高效标记与细胞内分布Molday ION罗丹明B荧光标记物
由Benjamin Addicott等人发表于2010年的《Mesenchymal stem cell labeling and in vitro MR characterization at 1.5T of new SPIO contrast agent: Molday ION Rhodamine-B》，主要探讨了新型超顺磁性氧化铁（SPIO）对比剂Molday ION Rhodamine-B（MIRB）在标记间充质干细胞（MSC）方面的应用，并通过体外MRI实验评估了其成像特性。
方法
本研究采用了一种由Biopal公司研发的新型SPIO造影剂——Molday ION Rhodamine-B（MIRB）(BPL-CL-50Q01-6A-50，BPL-CL-50Q02-6A-50)，对间充质干细胞（MSC）进行了标记，并在1.5T临床MRI设备上进行了体外成像特性研究。研究内容包括：
细胞培养：从食蟹猴（Macaca fascicularis）的髂嵴采集骨髓单核细胞，通过密度梯度离心法分离并扩增MSC。
细胞标记：将MSC与不同浓度的MIRB共孵育20小时，浓度范围从5到100mg Fe/ml。通过普鲁士蓝染色和荧光显微镜观察细胞内MIRB的分布，并通过流式细胞术检测标记效率。
MSC功能评估：通过流式细胞术、基因表达分析、T细胞增殖抑制实验以及成骨、成脂分化实验，评估MIRB标记对MSC活力、增殖能力、表型及功能的影响。
MRI成像：构建含有MIRB标记MSC的琼脂糖模型，使用T2加权梯度回波（GE）、T2加权快速自旋回波（FSE）和T2加权平衡稳态自由进动（bSSFP）序列进行MRI扫描，评估不同序列对MIRB标记MSC的检测能力。
艾美捷Molday ION罗丹明B荧光标记物的独特优势：
高效标记与细胞内分布：MIRB能够被非吞噬性细胞高效内化，标记效率在MIRB浓度达到或超过20mg Fe/ml时接近95%。MIRB主要定位于MSC细胞质的核周内体中，这种定位模式有助于MRI检测时产生强烈的磁敏感效应。
对细胞功能无显著影响：研究表明，在MIRB浓度高达30mg Fe/ml时，MSC的活力、增殖能力、表型以及成骨、成脂分化能力均未受到显著影响。此外，MIRB标记的MSC在抑制T细胞增殖方面也表现出与未标记MSC相似的能力。
优异的MRI检测性能：在体外MRI实验中，使用长TR/TE、低带宽和低翻转角的梯度回波序列能够最大限度地提高MIRB标记MSC的检测灵敏度。研究发现在1.5T MRI设备上，MIRB标记的MSC在细胞数量低至约1000个时仍能被清晰检测到，显示出极高的检测灵敏度。
多模态成像能力：MIRB不仅适用于MRI检测，还因其共轭了罗丹明B（Rh-B）荧光染料而具备荧光显微镜检测能力。这种多模态成像能力为科研人员提供了更多元的细胞追踪手段。
MIRB在干细胞治疗中的价值：
精准追踪：MIRB的高标记效率和优异的MRI检测性能使得科研人员能够精准地追踪移植后的干细胞，评估其在体内的分布、迁移及存活情况。
功能评估：通过MRI监测干细胞的功能变化，如分化状态、增殖能力等，为干细胞治疗的效果评估提供重要依据。
安全性：MIRB对干细胞功能无显著影响，表明其在干细胞治疗中具有良好的生物相容性和安全性。
结论
本研究证明了MIRB作为一种新型SPIO造影剂，在间充质干细胞标记及MRI检测中的卓越表现。MIRB不仅能够高效标记干细胞且对细胞功能无显著影响，还具备极高的MRI检测灵敏度。这些特性使得MIRB成为干细胞治疗中一种极具潜力的细胞追踪工具。未来，随着MIRB在更多临床前和临床试验中的应用，其有望在干细胞治疗领域发挥更大的作用，推动该领域的快速发展。
通过本文的研究，我们不仅展示了MIRB在MSC标记和MRI检测中的技术优势，还进一步强调了Biopal品牌产品在干细胞追踪领域的重要价值和广阔应用前景。
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Biopal Molday ION--高效顺磁性对比剂
一篇由Mengna Yao等人撰写，题为“High-dimensional topographic organization of visual features in the primate temporal lobe”的文章，发表在《Nature Communications》上。文章主要探讨了灵长类动物（包括人类和非人类灵长类）颞叶视觉特征的高维拓扑组织。本文采用深度学习技术和功能磁共振成像（fMRI）技术，构建了一个25维的视觉特征空间，并对猴脑和人脑中的ITC特征偏好进行了系统的测量与分析。
方法
1. 构建25维视觉特征空间：研究者们利用AlexNet神经网络，对ImageNet数据库中的200,000张自然图像进行处理，并通过独立成分分析（ICA）提取了25个独立成分（ICs），从而构建了一个25维的视觉特征空间。这些ICs代表了不同的视觉特征，如物体类别、形状和纹理等。
2. fMRI实验设计：为了测量猴脑和人脑中对这些视觉特征的偏好，研究者们设计了fMRI实验。在实验中，参与者被要求注视屏幕上的图像，这些图像分为“正”和“负”两类，分别代表对某一IC的最大和最小响应。通过交替呈现这两类图像，研究者们能够测量大脑对不同视觉特征的偏好。
3. Biopal Molday ION的应用：在fMRI实验中，为了提高信号噪声比，研究者们使用了艾美捷Biopal的Molday ION对比剂。Molday ION是一种高效的顺磁性对比剂，能够显著增强MRI信号的强度，从而提高图像质量和数据分析的准确性。在本研究中，Molday ION的使用对于清晰显示ITC中的特征偏好模式至关重要。
实验
1. 特征偏好图的构建：通过fMRI实验，研究者们成功构建了猴脑和人脑中的特征偏好图。这些图显示了ITC中不同位置对不同视觉特征的偏好程度。
2. 高维特征空间的量化分析：研究者们对特征偏好图进行了量化分析，发现猴脑中的ITC特征偏好呈现出一种复杂的拓扑组织，包括一对正交梯度，它们在空间尺度上有所不同。相比之下，人脑中的特征偏好虽然也呈现出类似的高维组织，但正交梯度的特征不如猴脑明显。
3. 新区域的发现与验证：通过分析特征偏好图，研究者们还发现了一个之前未知的功能子域，该区域对特定的视觉特征具有显著的偏好。为了验证这一发现，研究者们进行了进一步的fMRI实验和电生理记录，结果均支持了新区域的存在及其功能特性。
结论
本研究通过构建25维视觉特征空间并结合fMRI技术，对猴脑和人脑中的ITC特征偏好进行了系统的测量与分析。研究发现，猴脑中的ITC特征偏好呈现出一种复杂而有序的高维拓扑组织，而人脑中的特征偏好虽然相似但略有不同。此外，研究还揭示了一些之前未知的功能子域及其特征偏好。这些发现为理解ITC的功能组织提供了新的视角，并有助于推动神经科学和认知科学领域的发展。
Biopal Molday ION的作用与价值
在本研究中，Biopal Molday ION作为一种高效的顺磁性对比剂，对于提高fMRI图像的质量和数据分析的准确性发挥了关键作用。通过增强MRI信号的强度，Molday ION使得研究者们能够更清晰地观察到ITC中的特征偏好模式，从而提高了研究的可靠性和准确性。此外，Molday ION的使用还有助于减少扫描时间并降低噪声干扰，进一步提高了研究的效率和精度。
总之，Biopal Molday ION在神经影像研究中的应用为研究者们提供了更强大的工具来探索大脑的奥秘。通过揭示ITC中复杂的特征偏好模式及其拓扑组织，本研究不仅增进了我们对灵长类动物视觉系统的理解，还为神经科学和认知科学领域的研究提供了新的思路和方向。
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Wieslab替代途径活性检测试剂盒，安全性及耐受性良好
补体系统的失调在IgA肾病的发病和进展中起着关键作用。特别是替代途径的激活，导致肾脏炎症和肾小球损伤。超过90%的IgAN患者肾脏活检中可见系膜区C3沉积，以及IgA1免疫复合物的沉积。此外，关键补体调节因子如FH、FHR1、FHR5、FB和properdin在IgAN患者中的循环水平也升高，且与疾病严重程度相关。这些发现强烈提示补体替代途径在IgAN病理生理机制中的核心作用，因此，针对替代途径的治疗策略具有巨大潜力。
iptacopan as an alternative complement pathway inhibitor for IgA nephropathy”旨在评估iptacopan与安慰剂相比的剂量-反应关系、安全性及耐受性。研究分为两部分：第一部分旨在基于预设标准建立初步的概念验证，反映初始剂量-反应效应的存在；第二部分基于第一部分数据监测委员会的建议进行，以提供剂量-反应关系的确认性信息。
在研究期间，共筛选了261例患者，其中46例和66例患者分别被随机分配至第一部分和第二部分。基线特征在各治疗组间基本平衡，但200mg iptacopan组的基线UPCR和eGFR均值较低。
主要疗效结果显示，与安慰剂相比，iptacopan在降低UPCR方面表现出显著的剂量-反应效应。特别是在200mg剂量下，治疗3个月后UPCR较基线降低了23%（80%置信区间：8%-34%），且这一效应在6个月时持续存在，UPCR进一步降低至0.8g/g。此外，iptacopan治疗还显著降低了血浆Bb水平、尿sC5b-9水平和血清Wieslab替代途径活性检测值，表明iptacopan有效抑制了替代途径的激活。
安全性结果显示，iptacopan的耐受性良好，与安慰剂组相比，不良事件（AE）的发生率无显著差异。大多数AE为轻至中度，且未观察到与治疗相关的严重AE或死亡事件。
在实验中，用Svar Life Science公司的Wieslab替代途径活性检测试剂盒（货号COMPLAP330RUO, WIESLAB Complement Alternative Pathway Assay kit）用于测量血清中经体外激活后的替代途径活性，以半定量方式评估iptacopan对替代途径的抑制作用。结果显示，iptacopan以剂量依赖性方式有效抑制了替代途径的激活，且在200mg剂量下观察到近乎完全的抑制效应。这一发现进一步支持了iptacopan通过抑制替代途径减少IgAN患者蛋白尿的治疗机制。
艾美捷Wieslab替代途径活性检测试剂盒：
货号：COMPLAP330RUO
名称：WIESLAB Complement Alternative Pathway Assay kit/补体替代途径功能分析检测试剂盒
说明：Wieslab补体系统替代途径试剂盒是一种酶免疫分析法，用于定性测定人血清中功能性替代补体途径
原理：在Wieslab补体系统替代途径试剂盒中，微孔板条的孔被特定的替代途径激活剂包被。待测血清被稀释在含有特定阻断剂的稀释液中，以确保只有替代途径被激活。在稀释的待测血清在孔中孵育期间，补体通过特定包被被激活。然后孔被洗涤，使用特定的碱性磷酸酶标记的抗体检测C5b-9，该抗体针对在MAC形成期间表达的新抗原。经过进一步的洗涤步骤后，通过与碱性磷酸酶底物溶液孵育获得特定抗体的检测。补体激活的程度与颜色强度相关，以吸光度（光密度（OD））来衡量。
体外激活后，血清中的Wieslab试验(货号COMPLAP330RUO, WIESLAB Complement Alternative Pathway Assay kit)评估了功能性替代补体途径活性，结果显示iptacopan对替代补体途径的抑制呈剂量依赖性，从第8天开始出现最大抑制，在200 mg组中观察到对体外触发的替代补体途径的近乎完全抑制。
在本研究中，Svar Life Science的Wieslab替代途径活性检测试剂盒发挥了关键作用。该试剂盒通过测量血清中经体外激活后的替代途径活性，为评估iptacopan对替代途径的抑制作用提供了客观、可量化的指标。作为Svar Life Science的中国区代理商，艾美捷可提供补体替代途径分析检测试剂盒。
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文献丨Hypoxyprobe Omni Kit试剂盒的实验探讨方案
在癌症研究中，非侵入性功能成像已成为评估肿瘤发展和治疗效果的重要工具。肿瘤缺氧与肿瘤的侵袭性和预后密切相关，是监测癌症进展的关键参数之一。近年来，光声（Photoacoustic, PA）成像技术因其能够结合高频率超声（Ultrasound, US）实现解剖学和功能性信息的并行收集，逐渐在临床前研究中展现出应用潜力。光声成像通过激光脉冲激发分子产生热弹性波，这些波可以被超声接收器检测，从而实现对深层组织内光吸收分子的高分辨率成像。
艾美捷Hypoxyprobe Omni Kit试剂盒（HP3）的应用：
在实验中，为了可视化缺氧区域，研究团队使用了Hypoxyprobe?-1 Omni试剂盒（Hypoxyprobe Inc.生产，货号：HP3）。该试剂盒包含Pimonidazole HCl和亲和纯化的兔抗Pimonidazole抗体（PAb2627AP）。Pimonidazole是一种乏氧细胞标记物，能够在缺氧条件下与细胞内蛋白质结合，形成稳定的加合物。通过腹腔注射Pimonidazole后，可以使用PAb2627AP抗体进行免疫组化染色，从而可视化组织中的缺氧区域。
解析文章《Real-Time Assessment of Tissue Hypoxia In Vivo with Combined Photoacoustics and High-Frequency Ultrasound》
作者：
Marco Gerling 1* , Ying Zhao 2,3* , Salvatore Nania 3 , K. Jessica Norberg 3 , Caroline S. Verbeke 4 , Benjamin Englert 1 , Raoul V. Kuiper 6 , ?sa Bergstr?m 1 , Moustapha Hassan 5 , Albrecht Neesse 7 , J. Matthias L?hr 1,3 , Rainer L. Heuchel 1,3 *
具体实验步骤：
肿瘤模型建立：研究团队使用了小鼠胰腺癌（KPC细胞系）和结肠癌（通过AOM和DSS诱导）模型。
成像与数据采集：使用VisualSonics Vevo 2100 LAZR成像系统对小鼠进行PA和B模式US成像。在PA成像中，采用750 nm和850 nm的双波长激光脉冲，测量氧合血红蛋白（HbO?）和脱氧血红蛋白（Hb）的浓度，进而计算组织氧饱和度（sO?）。在成像前，通过腹腔注射Pimonidazole，随后在成像后进行免疫组化分析，以验证PA成像结果的准确性。
免疫组化分析：切除肿瘤组织，用4%甲醛固定过夜，并进行石蜡包埋切片。
使用PAb2627AP抗体进行免疫组化染色，检测Pimonidazole与缺氧细胞内蛋白质的加合物。使用ImageJ软件量化棕色染色强度，以评估缺氧程度。
实验结果：
实时光声成像检测小鼠器官氧合度变化
通过改变小鼠的氧气供应，研究团队证明了PA系统能够实时检测组织氧合度的变化。当氧气供应从医用空气（21% O?）增加到纯氧（100% O?）时，PA成像显示肝脏实质和胃壁的氧合度均有所增加，且肝脏实质的氧合度增加更为迅速和显著。当氧气供应恢复到医用空气时，氧合度也随之恢复正常。
肿瘤缺氧检测及与组织学评估的相关性
在胰腺癌和结肠癌模型中，PA成像能够准确识别缺氧区域，并与免疫组化染色结果高度一致。例如，在胰腺癌模型中，PA成像能够清晰显示肿瘤内的缺氧区域，而免疫组化染色也证实了这些区域的缺氧状态。通过线性回归分析，研究团队发现PA测量的氧饱和度与Pimonidazole染色强度之间存在显著的正相关关系（r=0.91, p=0.0028）。
光声成像与静脉造影的互补性
为了评估肿瘤灌注情况，研究团队在PA成像的基础上结合了静脉造影。通过静脉注射微泡造影剂，并实时跟踪其在肿瘤内的分布和清除情况，研究团队能够同时获取肿瘤的氧合度、灌注情况和解剖结构信息。这种双模态成像方法为纵向实时监测肿瘤血管生成和治疗反应提供了有力的工具。
胰腺皮下肿瘤异种移植物肿瘤缺氧的评价。A)缺氧s.c肿瘤的典型氧-血红蛋白PA图像。b模式图像（左图）和氧饱和度图（氧- hemo PA成像，右图）并排放置，显示相同的成像窗口。热图表示氧饱和度水平，范围从100%（红色）到0%（深蓝色）。低于总Hb定义阈值（最大强度的20%）的斑点为黑色（见方法）。黄线代表肿瘤区域。B)同一s.c.肿瘤的代表性缺氧染色（棕色）。黑线表示肿瘤区域。C)图2A所示缺氧s.c肿瘤的代表性H&E染色。D)非缺氧性s.c肿瘤的典型氧血红蛋白图像。b模式图像和氧饱和度图
（氧合血红光声图像放置在右侧显示相同的成像窗口）。热图如上所示。黄线代表肿瘤区域。E)非缺氧s.c肿瘤的代表性吡莫硝唑染色，因此缺乏棕色染色，如图2D所示。黑线表示肿瘤区域。F)具有代表性的非缺氧性sc肿瘤的H&E染色。G)基于pa的so2测量和相应的吡硝唑染色强度线性回归分析的图形表示。将吡莫硝唑强度归一化，将数据集中的最高值调整为100，将最低强度设置为0。95%置信区间的置信带如图（虚线）所示。
结论：
本研究表明，双波长PA成像技术能够实时、可靠地检测小鼠肿瘤模型中的缺氧区域，并与免疫组化结果高度一致。通过结合B模式US和静脉造影技术，该方法还能够提供关于肿瘤灌注和解剖结构的详细信息。因此，双模态PA/US成像技术在临床前癌症研究中具有广泛的应用前景，可用于实时监测肿瘤生长和治疗反应。
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MITO-ID MITO-ID膜电位检测试剂盒文献分析--研究方法及结果讨论
背景：
口腔鳞状细胞癌（OSCC）是非常常见的口腔癌类型，占所有口腔癌的90%以上。在2020年，全球估计有430,000例新的OSCC诊断和约200,000例相关死亡。尽管手术和辅助放疗化疗有所改进，OSCC的预后仍然较差，中位生存时间为37.6个月，5年生存率为64.4%。OSCC的不良预后包括局部侵袭、转移和复发。目前对OSCC复发机制的理解不足，缺乏有效的预后预测因子。肿瘤复发是癌症治疗失败的主要原因，因此理解肿瘤复发的机制对于提高治疗效果至关重要。系统方法，包括基因组学，是开发更有效的癌症预后和预测因子的关键。氧化磷酸化（OXPHOS）是一种代谢途径，它在癌细胞的能量代谢中起作用。早期研究表明，与正常细胞相比，癌细胞的糖酵解增加。然而，近期的研究表明，在某些癌症中，包括乳腺癌、肺癌和急性髓系白血病（AML），OXPHOS增加，且OXPHOS是癌症干细胞（CSCs）的首选能量产生过程。针对OXPHOS的治疗可能抑制癌症的恶性行为，因此，本研究旨在开发和验证一个新颖且强大的基因签名，以预测OSCC的预后，并揭示导致治疗失败的恶性和进展机制，以识别OSCC的治疗策略。
文献标题：Gene signature predicting recurrence in oral squamous cell carcinoma is characterized by increased oxidative phosphorylation
DOI:10.1002/1878-0261.13328
研究内容：
本研究的核心内容是开发和验证用于预测口腔鳞状细胞癌（OSCC）患者预后的基因签名，并探索与OSCC复发相关的生物学机制。研究团队通过Cox回归分析识别出一个与OSCC复发相关的基因签名（ORGS），并通过功能富集分析揭示了ORGS背后的生物学途径和过程。特别地，研究发现氧化磷酸化（OXPHOS）信号通路与ORGS相关，并且与OSCC患者的总体生存率差有强烈的关联。此外，研究还发现中介体复合物亚单位30（MED30）是OXPHOS的上游调控因子，其敲低可以减少组蛋白乙酰化，影响OXPHOS基因的表达，进而影响OSCC的预后。
研究方法：
1. 数据收集：研究者从TCGA数据库下载了OSCC患者的基因表达数据和临床信息，包括20530个基因表达数据和520个HNSCC患者的临床信息。
2. 基因签名开发：使用Cox比例风险模型，研究者确定了210个基因作为OSCC复发相关的基因签名（ORGS），其中包括123个高风险基因和87个低风险基因。
3. 功能富集分析：通过基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，研究者分析了ORGS相关的功能和途径。
4. 独立队列验证：研究者在两个独立的数据集（FHCRC和KHU）中验证了基因表达签名，使用支持向量机（SVM）算法来分类患者。
5. 上游调控因子分析：使用INGENUITY PATHWAY ANALYSIS（IPA）软件，研究者进行了上游调控因子分析，以识别OXPHOS基因的上游调控因子。
6. 细胞培养和转染：研究者对人类OSCC细胞系HSC3和HSC4进行培养，并进行了siRNA转染以沉默MED30基因。
7. 分子生物学实验：包括实时定量PCR（qRT-PCR）、西方印迹分析（Western blotting）、线粒体膜电位（MMP）检测、活性氧（ROS）生成检测和凋亡分析等实验，以探究MED30对OXPHOS基因表达和OSCC细胞功能的影响。
结果讨论：
ORGS成功将OSCC患者分为低风险和高风险两组，两组的总体生存率有显著差异，通路分析显示OXPHOS与ORGS在OSCC中相关，且高OXPHOS状态与OSCC患者预后差强相关。MED30作为OXPHOS的预测上游调控因子，其敲低可以减少组蛋白乙酰化；ORGS与OXPHOS调节过程强烈相关，表明OXPHOS是导致OSCC预后不良的关键机制。研究还发现MED30敲低会增加ROS生成并诱导凋亡，暗示MED30敲低可能通过ROS生成诱导凋亡。综上所述，这项研究不仅开发了一个新的基因签名ORGS来预测OSCC的复发，还揭示了OXPHOS和MED30在OSCC中的重要作用，为OSCC的治疗提供了新的靶点。
艾美捷 Enzo的MITO-ID MITO-ID膜电位检测试剂盒Membrane potential detection kit（货号：ENZ-51018）使用简单的混合读取，无清洗协议监测能量状态。它包括一个双发射阳离子染料来测量活细胞中的线粒体膜电位（MMP）。亮点包括：
灵敏度比JC-1 （Invitrogen）高10倍，水溶性好；
活细胞的真正混合-读取均质试验；
优化了荧光显微镜，流式细胞术，微孔板阅读器，和高应用程序吞吐量；
在文献中，MITO-ID Membrane Potential Detection Kit?的主要应用是检测活细胞中的线粒体膜电位（Mitochondrial Membrane Potential, MMP）。以下是其具体应用的详细描述：
1．线粒体膜电位的测定：MITO-ID Membrane Potential Detection Kit包含一种双发射阳离子染料，用于测定活细胞中的线粒体膜电位（MMP）。在有能量或活跃的细胞中，MITO-ID? 膜电位试剂因其相对负电荷而在线粒体中迅速聚集成发橙色荧光的聚合体，而在细胞质中则以发绿色荧光的单体存在。
2．细胞健康和凋亡的评估：线粒体膜电位的丧失通常与细胞凋亡的早期阶段有关。因此，MITO-ID?试剂盒可以作为评估细胞健康程度、线粒体膜通透性和细胞凋亡的一个重要工具。
3．药物诱导毒性和细胞凋亡研究：评估线粒体功能状态的基于细胞的检测方法正在成为阐明线粒体活动在药物诱导毒性、细胞凋亡级联以及其他细胞和生化过程中的作用的有用工具。
4．荧光显微镜和流式细胞术的应用：MITO-ID Membrane Potential Detection Kit优化了用于荧光显微镜和流式细胞术的线粒体膜电位（MMP）和细胞活性的测量。在荧光显微镜下，MITO-ID?膜电位染料是双发射探针，在细胞质中发出绿色荧光，在线粒体中发出橙色荧光。当添加像CCCP这样的扰动药物时，染料主要以绿色荧光单体存在于细胞质中，在线粒体中不再表现出橙色荧光。
5．高通量应用：该试剂盒适合于高通量应用，包括化学/环境毒性筛选，无需洗涤步骤，是一个真正的混合即读均质测定法，适用于活细胞。
综上所述，MITO-ID Membrane Potential Detection Kit在文献中主要应用于测定活细胞中的线粒体膜电位，评估细胞健康和凋亡，以及在药物毒性和细胞凋亡研究中的应。
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免疫级牛源II， IX 和 XI 型胶原蛋白实验方法说明
自主神经系统（Autonomic Nervous System, ANS）与免疫系统之间存在着密切的联系。ANS通过神经纤维直接支配淋巴器官，包括脾脏，从而提供了中枢神经系统（CNS）与免疫系统之间的桥梁。在脾脏中，已知的唯一神经抑制炎症的机制依赖于由脾脏去甲肾上腺素能纤维产生的去甲肾上腺素，这种去甲肾上腺素与CD4+ T细胞上的β2肾上腺素能受体（β2-ARs）结合，进而触发乙酰胆碱的释放。乙酰胆碱随后通过与髓样细胞上的α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAChRs）结合，抑制炎症细胞因子的分泌。尽管迷走神经抗炎通路在啮齿类动物中得到了广泛研究，但尚不清楚是否还存在其他神经通路。
“Apical splenic nerve electrical stimulation discloses an anti-inflammatory pathway relying on adrenergic and nicotinic receptors in myeloid cells”旨在探讨脾脏神经在调节炎症中的作用，并确定是否存在除迷走神经抗炎通路之外的其他神经通路。特别地，研究关注于脾脏神经的解剖和功能特性，以及电刺激这些神经对炎症的影响。
实验方法：
1. 动物模型与分组：实验使用了多种小鼠品系，包括C57BL/6、DBA、Foxn1-/-（T细胞缺陷）、Rag1-/-（T和B细胞缺陷）、LysM-Cre:Adrb2fl/fl（髓系细胞β2-ARs敲除）、LysM-Cre:Chrna7fl/fl（髓系细胞α7nAChRs敲除）等。实验分为多个组别，包括假手术组（SHAM）、不同神经刺激组（如迷走神经刺激、动脉脾神经刺激、顶端脾神经刺激）以及不同基因敲除小鼠组。
2. 神经刺激与参数：使用特制的电极对小鼠的迷走神经、动脉脾神经或顶端脾神经进行电刺激。刺激参数为矩形双相脉冲，脉冲幅度为650 ?A，脉冲宽度为100 ?s，频率为10 Hz，持续时间为2分钟。
3. 生理指标监测：在麻醉小鼠中监测颈动脉血压和心率，以评估神经刺激对心血管系统的影响。
4. 炎症模型与评估：使用脂多糖（LPS）诱导小鼠内毒素血症模型，通过检测血清中肿瘤坏死因子（TNF）水平评估炎症反应。此外，还使用了chondrexII型胶原（ 货号20022）和与弗氏完全佐剂（货号:7009， 完全弗氏佐剂，2mg/ml）混合后免疫DBA小鼠，成功诱导了关节炎，通过临床评分、组织病理学分析等方法评估关节炎的严重程度。
如上图：DBA小鼠在第0天用II型胶原蛋白进行免疫接种，并将电极植入第11天脾脏顶部的脾神经。在第21天，用II型胶原蛋白对小鼠进行加强免疫在35天内每2-3天监测一次临床症状。数据显示关节炎小鼠的百分比（a），平均临床评分（b）和平均厚度后爪（c）。
实验结果：
1. 神经解剖与功能分析：通过免疫组织化学和激光共聚焦显微镜观察，发现小鼠脾脏有三条神经分支：两条与动脉相关，包含儿茶酚胺能纤维；另一条位于脾脏顶端，同时包含儿茶酚胺能纤维和胆碱能纤维。电刺激顶端神经而非动脉神经能显著增加脾脏中ACh的含量，且这种增加不依赖于T细胞。
2. 神经刺激对炎症的抑制作用：电刺激迷走神经、动脉脾神经或顶端脾神经均能抑制LPS诱导的TNF产生，但机制不同。迷走神经和动脉脾神经刺激依赖于T细胞，而顶端脾神经刺激不依赖于T细胞，且其抑制作用可被β2-ARs和α7nAChRs的拮抗剂所阻断，表明顶端脾神经刺激通过平行作用于髓系细胞上的β2-ARs和α7nAChRs来抑制炎症。
3. 顶端脾神经刺激对CIA的抑制作用：在CIA小鼠中，电刺激顶端脾神经显著延迟了关节炎的发病时间，减轻了疾病严重程度，减少了关节肿胀和骨侵蚀，并降低了脾脏中炎症性单核细胞的数量。这些结果表明，顶端脾神经刺激可能通过抑制全身炎症反应来减轻关节炎症状。
在本研究中，Chondrex的牛II型胶原被用于建立胶原诱导的关节炎（CIA）模型。该模型是关节炎研究中的经典模型之一，能够模拟关节炎的病理特征和临床表现。牛II型胶原作为CIA模型的诱导剂，通过与弗氏完全佐剂混合后注射到小鼠体内，成功诱导了关节炎的发生和发展。
艾美捷免疫级牛源II， IX 和 XI 型胶原蛋白（免疫接种级别）：
20011 Immunization Grade Chick Type II Collagen, 10 mg, lyophilized
20012 Immunization Grade Chick Type II Collagen, 2 mg/ml x 5 ml
20021 Immunization Grade Bovine Type II Collagen, 10 mg, lyophilized
20022 Immunization Grade Bovine Type II Collagen, 2 mg/ml x 5ml
20031 Immunization Grade Porcine Type II Collagen, 10 mg, lyophilized
20032 Immunization Grade Porcine Type II Collagen, 2 mg/ml x 5ml
20041 Immunization Grade Rat Type II Collagen, 5 mg, lyophilized
20042 Immunization Grade Rat Type II Collagen, 2 mg/ml x 2.5 ml
20051 Immunization Grade Human Type II Collagen, 1 mg, lyophilized
20052 Immunization Grade Human Type II Collagen, 2 mg/ml x 0.5 ml
20061 Immunization Grade Mouse Type II Collagen, 1 mg, lyophilized
20062 Immunization Grade Mouse Type II Collagen, 2 mg/ml x 0.5 ml
20071 Imunization Grade Goat Type II Collagen, 5 mg, lyophilized
1071 Immunization Grade Chick Type IX Collagen, 5 mg, lyophilized
1072 Immunization Grade Bovine Type IX Collagen, 5 mg, lyophilized
1073 Immunization Grade Porcine Type IX Collagen, 5 mg, lyophilized
1081 Immunization Grade Chick Type XI Collagen, 5 mg, lyophilized
1082 Immunization Grade Bovine Type XI Collagen, 5 mg, lyophilized
1083 Immunization Grade Porcine Type XI Collagen, 5 mg, lyophilized
1085 Immunization Grade Human Type XI Collagen, 1 mg, lyophilized
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TopoGEN人拓扑异构酶IIIβ多克隆抗体，纯度大于95%
针对人拓扑异构酶IIIβ羧基末端区域的寡肽混合物，制备了一种兔多克隆抗体。通过HPLC和质谱分析确定，肽段的纯度大于95%。大约10毫克纯化肽（通过末端半胱氨酸硫醇）使用异双官能团交联剂MBS与KLH偶联，肽与KLH的比例为1:1。通过ELISA确定的抗体滴度大于1:10000。这种抗体适用于西方印迹应用，但尚未测试其他应用。特定检测所需的抗体稀释度应针对研究者特定系统（例如使用的细胞系）进行优化。
艾美捷TopoGEN人拓扑异构酶IIIβ多克隆抗体：
编号：TG2010-4
分类：拓扑抗体，拓扑III抗体
标签：人类拓扑3，人类拓扑3抗体，多克隆抗体
多克隆抗体单位定义：
抗体浓度以西方印迹单位表示；一个单位对应于1:1000稀释的抗体，需要制作1毫升稀释探针进行常规西方印迹。因此，10个单位的抗体将制作10毫升的稀释探针。
抗体瓶内容物：
编号TG2010-4含有250单位的兔抗体（作为血清），浓度为2.5单位/微升（总体积100微升）。
该抗体在室温下短时间内（24小时）稳定，但应储存在-20°C下以保证长期稳定性。抗体在常温下运输。
材料安全数据：
此产品未获得许可或批准用于人类或实验动物以外的动物的给药。
该产品仅作为研究用途的抗体出售。处理此产品时应采用安全的实验室操作。未对该产品进行化学、物理和毒理学分析。
人拓扑异构酶IIIβ多克隆抗体相关产品：
Polyclonalto HumanTopoisomerasel(serum)
Monoclonal Antibody toHumanTopoisomerase l
Polyclonal Antibody to HumanTopoiosomerasel(Scleroderma PatientSerum)
艾美捷科技是TopoGEN的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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TopoGEN松弛的pHOT-1质粒DNA底物，测定DNA旋转酶超螺旋活性
松弛pHOT-1是一种适用于测定DNA旋转酶超螺旋活性的DNA质粒。它也可用于测定DNA连接数的变化，以评估插层。使用高纯度topo I弛豫反应制备质粒，然后对弛豫产物进行灭活和再纯化。TopoGEN随后验证每批的松弛状态，并验证底物可以被大肠杆菌DNA旋转酶和金黄色葡萄球菌DNA旋转酶超螺旋化。
这种质粒非常适合检测任何拓扑异构酶。pHOT-1相对较小（<3KB），非常适合展示中间态拓扑异构体。由于所有拓扑异构酶都表现出简并的DNA结合和切割序列，pHOT-1将有效地支持广泛的拓扑异构酶活性。超螺旋pHOT-1是pBR322的缩小衍生物，优化以获得更高的产量。对于希望评估人类拓扑异构酶I在单一序列上的切割的研究者，它还有一个额外的特性：我们包含了人类拓扑异构酶I的首选结合位点（由Westergaard及其同事描述的十六核苷酸序列，见Bonven等人，1985年），该序列源自四膜虫核糖体基因重复序列。这个构建作为拓扑异构酶I切割底物非常有用，因为在没有喜树碱的情况下，酶在十六核苷酸位点有效切割。这允许研究者严格评估新的潜在拓扑异构酶I抑制剂，因为单一背景切割是内置的对照；如果该剂刺激在包含十六核苷酸位点的片段的这个和/或任何其他序列的切割，明显的切割很容易被揭示出来。通常，很难在DNA上捕获拓扑异构酶I切割；必须使用更多的酶，因为切割复合物会消耗酶的化学计量。由于这个原因，分析DNA切割需要更高水平的酶。该片段可以从多克隆位点使用下面显示的位点分离出来（Maniatis克隆书中的协议），末端标记并用作切割底物。
艾美捷TopoGEN松弛的pHOT-1质粒DNA底物：
编号：TG2035
分类：DNA底物
标签：dna底物，pHOT1，松弛DNA底物，松弛pHOT1
存储缓冲液：所有DNA都存储在TE缓冲液（10 mM Tris-Cl（pH 7.5），1 MM EDTA）中，浓度如上右上角指定。
存储和运输条件：这些DNA应存储在4°C下。DNA在常温下运输（或可能与酶运输一起在干冰上运输）。
质量控制分析：
•使用A260/A280比率法光谱测定纯度。在最适Gyrase活性条件下孵育，未导致任何可检测的DNA转化为缺口或线性DNA形式。
•对于超螺旋和松弛的DNA底物，超过85%的DNA将呈超螺旋（形式I）DNA，其余为缺口开放环状（形式II）DNA。没有可检测的线性DNA形式。
松弛的pHOT-1质粒DNA底物相关产品：
KinetoplastDNA(kDNA)
Supercoiled pHOT-1Plasmid DNA Substrate
Decatenated kDNA
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