InVivoMAb抗Powassan病毒E蛋白:无动物细胞培养清液中纯化,适用于多种应用
POWV-63单克隆抗体与Powassan病毒(POWV)的包膜(E)蛋白反应,POWV是一种蜱传黄病毒(TBFV),可导致人类严重至致命的神经系统疾病。大约10-15%的神经侵袭性POWV感染会导致死亡,超过一半的幸存者会遭受严重的长期神经后果。哺乳动物TBFV的E蛋白显示出约70%的序列相似性,其中许多,如POWV和蜱传脑炎病毒(TBEV),与脑部炎症有关。由于缺乏疫苗接种,人们对这一研究领域产生了兴趣,并开发了许多POWV中和抗体(如POWV-63、POWV-80、POWV-4等)。据报道,POWV-63抗体对Raji-DCSIGN-R细胞中的POWV感染表现出强烈的抑制作用(EC50<10ng/ml),这些细胞用基于POWV谱系II毒株P0375的报告病毒颗粒(RVP)的C-prM-E蛋白处理。用氢氘交换质谱(HDX-MS)和ELISA验证了该抗体对重组POWV E蛋白的特异性。发现POWV-63抗体检测到含有DII融合环或其近端的表位,这种检测需要完整的DII融合环路。TBEV、LGTV和GGYV C-prM-E转染细胞的流式细胞术显示了POWV-63抗体与这些黄病毒的显著交叉反应。几项体外实验表明,POWV-63抗体对DENV-2、SLEV和ZIKV RVPs也具有中和活性。有趣的是,这种抗体对K562细胞中的蚊媒黄病毒(MBFV)感染表现出抗体依赖性增强(ADE)作用。最近,一项体内实验研究表明,POWV-63单克隆抗体阻断了病毒生命周期中的附着后步骤。在基于C57BL/6J小鼠的体内研究中,POWV-63对POWV-SPO、TBFV和Langat病毒(LGTV)具有显著的保护作用。
艾美捷InVivoMAb抗Powassan病毒E蛋白/InVivoMAb anti-Powassan virus E protein:
货号:BE0434
亚型:小鼠IgG2c,κ
推荐稀释液:InVivoPure pH 7.0稀释液
免疫原:POWV SPO株或POWV mRNA疫苗
报告的应用:体内抵抗POWV
体外中和POWV
抗体依赖性增强(ADE)
焦点减少中和试验(FRNT)
流式细胞术
酶联免疫吸附试验(ELISA)
配方:PBS,pH 7.0
不含稳定剂或防腐剂
内毒素:<2EU/mg(<0.002EU/μg)
通过LAL凝胶凝固试验确定
纯度:>95%
通过SDS-PAGE确定
无菌性:0.2微米过滤
生产:在无动物设施中从细胞培养上清液中纯化
纯化:蛋白A
分子量:150 kDa
储存:抗体溶液应以原始浓度在4°C下储存。不要冷冻。
推荐稀释液
InVivoPure pH 7.0稀释液
InVivoMAb抗Powassan病毒E蛋白/InVivoMAb anti-Powassan virus E protein文献参考:
in vivo protection against POWV, In vitro neutralization of POWV, Antibody Dependent Enhancement (ADE), Focus reduction neutralization test (FRNT), Flow Cytometry, ELISA
VanBlargan LA, Errico JM, Kafai NM, Burgomaster KE, Jethva PN, Broeckel RM, Meade-White K, Nelson CA, Himansu S, Wang D, Handley SA, Gross ML, Best SM, Pierson TC, Fremont DH, Diamond MS. (2021). "Broadly neutralizing monoclonal antibodies protect against multiple tick-borne flaviviruses" J Exp Med 10.1084/jem.20210174.
Huang RY, Krystek SR, Felix N, Graziano RF, Srinivasan M, Pashine A, Chen G. (2018). "Hydrogen/deuterium exchange mass spectrometry and computational modeling reveal a discontinuous epitope of an antibody/TL1A Interaction" MAbs 10.1080/19420862.2017.1393595.
https://www.amyjet.com/products/BXC-BE0434-1mg.shtml
InVivoMAb抗小鼠/人Mac-2(半乳糖凝集素-3):高特异性识别与高效体内实验应用
M3/38单克隆抗体与人和小鼠Mac-2反应。Mac-2,也称为半乳凝素-3,是一种β-半乳糖苷结合凝集素,在多种组织中表达,包括消化道和泌尿生殖道、肺、血液、肾脏和心脏。Mac-2在髓系细胞和成纤维细胞以及上皮细胞和内皮细胞中高度表达。Mac-2具有多种不同的调节功能,包括细胞生长、增殖、凋亡、分化、细胞粘附、组织修复、炎症、组织纤维化和血管生成。Mac-2与多种疾病的发病机制有关,包括器官纤维化、慢性炎症、癌症、动脉粥样硬化和其他心血管疾病。
艾美捷InVivoMAb抗小鼠/人Mac-2(半乳糖凝集素-3)/InVivoMAb anti-mouse/human Mac-2 (Galectin-3):
货号:BE0395
亚型:大鼠IgG2a,κ
推荐同型对照:InVivoMAb大鼠IgG2a同型对照,抗三硝基苯酚
推荐稀释液:InVivoPure pH 7.0稀释液
偶联:该产品未偶联。我们提供抗体偶联服务。
免疫原:C57BL/6小鼠巨噬细胞糖蛋白
报告的应用:西方印迹
免疫荧光
免疫组化(石蜡)
免疫沉淀
配方:PBS,pH 7.0
不含稳定剂或防腐剂
内毒素:<2EU/mg(<0.002EU/μg)
通过LAL凝胶凝固试验确定
纯度:>95%
通过SDS-PAGE确定
无菌性:0.2微米过滤
生产:在无动物设施中从细胞培养上清液中纯化
纯化:蛋白G
分子量:150 kDa
储存:抗体溶液应以原始浓度在4°C下储存。不要冷冻。
InVivoMAb抗小鼠/人Mac-2(半乳糖凝集素-3)/InVivoMAb anti-mouse/human Mac-2 (Galectin-3)文献参考:
Immunohistochemistry (paraffin)
Pedersen K, Nielsen MA, Juul-Madsen K, Hvid M, Deleuran B, Greisen SR. (2023). "Galectin-3 interacts with PD-1 and counteracts the PD-1 pathway-driven regulation of T cell and osteoclast activity in Rheumatoid Arthritis" Scand J Immunol 97(2):e13245.
Immunofluorescence
Melo FH, Butera D, Junqueira Mde S, Hsu DK, da Silva AM, Liu FT, Santos MF, Chammas R. (2011). "The promigratory activity of the matricellular protein galectin-3 depends on the activation of PI-3 kinase" PLoS One 6(12):e29313.
Western Blot, Immunoprecipitation
Rosenberg I, Cherayil BJ, Isselbacher KJ, Pillai S. (1991). "Mac-2-binding glycoproteins. Putative ligands for a cytosolic beta-galactoside lectin" J Biol Chem 266(28):18731-6.
https://www.amyjet.com/products/BXC-BE0395-1mg.shtml
InVivoMAb抗小鼠VISTA:特异性强,内毒素低
8G8单克隆抗体与小鼠V结构域Ig T细胞活化抑制因子(VISTA)反应,也称为PD-1H和B7-H5。VISTA是一种309个氨基酸的I型跨膜糖蛋白,是Ig超家族的成员。VISTA在幼稚和活化的T细胞、NK细胞、巨噬细胞、树突状细胞和中性粒细胞上表达。VISTA作为一种负性免疫检查点蛋白,抑制T细胞细胞因子的产生和增殖。VISTA被肿瘤浸润淋巴细胞(如髓系细胞和调节性T细胞)过表达。8G8抗体是一种激动性抗体,在多种炎症和自身免疫小鼠模型中表现出免疫抑制特性,包括狼疮、肝炎、关节炎和银屑病。
艾美捷InVivoMAb抗小鼠VISTA/InVivoMAb anti-mouse VISTA:
货号:BE0423
亚型:亚美尼亚仓鼠IgG
推荐同型对照:InVivoMAb多克隆亚美尼亚仓鼠IgG
推荐稀释液:InVivoPure pH 7.0稀释液
免疫原:不可用或未知
报告的应用:体内激活VISTA信号传导
配方:PBS,pH 7.0
不含稳定剂或防腐剂
内毒素:<2EU/mg(<0.002EU/μg)
通过LAL凝胶凝固试验确定
纯度:>95%
通过SDS-PAGE确定
无菌性:0.2微米过滤
生产:在无动物设施中从细胞培养上清液中纯化
纯化:蛋白G
分子量:150 kDa
储存:抗体溶液应以原始浓度在4°C下储存。不要冷冻。
InVivoMAb抗小鼠VISTA/InVivoMAb anti-mouse VISTA文献参考:
in vivo stimulation of VISTA signaling
ElTanbouly MA, Zhao Y, Nowak E, Li J, Schaafsma E, Le Mercier I, Ceeraz S, Lines JL, Peng C, Carriere C, Huang X, Day M, Koehn B, Lee SW, Silva Morales M, Hogquist KA, Jameson SC, Mueller D, Rothstein J, Blazar BR, Cheng C, Noelle RJ. (2020). "VISTA is a checkpoint regulator for naïve T cell quiescence and peripheral tolerance" Science 367(6475):eaay0524.
in vivo stimulation of VISTA signaling
Ceeraz S, Eszterhas SK, Sergent PA, Armstrong DA, Ashare A, Broughton T, Wang L, Pechenick D, Burns CM, Noelle RJ, Vincenti MP, Fava RA. (2017). "VISTA deficiency attenuates antibody-induced arthritis and alters macrophage gene expression in response to simulated immune complexes" Arthritis Res Ther 19(1):270.
https://www.amyjet.com/products/BXC-BE0423-1mg.shtml
InVivoMAb抗小鼠VEGF-A,用于体内VEGF-A信号通路研究
2G11-2A05单克隆抗体与小鼠VEGF-A(血管内皮生长因子A)反应。VEGF-A是一种45kDa的同源二聚体,二硫键连接的糖蛋白,在血管生成、血管生成和内皮细胞生长中起着关键作用。它促进有丝分裂、趋化性和血管通透性。大多数肿瘤都需要血管生成,抑制VEGF与VEGF受体的结合一直是几种肿瘤治疗策略的重点。2G11-2A05抗体中和VEGF-A的生物活性。
艾美捷InVivoMAb抗小鼠VEGF-A/InVivoMAb anti-mouse VEGF-A:
货号:BE0399
亚型:大鼠IgG2a,κ
推荐同型对照:InVivoMAb大鼠IgG2a同型对照,抗三硝基苯酚
推荐稀释液:InVivoPure pH 7.0稀释液
偶联:未偶联。提供抗体偶联服务。
免疫原:小鼠VEGF的N端24个氨基酸序列
报告的应用:体内VEGF-A中和
西方印迹
配方:PBS,pH 7.0
不含稳定剂或防腐剂
内毒素:<2EU/mg(<0.002EU/μg)
通过LAL凝胶凝固试验确定
纯度:>95%
通过SDS-PAGE确定
无菌性:0.2微米过滤
生产:在无动物设施中从细胞培养上清液中纯化
纯化:蛋白G
分子量:150 kDa
储存:抗体溶液应以原始浓度在4°C下储存。不要冷冻。
InVivoMAb抗小鼠VEGF-A/InVivoMAb anti-mouse VEGF-A文献参考:
in vivo VEGF-A neutralization
Kaneko H, Kuroshima S, Kozutsumi R, Al-Omari FA, Hayano H, Nakajima K, Sawase T. (2023). "Zoledronate/Anti-VEGF Neutralizing Antibody Combination Administration Increases Osteal Macrophages in a Murine Model of MRONJ Stage 0-like Lesions" J Clin Med 12(5):1914.
in vivo VEGF-A neutralization
Mashima T, Wakatsuki T, Kawata N, Jang MK, Nagamori A, Yoshida H, Nakamura K, Migita T, Seimiya H, Yamaguchi K. (2021). "Neutralization of the induced VEGF-A potentiates the therapeutic effect of an anti-VEGFR2 antibody on gastric cancer in vivo" Sci Rep 11(1):15125.
in vivo VEGF-A neutralization
Huang J, Kelly CP, Bakirtzi K, Villafuerte Gálvez JA, Lyras D, Mileto SJ, Larcombe S, Xu H, Yang X, Shields KS, Zhu W, Zhang Y, Goldsmith JD, Patel IJ, Hansen J, Huang M, Yla-Herttuala S, Moss AC, Paredes-Sabja D, Pothoulakis C, Shah YM, Wang J, Chen X. (2019). "Clostridium difficile toxins induce VEGF-A and vascular permeability to promote disease pathogenesis" Nat Microbiol 4(2):269-279.
in vivo VEGF-A neutralization
Lu R, Kujawski M, Pan H, Shively JE. (2012). "Tumor angiogenesis mediated by myeloid cells is negatively regulated by CEACAM1" Cancer Res 72(9):2239-50.
https://www.amyjet.com/products/BXC-BE0399-1mg.shtml
ProSpec-多营养素:多功能蛋白质在干细胞维持和组织再生中的重要性
关于pleiotrophin(PTN):
通常缩写为PTN,由于发现它的科学家而得名,包括神经突起生长促进因子1(NEGF1),它是一种存在于人类体内的与PTN基因相关的蛋白质。这种蛋白质对肝素有很高的亲和力(肝素是一种用作血液稀释剂的药物),它是一种18-kDa的生长因子。它刺激神经发育、造血干细胞维持和细胞分化。
PTN常与神经退行性疾病联系在一起,因为它提供营养支持并促进积极恢复。多年来,在大鼠上进行了许多研究,在这些研究中,经PTN处理的细胞被移植到患有帕金森病的大鼠的纹状体中。从这些实验中,很明显通过这种方法阻断RPTPζ/β可能是治疗神经退行性疾病的一种方式。它也可以直接与HIV联系起来,作为一种通过与核糖体蛋白结合来抑制疾病的方式——作为一种低亲和力的受体。这是一个在人类和动物中不断研究的迷人蛋白质,它的结构、相互作用、功能和机制都非常复杂。
Pleiotrophin结构
Pleiotrophin在结构上与肝素结合蛋白和midkine相关。它有很高比例的氨基酸残基,导致异常迁移。它的结构在成人或儿童体内不同,并会随着时间的推移而发展。
Pleiotrophin功能
当Pleiotrophin与midkine结合时,它可以创建一系列受调控的肝素结合蛋白。存在于外周和中枢神经系统(在胚胎早期以及出生后发育阶段),以及肠道、骨骼和肾脏(以及其他非神经组织)中,它是体内一种必需的蛋白质。在成人中,它位于大脑的海马体中,并与肿瘤血管生成有关。它是一种重要的细胞信号传导细胞因子,对发育至关重要。
Pleiotrophin机制和相互作用
Pleiotrophin在体内有多种机制。其中之一是由PTM和NRP-1之间的相互作用产生的机制。展示了蛋白质如何协助癌症进展和肿瘤血管生成,它控制肿瘤细胞和内皮细胞的反应。
其次,已知PTN调节细胞因子的产生并有助于预防炎症。实现这一点的机制在法国实验室科学家进行的一项研究中有所描述——“在本研究中,我们首次展示了PTN在静止的人类外周血单个核细胞(PBMC)中诱导炎症细胞因子的表达,包括TNF-alpha、IL-1beta和IL-6”。
在相互作用方面,Pleiotrophin直接与糖胺聚糖以及多种ECM细胞相互作用。它还与硫酸软骨素蛋白多糖和酪氨酸磷酸酶ζ联系,后者是一种受体型蛋白,以促进血管生成活动。Pleiotrophin有一系列功能和相互作用,使其在神经系统中至关重要。作为一种分泌型生长因子,由于其重要性,它将在未来继续被研究多年。
ProSpec-多营养素相关研究:
多营养素重组人 CYT-749
多能营养素人重组体,His Tag CYT-451
艾美捷ProSpec-多营养素重组人:
人类重组Pleiotrophin(PTN)在大肠杆菌中产生,是一个单一的非糖基化多肽链,包含136个氨基酸,分子质量为15.3kDa。
Pleiotrophin通过专有的色谱技术纯化。
货号:CYT-749
来源:大肠杆菌。
物理外观:无菌过滤的白色冻干(冷冻干燥)粉末。
配方:Pleiotrophin蛋白是从0.2μm过滤的浓缩溶液中,以PBS,pH 7.4进行冻干。
溶解性:建议在无菌的18M-cm H2O中以不低于100μg/ml的浓度重新溶解冻干的Pleiotrophin,然后可以进一步稀释到其他水溶液中。
稳定性:虽然冻干的Pleiotrophin在室温下稳定3周,但应储存在低于-18°C的干燥环境中。重新溶解后的Pleiotrophin应在4°C下储存2-7天,长期使用应低于-18°C。长期储存时,建议添加载体蛋白(0.1% HSA或BSA)。
请避免冻融循环。
纯度:
大于97.0%,由以下方法确定:
a。RP-HPLC分析。
b。SDS-PAGE分析。
氨基酸序列:
GKKEKPEKKV KKSDCGEWQW SVCVPTSGDC GLGTREGTRT GAECKQTMKT QRCKIPCNWK KQFGAECKYQ FQAWGECDLN TALKTRTGSL KRALHNAECQ KTVTISKPCG KLTKPKPQAE SKKKKKKEGKK QEKMLD。
仅供实验室研究使用。不得用作药品、农业或杀虫剂产品、食品添加剂或家用化学品。
ProSpec生产细胞因子,生长因子,趋化因子,激素,酶,病毒抗原和许多其他重组蛋白。ProSpec专有的蛋白质纯化技术拥有十多年的丰富经验,生产成本低,产量高,生产效率高,产品纯度高,生物活性极具竞争力。艾美捷科技是ProSpec的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/prospec-china-distributor.shtml
ProSpec-甲状腺刺激素:揭秘其在内分泌系统中的多功能性
关于甲状腺刺激素:
人类激素甲状腺刺激素属于糖蛋白家族,由两个亚单位组成:α亚单位和β亚单位。这些亚单位通过非共价键结合成一个异二聚体。常见的α亚单位与四种特定的β亚单位结合。这导致了四种生物学上的人类激素;促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、促甲状腺激素(TSH)和绒毛膜促性腺激素(CG)。
FSH、LH和TSH激素在垂体前叶表达,已被证明对下丘脑-垂体轴的协调内分泌调节至关重要。TSH受体已被证明能激活甲状腺中特定的G蛋白偶联受体,以及性腺中的LH和TSH受体。这种异二聚糖蛋白家族仅在脊椎动物中发现。它们在从原始的鳐鱼到人类的生物中都保守,无论是在原始序列还是功能特性上。
甲状腺刺激素机制与功能
皮质激素衍生的糖蛋白激素(CGH),由于其甲状腺刺激活性,也被列为甲状腺刺激素。CGH是一个非共价异二聚体,由糖蛋白激素α2(GPHA2)和糖蛋白激素β5(GPHB5)组成。GPHA2和GPHB5激素的重组激活了人类TSH受体,但它不激活LH和FSH受体。从放射配体测定中,CGH显示出对TSH受体有很高的亲和力。它还显示出能刺激甲状腺细胞中的cAMP产生和胸腺嘧啶掺入。从体内研究中,观察到TSH抑制的大鼠血清甲状腺素水平增加。由于甲状腺刺激素在已知表达TSH受体的垂体前叶表达,导致人们假设其机制是旁分泌的。
ProSpec-甲状腺刺激素相关研究:
GPHA2人 HOR-258
GPHB5人 HOR-257
艾美捷ProSpec-甲状腺刺激素:
GPHA2人类重组蛋白在大肠杆菌中产生,是一个单一的非糖基化多肽链,包含120个氨基酸,总分子质量为13.28 kDa。甲状腺刺激素包含His标签,由14个额外的氨基酸组成。
重组人类甲状腺刺激素β亚单位的氨基酸序列与人类甲状腺刺激素β亚单位的氨基酸序列(无信号序列)100%同源。(N端24个氨基酸)。
甲状腺刺激素通过专有的色谱技术纯化。
货号:HOR-258
来源:大肠杆菌。
物理外观:过滤后的白色冻干(冷冻干燥)粉末。
配方:GPHA2经0.4μm过滤并从0.05M醋酸缓冲液pH 4中的0.5mg/ml溶液中冻干。
溶解性:建议加入0.1M醋酸缓冲液pH4制备约0.5 mg/ml的工作库存溶液,并让冻干的粉末完全溶解。对于转换为更高pH值,我们建议通过相关缓冲液进行大量稀释至10μg/ml的浓度。在更高浓度下,这种蛋白质的溶解性是有限的。产品非无菌!在使用前请使用适当的无菌过滤器过滤产品。
稳定性:虽然冻干的甲状腺刺激素在室温下稳定3周,但应储存在低于-18°C的干燥环境中。重新溶解后GPHA2应在4°C下储存2-7天,长期使用应低于-18°C。长期储存时,建议添加载体蛋白(0.1% HSA或BSA)。
请避免冻融循环。
纯度:
大于95.0%,由以下方法确定:
a。RP-HPLC分析。
b。SDS-PAGE分析。
氨基酸序列:
MRGSHHHHHH GMAS QEAVIPG CHLHPFNVTV RSDRQGTCQG SHVAQACVGH CESSAFPSRY SVLVASGYRH NITSVSQCCT ISGLKKVKVQ LQCVGSRREE LEIFTARACQCDMCRLSRY。
用途:ProSpec的产品仅供实验室研究使用。它们不得用作药品、农业或杀虫剂产品、食品添加剂或家用化学品。
ProSpec生产细胞因子,生长因子,趋化因子,激素,酶,病毒抗原和许多其他重组蛋白。ProSpec专有的蛋白质纯化技术拥有十多年的丰富经验,生产成本低,产量高,生产效率高,产品纯度高,生物活性极具竞争力。艾美捷科技是ProSpec的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/prospec-china-distributor.shtml
SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统-AP解决方案
SBA克隆分型系统AP试剂盒专为小鼠单克隆抗体的同种型而设计。它含有2.5毫克的捕获物抗体和1.0mL AP偶联的抗小鼠Ig、小鼠IgA、小鼠IgG1、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b、小鼠IgG3、小鼠IgM,小鼠κ、小鼠λ和pNPP底物。该试剂盒也可用于定量研究样品中的小鼠免疫球蛋白,如当与小鼠免疫球蛋白组(SB目录号5300-01)结合使用时,作为血清、上清液和腹水。
艾美捷SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统AP试剂盒(5300-04)组成:
• 山羊抗小鼠Ig,人用ads-UNLB
• 山羊抗小鼠Ig,人用ads-AP
• 山羊抗小鼠IgA-AP
• 山羊抗小鼠IgG1,人用ads-AP
• 山羊抗小鼠IgG2a,人用ads-AP
• 山羊抗小鼠IgG2b,人用ads-AP
• 山羊抗小鼠IgG3,人用ads-AP
• 山羊抗小鼠IgM,人用ads-AP
• 山羊抗小鼠Kappa-AP
• 山羊抗小鼠Lambda-AP
• pNPP底物片
处理和储存:
• 纯化(UNLB)抗体以2.5毫克纯免疫球蛋白的形式提供,溶于1.0毫升硼酸缓冲盐水中,pH值为8.2。未添加防腐剂或含胺的缓冲盐。储存于2-8°C。
• 碱性磷酸酶(AP)偶联物以1.0毫升库存溶液的形式提供,含有50 mM Tris/1 mM MgCl2/50%甘油,pH值为8.0,含有NaN3作为防腐剂。储存于2-8°C或长期储存于-20°C。
• pNPP底物片以20片×5毫克的形式提供。储存于2-8°C。避光保存。
• 如果按照指示储存,试剂在标签上显示的有效期内是稳定的。
建议的同型鉴定方案:
• 将捕获抗体稀释至5-10微克/毫升的浓度,使用硼酸缓冲盐水(BBS),pH值为8.2或磷酸缓冲盐水(PBS),pH值为7.4;向ELISA板的每个孔中加入0.1毫升;或者,用于免疫的抗原可以用作包被试剂。
• 用盖子或塑料膜覆盖板子,并在2-8°C的湿润环境中至少孵育12小时。
• 清空孔洞,用含有0.05% Tween®的BBS(或PBS)洗涤3次,清空孔洞,并用含有1%牛血清白蛋白的BBS(BBS/BSA)填充孔洞。
• 让抗体包被的板子在室温下至少放置1小时,以阻断板上的自由结合位点。
• 清空板子并洗涤3次。
• 向每个孔中加入0.1毫升的杂交瘤上清液,覆盖板子,并在室温下轻轻摇动孵育1小时或在2-8°C下过夜。
• 清空板子并洗涤3次。
• 将AP标记的检测抗体(s)稀释至1:250-1:500的比例,在BBS/BSA中加入0.1毫升的偶联物到板子的相应孔中,覆盖板子,并在室温下轻轻摇动孵育1小时或在2-8°C下过夜。
• 清空板子并洗涤5次。
• 准备底物缓冲液 - 向400毫升双重玻璃蒸馏水中加入24.5毫克MgCl2∙6H2O和48毫升二乙醇胺;用5N HCl调整pH值至9.8,并用蒸馏水补充至500毫升。
• 准备1毫克/毫升的底物溶液(例如,一片5毫克的药片+5毫升底物缓冲液),并向板子的每个孔中加入0.1毫升。
• 在添加底物后,读取每个孔的405纳米处的光密度。
SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统-AP参考文献:
1. Bergen HR 3rd, Losman MJ, O'Connor T, Zacharias W, Larson JE, Accavitti MA, et al. Specificity of monoclonal anti-Z-DNA antibodies from unimmunized MRL/Mp-lpr/lpr mice. J Immunol. 1987;139:743-8. (ELISA - Isotyping)
2. Hrdličková R, Nehyba J, Humphries EH. v-rel induces expression of three avian immunoregulatory surface receptors more efficiently than c-rel. J Virol.
1994;68:308-19. (ELISA - Isotyping)
3. Hong JS, Engler JA. Domains required for assembly of adenovirus type 2 fiber trimers. J Virol. 1996;70:7071-8. (ELISA - Isotyping)
4. Beier RC, Ripley LH, Young CR, Kaiser CM. Production, characterization, and cross-reactivity studies of monoclonal antibodies against the coccidiostat nicarbazin. J Agric Food Chem. 2001;49:4542-52. (ELISA - Isotyping)
5. Itoh T, Yoshida M, Chiba T, Kita T, Wakatsuki Y. A coordinated cytotoxic effect of IFN-γ and cross-reactive antibodies in the pathogenesis of Helicobacter pylori gastritis. Helicobacter. 2003;8:268-78. (ELISA - Isotyping)
6. Beelen R, Boyd B, Garavello JC, Pavanelli GC, Ainsworth AJ. Generation, characterisation and applicability of a monoclonal antibody to hybrid surubim catfish Pseudoplatystoma corruscans (Agassiz) × Pseudoplatystoma fasciatum (Linnaeus) immunoglobulin. Comp Clin Path. 2004;12:191-8. (ELISA - Isotyping)
7. Moore-Lai D, Rowland E. Discovery and characterization of an antibody, anti-egressin, that is able to inhibit Trypanosoma cruzi egress in vitro. J Parasitol.
2004;90:524-30. (ELISA - Isotyping)
SouthernBiotech 致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。 同时,SBA还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体,其中包括:荧光素和酶标记物,低内毒素/不含叠氮化物(LE/AF)制剂,F(ab)和 F(ab')2片段化抗体,此外还有纯化的免疫球蛋白、血清以及细胞外基质蛋白等产品。艾美捷科技是SouthernBiotech的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/sba-china-distributor.shtml
SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统-C57BL/6-AP同型鉴定方案
SBA克隆分型系统-C57BL/6-AP试剂盒专为C57BL/6小鼠单克隆抗体的同种型而设计。它含有2.5毫克捕获抗体和1.0 mL AP偶联的抗小鼠Ig、小鼠IgA、小鼠IgG1、小鼠IgG2b、小鼠IgG2c、小鼠IgG3、小鼠IgM、小鼠κ、小鼠λ和pNPP底物。该试剂盒也可用于样本中小鼠免疫球蛋白的定量研究如血清、上清液和腹水,当与C57BL/6小鼠免疫球蛋白组(SB目录号5300)结合使用时-01B)。
艾美捷SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统-C57BL/6-AP(5300-04B):
- 山羊抗小鼠Ig,人用ads-UNLB
- 山羊抗小鼠Ig,人用ads-AP
- 山羊抗小鼠IgA-AP
- 山羊抗小鼠IgG1,人用ads-AP
- 山羊抗小鼠IgG2b,人用ads-AP
- 山羊抗小鼠IgG2c,人用ads-AP
- 山羊抗小鼠IgG3,人用ads-AP
- 山羊抗小鼠IgM,人用ads-AP
- 山羊抗小鼠Kappa-AP
- 山羊抗小鼠Lambda-AP
- pNPP底物片
处理和储存:
- 纯化(UNLB)抗体以2.5毫克纯免疫球蛋白的形式提供,溶于1.0毫升硼酸缓冲盐水中,pH值为8.2。未添加防腐剂或含胺的缓冲盐。储存于2-8°C。
- 碱性磷酸酶(AP)偶联物以1.0毫升库存溶液的形式提供,含有50 mM Tris/1 mM MgCl2/50%甘油,pH值为8.0,含有NaN3作为防腐剂。储存于2-8°C或长期储存于-20°C。
- pNPP底物片以20片×5毫克的形式提供。储存于2-8°C。避光保存。
- 如果按照指示储存,试剂在标签上显示的有效期内是稳定的。
建议的同型鉴定方案:
- 将捕获抗体稀释至5-10微克/毫升的浓度,使用硼酸缓冲盐水(BBS),pH值为8.2或磷酸缓冲盐水(PBS),pH值为7.4;向ELISA板的每个孔中加入0.1毫升;或者,用于免疫的抗原可以用作包被试剂。
- 用盖子或塑料膜覆盖板子,并在2-8°C的湿润环境中至少孵育12小时。
- 清空孔洞,用含有0.05% Tween®的BBS(或PBS)洗涤3次,清空孔洞,并用含有1%牛血清白蛋白的BBS(BBS/BSA)填充孔洞。
- 让抗体包被的板子在室温下至少放置1小时,以阻断板上的自由结合位点。
- 清空板子并洗涤3次。
- 向每个孔中加入0.1毫升的杂交瘤上清液,覆盖板子,并在室温下轻轻摇动孵育1小时或在2-8°C下过夜。
- 清空板子并洗涤3次。
- 将AP标记的检测抗体(s)稀释至1:250-1:500的比例,在BBS/BSA中加入0.1毫升的偶联物到板子的相应孔中,覆盖板子,并在室温下轻轻摇动孵育1小时或在2-8°C下过夜。
- 清空板子并洗涤5次。
- 准备底物缓冲液 - 向400毫升双重玻璃蒸馏水中加入24.5毫克MgCl2∙6H2O和48毫升二乙醇胺;用5N HCl调整pH值至9.8,并用蒸馏水补充至500毫升。
- 准备1毫克/毫升的底物溶液(例如,一片5毫克的药片+5毫升底物缓冲液),并向板子的每个孔中加入0.1毫升。
- 在添加底物后,读取每个孔的405纳米处的光密度。
SouthernBiotech丨SBA克隆分型系统-C57BL/6-AP参考文献:
1. Dubovsky JA, Beckwith KA, Natarajan G, Woyach JA, Jaglowski S, Zhong Y, et al. Ibrutinib is an irreversible molecular inhibitor of ITK driving a Th1-selective pressure in T lymphocytes. Blood. 2013;122:2539-49. (ELISA - Serum)
2. Hwang I, Park C, Luong T, Harrison KA, Birnbaumer L, Kehrl JH. The loss of Gnai2 and Gnai3 in B cells eliminates B lymphocyte compartments and leads to a hyper-IgM like syndrome. PLoS One. 2013;8(8):e72596. (ELISA - Serum)
3. Park KS, Bayles I, Szlachta-McGinn A, Paul J, Boiko J, Santos P, et al. Transcription elongation factor ELL2 drives Ig secretory-specific mRNA production and the unfolded protein response. J Immunol. 2014;193:4663-74. (ELISA - Serum)
4. Hwang I, Park C, Harrison K, Boularan C, Galés C, Kehrl JH. An essential role for RGS protein/Gαi2 interactions in B lymphocyte-directed cell migration and trafficking. J Immunol. 2015;194:2128-39. (ELISA - Serum)
SouthernBiotech 致力于高质量、高亲和纯化的二抗的生产、纯化和标记。 同时,SBA还提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆抗体,其中包括:荧光素和酶标记物,低内毒素/不含叠氮化物(LE/AF)制剂,F(ab)和 F(ab')2片段化抗体,此外还有纯化的免疫球蛋白、血清以及细胞外基质蛋白等产品。艾美捷科技是SouthernBiotech的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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