Anti-RBPMS抗体丨PhosphoSolutions/Anti-RBPMS抗体方案
PhosphoSolutions专注于生产用于检测磷酸化蛋白的高特异性抗体,由Michael D.Browning博士、John W.Haycock博士和Andrew J.Czernik博士于2001年创立。自2001年成立以来,PhosphoSolutions一直在生产和验证他们的抗体,致力于提供优质的神经科学和癌症研究抗体,特别是高特异性磷酸化抗体。PhosphoSolutions的所有抗体都具有高特异性和可重复性。
RBPMS(具有多重剪接的RNA结合蛋白),也称为HERME。RBPMS以多种选择性剪接的异构体存在,被认为与RNA结合,可能在RNA相关事件中发挥作用,如转录和翻译。视网膜神经节细胞(RGCs)特异性的RNA结合蛋白先前已被鉴定为RGCs的优秀标志物(Kwong et al., 2010)。最近的研究结果表明,针对RBPMS的抗体是鉴定多种哺乳动物物种中RGC的特异检测工具(Rodriguez et al. 2014)。
艾美捷Anti-RBPMS抗体:
货号:1830-RBPMS
反应种属:Feline, Guinea Pig, Human, Mouse, Non-Human Primate, Pig, Rabbit, Rat, Tree Shrew, Whale, Zebrafish
应用:ICC, IHC, WB
引用文献:94篇
Anti-RBPMS抗体文献参考:
Su, J., Byer, L., Liang, Y. and Fox, M.A. (2024). Distribution, development, and identity of retinal ganglion cells labeled in the Sert-Cre reporter mouse. The Journal of
Comparative Neurology, [online] 532(3), p.e25606. (IHC, 1:500, mouse)
Guo, C., Deshpande, M., Niu, Y., Kachwala, I., Flores-Bellver, M., Megarity, H., Nuse, T., Babapoor-Farrokhran, S., Ramada, M., Sanchez, J., Inamdar, N., Johnson, T.V.,
Canto-Soler, M.V., Montaner, S. and Sodhi, A. (2023). HIF-1α accumulation in response to transient hypoglycemia may worsen diabetic eye disease. Cell Reports,
[online] 42(1), p.111976. (IHC, human)
Wang, A.Y.M., Kulkarni, M.M., McLaughlin, A.J., Gayet, J., Smith, B.E., Hauptschein, M., McHugh, C.F., Yao, Y.Y. and Puthussery, T. (2023). An ON-type directionselective ganglion cell in primate retina. Nature, [online] 623(7986), pp.381–386. (IHC, NHP)
Ruzafa, N., Pereiro, X. and Vecino, E. (2022). Immunohistochemical Characterisation of the Whale Retina. Frontiers in Neuroanatomy, [online] 16, p.813369. (IHC,
1:4000, Whale)
Puller, C., Duda, S., Lotfi, E., Yousef Arzhangnia, Block, C.T., Ahlers, M.T. and Greschner, M. (2020). Electrical Coupling of Heterotypic Ganglion Cells in the Mammalian
Retina. The journal of neuroscience/ The Journal of neuroscience, 40(6), pp.1302–1310. (IHC, 1:500, guinea pig)
Johnson, E.N., Westbrook, T., Shayesteh, R., Chen, E.L., Schumacher, J.W., Fitzpatrick, D. and Field, G.D. (2019). Distribution and diversity of intrinsically
photosensitive retinal ganglion cells in tree shrew. The Journal of Comparative Neurology, [online] 527(1), pp.328–344. (IHC, 1:500, tree shrew)
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TopoGEN金黄色葡萄球菌DNA旋转酶质量控制测试方案
DNA旋转酶是由金黄色葡萄球菌中的两个基因GyrA和GyrB编码的II型拓扑异构酶。DNA旋转酶是一种基本的拓扑异构酶,通过链断裂/重新连接和DNA缠绕的过程使DNA超螺旋化。作为一种II型酶,旋转酶在使松弛的质粒DNA底物负超螺旋化方面具有独特性。DNA旋转酶也是喹诺酮类抗菌剂的靶标,这些抗菌剂通过使酶转变为DNA损伤剂来发挥作用。TopoGEN提供来自革兰氏阳性细菌金黄色葡萄球菌的纯化DNA旋转酶,用于药物开发和筛选测定的各个方面。该酶在解链和超螺旋化动力DNA(kDNA)方面非常活跃,但也会使松弛的质粒DNA负超螺旋化。金黄色葡萄球菌酶是一个GyrA2GyrB2的异源四聚体,作为带有His标签的亚基纯化,重新组装成活性酶。
储存和运输条件:
该酶应储存在-20°C,并在这种浓缩状态下至少稳定6个月。酶可以在首次解冻时分装,以最小化多次冻融循环造成的损害。
单位定义:
一个单位将在37°C下,在以下描述的条件下,在30分钟内使100 ng的质粒超螺旋化。DNA旋转酶也会像所有II型酶一样解链kDNA;然而,产物将是负超螺旋化的微型kDNA。
艾美捷TopoGEN金黄色葡萄球菌DNA旋转酶(TG2000GSA)质量控制测试:
1. DNA旋转酶亚基通过公司专有方法克隆、过表达并纯化。通过CB染色在SDS-PAGE上为每个亚基检测到单一带。通过在优化I型活性的条件下测试超螺旋DNA的松弛来评估拓扑异构酶I的交叉污染。在这些条件下,与超螺旋质粒DNA孵育2小时后,未检测到松弛产物。
2. 通过测试线性kDNA和线性质粒DNA的形成来进行核酸酶污染测试。在10 mM MgCl2存在下,对1 µg的连环kDNA或超螺旋DNA进行孵育(37°C下4小时)。在这些条件下,未产生线性DNA或分解产物。
3. 根据SDS-PAGE,亚基纯度超过95%。没有另一个亚基的情况下,任一亚基都不活跃,且任一亚基都不显示核酸酶活性。这些数据表明,宿主(大肠杆菌)不对金黄色葡萄球菌gyrA或B的单个亚基的活性有所贡献。这一点通过使用特异性针对大肠杆菌的抗GyrA IgG的Western blotting探针得到了证实(数据未显示)。
测定条件:
TopoGEN提供用于测定金黄色葡萄球菌DNA旋转酶的三种缓冲液样品。缓冲液如下:
5X测定液(提供0.5 ml)包含以下溶质:
375 mM Tris-HCl(pH 7.5)
37.5 mM MgCl2
37.5 mM DTT
0.375 mg/ml BSA
150 mM KCl
10X ATP液:20 mM ATP(0.25 mL)。酶需要最终浓度为2.0 mM ATP。
5X钾谷氨酸液:2.5M(0.25 mL)。酶需要最终浓度为500 mM K-Glu。
*注:这些缓冲液提供给客户,以便为旋转酶测定建立工作对照。可能需要额外的缓冲液,建议客户按照上述配方进行补充。
所有缓冲液应储存在-20°C。
TopoGEN金黄色葡萄球菌DNA旋转酶文献参考:
1. Kato et al. (1990) Cell 63:393-404.
2. Peng, H., and Marians, K. (1999). DNA Topoisomerase Protocols Volume I; page 163
3. Wang, J. (1996) DNA Topoisomerases. Ann. Rev. Biochem 65:635-692
4. Levine et al., (1998) Biochem Biophys Acta 1400:29-43
5. Strahilevitz, J and Hooper, D. (2005) 49:1946-1956
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TopoGEN人拓扑异构酶I多克隆(血清)参数说明
使用新西兰白兔培养人拓扑异构酶I(从胎盘纯化)抗体。使用标准方法收集和处理血清。该抗体可用于蛋白质印迹。这种抗体与其他物种的交叉反应性尚未得到测试。值得注意的是,人类拓扑异构酶I会自发降解,尤其是在反复冷冻/解冻的情况下。酶的活性没有受到显著影响;然而,在蛋白质印迹实验中可以检测到亚带。
艾美捷TopoGEN人拓扑异构酶I多克隆(血清):
编号:TG2012-2
分类:拓扑抗体、拓扑I抗体
瓶装内容:提供的抗体为血清形式。
材料安全数据:
此产品未获得许可或批准用于人类或实验动物以外的动物的给药。
抗体应在蓝色冰上运输,并应储存在-20°C。
TopoGEN人拓扑异构酶I多克隆(血清)相关产品:
Monoclonal Antibody to HumanTopoisomerase l
单克隆抗体针对人类拓扑异构酶I
Polyclonal Antibody to HumanTopoiosomeraseI(SclerodermaPatient serum
多克隆抗体针对人类拓扑异构酶I(硬皮病患者血清)
Topoisomerase ll Alpha C-Terminal Peptide
拓扑异构酶II Alpha C-末端肽
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TopoGEN-Kinetoplast DNA(kDNA):拓扑异构酶II活性测定的关键生物标志物
Kinetoplast DNA(kDNA)是拓扑异构酶II测定的理想底物,因为它对II型反应机制具有特异性。研究人员甚至可以在存在大量过量拓扑异构酶I的情况下检测II型酶。因此,kDNA可以很好地量化粗细胞提取物中的II型活性,这些提取物经常被拓扑异酶I超载。kDNA与人类Top 2a和b以及原核酶,如DNA Gyrase或拓扑异异构酶IV,都表现得非常好。这种底物与我们的Topo II检测试剂盒、Topo II药物筛选试剂盒和Gyrase检测试剂盒包装在一起。
艾美捷TopoGEN-Kinetoplast DNA(kDNA):
编号:TG2013
分类:DNA底物
标签:DNA旋转酶、kDNA、kDNA底物、动力虫DNA、拓扑异构酶2
与其他DNA底物的区别:
基于超螺旋DNA松弛的粗提物中拓扑异构酶II活性的测定可能会因为部分纯化分数中存在拓扑异构酶I而变得复杂。由于Mg++的存在,污染的核酸酶活性可能会导致超螺旋底物降解或产生切口,这会引起额外的复杂性。通过使用从昆虫锥虫属克氏锥虫的动粒中制备的kDNA底物,可以避免这些问题。动粒DNA是由相互锁定的DNA小圆圈(大部分为2.5 kb)聚集而成的,形成极高分子量的大型网络。因此,这些网络无法进入琼脂糖凝胶。在与人类拓扑异构酶II alpha孵育后,该酶通过双链DNA断裂和重新连接循环,有效地释放(解链)小圆圈DNA。解链后的小圆圈由于尺寸小,会迅速进入凝胶。这种反应是II型酶特有的,不会检测到拓扑异构酶I。TopoGEN的kDNA经过认证,可与我们所有的Top2酶一起使用,但适用于人类/动物细胞系的粗提物。
对于连环kDNA底物,至少90%的DNA将保留在1%琼脂糖凝胶的孔中。
kDNA储存在10 mM Tris-Cl(pH 7.5)和1 mM EDTA中,浓度如产品说明所示。
kDNA应储存在4°C;然而,长期储存在-20°C也是可以接受的。底物通常在常温下运输。
TopoGEN-Kinetoplast DNA(kDNA)文献参考:
Ege Gok, Naz Unal, Burcin Gungor, Gulderen Karakus, Savas Kaya, Pakize Canturk and Konstantin P. Katin: Evaluation of the Anticancer and Biological Activities of Istaroxime via Ex Vivo Analyses, Molecular Docking and Conceptual Density Functional Theory Computations. Molecules 2023, 28(22), 7458;
Phillips JW, Goetz MA, Smith SK, Zink DL, Polishook J, Onishi R, Salowe S, Wiltsie J, Allocco J, Sigmund J, Dorso K, Lee S, Skwish S, de la Cruz M, Martin J, Vicente F, Genilloud O, Lu J, Painter RE, Young K, Overbye K, Donald RGK, Singh SB: Discovery of Kibdelomycin, A Potent New Class of Bacterial Type II Topoisomerase Inhibitor by Chemical-Genetic Profiling in Staphylococcus aureus. Cell Chemistry and Biology 2011, 18: 955-965. doi: 10.1016/j.chembiol.2011.06.011.
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TopoGEN-线性kDNA,II型酶的理想底物
由于部分纯化的组分中存在拓扑异构酶I,基于超螺旋DNA弛豫的使用粗提取物进行拓扑异肽酶II活性的测定可能会很复杂。污染核酸酶活性(由于Mg++)会降解或划伤超螺旋底物,从而产生额外的并发症。这些问题可以通过使用由昆虫Crithidia fasiculata锥虫动质体制备的链状DNA底物来避免。KDNA是互锁的DNA微环(大多为2.5kb)的集合,形成了高分子量的超大网络。因此,这些网络无法进入琼脂糖凝胶。当与拓扑异构酶II一起孵育时,它会使DNA参与双链断裂和重组循环,从而有效地释放(脱链)微环DNA。由于尺寸小,脱链的微环迅速进入凝胶。拓扑异构酶I不会发生这种反应。TopoGEN修改了Miller等人描述的原始凝胶系统,以允许使用kDNA对活性进行额外区分。
艾美捷TopoGEN-线性kDNA:
编号:TG2018-1
分类:DNA底物
标签:kDNA标记,线性kDNA,线性kDNA标记
kDNA是II型酶的理想底物,无论是原核生物还是真核生物。它对于断裂和重新连接DNA双链的拓扑异构酶具有高度特异性;这定义了II型(双链DNA)的作用机制。确保kDNA纯净、纯化至已知浓度、无核酸酶且验证可与top2酶一起工作至关重要。
线性kDNA质量控制测试:
对于连环kDNA底物,至少90%的DNA将保留在1%琼脂糖凝胶的孔中。
每批kDNA的解链都经过纯化的拓扑异构酶II测试。
该标记在常温下运输,应储存在4°C。
TopoGEN-线性kDNA文献参考:
Miller et al., J. Biol. Chem. 256:9334-9339 (1981)
Muller et al., Biochem. 27:8369-8379, 1988
Muller et al., Nuc. Acid. Res. 17:9499, 1989
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TopoGEN-脱乙酰kDNA:动力虫线粒体DNA的生物活性研究
由于存在污染的拓扑异构酶I,使用依赖于超螺旋DNA弛豫的Top2(人类和细菌)粗提取物的检测可能会变得复杂。污染的核酸酶活性(由于Mg++)会降解或划伤超螺旋底物,从而产生其他复杂情况。这些问题可以通过使用由昆虫Crithidia fasiculata锥虫动质体制备的链状kDNA底物来避免。KDNA是互锁的DNA微环(大多为2.5kb)的集合,形成了高分子量的超大网络。因此,这些网络无法进入琼脂糖凝胶。与Top2(Top2a、Gyrase或TopIV)一起孵育后,微环DNA被有效释放(并脱辅),Top2使DNA参与双链断裂和重组循环。由于尺寸小,脱链的微环迅速进入凝胶。拓扑异构酶I不会发生这种反应。TopoGEN修改了原始凝胶系统,允许使用kDNA对活性进行额外区分。反应产物可以如图所示变化。我们提供标记kDNA,如图所示,以清楚地鉴定反应产物,在这种情况下是脱链的kDNA形式。
艾美捷TopoGEN-脱乙酰kDNA:
编号:TG2020-1
分类:DNA底物
标签:解链kDNA、解链kDNA标记、kDNA标记、拓扑异构酶2测定
解链kDNA质量控制测试:
对于连环kDNA底物,至少90%的DNA将保留在1%琼脂糖凝胶的孔中。
每批kDNA的解链都经过纯化的拓扑异构酶II测试。
该标记在常温下运输,应储存在4°C。
脱乙酰kDNA文献参考:
Miller et al., J. Biol. Chem. 256:9334-9339 (1981)
Muller et al., Biochem. 27:8369-8379, 1988
Muller et al., Nuc. Acid. Res. 17:9499, 1989
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TopoGEN-高灵敏度人TDP-2检测试剂盒,快速定量分析
Tyrosyl-DNA磷酸二酯酶-2(TDP2)的功能是通过在DNA断裂部位加工5′-阻断蛋白(topo II)来去除被捕获的拓扑异构酶II/DNA复合物(图1)。就生理相关性而言,TDP2似乎具有多种作用,远远超出了II型拓扑异构酶损伤的修复和随后的DNA修复。这与Top1/DNA修复蛋白TDP1有很大不同。TDP1和2之间也存在许多机制差异(见Pommier的评论,PMID 24856239)。在人类中,TDP2应被视为一种多功能酶,在TNF和MAPK/JNK/p38通路中发挥作用。与APE1和Mg++/Mn++依赖性磷酸二酯酶超家族有一些相似之处,有证据表明,皮核糖核酸病毒将TDP2作为VPg非连接酶功能。鉴于拓扑异构酶II在抗癌治疗中的关键作用,抑制TDP2的药物可能被证明可用于与阿霉素和依托泊苷(VP16)等已建立的界面毒物(IFP)的联合治疗。由于这种想法,已经有了一些TDP2候选抑制剂。TDP2特异性识别5'-磷酸酪氨酸键,合成底物可用于HTS和药物发现(例如,4-硝基苯基膦酸乙酯或放射性标记的寡核苷酸)。虽然这些合成或半合成底物可用于高通量筛选,但抑制剂需要在真正的Top2/DNA共价加合物上进行测试和验证。因此,TopoGEN开发了一种真正的Top2/DNA底物。
TopoGEN提供捕获的、未经处理的Top2/kDNA共价复合物,可以有效地用作TDP2底物(检测大纲见图2)。由于存在共价结合的蛋白质,除非添加蛋白酶K(降解并释放大部分变性Top2a)或TDP2反应释放被捕获的蛋白质,否则无法检测到线性CC复合物(图2,左泳道)。
艾美捷TopoGEN-人TDP-2检测试剂盒:
编号:TG1005
分类:TPD2
标签:人类Tdp2测定,Tdp2,酪氨酸DNA磷酸二酯酶2
人类TDP2测定试剂盒包含了在易制备的1%琼脂糖凝胶中定量TDP2活性所需的试剂。由于kDNA是一个如此大的底物,凝胶可以快速运行(在100-250伏下不到10分钟),从而提高通量。试剂盒中包含标记物,以便明确解读结果。通过使用如ImageJ之类的共享软件扫描凝胶,结果可以轻松量化。
试剂盒可以在常温下运输或在冰上(干冰或湿冰)运输。收到后,DNA应储存在4°C,缓冲液储存在-20°C。避免频繁的冻融循环,因为这可能导致DNA断裂。
艾美捷科技是TopoGEN的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/TopoGEN.shtml
揭秘:你购买的胶原酶是否为正品?
在生物试剂领域,假货问题一直是生命科学从业者心中的痛。因为一旦买到假货,会导致以下后果::
实验反复失败,
浪费珍贵标本。
耽误宝贵时间,
造成经费损失。
潜在学术造假,
损害个人声誉。
近日,作为美国Worthington biochem品牌在中国区的总代理,艾美捷科技收到了一些来自不同高校的科研工作者的反馈,他们说近期低价购买的Worthington胶原酶,实验效果不佳,达不到之前用过的胶原酶的类似效果,此外,与艾美捷购买的正品胶原酶相比,他们购买的产品外包装,尤其是产品标签存在显著差异。请注意这些差异。
无独有偶,不少行业内经验很多年的经销商们,也有走眼的时候,被低价吸引,购买了假货产品,最后收到了终端用户的质疑,不光损害了客情关系,也导致了坏账的恶果。
为了维护广大科研工作者的正当权益,避免广大科研工作者继续踩雷,艾美捷代表Worthington品牌方,为中国客户分享避雷指南,共同维护科研的纯粹和神圣。
* 请注意,假货产品不仅限于上述两个货号,这里仅作为示例展示!
Worthington 避雷Tips:
1. 正品胶原酶,瓶口有塑封(白底蓝字,45°倾斜)
2. 正品瓶体标签,底色为纯白;假货通常泛黄
3. 正品字体清晰,粗细均匀;假货不一致,且上下间隙不一致(如图,Size与下方横线接触)
4. 国内仿冒产品的制造工艺也日益精湛,需要我们更加警惕。欢迎广大客户,反馈和补充其他鉴别方法!
行业内有这么一句话:在中国市场,永远都能找到更低的价格,但产品的质量一定会有一个底线的价格作为支持,以维护厂家和服务体系的运营,为客户提供保质保量的交付。我们强烈建议从Worthington品牌的官方认可渠道购买产品,以确保您获得正品。
谨防被低价诱惑,避雷不踩坑!