新手上路,有哪位大侠能介绍介绍终点法中的两点法的原理,在生化上怎么去做两点法呀
(简单回答)最基本的生化反应方法有三种,其他的都是在此基础演变而来。
1。速率法,有叫动态法,仪器连续检测生化反应过程中的吸光度变化,目的是得到吸光度变化速率。酶活性的检测大多用此方法。检测底物的是下降反应,又叫负反应,例如:ALT AST 等;检测生成物的是上升反应,又叫正反应,ALP。
2。终点法。仪器检测生化反应某一时间点的吸光度值,目的得到反应溶液的具体吸光度值。常见的有GLU,TP ,ALB 等
3。两点法。仪器检测生化反应两个时间点的吸光度值,第二点减去第一点,得到吸光度的差值,检测底物的差值为负,检测生成物的差值为正,例如,中生试剂的肌酐项目Cr。
生化仪无论半自动或全自动,都有实验参数设置,只要按试剂说明正确设置,再照试剂说明做实验就行了。使用分光光度计另当别论。
两点法:又称为一级动力学法、固定时间法等,指在一定的反应时间内,反应速度与底物浓度的一次方成正比,即v=k[S]。由于底物在不断的消耗,因此整个反应速度在不断的减小,表现为吸光度的变化越来越小。这类反应达到平衡的时间很长,理论上可以在任意时间段进行监测,但由于血清成份复杂,反应刚启动时反应较复杂,杂反应较多,必需经过一段延迟时间才能进入稳定反应期。
两点法不是什么终点法中的两点法,准确地说它应该属于动态法范畴,一种带标准的动态法.