EpiNext CUT&LUNCH RIP Kit RNA：耗时短，成本低
RNA-蛋白质相互作用在细胞中具有重要作用，包括结构、催化和调节功能。RNA免疫沉淀（RNA Immunoprecipitation，RIP）是一种强大的方法，用于研究体内单个蛋白质和RNA分子之间的相互作用。RIP的基本原理与染色质免疫沉淀（ChIP）非常相似，这种方法基于使用针对感兴趣蛋白质的特异性抗体来拉下RNA结合蛋白（RBP）和目标RNA复合物。富集蛋白复合RNA后进行qPCR或下一代测序，为研究表观转录组范围内的蛋白-RNA相互作用提供了一种有利的工具。
传统的RNA免疫沉淀（RIP）高分辨低，且需要交联，并且存在重复性差和过程复杂的问题，特别是，耗时较长，且成本较高。为了解决这些问题，EpigenTek开发了一种新的检测方法，即EpiNext CUT&LUNCH RNA免疫沉淀（RIP）试剂盒，用于研究体内蛋白-RNA相互作用，它整合了目前使用的RIP和CUT&RUN的所有优势。
艾美捷EpiNext CUT&LUNCH RNA Immunoprecipitation (RIP) Kit RNA-蛋白免疫共沉淀试剂盒（#P-2037）检测原理：
试剂盒提供了所有必要的试剂，以富集特定RNA结合蛋白的RNA复合物，从而能够通过qRT-PCR或NGS分析各种细胞样本中的蛋白-RNA相互作用。在这个检测中，细胞被渗透处理，并用针对感兴趣蛋白的RIP级抗体处理。然后，一种独特的核酸切割酶混合物选择性地切割目标蛋白区域周围的RNA序列，移除非特异性的RNA-蛋白复合物。只有抗体结合的复合物被选择性保留。捕获的蛋白/RNA复合物中的RNA片段被纯化，可以直接用于qRT-PCR或cDNA库构建，以分析蛋白质与RNA之间的相互作用。
结果示例：
使用EpiNext CUT&LUNCH RNA免疫沉淀（RIP）试剂盒进行目标蛋白/RNA富集：从200,000个MCF-7细胞中，使用阳性对照抗体捕获了SNRNP70/RNA复合物。非免疫IgG用作阴性对照。富集的RNA被纯化，并通过Qubit进行荧光定量。
EpiNext CUT&LUNCH RIP Kit RNA保存建议：
分两部分运输：第1部分在室温下运输，第2部分在 4°C的冰冻冰袋。
收到后，根据上表中的温度避光储存组件。
注：检查WB（清洗缓冲液）和PB（透化缓冲液）之前是否含有盐沉淀 使用. 如果是这样，在室温或37°C下短暂加热并振摇，直至盐重新溶解。
CUT&LUNCH RIP 试剂盒的所有组分在适当储存条件下，自装运之日起可稳定储存6个月。
https://www.amyjet.com/products/P-2037-24.shtml
Svar life science-TCC检测试剂盒：灵活且易于使用
补体系统（complement system）是先天免疫的重要组成部分，由大量血浆和细胞表面蛋白组成，负责快速检测和清除外来病原体。补体激活是通过识别与抗原结合的抗体，通过细菌膜等具有许多保守模式成分的外来表面，或通过C32的自发切割来启动的。识别导致形成中心催化C3转化酶，该转化酶引起后续系列的蛋白水解级联，推动病原体或受损宿细胞的吞噬作用。这一过程启动的免疫反应，导致补体的末端效应途径，形成末端补体复合物（terminal complement complex，TCC也叫 sC5b9），它有两种不同的形式。惰性的可溶性sC5b9可以在血浆和其他体液中检测，作为补体激活的指标，而膜攻击复合物（Membrane Attack Complex，MAC）则嵌入脂质膜中，可以导致溶解和细胞死亡，或者在宿主细胞上引起亚溶解激活。
补体系统在急性和慢性炎症、对感染的免疫反应以及自身免疫疾病中发挥着至关重要的作用。由于TCC是末端途径的产物，可以从所有三条补体途径（经典途径、凝集素途径和旁路途径）生成，因此在需要确定补体活性的所有情况下都涉及TCC检测。因此TCC 是补体研究、基础研究和转化研究、临床治疗效果评估、医疗器械和药物安全性研究中的优秀标志物。
Svar life science-TCC检测试剂盒是一种灵活且易于使用的酶免疫测定法，用于测定人血浆中的末端补体复合物（TCC，也称为 sC5b-9）。
艾美捷Complement TCC ELISA Kit 末端补体复合物ELISA检测试剂盒：
货号：COMPLTCCRUO
应用：用于半定量测定人EDTA血浆中可溶性末端补体复合体（sTCC，也称为TCC或sC5b-9）
原理：基于夹心ELISA检测方法，样本用测定稀释液稀释，取100?L稀释后的样本转移到微孔板孔中，并在室温下孵育60分钟。在这次第一次孵育过程中，样本中的TCC被预先包被在微孔板孔表面的抗TCC单克隆抗体捕获。经过洗涤以去除未结合的物质后，加入第二种辣根过氧化物酶（HRP）标记的单克隆抗体以检测与孔结合的TCC。再孵育30分钟后，孔再次被洗涤，并加入底物并孵育。颜色发展在30分钟后停止，颜色在分光光度计中测量。颜色的深浅与结合到孔中的TCC量成正比。通过与校准样本的颜色发展比较，确定TCC的量。
*与其他补体激活级联反应的产物一样，TCC是通过新表位测定原理特别测量的。新表位是隐藏在原始成分中的表位，在激活过程中形成的片段表面上暴露出来。
https://www.amyjet.com/brand/Complement-TCC-ELISA-Kit.shtml
补体旁路（经典丨凝集素丨筛选）途径ELISA检测试剂盒，一网打尽！
补体系统(Complement system)是免疫系统的一个关键部分，由一组共同工作以保护身体免受感染并支持免疫反应的蛋白质组成。它在识别和消除病原体、促进炎症以及促进细胞碎片清除中起着至关重要的作用。对补体系统的研究至关重要，首先，它有助于理解其与免疫系统其他组成部分的复杂相互作用，揭示免疫反应背后的机制。其次，研究补体系统有助于为各种免疫相关疾病和自身免疫疾病开发治疗策略。特别是在Eculizumab和C1-INH成功引入之后，更多的补体基础治疗药物已经获得批准进入临床试验或使用。对补体系统的全面研究有助于推进免疫学的发展，为改善治疗和预防一系列健康状况铺平了道路。
补体系统可通过三条既独立又交叉的途径被激活，即经典途径（classical pathway）、凝集素/MBL途径（lectin pathway）和旁路途径（alternative pathway，也叫替代途径）。
WIESLAB 功能性补体测定试剂盒是Svar Life Science提供的补体研究工具，它通过快速的基于ELISA的分析准确描述补体系统的三条途径（经典途径，凝集素途径，旁路途径）。这些试剂盒助力于特定途径的功能分析，而不会产生跨途径的干扰，使它们成为补体靶向药物开发和临床诊断中必不可少的工具。
经典途径是由抗体（IgG或者IgM）与抗原形成的复合物与C1q（级联反应的第一个蛋白）结合启动的，导致C1r的激活，进而裂解C1s。这反过来激活了丝氨酸蛋白酶，导致C4和C2的裂解，形成C4b2a（C3转化酶），进而裂解C3成C3a和C3b。C3a作为炎症细胞的招募因子（过敏毒素），而C3b则与C4b2a复合物结合形成C5转化酶（C4b2a3b）。C5转化酶启动膜攻击复合物（MAC）的形成，该复合物插入膜中，在细菌膜中形成功能性孔道，导致细菌溶解。
凝集素途径是由凝集素，甘露糖结合蛋白（MBP或血清凝集素）与入侵的外来细胞表面的甘露糖或N-乙酰葡萄糖胺残基结合而启动的。MBP在结构上与C1相似，由于其与糖残基的结合，激活了凝集素途径的第一个蛋白酶前体，即MBP相关丝氨酸蛋白酶（MASP1）。MASP1与Clr和CIs同源，能够蛋白水解激活MASP2，这是凝集素途径的第二个蛋白酶前体，与CIs相似。MASP1还可以激活C2和C4，但不是直接激活，而是在MASP-2的参与下进行。
C2和C4的激活产生了C3转化酶，并通过经典途径相同的反应顺序，导致MAC（膜攻击复合物）的形成。
旁路途径的激活不需要抗体或免疫复合物，而是由任何外来表面激活，如真菌、细菌多糖、脂多糖（LPSs）、颗粒和生物材料表面。通过旁路途径的补体激活在低速率下自发发生。C3内部硫酯基团在流体相中发生自发水解，生成C3·H2O。这种水解后的C3可以结合并激活因子B，并裂解另一个C3分子成C3a和C3b。在外来表面存在的情况下，C3b可能通过其硫酯结合位点的羰基与表面的羟基或氨基发生共价结合。C3b附着在表面有利于因子B和因子D与C3b的结合。因子D将因子B裂解成Ba和Bb，再次形成旁路途径的C3转化酶，C3bBb。这种附着的C3转化酶能够产生更多的C3b，导致正反馈放大循环。properdin（P因子）作用于稳定C3转化酶。C3b在表面的聚集允许形成旁路途径的C5转化酶，C3bBbC3b，并且可以裂解C5。随后TCC（膜攻击复合物）的组装与经典途径相同。
以上三条途径形成的C5转化酶，均可将C5裂解为C5a和C5b片段，C5b在液相中与C6、C7结合形成C5b67，嵌入细胞膜疏水脂质层中,进而与C8、若干C9分子聚合，形成C5b-9复合物，即末端补体复合物（terminal complement complex，TCC）。TCC以两种形式存在于体内，一是结合在细胞膜上，称为膜攻击复合物（membrane attack complex，MAC），即末端补体复合物（terminal complement complex，TCC）。TCC以两种形式存在于体内，一是结合在细胞膜上，称为膜攻击复合物，另一种是游离在血浆中与S-蛋白结合，形成SC5b-9。
补体系统对免疫系统至关重要，由一系列蛋白质组成，帮助防御感染和促进受损细胞的清除。这一防御系统在癌症中扮演着重要角色。虽然补体激活可以导致肿瘤细胞死亡，但补体和补体肽（过敏毒素）引起的慢性炎症可能是促肿瘤的，促进癌症生长。补体在肿瘤微环境中这种复杂且矛盾的作用给充分利用其在癌症治疗中的潜力带来了挑战。已经变得明显的是，补体在癌症中的作用高度依赖于特定的癌症类型和治疗策略。理解补体的多种状态和功能对于理解其在癌症进展和临床结果中的复杂作用至关重要。
艾美捷补体旁路（经典丨凝集素丨筛选）途径ELISA检测试剂盒解决方案：
COMPLAP330RUO丨WIESLAB Complement System Alternative Pathway 补体旁路途径ELISA检测试剂盒：用于人血清中功能性旁路补体途径的定性测定
COMPLCP310RUO丨WIESLAB Complement System Classical Pathway 补体经典途径ELISA检测试剂盒：用于人血清中功能性经典补体途径的定性测定
COMPLMP320RUO丨WIESLAB Complement System MBL Pathway 补体凝集素途径ELISA检测试剂盒：用于人血清中功能性经典补体途径的定性测定
COMPL300RUO丨WIESLAB Complement System Screen补体途径筛选检测试剂盒：用于人血清中功能性经典途径、凝集素途径和旁路途径补体系统的定性测定
https://www.amyjet.com/brand/WIESLAB-Complement-System.shtml
糖尿病模型研究工具：Mouse Insulin ELISA/小鼠胰岛素ELISA试剂盒
ALPCO-Mouse Insulin ELISA/小鼠胰岛素ELISA试剂盒：用于定量测定小鼠血清和血浆中的胰岛素。
艾美捷Mouse Insulin ELISA/小鼠胰岛素ELISA试剂盒（80-INSMS-E01）检测原理：
ALPCO小鼠胰岛素ELISA是一种夹心型免疫分析方法。96孔微孔板被涂覆以特异性胰岛素单克隆抗体。标准品、对照品和样本被加入到微孔板孔中与结合物一起。然后微孔板在室温下放置在微孔板振荡器上，以700-900转每分钟的速度振荡。第一次孵育完成后，孔被洗涤并擦干。接着加入TMB底物，微孔板再次在室温下放置在微孔板振荡器上，以700-900转每分钟的速度振荡。第二次孵育完成后，加入终止液，并在450纳米处用分光光度计测量光密度（OD）。产生的色度强度与样本中的胰岛素量成正比。
所需材料：
- 用于分配高达100微升的精密移液管（带一次性吸头）
- 用于分配高达100微升的重复或多通道移液管
- 用于试剂准备的量筒和移液管
- 用于试剂准备的蒸馏水或去离子水
- 微孔板洗涤器或洗涤瓶
- 能够以700-900转每分钟速度振荡的微孔板振荡器
- 带有450纳米滤光片的微孔板读取器
- 用于样本准备的漩涡混合器
注意事项：
1. 该试剂盒中包含的人血液制品已检测HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在。这些病毒的检测方法不能保证病毒的缺失；因此，所有试剂应被视为潜在感染性。处理和处置应遵循所有适当的国家和地方法规，以处理潜在的生物危害材料。
2. 所有源自动物的材料均为BSE阴性。然而，所有材料应被视为潜在感染性。
3. 避免直接与皮肤接触。
4. 本产品不可内服。
5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。
6. 不要口吸任何试剂。
7. 试剂盒中的试剂是特定批次的，不得替换。
8. 不要使用超过有效期的试剂。
9. 不建议更改测试程序，可能会影响测试结果。
测试程序：
所有试剂和微孔板条应在使用前平衡至室温（18-25°C）。使用前轻轻混合所有试剂。每次运行测试时，如果同时使用多个微孔板，则每个微孔板都必须进行标准曲线测试。所有标准品、对照品和样本应以双份运行。
1. 在打开铝箔袋之前，应将微孔板平衡至室温。为标准品、对照品和样本的双重测定指定足够的微孔板条。剩余的微孔板条应存放在含有干燥剂的密封铝箔袋中，存放在2-8°C。
2. 将每个标准品、对照品和样本的10微升分别滴入相应的孔中。有关对照品重组说明，请参阅试剂准备和分析证书。
3. 向每个孔中滴入75微升的工作强度结合物（见试剂准备）。
4. 用板封盖覆盖微孔板，并在室温下振荡器上以700-900转每分钟的速度振荡，孵育2小时。
5. 倒掉孔中的内容，并使用微孔板洗涤器用每个孔350微升的工作强度洗涤缓冲液洗涤微孔板6次（见试剂准备）。或者，使用配备洗涤喷嘴的洗涤瓶将工作强度洗涤缓冲液注入孔中。（不建议使用多通道移液管。洗涤液必须以足够且相等的力量分配，以便正确洗涤孔。）在洗涤之间，倒置微孔板以丢弃液体，并在吸水纸上用力拍打倒置的微孔板。在最后一次洗涤后（自动或手动），通过倒置并在吸水纸上用力拍打微孔板，从孔中去除任何残留的洗涤缓冲液和气泡。
6. 向每个孔中滴入100微升的TMB底物。
7. 用板封盖覆盖微孔板，并在室温下振荡器上以700-900转每分钟的速度振荡，孵育15分钟。
8. 向每个孔中滴入100微升的终止液，并轻轻摇晃微孔板以混合内容物。在进行下一步之前，去除任何气泡。
9. 将微孔板放入能够读取450纳米处吸光度的微孔板读取器中。微孔板应在加入终止液后立即分析，且不超过30分钟。
结果计算：
从标准品构建标准曲线。将零点作为曲线的一部分。建议使用软件程序计算标准曲线并确定样本的浓度。
ALPCO小鼠胰岛素ELISA是一种配体结合测定，其响应与分析物浓度呈S形关系。目前接受的此类曲线的参考模型使用5参数逻辑（pl）拟合，因为此模型可以在更大范围内优化准确性和精确性。尽管三次样条和其他模型是可以接受的方法，但它们通常在范围的低端和高端显示出较低的内部测试准确性和精确性。
在以下示例中，使用了5 pl曲线拟合来最大化低浓度样本的准确性和精确性。然而，由于个体实验室条件的影响，所有模型的准确性和精确性在可检测范围的最低端和最高端都是有限的。因此，在解释分析物响应变为非线性时的结果时，始终需要谨慎。
不建议将样本浓度值外推至标准浓度值范围之外。
文献参考：
Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.
短期测定方案：
https://www.amyjet.com/products/ALP-80-INSMS-E01.shtml
ALPCO脂联素(大鼠)ELISA试剂盒，高效代谢研究工具
ALPCO-脂联素(大鼠)ELISA试剂盒Rat Adiponectin ELISA：用于大鼠血清和血浆中脂联素的定量测定。
艾美捷脂联素(大鼠)ELISA试剂盒/Rat Adiponectin ELISA（22-ADPRT-E01）检测原理：
这是一种使用两种特异性、高亲和力抗体的夹心测定法。样本中的脂联素与涂覆在微孔板的第一抗体结合。随后，第二特异性抗脂联素抗体依次与固定的脂联素结合。第二抗体被生物素化，并与链霉亲和素-过氧化物酶-酶共轭物混合应用。在最后的底物反应中，混合物的颜色将定量取决于样本中脂联素的水平。
储存条件：
收到试剂盒后，直到有效期之前，请将其存放在2-8°C。
储存寿命：
各组分初次开启后的保质期为4周，未使用的条带和微孔板应与干燥剂一起密封存放在夹锁袋中，存放在2-8°C，使用时请按照提供的框架操作。重组的标准品A-F和对照血清KS1与KS2必须存放在-20°C（最长4周）。注意：标准品只能解冻一次——如有必要，请分装在适当的体积中存放。再次使用时，请快速但温和地解冻（避免温度升高超过室温，避免过度漩涡混合）。避免反复冻融。1:20稀释的洗涤缓冲液WP在2-8°C下稳定，可存放长达4周。
试剂准备：
使用前将所有试剂平衡至室温（20 - 25°C）。缓冲液中可能的沉淀物在使用前必须通过混合和/或加热溶解。不能混合不同批号的试剂。
重组：
标准品A-F和对照KS1与KS2用稀释缓冲液VP重组。建议将重组后的试剂在室温下放置15分钟，然后用漩涡混合器彻底但温和地混合（不应产生泡沫）。
稀释：
重组后，将对照血清KS1和KS2用稀释缓冲液VP以与样本相同的比例（1:1500）稀释。
所需体积的洗涤缓冲液WP是通过将提供的20倍浓缩液与去离子水以1:20稀释得到的。
测定程序：
进行测定时，标准品A-F、对照血清KS1和KS2以及样本应尽快（例如<15分钟）移液。为了减少由于孵化时间差异导致的变异性，抗体-POD共轭物AK以及随后的底物溶液S应与样本以相同的顺序和时间间隔添加到板上。停止溶液SL应与底物溶液S以相同的顺序添加到板上。所有测定（标准品A-F、对照血清KS1和KS2以及样本）应以双份进行。为了获得最佳结果，建议准确移液并遵守协议。
孵化：
室温孵化意味着在20 - 25°C下孵化。底物溶液S稳定的四甲基联苯胺是光敏性的；存储和孵化时应避光。
摇晃：
推荐的板振荡器摇晃速率为350转每分钟。然而，可能需要根据使用的板振荡器型号进行调整。摇晃不足可能导致溶液混合不充分，从而导致光密度低、变异性高和/或假值，摇晃过度可能导致光密度高和/或假值。
洗涤：
正确的洗涤对于测试的安全性、可靠性和精确性至关重要。
不完全洗涤是常见的，并且会对测定结果产生不利影响。不当的洗涤技术会增加变异性，例如空白值高，可能导致错误结果。
高背景值或高变异性可能表明洗涤问题。
所有洗涤必须使用提供的稀释至使用浓度的洗涤缓冲液WP进行。每个洗涤周期和孔的洗涤体积至少为300 µL。
建议手动洗涤。洗涤缓冲液可以通过多步设备、多通道移液管或喷雾瓶分配。液体可以通过在水槽上方动态摆动微孔板来移除。如果使用抽吸设备，必须注意不要划伤孔内表面。在每个洗涤步骤之后，应通过倒置板并在无尘吸水纸上反复拍打以去除剩余液体。
当使用自动微孔板洗涤器时，必须仔细遵循使用说明。必须进行设备调整，例如板几何形状和提供的洗涤参数。分配和抽吸管路不得划伤孔内表面。必须采取措施，使每次抽吸步骤后剩余的液体量最小化。在每个洗涤周期的最后一次抽吸步骤之后，可以通过倒置板并在无尘吸水纸上反复拍打来控制，可能的剩余液体可以被去除。
必须考虑处理潜在感染材料的危险。
典型标准曲线示例：
图1中的示例数据和标准曲线不能用于计算测试结果。每次测试都应生成一个标准曲线。
表1描述了一个典型的标准曲线数据。
文献参考：
1. Nakano, Y., et al., Isolation and characterization of GBP28, a novel gelatinbinding protein purified from human plasma. J Biochem (Tokyo), 1996. 120(4): p. 803-12.
2. Pajvani, U.B., et al., Structure-function studies of the adipocyte-secreted hormone Acrp30/adiponectin. Implications for metabolic regulation and bioactivity. J Biol Chem, 2003. 278(11): p. 9073-85.
3. Tsao, T.S., et al., Role of disulfide bonds in Acrp30/adiponectin structure and signaling specificity. Different oligomers activate different signal transduction pathways.J Biol Chem, 2003. 278(50): p. 50810-7.
4. Shimada, K., T. Miyazaki, and H. Daida, Adiponectin and atherosclerotic disease.Clin Chim Acta, 2004. 344(1-2): p. 1-12.
https://www.amyjet.com/products/ALP-22-ADPRT-E01.shtml
肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA：高质量试剂组成的可靠ELISA试剂盒
肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA是一种夹心酶免疫分析法，用于体外定量测量大鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和细胞培养上清中的TNFα。antibodies-online提供试剂盒组分的验证数据（WB），因此这是一种由高质量试剂组成的可靠ELISA试剂盒产品。
艾美捷肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA试剂盒：
货号：ABIN6574141
目标：肿瘤坏死因子α（TNF alpha）
反应性：大鼠
检测方法：比色法
方法类型：夹心ELISA
检测范围：15.6 pg/mL - 1000 pg/mL
最低检测限：15.6 pg/mL
应用：ELISA
样本类型：细胞培养上清、细胞裂解液、血浆、血清、组织匀浆
分析方法：定量
特异性：该测定法对检测肿瘤坏死因子α（TNFα）具有高灵敏度和极佳的特异性。
交叉反应性（详情）：未观察到肿瘤坏死因子α（TNFα）与其类似物之间有显著的交叉反应或干扰。
灵敏度：5.9 pg/mL
样本体积：100 μL
测定时间：3小时
板：预涂覆
使用注意事项：与本试剂盒配套使用的停止液是酸性溶液。使用此材料时，请佩戴眼睛、手、面部和衣物保护。
储存：4 °C/-20 °C
对于未开封的试剂盒：所有试剂应根据瓶身上的标签存放。标准品、检测试剂A、检测试剂B和96孔条板应在收到后存放在-20°C，而其他试剂应存放在4°C。
对于已开封的试剂盒：剩余的试剂必须按照上述储存条件存放。此外，请将未使用的孔放回含有干燥剂的铝箔袋中，并用拉链密封铝箔袋。
仅限研究使用
肿瘤坏死因子α(TNFα)ELISA试剂盒组分：
预涂覆、即用型96孔条板，平底
96孔板封盖
参考标准
标准品稀释液
检测试剂A
检测试剂B
测定稀释液A
测定稀释液B
试剂稀释液（如果检测试剂为冻干）
TMB底物
停止液
洗涤缓冲液（30倍浓缩）
说明书
关于标准物质的信息：
标准品可能是重组蛋白或天然蛋白，这将取决于特定的试剂盒。此外，表达系统可能是大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞。标准品中含有0.05%的proclin 300作为防腐剂。
关于试剂的信息：
试剂盒中使用的停止液是浓度为1 mol/L的硫酸。洗涤液是TBS。标准品稀释液中含有0.02%的叠氮钠，测定稀释液A和测定稀释液B中含有0.01%的叠氮钠。有些试剂盒中可能含有BSA。
关于抗体的信息：
不同试剂盒中提供的抗体及其宿主会有所不同。
方案：
准备所有试剂、样本和标准品，
向每个孔中加入100μL的标准品或样本。在37°C下孵化1小时，
抽吸并加入100μL准备好的检测试剂A。在37°C下孵化1小时，
抽吸并洗涤3次，
加入100μL准备好的检测试剂B。在37°C下孵化30分钟，
抽吸并洗涤5次，
加入90μL底物溶液。在37°C下孵化10-20分钟，
加入50μL停止液。立即在450nm处读取。
试剂准备：
使用前将所有试剂盒组分和样本平衡至室温（18-25°C）。如果试剂盒不会一次性用完，请只取出当前实验所需的条带和试剂，并将剩余的条带和试剂留在所需的条件下。
标准品 - 用0.5 mL的标准品稀释液重组标准品，室温下放置10分钟，轻轻摇晃（不要产生泡沫）。库存溶液中标准品的浓度为1,000pg/mL。准备7个含有0.25 mL标准品稀释液的试管，并制作双倍稀释系列。在下一个转移前彻底混合每个试管。设置7个稀释标准点，如1,000pg/mL、500pg/mL、250pg/mL、125pg/mL、62.5pg/mL、31.2pg/mL、15.6pg/mL，最后一个微量离心管与标准品稀释液为空白，即0pg/mL。
检测试剂A和检测试剂B - 如果为冻干品，用150μL的试剂稀释液重组检测试剂A，室温下放置10分钟，轻轻摇晃（不要产生泡沫）。使用前请短暂离心或旋转库存检测A和检测B。分别用测定稀释液A和B将它们稀释至工作浓度100倍。
洗涤液 - 将20 mL的洗涤液浓缩液（30倍）与580 mL的去离子或蒸馏水稀释，制备600 mL的洗涤液（1倍）。
TMB底物 - 用无菌吸头吸取所需剂量的溶液，不要将残余溶液重新倒入瓶中。
注意：
不允许直接在孔中进行连续稀释。
请在测定前15分钟内准备标准品。请不要直接在37°C下溶解试剂。
请根据说明书仔细重组标准品或工作检测试剂A和B，并避免产生泡沫，轻轻混合直至晶体完全溶解。为了减少移液引起的不精确性，请使用小体积，并确保移液器已校准。建议一次性吸取超过10μL。
重组的标准品、检测试剂A和检测试剂B只能使用一次。
如果洗涤液浓缩液（30倍）中形成晶体，请加热至室温并轻轻混合，直至晶体完全溶解。
受污染的水或试剂准备容器会影响检测结果。
样本准备：
建议使用新鲜样本，避免长时间储存，否则样本中的蛋白质可能会降解和变性，导致假结果。因此，样本应在2 - 8°C下短期储存，或分装后在-20°C（≤1个月）或-80°C（≤3个月）下储存。应避免反复冻融。测定前，冷冻样本应缓慢解冻并离心以去除沉淀物。
如果说明书中未指定样本类型，需要进行初步测试以确定与试剂盒的兼容性。
如果使用裂解缓冲液制备组织匀浆或细胞培养上清，引入的化学物质可能会导致偏差。推荐的稀释因子仅供参考。
请在进行测试前估算样本的浓度。如果值不在标准曲线范围内，则必须确定特定实验的最佳样本稀释度。然后，应使用PBS（pH =7.0-7.2）稀释样本。
测定精度
内部测定精度（测定内的精度）：在一块板上分别测试3个低、中、高目标水平的样本，每个样本测试20次。
外部测定精度（测定间的精度）：在3个不同的板上测试3个低、中、高目标水平的样本，每个板上8个重复。
CV(%) = SD/meanX100
内部测定：CV < 10%
外部测定：CV < 12%
标准曲线：
文献参考：
Palladini, Cagna, Di Pasqua, Adorini, Croce, Perlini, Ferrigno, Berardo, Vairetti: "Obeticholic Acid Reduces Kidney Matrix Metalloproteinase Activation Following Partial Hepatic Ischemia/Reperfusion Injury in Rats." in: Pharmaceuticals (Basel, Switzerland), Vol. 15, Issue 5, (2022)
Mousa, Alhumaydhi, Abdellatif, Abdulmonem, AlKhowailed, Alsagaby, Al Rugaie, Alnuqaydan, Aljohani, Aljasir, Alwashmi, Soliman, Yosof, Elsheikh, Babiker, Alsuhaibani, Hegazy, Seleem: "Curcumin and ustekinumab cotherapy alleviates induced psoriasis in rats through their antioxidant, anti-inflammatory, and antiproliferative effects." in: Cutaneous and ocular toxicology, pp. 1-10, (2021)
Ma, Zhao, Zhang, Chen: "Intra-arterial human urinary kallidinogenase alleviates brain injury in rats with permanent middle cerebral artery occlusion through PI3K/AKT/FoxO1 signaling pathway." in: Brain research, Vol. 1687, pp. 129-136, (2019)
https://www.amyjet.com/brand/ABIN6574141.shtml
IL-6 ELISA Kit：可靠地检测细胞培养多种样本类型中的IL-6
IL-6 ELISA Kit是一种夹心酶免疫分析法，用于体外定量测量小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和细胞培养上清中的IL-6。
antibodies-online提供试剂盒组分的验证数据（WB），因此这是一种由高质量试剂组成的可靠ELISA试剂盒产品。
艾美捷IL-6 ELISA Kit：
货号：ABIN6574135
目标：白细胞介素6（IL-6）
反应性：小鼠
检测方法：比色法
方法类型：夹心ELISA
检测范围：7.8 pg/mL - 500 pg/mL
最低检测限：7.8 pg/mL
应用：ELISA
样本类型：细胞培养上清、细胞裂解液、血浆、血清、组织匀浆
分析方法：定量
特异性：该测定法对检测白细胞介素6（IL-6）具有高灵敏度和极佳的特异性。
交叉反应性（详情）：未观察到白细胞介素6（IL-6）与其类似物之间有显著的交叉反应或干扰。
灵敏度：3.0 pg/mL
样本体积：100 μL
测定时间：3小时
板：预涂覆
使用注意事项：与本试剂盒配套使用的停止液是酸性溶液。使用此材料时，请佩戴眼睛、手、面部和衣物保护。
储存：4 °C/-20 °C
对于未开封的试剂盒：所有试剂应根据瓶身上的标签存放。标准品、检测试剂A、检测试剂B和96孔条板应在收到后存放在-20°C，而其他试剂应存放在4°C。
对于已开封的试剂盒：剩余的试剂必须按照上述储存条件存放。此外，请将未使用的孔放回含有干燥剂的铝箔袋中，并用拉链密封铝箔袋。
仅限研究使用
IL-6 ELISA Kit组分：
预涂覆、即用型96孔条板，平底
96孔板封盖
参考标准
标准品稀释液
检测试剂A
检测试剂B
测定稀释液A
测定稀释液B
试剂稀释液（如果检测试剂为冻干）
TMB底物
停止液
洗涤缓冲液（30倍浓缩）
说明书
特定信息：
IL-6 ELISA试剂盒ABIN6574135能用来做什么？这个小鼠IL-6 ELISA试剂盒适用于可靠地检测细胞培养上清、细胞裂解液、血浆、血清和其他样本类型中的IL-6/白细胞介素6。最低检测限为7.8 pg/ml，检测范围为7.8 pg/ml至500 pg/ml。
这个IL-6 ELISA试剂盒有哪些验证数据？提供了5张显示试剂盒组分性能的图片。该试剂盒在49篇PubMd出版物中被引用。使用我们的高质量IL-6 ELISA试剂盒可靠地检测IL-6。
IL-6的功能是什么？白细胞介素6（IL-6）是一种蛋白质，既充当促炎细胞因子，也充当抗炎肌因子。它由人类IL6基因编码。成骨细胞分泌IL-6以刺激破骨细胞的形成。此外，许多血管的中膜平滑肌细胞产生IL-6作为一种促炎细胞因子。IL-6通过抑制TNF-alpha和IL-1并激活IL-1ra和IL-10，充当抗炎肌因子。
关于标准物质的信息：
标准品可能是重组蛋白或天然蛋白，这将取决于特定的试剂盒。此外，表达系统可能是大肠杆菌、酵母或哺乳动物细胞。标准品中含有0.05%的proclin 300作为防腐剂。
关于试剂的信息：
试剂盒中使用的停止液是浓度为1 mol/L的硫酸。洗涤液是TBS。标准品稀释液中含有0.02%的叠氮钠，测定稀释液A和测定稀释液B中含有0.01%的叠氮钠。有些试剂盒中可能含有BSA。
关于抗体的信息：
不同试剂盒中提供的抗体及其宿主会有所不同。
方案：
准备所有试剂、样本和标准品，
向每个孔中加入100μL的标准品或样本。在37°C下孵化1小时，
抽吸并加入100μL准备好的检测试剂A。在37°C下孵化1小时，
抽吸并洗涤3次，
加入100μL准备好的检测试剂B。在37°C下孵化30分钟，
抽吸并洗涤5次，
加入90μL底物溶液。在37°C下孵化10-20分钟，
加入50μL停止液。立即在450nm处读取。
试剂准备：
使用前将所有试剂盒组分和样本平衡至室温（18-25°C）。如果试剂盒不会一次性用完，请只取出当前实验所需的条带和试剂，并将剩余的条带和试剂留在所需的条件下。
标准品 - 用1.0 mL的标准品稀释液重组标准品，室温下放置10分钟，轻轻摇晃（不要产生泡沫）。库存溶液中标准品的浓度为2,000pg/mL。首先将库存溶液稀释至500pg/mL，稀释后的标准品作为最高标准（500pg/mL）。然后准备7个含有0.5 mL标准品稀释液的试管，并使用稀释后的标准品制作双倍稀释系列。在下一个转移前彻底混合每个试管。设置7个稀释标准点，如500pg/mL、250pg/mL、125pg/mL、62.5pg/mL、31.2pg/mL、15.6pg/mL、7.8pg/mL，最后一个微量离心管与标准品稀释液为空白，即0pg/mL。
检测试剂A和检测试剂B - 如果为冻干品，用150μL的试剂稀释液重组检测试剂A，室温下放置10分钟，轻轻摇晃（不要产生泡沫）。使用前请短暂离心或旋转库存检测A和检测B。分别用测定稀释液A和B将它们稀释至工作浓度100倍。
洗涤液 - 将20 mL的洗涤液浓缩液（30倍）与580 mL的去离子或蒸馏水稀释，制备600 mL的洗涤液（1倍）。
TMB底物 - 用无菌吸头吸取所需剂量的溶液，不要将残余溶液重新倒入瓶中。
注意：
不允许直接在孔中进行连续稀释。
请在测定前15分钟内准备标准品。请不要直接在37°C下溶解试剂。
请根据说明书仔细重组标准品或工作检测试剂A和B，并避免产生泡沫，轻轻混合直至晶体完全溶解。为了减少移液引起的不精确性，请使用小体积，并确保移液器已校准。建议一次性吸取超过10μL。
重组的标准品、检测试剂A和检测试剂B只能使用一次。
如果洗涤液浓缩液（30倍）中形成晶体，请加热至室温并轻轻混合，直至晶体完全溶解。
受污染的水或试剂准备容器会影响检测结果。
样本准备：
建议使用新鲜样本，避免长时间储存，否则样本中的蛋白质可能会降解和变性，导致假结果。因此，样本应在2 - 8°C下短期储存，或分装后在-20°C（≤1个月）或-80°C（≤3个月）下储存。应避免反复冻融。测定前，冷冻样本应缓慢解冻并离心以去除沉淀物。
如果说明书中未指定样本类型，需要进行初步测试以确定与试剂盒的兼容性。
如果使用裂解缓冲液制备组织匀浆或细胞培养上清，引入的化学物质可能会导致偏差。推荐的稀释因子仅供参考。
请在进行测试前估算样本的浓度。如果值不在标准曲线范围内，则必须确定特定实验的最佳样本稀释度。然后，应使用PBS（pH =7.0-7.2）稀释样本。
测定精度
内部测定精度（测定内的精度）：在一块板上分别测试3个低、中、高目标水平的样本，每个样本测试20次。
外部测定精度（测定间的精度）：在3个不同的板上测试3个低、中、高目标水平的样本，每个板上8个重复。
CV(%) = SD/meanX100
内部测定：CV < 10%
外部测定：CV < 12%
蛋白标准WB：针对高纯度大肠杆菌表达的重组小鼠IL6的不同对照抗体。
文献参考：
Tian, Wang, Liu, Yang, Wu, Wei, Chen: "Preparation and Evaluation of the Fully Humanized Monoclonal Antibody GD-mAb Against Respiratory Syncytial Virus." in: Frontiers in cellular and infection microbiology, Vol. 9, pp. 275, (2019)
Gao, Wang, Yu, Sheng, Wu, Wang, Zhang, Lin, Gong: "Chlorogenic Acid Attenuates Dextran Sodium Sulfate-Induced Ulcerative Colitis in Mice through MAPK/ERK/JNK Pathway." in: BioMed research international, Vol. 2019, pp. 6769789, (2019)
Qiu, Yuan, Li, Yang, Hu, Su, Chen: "Bidirectional effects of moxifloxacin on the pro‑inflammatory response in lipopolysaccharide‑stimulated mouse peritoneal macrophages." in: Molecular medicine reports, Vol. 18, Issue 6, pp. 5399-5408, (2019)
https://www.amyjet.com/brand/ABIN6574141.shtml
文献支持丨TNF-alpha和IL-6 ELISA试剂盒在生物研究中的重要作用
近期, Giuseppina发表的标题为“Obeticholic Acid Reduces Kidney Matrix Metalloproteinase Activation Following Partial Hepatic Ischemia/Reperfusion Injury in Rats”，发表在《Pharmaceuticals》期刊上。该研究主要探讨了obeticholic acid（OCA），一种法尼醇X受体（FXR）激动剂，在大鼠部分肝缺血/再灌注（I/R）损伤后对肾脏基质金属蛋白酶（MMPs）激活的影响。研究背景指出，OCA已显示出治疗非酒精性脂肪肝病（NASH）的潜力，并能增加胰岛素敏感性。此外，研究还关注了I/R损伤后多器官功能障碍，尤其是肾脏损伤的问题。
研究方法：
研究者使用雄性Wistar大鼠进行实验，将大鼠随机分为两组：一组口服OCA（10 mg/kg/天），另一组给予相同体积的车辆对照。经过5天的给药后，大鼠接受60分钟的部分肝缺血处理，随后进行120分钟的再灌注。实验结束后，收集肾脏活检样本（皮质和髓质）和血液样本，用于后续的生化分析和分子生物学检测。
实验内容：
实验中，研究者监测了血清肌酐、肾脏MMP-2和MMP-9二聚体、组织金属蛋白酶抑制因子（TIMP-1, TIMP-2）、RECK、TNF-alpha和IL-6的水平。特别地，文章提到了使用antibodies-online提供的TNF-alpha和IL-6 ELISA试剂盒来测定肾脏皮质中的TNF-alpha和IL-6水平。这些因子是炎症反应的关键指标，对于评估肾脏损伤和OCA的抗炎效果至关重要。
艾美捷--TNF-alpha和IL-6 ELISA试剂盒的作用和价值：
在本研究中，antibodies-online提供的TNF-alpha ELISA试剂盒(Cat# ABIN6574141)和IL-6 ELISA试剂盒(Cat# ABIN6574135)被用来定量检测肾脏组织中TNF-alpha和IL-6的浓度。ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种敏感且特异的生物化学分析方法，能够准确测定样本中特定蛋白质的浓度。在这项研究中，ELISA试剂盒的价值体现在以下几个方面：
1. 高灵敏度和特异性：ELISA试剂盒能够提供高灵敏度的检测结果，使得研究者能够准确测量肾脏组织中TNF-alpha和IL-6的微小变化，这对于评估肾脏炎症状态和OCA的抗炎效果至关重要。
2. 操作简便：ELISA试剂盒操作简单，易于标准化，使得实验操作和结果分析更加高效。
3. 结果可靠：通过ELISA试剂盒得到的数据显示，OCA处理的大鼠肾脏皮质中TNF-alpha和IL-6的水平显著降低，这表明OCA具有抗炎作用，对于减轻I/R引起的肾脏损伤具有潜在的治疗价值。
4. 科研支持：antibodies-online的ELISA试剂盒为研究提供了重要的实验工具，支持了OCA在肾脏保护方面的研究，推动了对I/R后肾脏损伤机制的深入理解。
实验结论：
研究结果表明，OCA预处理能够减轻肝脏I/R后引起的肾脏损伤，通过降低TNF-alpha和IL-6介导的MMPs表达。具体来说，OCA治疗能够减少肾脏皮质和髓质中MMP-9二聚体的活性，并降低血清肌酐水平，减少肾脏组织中的TNF-alpha和IL-6水平。这些发现揭示了OCA在减轻I/R引起的肾脏损伤中的潜在治疗作用，为未来的临床应用提供了科学依据。
综上，antibodies-online提供的TNF-alpha和IL-6 ELISA试剂盒在本研究中发挥了重要作用，为评估OCA对肾脏损伤的保护效果提供了准确可靠的实验数据。通过这些数据，研究者能够深入理解OCA在肾脏保护中的分子机制，并为开发新的治疗策略提供了重要信息。
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