SouthernBiotech丨明胶底玻片的多种应用及文献参考
SouthernBiotech的明胶底玻片已经过仔细清洁,并用0.1%明胶和硫酸钾铬的溶液进行了底涂。涂有涂层的载玻片尺寸为25毫米x 75毫米,带有磨砂端用于标记。为了获得合适的附着力,SouthernBiotech建议厚度小于100μm的部分。
艾美捷SouthernBiotech丨明胶底玻片(SLD01-CS)的应用:
冰冻切片——文献3,6中报道
自由漂浮冷冻切片——文献4,5,7,8中报道
树脂嵌入部分——文献2中报道
TUNEL——文献1中报道
图:自由漂浮Bcs1lc.232A>Gmouse脑皮质冷冻切片用抗GFAP染色,然后二次试剂DAB,并安装在明胶载玻片上(SB目录号SLD01)。图片来自Tegelberg S、Tomašid N、Kalljärvi J、Purhonen
J、 埃尔默
SouthernBiotech丨明胶底玻片参考文献:
1. Lee T, Zhang X, Dhar S, Faas H, Lippard SJ, Jasanoff A. In vivo imaging with a cell-permeable porphyrin-based MRI contrast agent. Chem Biol.
2010;17:665-73. (TUNEL)
2. Curcio CA, Messinger JD, Sloan KR, Mitra A, McGwin G, Spaide RF. Human chorioretinal layer thicknesses measured in macula-wide, highresolution histologic sections. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2011;52:3943-54. (Resin embedded sections)
3. Deane EC, Ilie AE, Sizdahkhani S, Gupta MD, Orlowski J, McKinney RA. Enhanced recruitment of endosomal Na+/H+ exchanger NHE6 into dendritic spines of hippocampal pyramidal neurons during NMDA receptor-dependent long-term potentiation. J Neurosci. 2013;33:595-610. (Frozen sections)
4. Hodor A, Palchykova S, Baracchi F, Noain D, Bassetti CL. Baclofen facilitates sleep, neuroplasticity, and recovery after stroke in rats. Ann Clin Transl Neurol. 2014;1:765-77. (Free floating frozen sections)
5. Kim KY, Scholl ES, Liu X, Shepherd A, Haeseleer F, Lee A. Localization and expression of CaBP1/caldendrin in the mouse brain. Neuroscience.2014;268:33-47. (Free floating frozen sections)
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7. Tegelberg S, Tomašić N, Kallijärvi J, Purhonen J, Elmér E, Lindberg E, et al. Respiratory chain complex III deficiency due to mutated BCS1L: a novel phenotype with encephalomyopathy, partially phenocopied in a Bcs1l mutant mouse model. Orphanet J Rare Dis. 2017;12:73. (Free floating frozen sections)
8. Morabito MV, Ravussin Y, Mueller BR, Skowronski AA, Watanabe K, Foo KS, et al. Weight perturbation alters leptin signal transduction in a regionspecific manner throughout the brain. PLoS One. 2017;12(1): e0168226. (Free floating frozen sections)
SouthernBiotech 致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。 同时,SBA还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体,其中包括:荧光素和酶标记物,低内毒素/不含叠氮化物(LE/AF)制剂,F(ab)和 F(ab')2片段化抗体,此外还有纯化的免疫球蛋白、血清以及细胞外基质蛋白等产品。艾美捷科技是SouthernBiotech的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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SouthernBiotech丨大鼠抗人Caspase-8-UNLB(SB125a),多功能实验应用
半胱天冬酶是半胱氨酸蛋白酶家族,可诱导细胞凋亡,以应对各种细胞内外刺激。这些酶被合成为无活性的前体,在诱导凋亡时在天冬氨酸特异性位点被切割。Caspase-8是一种细胞质蛋白酶,能够处理/激活所有已知的胱天蛋白酶,表明其在凋亡级联反应的早期存在。它介导肿瘤坏死因子(TNF)和神经生长因子(NGF)家族受体诱导的细胞死亡,以消除受损细胞并维持白细胞稳态。此外,研究表明,它调节Fas诱导的细胞毒性,可能在巨噬细胞分化中具有非凋亡作用。
SB125a单克隆抗体检测到一条约55kD的条带,对应于胱天蛋白酶-8的全长形式。
艾美捷SouthernBiotech丨大鼠抗人Caspase-8-UNLB(SB125a):
货号:17300-01
克隆:SB125a
同型:大鼠(Sprague Dawley)IgMκ
同型对照:大鼠IgM-UNLB(NIP/M-2)
特异性:人caspase-8
其他名称:MACH, FLICE, Mch5
免疫原:纯化的人源caspase-8
缀合物:UNLB(未缀合)
缓冲液配方:硼砂缓冲液,pH 8.2
克隆性:单克隆
浓度:1.0 mg/mL
体积:0.1 mL
推荐储存:2-8°C
应用:西方印迹(已进行质量测试)
图:将Jurkat细胞的总细胞裂解物与STS一起孵育,通过电泳分离,转移到PVDF膜上,并用大鼠抗人Caspase-8-UNLB(SB Cat.No.17300-01)进行检测。用山羊抗大鼠IgM-HRP(SBCat.N
相关产品:
大鼠lgM后勤基地(NIP/M-2) 0120-01
山羊抗大鼠lgG(H+L),小鼠/人 3051-05
小鼠抗Bcl-xL后勤基地(7B2.5) 10030-01
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SouthernBiotech丨大鼠抗人IL-13-BIOT(SB126d),适用于人类IL-13检测
SouthernBiotech大鼠抗人IL-13-BIOT(SB126d)用于ELISA测定的生物素抗人IL-13抗体。
艾美捷SouthernBiotech丨大鼠抗人IL-13-BIOT(SB126d):
货号:15930-08
克隆:SB126d
同型:大鼠(Sprague Dawley)IgG1κ
同型对照:大鼠IgG1-BIOT(KLH/G1-2-2)
特异性:人IL-13
其他名称:白细胞介素-13, NC30
免疫原:大肠杆菌表达的人IL-13
缀合物:BIOT(生物素)
缓冲液配方:含有小于0.1% 叠氮化钠的磷酸盐缓冲液
克隆性:单克隆
浓度:0.5 mg/mL
体积:1.0 mL
推荐储存:2-8°C
应用:酶联免疫吸附试验(ELISA)-检测 - 已进行质量测试
注意 – 可与纯化的克隆JES10-5A2(SB目录号10125-01)或纯化克隆JES10-35G12(SB目录号10124-01)配对用于夹心ELISA
相关产品:
Rat lgG1-BIOT(KLH/G1-2-2) 0116-08
Rat Anti-Human IL-13-UNLB(JES10-5A2) 10125-01
Rat Anti-Human IL-13-UNLB(JES10-35G12) 10124-01
SouthernBiotech 致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。 同时,SBA还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体,其中包括:荧光素和酶标记物,低内毒素/不含叠氮化物(LE/AF)制剂,F(ab)和 F(ab')2片段化抗体,此外还有纯化的免疫球蛋白、血清以及细胞外基质蛋白等产品。艾美捷科技是SouthernBiotech的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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SouthernBiotech丨支原体检测试剂盒,专业检测细胞培养物中潜在的支原体污染
SouthernBiotech支原体检测试剂盒专为检测细胞培养物中潜在的支原体污染而设计。该试剂盒采用聚合酶链式反应(PCR)扩增支原体内保守的16S核糖体RNA编码区基因组,从而提供了一种广泛、高灵敏度和高效的检测方法。精心确定的底漆顺序包括支原体的三个属(支原体、Acholeplasma和脲原体),使试剂盒能够检测95%以上的潜在细胞文化感染。支原体检测试剂盒中的PCR技术快速(结果通常在3小时内获得)且易于使用。工具包它也是高度敏感的,可以在100µL的测试样品上清液中检测到少至2-5femtogram的支原体DNA。真核生物试剂盒不扩增细胞培养上清液中的细菌DNA。
感染支原体的样本细胞系将在琼脂糖凝胶上产生~448 bp至~611 bp的PCR产物,具体取决于存在的支原体类型。加入阳性对照(M.orale,503 bp)以验证PCR扩增过程具有以及确认测试样品中获得的PCR产物的大小。还提供了内部控制,以消除与PCR抑制剂相关的潜在假阴性。
艾美捷SouthernBiotech丨支原体检测试剂盒用户指南:
• 引物组和核苷酸(冻干)- 蓝色瓶盖
引物/核苷酸混合物(包括dATP、dCTP、dGTP和dUTP的脱氧核苷酸三磷酸)
• 无菌PCR 10X反应缓冲液(500 μL)- 白色瓶盖
100 mM Tris-HCl,pH 8.5
750 mM KCl
30 mM MgCl2
• 阳性对照DNA(冻干)- 黄色瓶盖
来自M. orale的非感染性PCR产物
产生一个503 bp的条带
• 内部对照DNA(冻干)- 绿色瓶盖
包含特定支原体引物序列的非感染性质粒DNA
产生一个270 bp的条带
SouthernBiotech丨支原体检测试剂盒组件:
引物组和核苷酸(冻干)-蓝色帽
无菌PCR 10X反应缓冲液(500μL)-白色盖子
阳性对照DNA(冻干)-黄色帽
内部控制DNA(冻干)-绿帽
Lane 1 E. coli Genomic DNA
Lane 2 Hybridoma Cell DNA
Lane 3 Negative Control (H20)
Lane 4 Positive Control
Lane 5 Inhibited Sample
Lane 7 Weakly Contaminated Sample
Lane 8 100 bp DNA Ladder
Lane 6 Strongly Contaminated Sample
所需材料:
• 热循环仪
• Taq DNA聚合酶
以下协议已针对热启动Taq DNA聚合酶进行了优化
不建议使用其他DNA聚合酶
• DNA梯度
• PCR反应管
• 无DNase水
支原体检测试剂盒参考文献:
1. Lamb SA, Rahman MM, McFadden G. Recombinant myxoma virus lacking all poxvirus ankyrin-repeat proteins stimulates multiple cellular anti-viral pathways and exhibits a severe
decrease in virulence. Virology. 2014;464-5:134-45.
2. Frampton GM, Ali SM, Rosenzweig M, Chmielecki J, Lu X, Bauer TM, et al. Activation of MET via diverse exon 14 splicing alterations occurs in multiple tumor types and confers clinical
sensitivity to MET inhibitors. Cancer Discov. 2015;5:850-9.
3. Modur V, Joshi P, Nie D, Robbins KT, Khan AU, Rao K. CD24 expression may play a role as a predictive indicator and a modulator of cisplatin treatment response in head and neck
squamous cellular carcinoma. PLoS One. 2016;11(6):e0156651.
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5. Wang X, Shaw DK, Hammond HL, Sutterwala FS, Rayamajhi M, Shirey KA, et al. The prostaglandin E2-EP3 receptor axis regulates Anaplasma phagocytophilum-mediated NLRC4
inflammasome activation. PLoS Pathog. 2016;12(8):e1005803.
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Worthington:醛缩酶Aldolase的多功能性研究
醛缩酶存在于所有动物和植物组织以及大多数微生物中。I类醛缩酶存在于动物和高等植物组织中,其特征是不需要二价金属辅因子,并且与底物二羟基丙酮磷酸盐形成酮亚胺席夫碱中间体。II类醛缩酶仅在原核生物和低等真核生物中发现,需要二价金属辅因子(Heron和Caprioli 1975,London 1974,Lebherz等人1973,Gefflaut等人1995)。I类醛缩酶有三种类型:A型(主要形式)存在于肌肉中;肝肾B型;以及大脑中的C型(加上一些A型)(Horecker等人,1972)。
特异性:
醛缩酶对其底物D-果糖具有高度特异性。
组成:
哺乳动物中发现的三种同工酶(A、B和C)由四个相同的亚基组成,每个亚基是一个由360个氨基酸组成的多肽链。该酶具有同源四聚体结构,亚基大约为40 kDa(Marsh和Lebherz 1992年)。这些亚基的结构是一个被α-螺旋和连接环包围的β-桶(Littlechild和Watson 1993年)。如果同源四聚体中四个亚基之一的活性被破坏,整个复合物将无法正常功能,表明活性位点之间存在紧密的通信(Marsh和Lebherz 1992年)。
分子特征:
一类真核酶的一级结构高度保守(Kelly和Tolan 1986年,Freemont等人1988年);然而,一类和二类酶序列之间没有相似性,因为它们具有独立的进化起源(Marsh和Lebherz 1992年)。然而,一类和二类酶都含有羧基末端酪氨酸残基,这对于最大催化活性是必需的(Rutter 1961年,Morse和Horecker 1968年)。长时间的收缩活动通过下调细胞质糖酵解酶和增强线粒体酶活性来降低A型醛缩酶在mRNA中的表达(Williams等人1986年)。
艾美捷Worthington醛缩酶(CAS: 9024-52-6)的应用:
化学酶合成(Bolt等人2008年,Calveras等人2009年)
结构功能研究(St.-Jean等人2005年)
有机合成(Castillo等人2006年,Concia等人2009年)
D-果糖-1,6-二磷酸的定量
偶联反应中的代谢物测定(Hiller等人2007年)
柱和凝胶中的分子量标记
醛缩酶特征:
CATH分类
类别:Alpha Beta
架构:Alpha-Beta桶
拓扑:TIM桶
分子量:156.8 kDa(理论)
最佳pH值:6.9-8.8
等电点:8.47(理论)
消光系数:
133,560 cm-1 M-1(理论)
E1%,280 = 8.52(理论)
活性位点残基
赖氨酸(K229)
谷氨酸(E187)
以及其他带电残基(由于活性位点附近发现的许多带电氨基酸的接近,功能分配复杂)(St.-Jean等人2005年)
抑制剂:
重金属,特别是Cu2+、Zn2+和Ag+
羟基萘甲醛磷酸衍生物(Dax等人2005年)
磷酸化的芳香族化合物(Blonski等人1997年)
D-赤藓糖醇1-磷酸(Ferroni等人1991年)
磷脂酰丝氨酸脂质体(Kwiatkowska等人1994年)
磷酸盐和腺嘌呤核苷酸(Callens等人1991年)
文献参考:
Allen, B. , Gracy, R. and Harris, B.
Studies on Aldolase from Human Cardiac Tissue , Arch Biochem Biophys 155 , 325 , 1973
Anderson, L. , Heinrikson, R. and Nyes, C.
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Reactivity of the Active-Centre Lysine Residue of Rabbit Muscle Aldolase , Biochem J 137 , 181 , 1974
Anderson, P. , Gibbons, I. and Perham, R.
A Comparative Study of the Structure of Muscle Fructose 1,6-Diphosphate Aldolases , Eur J Biochem 11 , 503 , 1969
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Worthington:氨基酸氧化酶,D-:从代谢物测定到生物传感器的开发
D-氨基酸氧化酶(DAAO)是一种氧化还原酶,它将D-氨基酸氧化脱氨基为相应的α-酮酸。DAAO是一种黄酶,每单体含有1摩尔FAD。
特异性
D-型脯氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、缬氨酸和苯丙氨酸是良好的底物(Scannone等人1964年,Dixon和Kleppe 1965b年)。据报道,该酶作用于L-脯氨酸(Wellner和Scannone 1964年)和D-乳酸(Yagi和Ozawa 1964b年)。pkDAOO的最佳底物是D-脯氨酸,而DAAOs对D-天冬氨酸表现出非常低或没有活性(Tishkov和Khoronenkova 2005年)。
不同物种的DAAOs一级结构中的底物结合域没有显示出高度同源性。这可能反映了不同来源的DAAOs在特异性上的广泛变化(Tishkov和Khoronenkova 2005年)。
组成
活性pkDAAO全酶是一个由347个氨基酸组成的单体,可以发生二聚化。单体比二聚体更具活性,并且每个单体含有1摩尔非共价结合的FAD。截至2000年,所有已表征的DAAOs都含有非共价结合的FAD作为它们的辅助基团(Pilone 2000年)。
分子特征
编码哺乳动物DAAO的基因在基因组中只有一个副本。一个1041 bp的开放阅读框架编码了酶的所有347个氨基酸。这表明没有发生由蛋白酶催化的翻译后加工(Fukui 1987年)。
猪D-氨基酸氧化酶的一级结构由Ronchi等人(Ronchi等人1982年)确定,基因由Momoi等人(Momoi等人1988年)克隆。在不同来源的DAAOs中,一级结构中有六个区域高度保守(Faotto等人1995年)。区域I包含共识序列GXGXXG,区域I和III已被发现涉及辅酶结合(Wierenga等人1983年)。区域II、IV和V包含活性位点残基。Ser-Lys/His-Leu末端序列是过氧化物酶体靶向信号序列(Subramani 1993年,Pilone 2000年)。
哺乳动物DAAOs显示出63%的同一性,而三种已知的微生物DAAOs(R. gracilis、T. variabilis和Fusarium solanii)显示出18%的同一性。酵母和哺乳动物DAAOs之间观察到30%的同一性(Pilone 2000年)。
艾美捷Worthington氨基酸氧化酶,D-(9000-88-8)的应用:
酮酸制备
氧化还原研究
从外消旋混合物中分离L-氨基酸
FAD测定
D-丙氨酸测定
生物传感器(Inaba等人2003年)
D-氨基酸氧化酶的特性:
CATH分类
类别:Alpha Beta
架构:2层三明治和3层(aba)三明治
拓扑:D-氨基酸氧化酶;链A,第2个结构域和Rossmann折叠
分子量:78.7 kDa(理论)
单体:38.0-39.0 kDa(Curti等人1973年,Tu等人1973年)
最佳pH值:
取决于底物:D-丙氨酸约为9(Dixon和Kleppe 1965c年)。
等电点:7.0,7.2(Tishkov和Khoronenkova 2005年)
消光系数:
75,420 cm-1 M-1(理论)
E1%,280 = 19.17(理论)
活性位点残基:
酪氨酸(Y224)
天冬氨酸(D228)
精氨酸(R283)
(Pilone 2000年)
抑制剂:
2-羟酸,2-酮酸和2-氧丁酸(Dixon 1965b年)
代谢产物和药物(Hamilton和Buckthal 1982年)
腺苷5'-单磷酸和苯胺(Yagi等人1972c年)
苯甲酸(Pollegioni等人2007年)
苯甲酸钠(Nguyen等人2009年)
文献参考:
Aki, K. , Tagagi, T. , Isemura, T. and Yamano, T.
Optical Rotatory Dispersion and Circular Dichroism of D-Amino Acid Oxidase , Biochim Biophys Acta 122 , 193 , 1966
Alston, T. , Porter, D. and Bright, H.
Suicide Inactivation of D-Amino Acid Oxidase by 1-Chloro-1-Nitroethane , J Biol Chem 258 , 1136 , 1983
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Worthington:α-淀粉酶,多糖分解的关键生物催化剂
猪胰腺α-淀粉酶(PPA)在内部键处作用于大型线性碳水化合物聚合物。水解产物具有α构型。α-淀粉酶活性存在于所有生物体中;然而,即使在单个物种的不同组织中,酶也存在显著差异。
特异性:
α-淀粉酶催化含有3个或更多α-1,4-糖苷键的多糖中内部α-1,4-葡萄糖苷键的水解,产生麦芽糖和葡萄糖的混合物。另见Takeshita和Hehre(1975年)。
组成:
该酶是一种糖蛋白(Beaupoil-Abadie等人1973年)。它由大约475个残基组成的单一多肽链,有两个自由巯基,四个二硫键,并且含有一个紧密结合的Ca2+(Granger等人1975年,Steer等人1974年)。它以两种形式存在(PPAI和PPAII),这两种形式具有相同的酶性质和55.4 kDa的分子量,仅在电泳迁移率和pI上有所不同(Cozzone等人1970b年,Marchis-Mouren和Pasero 1967年,Darnis等人1999年)。
PPA的两种形式的结构由一个主要的A域(残基1-99和170-404)组成,该域组织为一个(α/β)8桶,包含一个环(B域)。紧随其后的是C端域C(残基405-496),这是一个十β链的希腊钥匙图案(Darnis等人1999年)。
分子特征:
动物α-淀粉酶由两个位点编码,amy1(唾液)和amy2(胰腺)。完整的amy cDNA长度为1565 bp。它包含一个15个氨基酸的信号肽和一个1536-nt的开放阅读框(ORF)。一个29-nt的3'非编码区域后面是一个短的poly(A)尾。
动物α-淀粉酶包含五个保守区域,包括四个在(α/β)8桶周围或附近的区域,以及一个在域B的C端附近的短序列(Janecek 1993年,Svensson 1994年,Janecek和Balaz 1995年)。人和猪胰腺α-淀粉酶的同一性为87.1%,仅有64个氨基酸替换。小鼠和大鼠α-淀粉酶与猪α-淀粉酶的同一性为85.5%。氨基酸304-310在哺乳动物α-淀粉酶中是保守的,被认为涉及酶机制(Darnis等人1999年)。
应用:
乙醇生产
减少淀粉或糖原分子
艾美捷Worthingtonα-淀粉酶(9000-85-5)的特性:
CATH分类
类别:Alpha Beta;主要Alpha
架构:Alpha-Beta桶;三明治
拓扑:TIM桶;免疫球蛋白样
分子量:
51.0-54.0 kDa(Cozzone等人1970a年)
55.4 kDa(SDS-PAGE)(Alkazaz等人1996年)
最佳pH值:7.0
等电点:
PPAI:7.5(Ajandouz等人1995年)
PPAII:6.4(Ajandouz等人1995年)
消光系数:
133,870 cm-1 M-1(理论)
E1%, 280 = 26(Caldwell等人1952年)
激活剂:
氯离子是必需的。(另见O’Donnell等人1975年关于胆汁盐的影响)
钙和氯离子对稳定性是必要的。
抑制剂:
酚类化合物(Funke和Melzig 2005年)
植物提取物(Karthic等人2008年,Buonocore等人1985年)
尿素和其他酰胺试剂(Toralballa和Eitingon 1967年)
文献参考:
Agarwal, R. and Henkin, R.
Metal Binding Characteristics of Human Salivary and Porcine Pancreatic Amylase , J Biol Chem 262 , 2568 , 1987
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Aoshima, H. , Manabe, T. , Hiromi, K. and Hatano, H.
Effect of Photooxidation of Bacterial Liquefying alpha-Amylase Dependent on the Degree of Polymerization of Linear Substrates , Biochim Biophys Acta 341 , 497 , 1974
Babbar, I. , Powar, V. and Jagannathan, V.
Crystallization of alpha-Amylase from Bacillus subtilis , Biochim Biophys Acta 65 , 347 , 1962
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Worthington:碳酸酐酶Carbonic Anhydrase的分子特性与生理作用
碳酸酐酶(CA)催化CO2/H2CO3的可逆水合和脱水反应。CA在自然界中广泛存在,存在于动物、植物和某些细菌中。在哺乳动物中已经鉴定并表征了16种同工酶。由于红细胞CA相对容易获得用于实验目的,因此它是研究最广泛的。
特异性:
血液中CO2的运输和排泄在很大程度上依赖于红细胞内CA对CO2反应的快速催化(Tufts等人2003年)。牛CA可逆地水合烷基丙酮酸酯,并对多种底物表现出水合酶活性(Pocker等人1974年,Wells等人1975年)。
组成:
迄今为止在哺乳动物中已描述了十六种CA同工酶。红细胞CA,CA-I和CA-II最为知名。CA-I、CA-II、CA-III、CA-VII和CA-XIII是细胞质型的。CA-IV、CA-IX、CA-XII、CA-XIV和CA-XV是膜结合型的。CA-VI分泌在唾液中。CA-VA和CA-VB是线粒体的。还有三种无催化活性的形式,称为CA相关蛋白(CARPs):CARP-VIII、CARP-X和CARP-XI(Coban等人2009年)。
锌金属总是与组氨酸93、95和118(成熟链编号)结合。一个氢键网络,与锌结合的水分子和这些组氨酸直接或间接相连,包括28-Ser、91-Glu、105-Glu、106-His、116-His、193-Tyr、198-Thr、208-Trp和223-Asn。这些残基被发现是高度保守的(Lindskog1982年,Lindskog等人1984年)。牛和人的CA I和II包含一个独特的C末端结结构,已被证明对酶活性和机械特性很重要(Alam等人2002年)。
分子特征:
红细胞中的每种同工酶(CA-I和CA-II)由一个由259或260个氨基酸残基组成的单链肽组成。低活性形式(CA-I)包含260个残基,而高活性形式(CA-II)包含259个残基。给定物种中红细胞的高活性和低活性形式通常显示出超过50%的序列同一性;例如,马CA-I和CA-II形式仅显示出55%的同一性(Wendorff等人1985年)。相比之下,不同物种中相同形式的同工酶显示出更大的同源性;人的CA-II和牛CA-II显示出77%的序列同源性(Tashian等人1980年,Engberg等人1985年,Alam等人2003年)。这些同工酶由不同的基因编码,但由于在活性中心的大量同源性,它们似乎有共同的进化历史。泛素,一个76个残基的蛋白质,具有一些CA的酶特性,与CA有独特的序列同源性(Deutsch1987年)。
碳酸酐酶的特性:
CATH分类
类别:Alpha Beta
拓扑:碳酸酐酶II
分子量:
29.0 kDa(理论)
30 kDa(Lindskog等人1971年)
最佳pH值:7.0-7.5(Demir等人2000年,Tasgin等人2009年)
等电点:6.40(理论)
艾美捷Worthington 碳酸酐酶(9001-03-0)的应用:
血液中CO2的测定
酸度测试试剂中CO2的消除
羧基转移
还原反应
消光系数:
50,070 cm-1M-1(理论)
E1%, 280 = 19.0(Nyman和Lindskog1964年)
活性位点残基
组氨酸(H63)
天冬氨酸(N66)
赖氨酸(K126)
激活剂:
HPO42-(Rowlett等人1991年)
SO32-(Rowlett等人1991年)
抑制剂:
单价阴离子(Lindskog等人1971年,Ward和Cull1972年)
磺酸盐和磺胺类(Pocker和Watamori1973年,Binford等人1974年)
咪唑(Edsall1968年)
文献参考:
Andersson, B. , Nyman, P. and Strid, L.
Amino Acid Sequence of Human Erythrocyte Carbonic Anhydrase B , Biochem Biophys Res Commun 48 , 670 , 1972
Appleton, D. and Sarkar, B.
The Activity-Related Ionization in Carbonic Anhydrase , Proc Natl Acad Sci U S A 71 , 1686 , 1974
Behravan, G. , Jonsson, B. and Lindskog, S.
Fine Tuning of the Catalytic Properties of Carbonic Anhydrase - Studies of a Thr200 --> His Variant of Human Isoenzyme II , Eur J Biochem 190 , 351 , 1990
Behravan, G. , Jonsson, B. and Lindskog, S.
Fine Tuning of the Catalytic properties of Human Carbonic Anhydrase-II-Effects of Varying Active-Site Residue-200 , Eur J Biochem 195 , 393 , 1991
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