血清钾、钠测定在临床上具有重要意义。常用的测定方法有火焰光度法和离子选择电极法。德国宝灵曼(Boehringer Mannheim, BM)公司推出钾、钠、氯酶法测定试剂盒，可以直接在全自动生化分析仪上进行测定。我们利用酶法钾、钠试剂盒在全自动生化分析仪上测定，并与火焰光度法和离子选择电极法进行了比较，取得满意效果，现报道如下。
一、测定原理
1.钾的反应原理：磷酸烯醇丙酮酸和二磷酸腺苷(ADP)在钾-依赖性丙酮酸激酶作用下生成丙酮酸和三磷酸腺苷(ATP)，生成的丙酮酸和还原型辅酶I(NADH)在乳酸脱氢酶的作用下生成L-乳酸和氧化型辅酶Ⅰ。NADH的下降速率与标本中的钾离子浓度成正比，在380 nm波长处监测NADH吸光度的变化可以计算出钾离子的含量。
2.钠的反应原理：邻硝基苯-β，D-半乳糖苷在钠-依赖性β-半乳糖苷酶作用下生成邻硝基苯酚和半乳糖，邻硝基苯酚生成速率与标本中的钠离子浓度成正比，在405 nm波长处监测邻硝基苯酚吸光度的变化可以计算出钠离子的含量。
二、材料与方法
1.材料：(1)仪器：日本Olympus AU560型全自动生化分析仪；瑞士AVL988-3型电解质分析仪；山东高密分析仪器厂生产的6400A型火焰光度计。(2)试剂：均为德国BM公司产品。(3)钾、钠酶法试剂盒(批号分别为1298011和1298054)。(4)标准液：第一标准K 2.5 mmol/L，Na 140 mmol/L；第二标准K 8.0 mmol/L，Na175 mmol/L。(5)复合质控血清Precinorm U(批号：186719)和Precipath U(批号：185259)。
2.方法：实验参数设定：(1)钾的参数：样本量7 μl；试剂Ⅰ(R1)250 μl，试剂Ⅱ(R2) 100 μl；第一波长(λ1)380 nm，第二波长(λ2) 410 nm。方法：两点法，负反应；第一点为11(396秒)，第二点为15(540秒)，间隔时间144秒；AA双标准定标。(2)钠的参数：样本量10 μl；R1：250 μl，R2：100 μl；λ1：410 nm，λ2：660 nm。方法：两点法，正反应；其它参数同钾的参数。(3)计算：设定高、低标准浓度分别为CH、CL，高、低标准及标本吸光度变化分别为△AH、△AL、△AT，计算如下：
钾、钠浓度C=CL+(CH-CL)×
3.选择AU560型全自动生化分析仪定标程序进行定标，火焰光度法和离子选择电极法按使用说明操作，统一使用BM复合质控血清进行质量控制。
三、结果与讨论
1.结果：(1)线性试验：配制浓度分别为1.25、2.50、5.00、7.50、10.0、12.5 mmol/L的钾标准液和浓度为45、90、132.5、175、220 mmol/L的钠标准液，绘制标准曲线，线性范围：钾1.25～10.0 mmol/L，钠45～175 mmol/L。(2)精密度：取不同浓度混合血清分别测定钾、钠，连续测定20次，测得批内CV，钾CV：1.116%，钠CV：0.939%；用Precinorm和precipath两种复合质控血清每天测定一次，连续测15天，日差变化的CV值分别为：钾1.62%～1.81%；钠1.97%～2.52%。(3)回收试验：在用酶法测得钾、钠浓度的血清中，加入不同浓度的标准液，测得钾的平均回收率为99.2%，钠101.5%。(4)相关试验：随机取30份标本血清分别用酶法、火焰光度法、离子选择电极法测定钾、钠，并做相关性分析，结果如下：酶法与火焰光度法比较，回归方程为：钾Y(酶法)=1.033 3X-0.297 6，r=0.992 4，钠Y(酶法)=1.027 8X-0.759 5，r=0.986 3。酶法与离子电极法比较，回归方程为：钾Y(酶法)=1.002 6X-0.220 4，r=0.998 3；钠Y(酶法)=1.078 4X-1.001 5，r=0.989 9。
2.讨论：酶法测定钾、钠一般要求双试剂，适应于较大型的全自动生化分析仪。结果表明，该方法的线性范围基本满足临床要求，同时与火焰光度法和离子选择电极法有较好的一致性，是一种可行的方法。但我们在实际操作过程中应注意几点：(1)比色杯一定要洁净，特别是使用塑料比色杯时，要求注意挑选和定期更换，以保证结果的准确性。(2)冲洗水或稀释水要用去离子水，以减少水中钾、钠离子的干扰。(3)每次复溶配制试剂必须进行重新定标。
钾、钠酶法测定操作简便，弥补了生化分析仪不能同时测定钾、钠的不足，在方法学上提供了新的手段。