172、缓冲液有哪几种类型,各试举一例。
共有三种类型
①弱酸及其对应盐,例:HAc-NaAc
②弱碱及其对应盐,例:NH3.H2O-NH4Cl
③多元酸的酸式盐胶及其对应的次级盐,例:NaHCO3-Na2CO3
173、在人体血液中哪些缓冲对,其中哪种缓冲对能力最大?
血液中主要缓冲对有:BHCO3-H2CO3 B2HPO4-BH2PO4 B-蛋白质-H-蛋白质
其中BHCO3-H2CO3 的缓冲能力最大
问答题 回答下列问题,有计算时应列出公式(算式)及计算步骤
174、在200毫升150g/L的氢氧化钾,密度为1.12g/L中加入多少克氢氧化钾才能成200g/L的氢氧化钾溶液?
200×0.15×1.12+X =0.2
200 1.12+X X=14(g)
175、配制200g/L硫酸400克,需980g/L密度为1.84的浓硫酸多少?水多少?
400×0.20=1.84×0.98
V=44.4ml
加水:400-1.84×44.4=318.3g
176、用600g/L的氢氧化钠溶液和250g/L氢氧化钠溶液配制45g/L的氢氧化钠1400毫升,问需两种溶液各多少?
600g/L V1+(1400-V1)×250g/L=1400×45g/L
V1=800(ml) (600g/L)
V2=1400-800=600 (ml) (250g/L)
177、使用吸管应注意哪些?
①右手持吸量管,左手握洗耳球,吸样后用洁净纱布或吸水纸擦去管尖外面多余液体
②读数时,视线应与液体弯月凹面在同一水平面上
③排液时应将吸量管紧贴容器内壁,倾斜容器成45度角,徐徐放出后在器壁停留15秒
④一般以自动流出量为准,若吸量管刻有“吹”字,才可吹出余液
178、使用容量瓶应注意什么?
①不充许将容量瓶放在烘箱和冰箱中,也不能用容量瓶加热溶解物质
②不要用容量瓶存放配好的试剂
③容量瓶长期不用时,应该洗净,将玻璃塞隔上一层纸后再塞
179、使用电动离心机时为什么必须平衡?为什么不能用手强行制动?
①离心机在使用时转速很快,稍有不平衡便会引起震动,导致轴心损坏
②急速关机或用手强行制动可引起离心机电动机线圈产生高热而损坏
180、使用分光光度计为什么要选择适当的波长?
根据光的“互补色”原理,有色溶液对可见光区某种波长的光选择性吸收,只吸收该有色溶液的互补色。
选择适当波长,即获得一束理想的单色光---该溶液的“互补色”光。
181、举例说明为什么抽血做生化检验一般均采用空腹血?
进餐可使血液中很多化学成分发生变化
例如:进餐后血糖和血脂将大幅度增加。
高蛋白或高核酸饮食可使血中尿素或尿酸浓度增加。
182、血糖标本为什么必须立即测定或分离血清?
血细胞不断从血浆中摄取葡萄糖加以利用,使血糖浓度降低,所以应及时测定。
若能及时分离血清,血糖浓度在25度可稳定8小时,4度可稳定72小时。
183、配制葡萄糖标准液时,为什么必须在葡萄糖溶解2小时后才能应用?
因为葡萄糖氧化酶仅作用于β-D葡萄糖,市场购买的葡萄糖结晶属于α型,溶于水后发生变旋光作用,两小时后两型的比例可达平衡状态。
184、试述葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理。
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化,生成葡萄糖酸及过氧化氢,后者在过氧化物酶作用下,使色原性氧受体4-氨基安替匹林和酚去氢缩合为红色醌类,其颜色深浅与血糖浓度呈正比。
185、将PH=1.0的某强酸溶液,用水稀释100倍,求溶液PH值。
PH=1 即[H+]=10-1mol/L
0.1V=100V *[H+] [H+]=10
pH=--lg 10-4=4.0
186、将浓度为1.25mol/L的盐酸溶液20毫升,跟浓度为0.1mol/L的氢氧化钠溶液30毫升混合,假定混和后溶液的体积为50毫升,求混合溶液的PH值。
0.03×0.1-0.02×0.125
[OH-]= 0.05 碱过量
= 10
POH=-lg 10-2=2
PH=14-2=12
187、配制PH=12的氢氧化钠溶液500毫升需用氢氧化钠的量是多少?
POH=14-2 则[OH-]=0.01mol/L
氢氧化钠的物质的量浓度为:0.01mol/L
1000:500=0.01:40X
X=0.2
188、将0.23克金属钠溶于水配成100毫升溶液,其溶液PH值是多少?
2Na+2H2O=2NaOH+H2↑
0.23、23 X X=0.01mol/L
M=0.01/0.1=0.1mol/L
PH=14-(-lg 0.1)=13
189、试述双缩脲反应原理。
蛋白质中的肽键(-CONH)在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物。
此反应和两个尿素分子缩合后生成的双缩脲(H2N-OC-NH-H2N)
在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色反应相类似,故称为双缩脲反应。
190、染料结合法测定血清白蛋白的原理是什么?
根据白蛋白通过离子键或疏水键具有结合低分子物质,包括生理代谢物和外源性染料的能力,而球蛋白很少结合外源性染料,故可在为分离白蛋白、球蛋白的条件下用某些具有指示剂作用的染料,如溴甲酚紫或溴甲酚绿等直接测定白蛋白。
191、简述蛋白质电泳的原理。
血清中各种蛋白质都有其特有的等电点,在高于其等电点PH的缓冲液中,将形成带负电荷的质点,在电场中向正极泳动,在同一条件下,不同蛋白质带电荷有差异,分子量大小也不同,所以泳动速度不同,血清蛋白质可分成五条区带。
192、影响电泳迁移率的因素有哪些?
①电场强度:愈高,带电质点移动速度愈快。
②溶液的PH值:距离质点等电点愈远,质点所带净电荷愈多,电泳速度愈快
③溶液的离子强度:越高,质点的泳动速度愈慢,但区带分离度却越清晰。
④电渗:质点电泳速度即电泳力与电渗力的代数和,所以支持物电渗作用越小越大。
193、血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳法注意事项有哪些?
①选择优质薄膜,无空泡,皱折,厚薄不匀或霉点变质等现象。
②样本点在薄膜毛面,点样量适宜。电泳时光面朝上,电泳槽密闭。
③缓冲液量不宜太少,两槽缓冲液应在同一水平面上
④调节好电流,电压,一般电压为90-150V,电流0.4-0.6mA/cm
通电时间夏季约为40分钟,冬季约为45分钟
⑤溶血可使β球蛋白增高,白蛋白降低,样品应防止溶血。
194、聚丙稀酰胺凝胶作为支持物进行蛋白质电泳比其它支持物有何优点?
聚丙稀酰胺单体与交联剂甲叉双丙稀酰胺在催化剂过硫酸铵或核黄作用下结合交联而形成三维网状结构凝胶。不但可以作为电泳支持物,同时具有分子筛效应,并可通过不同浓度进行控制,因而分辨率和敏感性很高。
195、赖氏法测定丙氨酸氨基转移酶的原理是什么?
血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)能使丙氨酸与α-酮戊二酸互相移换氨基和酮基而生成丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显红色。显色深浅反映血清中ALT活性的大小。
196、简述乳酸脱氢酶测定原理。
乳酸脱氢酶(LDH)在辅酶I的递氢作用下,使乳酸脱氢而生成丙酮酸。此反应是可逆的,反应平衡点偏向顺向。加入2,4-二硝基苯肼并与丙酮酸作用,生成丙酮酸二硝基苯腙,在碱性溶液中显棕红色。根据红色的深浅而换算出酶活力的大小。
197、乳酸脱氢酶测定时有哪些注意事项?
①草酸、乙二胺四乙酸对本酶有抑制作用,故不宜用。
②红细胞中乳酸脱氢酶含量较血清中约高100倍,故应避免溶血,及时分离血清。
198、乳酸脱氢酶测定的顺向反应有什么优点?
①所需NAD+较逆向反应所需NADH稳定,易得纯品,含抑制LDH杂质少,价格低
②乳酸钠(或乳酸锂)底物比丙酮酸底物稳定
③过量乳酸对LDH的抑制低于过量丙酮酸对LDH有抑制
199、用γ-谷氨酰-α-萘胺作基质测定γ-GT是根据什么原理?
γ-GT作用于底物L-γ-谷氨酰-α萘胺,此底物既作为γ-谷氨酰的供体,又作为受体,生成L-γ-谷氨酰-L-γ-谷氨胺-α-萘胺和游离的α-萘胺,后者与重氮化的对氨基苯磺酸反应,生成红色的偶氮化合物,色泽的深浅与酶活力成比例,与α-萘胺标准液比较,可以求得样品中γ-GT的活力。
200、试述血清淀粉酶碘-淀粉比色法测定原理。
血清(或血浆)中α-1,4葡萄糖苷键水解,产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1,6糖苷键支链的糊精。在有足够量基质的条件下,反应后加入的碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物,其蓝色的深浅与经酶促反应的空白管比较其吸光度,从而推算出淀粉酶活力单位。
201、血清淀粉酶碘-淀粉比色法测定有哪些注意事项?
①草酸盐、枸橼酸盐、EDTA-Na2及氟化钠对淀粉酶活性有抑制。
②酶活性在400单位以下时与底物的水解量成线性,如测定管吸光度小于空白管一半时应将血清量加大稀释倍数或减少血清加入量,测定结果乘稀释倍数。
③唾液含高浓度淀粉酶,须防止混入。
④淀粉溶液若出现混浊或絮状物,不能再使用。
202、PH>7的溶液一定是碱吗?
PH>7只能表明溶液中氢氧根离子浓度大于氢离子浓度,至于溶液中的溶质可能是碱,也可能是强碱弱酸组成的盐,因其水解后也呈碱性。
228、配制质量浓度溶液在 量筒 中定容,配制物质的量浓度溶液在容量瓶中定容。203、试述胰岛素对血糖浓度的调节作用。
①促进葡萄糖进入肌肉,脂肪细胞。
②促进葡萄糖的氧化。
③促进糖元合成。
④抑制糖元分解。
⑤抑制糖异生作用。
⑥促进糖转变成脂肪。
204、氯化钠和醋酸铵的水溶液都显中性,但原因不同,试分别加以解释?
氯化钠是强酸强碱盐不发生水解,对水的电离平衡无影响,其溶液显中性。
醋酸铵是弱酸弱碱盐发生水解后,所生成的弱酸和弱碱的相对强弱差不多,电离度几乎相等,所以其溶液显中性。
205、何谓血浆脂蛋白?如何分类?各分哪几类?
①血浆中的脂类与载脂蛋白构成的一类水溶性复合物。
②用密度分类法可分为:CM、VLDL、LDL、HDL
③用电泳法分为:CM、β-1ρ、前β-1ρ、α-1ρ
206、判断碳酸钠水溶液的酸碱性,说明理由。
碳酸钠是弱酸强碱盐,能发生水解,生成弱电解质,破坏了水的电离平衡,溶液中氢氧根离子增多,显示碱性,其水解方程式是:
207、判断硫酸铵的水溶液的酸碱性,说明理由。
硫酸铵是强酸弱碱盐,发生水解,生成弱电解质,破坏水的电离平衡,溶液中的氢离子增多,显示酸性,其水解方程式是:
208、各类脂蛋白有何主要生理功能?
① CM转运外源性甘油三酯
② 前β-1ρ转运内源性甘油三酯
③ β-1ρ将胆固醇由肝内转运到肝外
④ α-1ρ将胆固醇由肝外转运到肝内
209、简述高密度脂蛋白中胆固醇测定的原理。
运用沉淀法将HDL与LDL和VLDL分开,然后测定HDL中的胆固醇含量
根据LDL及VLDL中的载脂蛋白B含有较多的碱性氨基酸可与多聚阴离子在二价阳离子存在下形成复合物。
210、常规测定的血清载脂蛋白其临床意义如何?
Apo AI 缺乏症属常染色体隐性遗传病
Apo AI 下降和Apo B 增高者常易患冠心病、未控制的糖尿病、肾病综合征、营养不良、肝功能低下等。
211、判断氯化钡水溶液的酸碱性,说明理由。
氯化钡水溶液显中性,因它是强酸强碱盐,不发生水解,没有破坏水的电离平衡。
212、简述火焰光度分析法测定钾、钠的原理。
火焰光度分析法是发射光谱分析
样品中的钾、钠原子受火焰的热能而被激发处于激发状态,激发的原子不稳定,迅速回到基态,放出能量,发射出元素特有的波长幅射谱线,利用此原理进行光谱分析。
血清、尿液等标本用去离子水适当稀释后,由压缩空气喷成气雾,再与可燃气体混合,点燃成火焰。钾的火焰呈深红色,波长为767nm,钠的火焰呈黄色,波长589nm,用相应波长的滤色片将谱线分离,然后通过光电管或光电池转换成电信号,经放大器放大后进行测量。样品溶液中钾、钠的浓度越大,所发射的光谱也越强。用已知含量标准液与待测标本液对比,即可计算出血清、尿液等标本中钾、钠浓度。
213、简述硝酸汞滴定法测定氯化物的原理。
氯离子与硝酸汞作用生成氯化汞,此氯化汞为可溶性,而且解离很低,当滴定达到终点时,过量的硝酸汞中的汞离子与指示剂二苯胺脲作用形成淡紫红色。
214、简述硝酸汞滴定法测定氯化物的注意事项。
①二苯胺脲有两种:一为二苯卡巴腙,一为二苯卡巴肼。前者终点明显、稳定,且比后者灵敏度高三倍,故试验对应选择前者。配好后应置棕色瓶内,避光保存。
②取样品后,迅速分离血浆(血清),以免血浆中CO2与红细胞内氯离子发生转移,而使结果偏高。
③本法所用的标本呈弱酸性(PH6.0左右)时,滴定终点明显;如血浆加指示剂后出现淡红色,为标本偏碱,可酌加数滴稀硝酸,但如PH4.0以下,终点也不明显。
215、钾有哪主要生理功能?
①维持细胞内液的渗压扩容量
②影响机体的酸碱平衡
③参与细胞内的物质代谢
④维持神经肌肉的正常兴奋性
216、简述物质代谢对钾在细胞内外分布的影响。
①糖原合成,钾入细胞;反之,钾出细胞
②蛋白质合成,钾入细胞;反之,钾出细胞
217、以HOAc-NaOAc 缓冲对为例说明缓冲原理(用化学式说明)
HOAc = H+ + OAc NaOAc = Na+ + OAc
NaOAc = Na+ + OAc- HOAc = H+ + OAc
HCl = Cl- + H+ 外加少量 NaOH = OH- + Na
H2O
218、用滴定法测定血浆(清)碳酸氢根(HCO 3-)应注意什么?
①应立即分离血浆(清),并避免与空气接触。
②0.01mol/L氢氧化钠不宜用钠玻璃贮存,且应密封,避免从环境中吸收CO2,因0.01mol/L盐酸较稳定,故应每天作校正滴定,用酚红作指示剂,以出现红色且10秒钟不褪色为准进行质量监测。
③所用器材及生理盐水均应为中性
④每次应以生理盐水加酚红指示剂作为对照,观察颜色变化。
219、血气分析对血液标本有什么要求?为什么?
①因静脉血来自身体的不同部位,而动脉血可反映全身情况,故血气分析以动脉血为宜。
②采得的血液标本必须严格隔绝空气。因为空气中的氧分压高于动脉血,二氧化碳分压低于动脉血,一旦接触空气可使血液中二项值改变。
③血液标本采集后必须立即检测。如因故不能及时检测,样品必须置冰箱内,但最长不能超过1小时,因为血细胞在体外仍有糖酵解作用,会使欲检测值改变。
④血液必须抗凝,以防止血气分析仪中毛细血管道被阻塞。抗凝剂应选用肝素,其浓度为1000单位/ml或 10mg/ml,溶于生理盐水。
⑤因为仪器是在37度恒温下测量,采血时应测量病人体温,按病人实际体温加以校正。
⑥送检时应记录病人当时的血红蛋白浓度,检测时输入,以便计算。
220、组成缓冲对的条件是什么?含有氢氧化钠和氢化钠的溶液是否具有缓冲作用?为什么?
条件:必有抗酸成分和抗碱成分,且两种成分之间存在化学平衡,组成缓冲对的必是:
①弱酸和它的强碱盐
②弱碱和它的强酸盐
③多元酸的酸式盐和其对应的次级盐
以上三种情况才能组成缓冲对。
氢氧化钠和氯化钠溶液不具有缓冲作用,因氢氧化钠是强碱,不符合上述条件有。
221、用直线把组成缓冲对的物质联结起来。
① NAc ⑤ NaHCO3
② Na2CO3 ⑥ NaOH
③ H2CO3 ⑦ NH4Cl
④ NH3·H2O ⑧ KAc
NAc → KAc
Na2CO3→NaHCO3
H2CO3→NaHCO3
NH3·H2O → NH4Cl
222、比较血清两种胆红素的区别?
未结合胆红素 结合结合胆红素
①是否与葡萄糖醛酸结合 未结合 结合
②溶解性 脂溶性 水溶性
③能否透过生物膜 能 不能
④与重氮试剂的反应 间接 直接
⑤能否经肾随尿排出 不能 能
223、试述改良J-G法测定血清胆红质的基本原理。
血清与醋酸钠-咖啡因-苯甲酸钠试剂混合,加入偶氮苯磺酸,生成紫色的偶氮胆红质。
醋酸钠缓冲液保持偶氮反应的PH;
咖啡因-苯甲酸钠加速胆红素与偶氮苯磺酸的偶联反应。
抗坏血酸(或叠氮钠)破坏剩余偶氮试剂,终止偶氮反应。
最后加入强碱性酒石酸溶液使紫色偶氮胆红质转变成蓝色偶氮胆红质。
在600nm波长,比色测蓝色偶氮胆红质的生成量。