白(TGA)、抗甲状腺微粒体抗体(TMA)。GAD抗体的测定采用ELISA法，药盒为美国Biomerica公司产品，由北京海奥万信生物技术有限公司提供，批间及批内变异系数分别为＜10%与＜5%。TSH、FT3、FT4试剂盒为天津DPC公司产品，TSH测定采用IRMA法，FT3、FT4应用包被抗体RIA法测定。TGA与TMA测定采用直接免疫沉淀法，试剂盒由山东3V公司提供。
3.统计学处理：结果以x±s表示，统计学分析采用t检验、χ2检验、相关性分析，P＜0.05有统计学意义。
二、结果
1.各项指标测定结果：表1结果提示GD组GAD抗体、FT3、FT4、TGA、TMA水平均显著高于正常对照组。GD组血清TSH水平显著低于正常对照组。
2.相关分析：51例GD患者血清GAD抗体与FT3、FT4 均呈显著正相关 ( 分别为 r=0.521,P＜0.01;r=0.435,P＜0.01)，GAD抗体与TSH 呈显著负相关 (r=-0.352,P＜0.05)，GAD抗体与TGA、TMA均呈显著正相关(分别为r=0.307,P＜0.05;r=0.298,P＜0.05)。GAD抗体与病程无显著相关性。
3.GAD 抗体阳性 率：GD组GAD 抗体的阳性率 为19.6%(10/51)，正常对照组GAD抗体的阳性率为2.1%(1/46)，两组比较差异具有显著性(P＜0.01)。GD组中，病程大于5年者与病程在5年以下者比较，阳性率差异无显著性。
三、讨论
Baekkeskov等1982年发现了由一组抗体与胰岛细胞中分子量约为64 000的蛋白质形成的印迹条带。已证实64 000抗原即为GAD。GAD是抑制性神经递质γ-氨基丁酸的生物合成酶，存在于人和动物的脑、胰岛等组织内。目前认为血清GAD抗体的检测是临床上用以诊断1型糖尿病特别是成人晚发自身免疫性糖尿病的主要标志，并对糖尿病的正确分型及指导治疗皆有重要的参考价值〔1-3〕。
Christie等〔4〕通过测定GAD活性证实，GAD不仅存在于脑及胰岛内，也存在于甲状腺等组织内。本组资料结果显示，GD患者血清GAD抗体水平显著高于正常对照组，提示GD患者甲状腺有自身免疫的存在，至于GAD抗体的产生是免疫识别变异，或“禁株”细胞失控有待研究，可认为GAD抗体是GD的一种非特异性抗体。本研究显示GD组血清GAD阳性率(19.6%)与文献报道〔5，6〕10%～20%的结果相符合。
有学者发现，1型糖尿病合并GD的患者GAD抗体阳性率明显高于不伴GD的1型糖尿病患者，且认为GAD抗体阳性的GD患者有进展为1型糖尿病的危险〔7〕。而我们对3
表1 Graves病(GD)组与正常对照组血清谷氨酸脱羧酶(GAD)抗体、促甲状腺激素、游离T3、游离T4、抗甲状腺球蛋白、抗甲状腺线粒体抗体水平的比较
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| 组别 |
例数 |
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抗甲状腺 |
|
| GAD抗体 |
游离T3 |
游离T4 |
促甲状腺激素 |
抗甲状腺球蛋白 |
微粒体抗体 | <
| (OD值) |
(pmol/L) |
(pmol/L) |
(μIU/L) |
(%) |
(%) |
|
|
| NC组 |
46 |
0.31±0.18 |
4.6±1.9 |
18.7±6.4 |
2.58±2.21 |
12.0±10.0 |
11.0±5.0 |
| GD组 |
51 |
0.72±0.30 |
16.0±8.7 |
42.4±13.9 |
0.11±0.09 |
31.0±15.0 |
26.0±12.0 |
|
注：与NC组比较，P＜0.01,P＜0.001
例GAD抗体阳性的GD患者进行2年的随访研究发现，无1例患者进展为1型糖尿病。这与Baekkeskov等〔1〕的观点相一致，他们认为非糖尿病患者GAD抗体的出现并不总是能预测1型糖尿病的发生，如在Stiffman综合征患者中GAD抗体阳性率较高，其中有些患者GAD抗体的滴度非常高但不伴有糖尿病，且经长期随访并未发展为1型糖尿病。
本组资料研究结果显示，GD患者血清GAD抗体分别与FT3、FT4、TGA、TMA呈显著正相关，与TSH呈现显著负相关，表明GAD抗体的测定可反映甲亢的病情程度及甲状腺的机能状态。故在GD患者中血清GAD抗体的测定是否有助于GD的诊断还有待进一步探讨。
参 考 文 献
1，Baekkeskov S, Anstoot HJ, Christgan S, et al. Identification of the 64KD antigen in insulin-dependent diabetes as the GABA-synthesizing enzyme glutamic acid decarboxylase. Nature, 1992,374:151-154.
2，Tuomi T. Antibodies to glutamic acid decarboxylase reveal latent autoimmune diabetes mellitus in adults with a non-insulin-dependent onset of disease. Diabetes, 1993,42:359-362.
3，何君钦， 林丽香， 陈鸣钦. 糖尿病患者谷氨酸脱羧酶自身抗体测定的临床意义. 中华内分泌代谢杂志， 1997，2：97-100.
4，Christie M, Brown TJ, Cassidy D. Binding of antibodies in sera from type 1 diabetic patients to glutamate decarboxylase from rat tissue. Evidence for antigenic and non-antigenic froms of the enzyme. Diabetologia, 1992,35:380-384.
5，Hallengren B, Falorni A, Landin-Olsson M, et al. Islet cells and glutamic acid decarbosylase antibodies in hyperthyroid patients: At diagnosis and following treatment. J Intern Med, 1996,239:63-68.
6，Maugender D, Verite F, Guilhem I, et al. Anti-pancreatic autoimmunity and Graves‘ disease: Study of a cohort of 600 Caucasian patients. Eur J Endocrinol, 1997,137:503-510.
7，Kawasaki E, Takino H, Yano M, et al. Antibodies to glutamic acid decarboxylase in patients with IDDM and autoimmune thyroid disease. Diabetes, 1994,43:80-86.