Synaptic Systems：用于科学研究的抗微管蛋白抗体方案
细胞骨架是细胞的主要机械结构，由不同的蛋白质生物大分子组成。它是一个复杂且动态的网络，在真核生物中由三个主要组成部分构成，即肌动蛋白微丝、中间丝和微管。这三种丝状结构都能根据细胞的需求通过聚合和解聚迅速生长和收缩（Fletcher和Mullins，2010）。
微管由α-微管蛋白和β-微管蛋白二聚体组成。这些二聚体组装成原丝，最终相互结合形成中空的微管。微管是细胞骨架的重要组成部分，为真核细胞提供形状和结构。
此外，它们还参与细胞分裂、细胞内运输和细胞运动等过程（Goodson和Jonasson，2018）。
作为管家基因，微管蛋白在所有细胞类型中都有丰富的表达，因此经常用作西方印迹实验中的装载对照。它们也常用作免疫细胞化学（ICC）和免疫组织化学（IHC/IHC-P）中标记微管网络的蛋白质。
Synaptic Systems提供广泛的物种面板，包括针对α-微管蛋白的单克隆、多克隆和重组抗体，这些抗体不区分不同的翻译后修饰。
这为您提供了最大的自由度，使您能够将我们的α-微管蛋白抗体与您选择的其他抗体结合在多重实验中使用。
艾美捷Synaptic Systems--α-微管蛋白：
Cat.No. ProductDescription
302008 a-Tubulin,rabbit,monoclonal,recombinant IgG
302203 a-Tubulin,rabbit,polyclonal,affinity purified
302204 a-Tubulin,Guinea pig,polyclonal,antiserum
302206 a-Tubulin,chicken,polyclonal,affinity purified
302211 a-Tubulin,mouse,monoclonal,recombinant IgG
302211C3 a-Tubulin,mouse,monoclonal,purified IgG,Oyster 550 discontinued
302217 a-Tubulin,rat,monoclonal,purified IgG
302308 a-Tubulin,Guinea pig,monoclonal,recombinant lgG
302411 a-Tubulin,mouse,monoclonal,purified IgM(K.0.)
微管蛋白的翻译后修饰
通常，微管的半衰期相当短，为5-10分钟。然而，一些翻译后修饰的微管蛋白变体可以持续数小时。一般来说，翻译后修饰调节微管的聚合和解聚，并在细胞骨架动态的微调中发挥重要作用（Infante，2000）。
去酪氨酸化/酪氨酸化：α-微管蛋白的C末端酪氨酸是遗传编码的，但可以通过Vasohibins翻译后移除，导致新创建的C末端暴露出一个自由的谷氨酸（Aillaud等人，2017）。这种微管蛋白变体通常被称为Glu-微管蛋白，例如在神经元或肾小球中发现。这种去酪氨酸化反应可以通过微管蛋白酪氨酸连接酶（TTL）逆转。酪氨酸化的α-微管蛋白被称为Tyr-微管蛋白，对于小鼠胚胎出生后的生存至关重要（Erck等人，2005）。
多谷氨酰化：几个谷氨酸（通常是4-6个）被添加到位于α-和β-微管蛋白C末端部分的谷氨酸残基上（Edde等人，1990；Wehland等人，1992）。这种多谷氨酰化的微管蛋白例如在神经元和有丝分裂纺锤体中出现。
Synaptic Systems提供特异性良好的单克隆抗体，专门针对Glu-微管蛋白、多谷氨酰化微管蛋白和Tyr-微管蛋白。
Delta2：不可逆地移除α-微管蛋白的最后两个残基，导致delta2或D2-微管蛋白的形成。这种高度稳定的α-微管蛋白变体仅限于神经元，因此经常用作标记神经细胞骨架的标记（Paturle-Lafanechère等人，1994）。
b3微管蛋白
第三类β-微管蛋白也被称为TuJ1，在中枢和外周神经系统（CNS和PNS）中含量丰富，特别是在胎儿和出生后发育期间显著表达（Katsetos等人，2003）。也有报道称它在某些非神经元起源的肿瘤中表达（Dráberovà等人，1998）。
用小鼠抗β3-微管蛋白（目录号302 311，稀释1:5000，红色）对PFA固定的小鼠皮质切片进行间接免疫染色。DAPI染色（蓝色）显示细胞核。
Synaptic Systems--其他微管蛋白：
Cat.No. Product Description
302302 B3-Tubulin,rabbit,polyclonal,antiserum
302304 B3-Tubulin,Guinea pig,polyclonal,antiserum
302306 B3-Tubulin,chicken,polyclonal,IgY fraction
302311 B3-Tubulin,mouse,monoclonal,purified IgG
302213 △2-tubulin,rabbit,polyclonal,affinity purified
302011 Glu-Tubulin,mouse,monoclonal,purified lgG
302117 Tyr-a-tubulin,rat,monoclonal,purified IgG K.0.
艾美捷科技是Synaptic Systems的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Synaptic Systems新型PSD95抗体在标准PFA固定组织中取得的结果
NanoTag Biotechnologies和Synaptic Systems推出了首款PSD95 FluoTag-X2抗体，该抗体在标准的免疫染色应用中显示出强大且可靠的结果，如免疫组织化学（IHC）和免疫细胞化学（ICC）。它适用于PFA/甲醛固定的大鼠和小鼠来源的组织和细胞，无需额外的抗原检索（AGR）步骤。
突触后密度（PSD）
突触后密度（PSD）是一个特殊的蛋白质密集区域，位于突触后膜上，与突触前活性区域相邻。最初，它通过电子显微镜（EM）被识别为突触后膜上的电子密集结构。PSD在突触裂隙处作为支架结构，使神经递质受体聚集在接近神经递质释放的突触前部位（Banker等人，1974；Ziff，1997；Dosemeci等人，2016）。
根据大脑区域、活动状态、突触成熟度以及一些神经退行性疾病，PSD的大小和组成会有所不同（Meyer等人，2014；Vyas和Montgomery，2016）。
大鼠海马突触的EM断层扫描
PSD95（SAP90）
PSD95（突触后密度蛋白95）也被称为SAP90（突触相关蛋白90）或Disks large同源物4，由DLG4基因编码（Statthakis等人，1997）。
与其亲属PSD93、SAP102和SAP97一起，它属于MAGUK超家族蛋白，并共享特征性的PDZ、SH3和GUK结构域（Woods和Bryant，1993）。
PSD95和PSD93是PSD的关键组成部分（Hunt等人，1996；Kennedy，1997），形成包含数百份副本的多聚体支架，聚集神经递质受体、离子通道和其他伴随的信号蛋白（Dosemeci等人，2016）。
因此，PSD95是一个有价值且常用的标记蛋白，用于在神经系统中特异性免疫标记突触后位点，无论是在免疫细胞化学（ICC）还是免疫组织化学（IHC）中。然而，由于多聚体、紧凑和密集的结构，抗体表位经常被掩盖或难以被大型的完整IgG抗体分子访问，因为空间障碍。抗原检索方法或特殊的固定协议可以改善结果，但可能因为与额外的组织处理步骤不兼容，而限制了其他抗体在多重实验中的应用。
PSD95 FluoTag
新的PSD95 FluoTag N3702是一个单域抗体（sdAb），通常被称为纳米抗体，由我们的合作伙伴公司NanoTag Biotechnologies开发。这种重组的骆驼科衍生抗体仅包含一个羊驼重链抗体的抗原结合位点。仅约15 kDa的这种FluoTag比传统的IgG抗体分子小约10倍。由于其小尺寸，这种PSD95 FluoTag甚至可以在标准的4% PFA灌注固定和后固定组织中可靠地访问其表位。这种组织制备方法通常用于振动切片和冷冻切片的免疫组织化学染色（游离和贴片安装），因为它确保了组织形态的极佳保存，并且与大量可用的研究抗体兼容。
在培养神经元的免疫细胞化学染色中，新推出的PSD95 FluoTag在PFA固定的细胞上也显示出优越的性能。
其单价结合特性以及每个FluoTag上定义的荧光分子数量使其成为定量分析的理想试剂。
为确保最大范围的应用满足您的需求，Synaptic Systems的新PSD95 FluoTag可与广泛的荧光团结合（见表格）。
艾美捷Synaptic Systems--PSD95 sdAb - FluoTag-X2 - 所有变体列表：
Cat.No.Product Description
N3702-AF568-L PSD95 sdAb,camelid,monoclonal,FluoTag-X2,AZdye 568
N3702-AF647-L PSD95 sdAb,camelid,monoclonal,FluoTag-X2,Alexa 647
N3702-At488-L PSD95 sdAb,camelid,monoclonal,FluoTag-X2,ATTO 488
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Synaptic Systems：用单克隆重组兔抗-Fos抗体226 008改进c-Fos实验
原癌基因c-fos属于即刻早期基因（IEGs），在大脑中快速且短暂地表达（Herrera和Robertson，1996）。它可以被各种刺激诱导，通常用作神经元激活的标记（Morgan等人，1987；Gaiddon等人，1996；Chowdhury等人，2000；Gallo等人，2018；Wakhloo等人，2020）。像许多其他IEGs一样，c-Fos是一种转录因子。它与c-Jun形成异二聚体结合到AP-1结合位点，并增强许多其他涉及增殖、分化、凋亡或炎症的基因的表达（Ye等人，2014）。
异二聚体bZIP转录因子c-Fos/c-Jun与DNA结合的图示
您的c-Fos实验的关键技术参数
动物处理：在规划涉及动物的c-Fos实验时，您应该意识到可能影响您研究的技术陷阱。例如，您应该考虑到c-Fos表达是时间依赖的，易受压力影响，并且可以在几分钟后被检测到（Herrera和Robertson，1996）。重要的是要考虑到许多因素，如动物处理本身（例如，针头注射）或在黑暗期暴露于光线下（昼夜节律激活）可能会影响c-Fos表达（Asanuma和Ogawa，1994；Herrera和Robertson，1996）。因此，实验必须精确规划和进行，并设置适当的对照组，以避免假阳性结果。
IHC协议：您还应该关注的另一个点是您的免疫组织化学（IHC）协议。似乎c-Fos阳性细胞的总数是阈值依赖的。许多参数影响可检测的c-Fos阳性细胞数量：组织储存条件、切片方法（冷冻切片机或振动切片机）、染色参数（例如，孵化温度）、信号增强试剂（Berghorn等人，1994；Werner等人，1996；Mayer和Bendayan，2001），以及最重要的是，一抗选择。
c-Fos抗体：一抗在特异性、灵敏度和信噪比方面有所不同，这些特性影响您的实验结果。因此，Synaptic Systems旨在提供高特异性和一致性的c-Fos抗体，以支持科学研究和实验可重复性。由于单克隆抗体与多克隆抗体相比具有几个优点，Synaptic Systems开发了一种新的单克隆重组兔抗c-Fos抗体。
Synaptic Systems单克隆重组c-Fos抗体的优势：
抗体具有由两个重链和两个轻链组成的共同结构。重链和轻链都包含物种特异性的恒定区域和负责目标识别的可变序列（Davies和Metzger，1983）。
在来自定义的杂交瘤细胞系的单克隆抗体制剂中，所有单个抗体分子都是相同的，并且共享相同的抗原识别位点。相比之下，多克隆抗体，如兔c-Fos抗体226 003，由抗体分子的混合物组成，它们在目标识别序列上有所不同。一旦血清用完，就必须对新的动物进行免疫。获得的新血清包含新的c-Fos抗体混合物，具有新的特异性和亲和力特性，导致多克隆c-Fos抗体的批次间变异。
通过Synaptic Systems的单克隆重组兔c-Fos抗体226 008，Synaptic Systems永久性地解决了批次间变异的问题。Synaptic Systems对表现一贯良好的大鼠单克隆c-Fos抗体226 017的c-Fos目标识别域进行了测序，并将它们融合到兔IgG的恒定抗体区域。
这种高度定义的单克隆重组抗体可以在受控条件下在哺乳动物细胞中表达，作为一种无限资源，批次间变异最小。它在Synaptic Systems测试的标准应用中显示出优越的性能，并且等同于甚至优于Synaptic Systems最好的兔多克隆c-Fos批次。虽然多克隆兔抗c-Fos抗体226 003非常容易受到实验条件的变化影响（例如，IHC实验中的孵化温度会影响信号强度），但单克隆重组兔抗c-Fos抗体226 008在各种实验设置中都能产生稳健的染色结果，因此是您实验的最佳选择。
随着时间的推移，这种单克隆抗体将被用于许多不同的应用，收集到的所有信息将有助于更好地表征这种研究试剂。
与多克隆抗体相比，这些信息会累积并且永远不会丢失，使这种研究试剂成为您手中越来越有价值和可靠的工具。
新的组织透明技术，如CLARITY和iDISCO，为生物过程和结构提供了全新的见解。与Synaptic Systems的单克隆重组兔抗c-Fos抗体226 008结合使用，它们使Synaptic Systems能够在整个较大的区域内研究大脑中的途径。已经展示了如何通过使用CLARITY的修改版本和Synaptic Systems的c-Fos抗体226 008来标记记忆细胞，评估同一小鼠中重叠的细胞群体（Refaeli等人，2024）。
艾美捷Synaptic Systems 相关产品：
Cat.No. Product Description
226008 c-Fos,rabbit,monoclonal,recombinant lgG
226009 c-Fos,chicken,monoclonal,recombinant lgY
226017 c-Fos,rat,monoclonal,purified IgG
226308 c-Fos,Guinea pig,monoclonal,recombinant IgG
188002 MAP2,rabbit,polyclonal,antiserum
188011 MAP2,mouse,monoclonal,purified IgG
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Synaptic Systems--FluoTag-X4抗GFP单结构域抗体与天然GFP信号高度相关
FluoTag-X4抗GFP单结构域抗体与天然GFP信号高度相关，在定量共定位方面优于传统GFP抗体。
在以下方法中，应通过原生GFP信号与抗体染色信号的共定位研究来突出这一优势。对转基因小胶质细胞CX3CR1-GFP+/-小鼠（Jung等人，2000年）的脑切片进行了免疫组织化学染色，使用的是FluoTag®-X4抗GFP抗体或传统的间接免疫染色。
通过合并图片、散点图和相关系数分析共定位
共定位可以在两个荧光信号的合并图片中可视化。原生GFP通道（绿色 - 图1A，2A）和抗体染色通道（红色 - 图1B，2B）的重叠像素显示为黄色（图1C，2C）。合并图片清楚地显示，FluoTag®-X4抗GFP染色结果在微胶质细胞的不同区域产生了均匀的共定位，而传统染色在微胶质细胞的不同区域产生了波动。细胞核显示出明亮的原生GFP信号，但只有非常微弱的抗体染色（图2A-C，星号），这可能是由于传统抗体进入细胞核的穿透性较差或空间障碍所致。相比之下，微胶质细胞的突起与GFP信号相比，在抗体染色下显得更亮（图2A-C，箭头），很可能是由于二级试剂的高放大作用。散点图是另一种有用的工具，用于可视化共定位（ImageJ，Dunn等人，2011）。在这里，每个像素的颜色强度相互对比（图1D，2D）。在高共定位的情况下，点会围绕一条直线聚集，如图1D中可以很好地看到。
图1：使用单域FluoTag®-X4抗GFP抗体的直接免疫染色。
（A）原生GFP信号，
（B）FluoTag®-X4抗GFP抗体（AB）染色，
（C）合并图片以及
（D）带有皮尔逊相关系数（PCC）的散点图。
图2：使用传统抗GFP抗体的间接免疫染色。
（A）原生GFP信号，
（B）传统抗体（AB）染色，
（C）合并图片以及
（D）带有皮尔逊相关系数（PCC）的散点图。
这两种可视化方法，合并图片和散点图，都表明FluoTag®-X4抗GFP染色与原生GFP信号的相关性高于传统染色。接下来，使用皮尔逊相关系数（PCC）量化了相关性，这是一个稳健的工具，不受增益或偏移的影响（ImageJ，Adler等人，2010，Bolte等人，2006）。如果完全正相关，PCC为1；如果没有相关性，PCC为0。量化显示，FluoTag®-X4抗GFP-At542与原生GFP信号的相关性令人印象深刻，PCC为0.9732（图1D），而传统间接抗体染色与原生GFP信号的相关性仅为0.7676（图2D）。对每组三张图片的分析确认了这一结果，具有高度的统计显著性p<0.001。
这个实验再次说明，小的直接结合的单域抗体具有单价结合特性，显示出非常好的组织穿透性，并产生准确反映给定蛋白表达水平和分布的染色模式。它们不受二级试剂高放大作用的影响，这使得它们在定量共定位研究中优于传统的间接免疫染色。
艾美捷Synaptic Systems 相关产品：
Cat.No. Product Description
N0304-AF568-L GFP sdAb,camelid,monoclonal,FluoTag-X4,AZdye 568
N0304-AF647-LGFP sdAb,camelid,monoclonal,FluoTag-X4,Alexa 647
N0304-At488-LGFP sdAb,camelid,monoclonal,FluoTag-X4,ATTO 488
文献参考：
Adler et al., 2010: Quantifying Colocalization by Correlation: The Pearson Correlation Coefficient is Superior to the Mander’s Overlap Coefficient. PMID: 20653013
Bolte et al., 2006: A guided tour into subcellular colocalization analysis in light microscopy. PMID: 17210054
Dunn et al., 2011: A practical guide to evaluating colocalization in biological microscopy. PMID: 21209361
Jung et al., 2000: Analysis of Fractalkine Receptor CX3CR1 Function by Targeted Deletion and Green Fluorescent Protein Reporter Gene Insertion. PMID: 10805752
Prasher et al., 1992: Primary structure of the Aequorea victoria green-fluorescent protein. PMID: 1347277
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用Synaptic Systems抗体探索RNA甲基
SYSY是m6A特异性抗体的第一家商业供应商。我们的产品已被用于700多种科学出版物，并使研究RNA甲基化的全新方法得以开发。单克隆抗体和重组抗体变体的开发补充了极其成功的多克隆抗m6a抗体，并保证了最佳的可重复性和批次间的一致性。抗m6A抗体适用于广泛的应用，如MeRIP、m6A CLIP和miCLIP测序、经典IP、斑点印迹和ELISA。
m6A抗体：
Cat. No. Product Description
202 003 m6A, rabbit, polyclonal, affinity purified
202 008 m6A, rabbit, monoclonal, recombinant IgG
202 011 m6A, mouse, monoclonal, purified IgG
202 018 m6A, rabbit, monoclonal, recombinant IgG
202 111 m6A, mouse, monoclonal, purified IgG
探索剪接体，一切的起点
1987年，Peter Bringmann和Reinhard Lührmann开发了首批针对m6A的多克隆抗体，以研究这种RNA修饰在真核生物剪接体中的重要性。这些抗体使得m6A修饰的小核糖核酸（snRNAs）U2、U4和U6能够从核糖蛋白复合体（snRNPs）中定量免疫分离（Bringmann, Lührmann, 1987）。
1997年，SYSY将R. Lührmann和P. Bringmann的原始m6A抗血清纳入其目录，并成为首家供应特异性m6A抗体的商业供应商。
通过MeRIP测序发现m6A RNA甲基组
后来发现，N6-甲基腺苷或m6A修饰涉及许多转录后调控过程，m6A甲基组的转录组成为了一个全新且迅速发展的研究领域。
Kate Meyer（Meyer等人，2012年）和Dan Dominissini（Dominissini等人，2012年和2013年）的关键出版物为SYSY亲和纯化的m6A兔多克隆抗体（目录号202 003）在全球的成功铺平了道路。Meyer和Dominissini开发了基于抗体的m6A测序方法，这是一种基于平行测序免疫分离的RNA片段（100-200 nt长）携带m6A修饰的方法。
这种新技术，也称为MeRIP测序，使科学家能够揭示许多由m6A修饰调控的转录后调控机制，导致科学出版物数量不断增长。
随着时间的推移，m6A相关科学出版物数量的发展。
发现m6A峰值富集在3'-非翻译区、靠近终止密码子和长外显子内（7, 8）。已经证明m6A修饰可以影响RNA生命周期的每个过程，并对许多生理过程产生影响，如干细胞发育、翻译调控、癌症、脂肪生成等（Linder等人，2015年）。
先进技术
通过MeRIP测序，m6A残基可以被定位到100-200 nt长的区域。通过将m6A修饰分配给已识别的DRACH基序，可以显著缩小m6A残基的确切位置。然而，为了实现单核苷酸分辨率，必须开发更先进的技术。M6A-CLIP和miCLIP基于m6A位点特异性紫外线诱导的抗体交联，这在cDNA合成过程中引起可预测的突变和截断模式。这允许更精确地定位m6A残基（Linder等人，2015年，Ke等人，2015年）。
艾美捷Synaptic Systems抗体，提升您的RNA甲基组研究！
Cat. No. Product Description
428 003 FTO, rabbit, polyclonal, affinity purified K.D.
202 003 m6A, rabbit, polyclonal, affinity purified
202 008 m6A, rabbit, monoclonal, recombinant IgG
202 011 m6A, mouse, monoclonal, purified IgG
202 018 m6A, rabbit, monoclonal, recombinant IgG
202 111 m6A, mouse, monoclonal, purified IgG
417 003 METTL3, rabbit, polyclonal, affinity purified K.D.
文献参考：
A L Lu, D Y Chang, 1988: Repair of single base-pair transversion mismatches of Escherichia coli in vitro: correction of certain A/G mismatches is independent of dam methylation and host mutHLS gene functions. PMID: 3284785
Bringmann, Lührmann, 1987: Antibodies specific for N6-methyladenosine react with intact snRNPs U2 and U4/U6. PMID: 2951275
Carter, 1994: Spatial localization of pre-mRNA transcription and processing within the nucleus. PMID: 7765739
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Cayman Chemical无细胞蛋白质合成（大肠杆菌）试剂盒：易于使用、快速且高效
无细胞蛋白质合成（CFPS）是一个易于使用、快速且高效的系统，它不包含膜结构障碍，但包含了原生细胞的转录和翻译机制以及合成所需蛋白质的外源资源（例如，氨基酸、核苷酸和二级能量底物）。1-5
CFPS（大肠杆菌）套件可以在几小时内产生高水平和不同分子量的重组蛋白，并且可以用于高通量功能基因组学和蛋白质组学。此外，它还可以提供蛋白质以推动生化和结构生物学研究。
合成的蛋白质可以通过SDS-PAGE、西方印迹和荧光检测尺寸排除色谱（FSEC）进行检测，并且可以通过亲和纯化技术从反应混合物中分离出来，以进行进一步的结构和/或功能特性分析。
艾美捷Cayman Chemical无细胞蛋白质合成（大肠杆菌）试剂盒：
货号：41534
同义词：CFPS（无细胞蛋白质合成）
储存：-80°C
运输：在美国本土使用干冰运输；其他地区可能有所不同
稳定性：至少1年
模板制备：
包含DNA的线性或环形质粒或用于POl的PCR产物可以用作模板。环形质粒DNA可以产生相对较高的产量，但在进行高通量筛选时使用PCR产物更为方便。为了获得最佳的蛋白质产量，使用高纯度和高浓度的质粒DNA模板非常重要，并避免在DNA模板中加入高浓度的盐或甘油。此外，建议在蛋白质合成缓冲液中添加适当的核酸酶抑制剂，以抑制任何污染的RNase/DNase并稳定线性DNA。为了方便，可以使用Control His-sfGFP Plasmid（产品编号400793）作为克隆载体。这个高拷贝数载体包含了所需的T7启动子、核糖体结合位点（RBS）和T7终止子元素。sfGFP基因可以被其他感兴趣的基因替换，以用于体外表达。
环形质粒DNA作为模板
在此平台上使用的质粒必须包含以下元素和结构特征：
图：控制His-sfGFP质粒的示意图
目标基因必须位于一个RBS（核糖体结合位点）上游的T7启动子的控制之下。
T7启动子与ATG起始密码子之间的距离应在20到100个核苷酸左右。
T7终止子必须位于终止密码子下游。
文献参考：
1. Silverman, A.D., Karim, A.S., and Jewett, M.C. Cell-free gene expression: An expanded repertoire of applications. Nat. Rev. Genet. 21(3), 151-170 (2020).
2. Garenne, D., Haines, M.C., Romantseva, E., et al. Cell-free gene expression. Nat. Rev. 1, 49 (2021).
3.Levine,M.Z.,Gregprio,N.E.,Jewett,M.C.,et al.Escherichia coli-basedcell-free protein synthesis:Protocols for a robust flexible,and accessibleplatform technology.J.Vis.Exp.144,e58882(2019).
4. Jewett, M.C., and Swartz, J.R. Mimicking the Escherichia coli cytoplasmic environment activates long-lived and efficient cell-free protein synthesis. Biotechnol. Bioeng. 86(1), 19-26 (2004).
5. Davanloo, P., Rosenberg, A.H., Dunn, J.J., et al. Cloning and expression of the gene for bacteriophage T7 RNA polymerase. Proc. Nat. Acad. Sci. USA 81(7), 2035-2039 (1984).
艾美捷科技是Cayman Chemical的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Cayman Chemical血清铁测定试剂盒：简单快速；1小时内得到结果
铁（Fe）是自然界中含量最丰富的元素之一，对多种生物体至关重要。¹它以亚铁（Fe²+）和铁（Fe³）的形式存在，分别作为电子供体和受体，以氧化态依赖的方式发挥作用，并参与所有细胞的功能。铁主要储存在含血红素的蛋白质中，包括血红蛋白和肌红蛋白，参与氧气运输，但也存在于含有铁硫簇的酶中，这些酶在细胞呼吸、DNA合成、基因调控和类固醇合成中发挥作用，以及在含血红素的辅因子中。
非血红素铁的过量水平可能是有害的，因为亚铁作为电子供体，催化活性氧物质（ROS）的产生，引发氧化应激。为了防止铁过载，非血红素铁也储存在巨噬细胞和肝细胞中的铁储存蛋白铁蛋白和含铁血黄素中，并通过血液中的转铁蛋白运输，转铁蛋白是一种结合并运输铁的糖蛋白。1-3铁结合的转铁蛋白与需要铁的细胞表面的转铁蛋白受体（TfR1）结合，形成转铁蛋白/TfR复合物，该复合物经历依赖于clathrin的内吞作用，以促进细胞内铁的释放。23铁的生物利用度及其随后输送到不同组织和细胞，取决于转铁蛋白和TfR1的铁循环，使转铁蛋白结合的铁成为大多数细胞的生理铁源。
在绝对和功能性铁缺乏的患者中，血清铁水平会降低。在铁过载疾病患者中，如血色病，以及在急性肝炎或慢性肝功能衰竭患者中，血清铁水平会增加。这些，共同强调了测量血清中铁水平的重要性。
Cayman的血清铁测定试剂盒提供了一种方便的比色法来测定血清中的铁水平。该测定的范围为0-100μM（0-560μg/dl），检测下限（LLOD）为0.68μM（3.8μg/dl）。注：总铁结合能力和血清铁测定试剂盒也可从Cayman购买（ltem No.702230）。
艾美捷Cayman Chemical血清铁测定试剂盒：
货号：702870
检测限：0.68 µM（3.8 µg/dl）
测定范围：0-100 µM（0-56 µg/dl）
储存：-20°C
运输：在美国本土使用湿冰运输；其他地区可能有所不同
稳定性：≥ 456天
血清：
通常，正常人血清中的铁浓度范围在10-40μM之间。5然而，每个实验室应建立自己的参考区间，因为由于方法学、设备和样本人群的差异，这些区间可能会有相当大的变化。避免使用溶血性、黄疸性（黄疸）或脂血性血清，因为这些会干扰检测。⁶为了最小化脂血，应在禁食后采集样本。
1. 在不含抗凝剂的采血管中采血。
2. 让血液在室温下静置30分钟以形成血凝块。
3. 在4℃下以2,000xg的速度离心血液15分钟。将顶部的黄色血清层转移到一个干净的试管中，不要搅动白色的纤维层。将血清存放在冰上。如果不在同一天进行检测，应存放在-80℃。避免反复冻融。
4. 血清在检测前不需要稀释。
平行性：
为了评估平行性，将血清样本用血清铁缓冲液进行系列稀释，并使用血清铁检测试剂盒进行评估。结果如下图所示。
Cayman Chemical血清铁测定试剂盒特征：
测量多达40个样本的血清铁水平，一式两份
简单、灵敏、快速；1小时内得到结果
基于板的比色测量（570 nm）
检测下限（LLOD）为0.68µM（3.8µg/dl）
已在人血清和动物血清（如小鼠、大鼠和牛）中验证
艾美捷科技是Cayman Chemical的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/cayman-china-distributor.shtml
Cayman Chemical--Caspase-3/7细胞活性检测试剂盒，高灵敏度检测酶活性
Cayman的Caspase-3/7细胞活性检测试剂盒提供了一种方便的方法来检测细胞裂解物中caspase-3和caspase-7的活性。使用caspase-3/7特异性底物N-Ac-DEVD-AFC监测活性。活性酶的裂解作用会产生一种高荧光产物，可以使用400纳米的激发波长和505纳米的发射波长进行测量。试剂盒中包含活性caspase-3作为阳性对照，还含有诱导细胞凋亡的staurosporine。caspase-3/7抑制剂N-Ac-DEVD-CHO作为对照，以确认荧光信号对酶活性的特异性。
需要但未提供的：请下载试剂盒手册，以验证是否需要超纯水（Milli-Q或等效物）或其他任何组分进行此检测。
警告：本产品不适用于人类或兽医用途。
艾美捷Cayman Chemical血清铁测定试剂盒：
货号：702790
同义词：Apopain、Apoptotic Protease Mch-3、CASP-3/7、CMH-1、Cysteine Protease CPP32、ICE-LAP3、ICE-like Apoptotic Protease 3、Protein Yama、SCA-1、SREBP Cleavage Activity 1
发射：505纳米
激发：400纳米
储存：-80°C
运输：在美国本土使用干冰运输；其他地区可能有所不同
稳定性：≥ 1年
执行检测：
最佳的种植密度将取决于细胞类型和处理时间。过度拥挤的细胞可能导致高非特异性荧光。建议对所有测试化合物包括可选的用Staurosporine凋亡诱导剂处理，都包含适当的对照组。
1. 在96孔板中培养细胞，并按照典型的实验程序用测试化合物和对照组进行处理。每种处理都要进行六次重复，其中三个结果的细胞裂解物将被加入到样本孔中，另外三个加入到样本+抑制剂孔中。
a. 建议在实验中使用前，将贴壁细胞培养至80%的密度。
b. 建议在实验中使用前，将悬浮细胞的密度培养至5x10⁴至5x10⁵。
2. 以800 x g的速度离心板5分钟，并小心地吸去培养基。
3. 用200μl/孔的基于细胞的检测缓冲液轻轻洗涤细胞。
4. 以800 x g的速度离心板5分钟，并小心地吸去缓冲液。
5. 向每个孔中加入100μl的基于细胞的检测裂解缓冲液。
6. 在室温下，用轨道摇床轻轻摇晃孵育30分钟。
性能特征分析：
文献参考：
1.Cohen,G.M.Caspases:The executioners ofapoptosis.Biochem.J.326(Pt 1),
1-16(2007).
2.Mcllwain,D.R,Berger,T,and Mak,TW.Caspase functions in cell death anddisease.Cold Spring Harb.Perspect.Biol.5(4),a008656(2013).
3.Sun,G.Death and survival from executioner caspase activation.Semin.CellDev.Biol.156,66-73(2024).
4.Sahoo,G.,Samal,D.,Khandayataray,P,et al.A review on caspases:Keyregulators of biological activities and apoptosis.Mol.Neurobiol.60(10),5805-5837(2023).
艾美捷科技是Cayman Chemical的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/cayman-china-distributor.shtml