Jena bioscience--T4 DNA Ligase无缝DNA连接和生物技术应用工具
T4 DNA连接酶催化在双链DNA或RNA中相邻的5'磷酸和3'-羟基末端之间形成磷酸二酯键。
艾美捷T4 DNA Ligase：
货号：EN-149L
单位定义：一个Weiss单位被定义为在37°C下20分钟内催化1纳摩尔的32P从焦磷酸盐转移到ATP，并转化为Norit吸附不了的物质的酶的量。
适用于一般实验室使用。
运输：在凝胶包装上运输
储存条件：在-20°C下储存
附加储存条件：避免冻融循环
保质期：12个月
形态：液体（提供时含10 mM Tris-HCl pH 7.4，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，200 µg/ml BSA和50% [v/v]甘油）
浓度：2.5 Weiss单位/微升（500 CE单位/微升）
T4 DNA Ligase内容：
标准连接缓冲液，10倍浓度。
25°C时500 mM Tris-HCl pH 7.8，100 mM MgCl2，100 mM DTT，10 mM ATP和25 µg/ml BSA
快速连接缓冲液，2倍浓度。
25°C时60 mM Tris-HCl pH 7.8，20 mM MgCl2，20 mM DTT，2 mM ATP和10% PEG
连接缓冲液中的白色沉淀是正常的，不影响反应效率。不要加热缓冲液，因为这会破坏其中的ATP。
热灭活：
T4 DNA连接酶可以通过在65°C下孵育10分钟来灭活。
注意：
一个粘性末端连接单位（CEU）被定义为在16°C下，1x T4 DNA连接酶反应缓冲液中，30分钟内，20微升总反应体积中，使λ DNA的Hind III片段（5' DNA末端浓度为0.12微摩尔，300微克/毫升）连接50%所需的酶量。
一个Weiss单位大约相当于200个CE单位。
如果NaCl或KCl的浓度超过200 mM，T4 DNA连接酶将受到强烈抑制。
连接平端和单碱基突出的片段需要大约50倍的酶量才能达到与粘性末端DNA片段相同的连接程度。通过添加PEG 4000（最终浓度为10% w/v）或六亚甲基氯化物，或将ATP浓度降低到50微摩尔，可以增强平端连接。
为了稀释T4 DNA连接酶以便在-20°C下储存，应使用含有50%甘油的储存缓冲液；为了稀释连接酶立即使用，建议使用1x反应缓冲液。
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Jena bioscience--dATP-溶液，高纯度高效液相色谱法
PCR级SN38 LadATP的示例以超纯水溶液（pH8.5），适用于所有分子生物学应用，包括PCR/qPCR、逆转录、DNA标记和DNA测序。
艾美捷dATP-溶液：
货号：NU-1001-10ML
运输：在凝胶包装上运输
储存条件：在-20°C下储存
保质期：12个月
分子式：C10H16N5O12P3（游离酸）
分子量：491.18 g/mol（游离酸）
CAS号：1927-31-7
纯度：≥ 99%（高效液相色谱法）
形态：清澈的水溶液
浓度：100 mM - 110 mM
pH值：8.5 ±0.2（22°C）
光谱特性：最大吸收波长259 nm，摩尔吸光系数15.1 L mmol^-1 cm^-1（Tris-HCl pH 7.0）
dATP-溶液参考文献：
Erlich et al. (1988) Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase. Science 29 (239):487.
Holland et al. (1991) Detection of specific polymerase chain reaction product by utilizing the 5’—-3’ exonuclease activity of Thermus aquaticus DNA polymerase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88 (16):7276.
Sanger et al. (1977) DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. Proc.Natl. Acad. Sci. USA 74:5463.
相关规格：
Cat. No. Amount
NU-1001L 1 ml (100 mM)
NU-1001-10ML 10 ml (100 mM)
NU-1001-100ML 100 ml (100 mM)
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Jena bioscience生物实验室常备--dNTP Bundle
dNTP Bundle包含四种单独的超纯dATP溶液，dCTP、dGTP和dTTP以透明水溶液（pH 8.5）的形式供应。
dNTP Cat. No. cap color
dATP NU-1001 red
dCTP NU-1002 blue
dGTP NU-1003 yellow
dTTP NU-1004 green
质量控制规范：
低丰度长片段PCR（18 kb，λDNA，模板稀释系列）：使用50皮克或更少模板的PCR片段
实时逆转录PCR（749 bp片段，人类GAPDH基因，模板稀释系列）：使用10皮克或更少模板的PCR片段
细菌或人类DNA污染：不可检测
DNA酶、RNA酶、切割活性：不可检测
蛋白酶：不可检测
艾美捷dNTP Bundle：
货号：NU-1005L
运输：使用凝胶包装运输
储存条件：需在-20°C下储存
保质期：自交货日期起12个月
分子式：
dATP：C10H16N5O12P3（游离酸）
dCTP：C9H16N3O13P3（游离酸）
dGTP：C10H16N5O13P3（游离酸）
dTTP：C10H17N2O14P3（游离酸）
分子量：
dATP：491.18 g/mol（游离酸）
dCTP：467.15 g/mol（游离酸）
dGTP：507.18 g/mol（游离酸）
dTTP：482.17 g/mol（游离酸）
纯度：≥ 99%（高效液相色谱法）
形态：清澈的水溶液
浓度：100 mM - 110 mM
pH值：8.5 ±0.2（22°C）
光谱特性：dATP：最大吸收波长259 nm，摩尔吸光系数15.1 L mmol^-1 cm^-1
(Tris-HCl pH 7.0)
dCTP: λmax 271 nm, ε 8.9 L mmol-1 cm-1 (Tris-HCl pH 7.0)
dGTP: λmax 252 nm, ε 14.2 L mmol-1 cm-1 (Tris-HCl pH 7.0)
dTTP: λmax 267 nm, ε 9.5 L mmol-1 cm-1 (Tris-HCl pH 7.0)
dNTP Bundle参考文献：
Erlich et al. (1988) Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase. Science 29 (239):487.
Holland et al. (1991) Detection of specific polymerase chain reaction product by utilizing the 5’—-3’ exonuclease activity of Thermus aquaticus DNA polymerase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88 (16):7276.
Sanger et al. (1977) DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. Proc.Natl. Acad. Sci. USA 74:5463.
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Jena bioscience--dNTP混合物- 10 mM溶液的应用和参数说明
dNTP混合物是超纯dATP、dCTP、dGTP和dTTP以清澈的水溶液（pH 8.5）形式供应。
Cat. No. Amount
NU-1006S 1 ml
NU-1006L 5x 1 ml
NU-1006-10ML 10 ml
NU-1006-100ML 100 ml
艾美捷dNTP混合物- 10 mM溶液：
货号：NU-1006-10ML
运输：使用凝胶包装运输
储存条件：需在-20°C下储存
保质期：12个月
分子式：
dATP：C10H16N5O12P3（游离酸）
dCTP：C9H16N3O13P3（游离酸）
dGTP：C10H16N5O13P3（游离酸）
dTTP：C10H17N2O14P3（游离酸）
分子量：
dATP：491.18 g/mol（游离酸）
dCTP：467.15 g/mol（游离酸）
dGTP：507.18 g/mol（游离酸）
dTTP：482.17 g/mol（游离酸）
纯度：≥ 99%（高效液相色谱法）
形态：清澈的水溶液
pH值：8.5 ±0.2（22°C）
应用：
对于标准的PCR应用，建议每种dNTP的最终浓度为200 µM。
质量控制规范：
低丰度长片段PCR（18 kb，λDNA，模板稀释系列）：使用50皮克或更少模板的PCR片段
实时逆转录PCR（749 bp片段，人类GAPDH基因，模板稀释系列）：使用10皮克或更少模板的PCR片段
细菌或人类DNA污染：不可检测
DNA酶、RNA酶、切口活性：不可检测
蛋白酶：不可检测
dNTP混合物- 10 mM溶液参考文献：
Erlich et al. (1988) Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase. Science 29 (239):487.
Holland et al. (1991) Detection of specific polymerase chain reaction product by utilizing the 5’—-3’ exonuclease activity of Thermus aquaticus DNA polymerase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88 (16):7276.
Sanger et al. (1977) DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. Proc.Natl. Acad. Sci. USA 74:5463.
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Jena bioscience--5-Methyl-CTP在表观遗传学中的作用
Jena bioscience--5-Methyl-CTP的应用：
1、修饰碱基的功能影响[1-5]
2、PCR中的掺入[3]。
Cat. No. Amount
NU-1138S 10 µl (100 mM)
NU-1138L 5 x 10 µl (100 mM)
艾美捷5-Methyl-CTP：
货号：NU-1138L
运输：使用凝胶包装运输
储存条件：需在-20°C下储存，短期（累计不超过1周）暴露在室温下是可能的。
保质期：自交货日期起12个月
分子式：C10H18N3O14P3（游离酸）
分子量：497.18 g/mol（游离酸）
精确质量：497.00 g/mol（游离酸）
CAS号：327174-86-7（酸）
纯度：≥ 95%（高效液相色谱法）
形态：水溶液
颜色：无色至微黄
浓度：100 mM - 110 mM
pH值：7.5 ±0.5
光谱特性：最大吸收波长277 nm，摩尔吸光系数9.0 L mmol^-1 cm^-1（Tris-HCl pH 7.5）
相关产品：
高产T7 RNA合成试剂盒，#RNT-101
5-Methyl-CTP参考文献：
[1] Adams et al. (2014) 185 CELLULAR VIABILITY AND EXPRESSION OF GREEN FLUORESCENT PROTEIN IN BOVINE FETAL FIBROBLASTS FOLLOWING TRANSFECTION OF SYNTHETIC mRNA INCLUDING MODIFIED BASES. Reprod.Fertil. Dev. 26:207.
[2] Tchigvintsev et al. (2013) Biochemical and Structural Studies of Conserved Maf Proteins Revealed Nucleotide Pyrophosphatases with a Preference for Modified Nucleotides. Chem. Biol. Oxford U.K. 20:1386.
[3] Wong et al. (1997) A novel method for producing partial restriction digestion of DNA fragments by PCR with 5-methyl-CTP. Nucleic Acids Res. 25:4169.
[4] Kormann et al. (2011) Expression of therapeutic proteins after delivery of chemically modified mRNA in mice. Nature Biotechnology 29:154.
[5] Warren et al. (2010) Highly efficient reprogramming to pluripotency and directed differentiation of human cells with synthetic modified mRNA. Cell Stem Cell 7 (5):618.
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Jena bioscience--Pseudo-UTP：RNA合成中的非天然尿苷酸三磷酸
Jena bioscience--Pseudo-UTP：Ψ-UTP 假尿苷-5'-三磷酸钠盐
Cat. No. Amount
NU-1139S 10 µl (100 mM)
NU-1139L 5 x 10 µl (100 mM)
艾美捷Pseudo-UTP：
货号：NU-1139L
运输：使用凝胶包装运输
储存条件：需在-20°C下储存，可以短期（累计不超过1周）暴露在室温下。
保质期：自交货日期起12个月
分子式：C9H15N2O15P3（游离酸）
分子量：484.14 g/mol（游离酸）
精确质量：483.97 g/mol（游离酸）
CAS号：1175-34-4
纯度：≥ 95%（高效液相色谱法）
形态：水溶液
颜色：无色至微黄
浓度：100 mM - 110 mM
pH值：7.5 ±0.5
溶解性：可溶于水
光谱特性：最大吸收波长约为265 nm ±2 nm，摩尔吸光系数7.9 L mmol^-1 cm^-1（Tris-HCl pH 7.5）
相关产品：
高产T7 RNA合成试剂盒，#RNT-101
Pseudo-UTP参考文献：
Anderson et al. (2012) Nucleofection induces transient eIF2α phosphorylation by GCN2 and PERK. Gene Ther. doi: 10.1038/gt.2012.5.
Green et al. (2012) Activation of autoreactive B cells by endogenous TLR7 and TLR3 RNA ligands. J. Biol. Chem. 287 (47):39789.
Karikó et al. (2012) Increased Erythropoiesis in Mice Injected With Submicrogram Quantities of Pseudouridine-containing mRNA Encoding Erythropoietin. Mol Ther. 20 (5):984.
Warren et al. (2012) Feeder-free derivation of human induced pluripotent stem cells with messenger RNA. Sci Rep. 2:657.
Anderson et al. (2011) Nucleoside modifications in RNA limit activation of 2’-5’-oligoadenylate synthetase and increase resistance to cleavage by RNase L. Nucleic Acids Research. 39 (21):9329.
Karikó et al. (2011) Generating the optimal mRNA for therapy: HPLC purification eliminates immune activation and improves translation of nucleoside-modified, protein encoding mRNA. Nucleic Acids Research. 39 :e142.
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Jena bioscience--2-Thio-UTP，增强研究与诊断的精准度
Jena bioscience--2-Thio-UTP：s、2UTP、2-硫代-UTP、2-硫尿苷-5'-三磷酸钠盐Cat. No. Amount
NU-1151S 10 µl (100 mM)
NU-1151L 5 x 10 µl (100 mM)
艾美捷2-Thio-UTP：
货号：NU-1151L
运输：使用凝胶包装运输
储存条件：需在-20°C下储存，可以短期（累计不超过1周）暴露在室温下。
保质期：自交货日期起12个月
分子式：C9H15N2O14P3S（游离酸）
分子量：500.21 g/mol（游离酸）
精确质量：499.95 g/mol（游离酸）
CAS号：35763-29-2
纯度：≥ 95%（高效液相色谱法）
形态：水溶液
颜色：无色至微黄
浓度：100 mM - 110 mM
pH值：7.5 ±0.5
光谱特性：最大吸收波长274 nm，摩尔吸光系数14.2 L mmol^-1 cm^-1（Tris-HCl pH 7.5）
特定配体：
用于嘌呤能受体的配体：
在P2Y2受体上具有强效和选择性的激动剂[1,2,3,4]
相关产品：
高产T7 RNA合成试剂盒，#RNT-101
2-Thio-UTP参考文献：
[1] Higgins et al. (2014) Nucleotides Regulate Secretion of the Inflammatory Chemokine CCL2 from Human Macrophages and Monocytes. Mediators Inflamm. 293925.
[2] Zizzo M. et al. (2012) Pharmacological characterization of uracil nucleotide-preferring P2Y receptors modulating intestinal motility: a study on mouse ileum. Purinergic Signal. 8 (2):275.
[3] Ko et al. (2008) Synthesis and potency of novel uracil nucleotides and derivatives as P2Y2 and P2Y6 receptor agonists. Bioorg. Med. Chem. 16 (12):6319.
[4] El-Tayeb et al. (2006) Synthesis and structure-activity relationships of uracil nucleotide derivatives and analogues as agonists at human P2Y2, P2Y4, and P2Y6 receptors. J. Med. Chem. 49 (24):7076.
Kormann et al. (2011) Expression of therapeutic proteins after delivery of chemically modified mRNA in mice. Nature Biotechnology 29:154.
Warren et al. (2010) Highly efficient reprogramming to pluripotency and directed differentiation of human cells with synthetic modified mRNA. Cell Stem Cell 7 (5):618
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Jena bioscience生物合成中的修饰者--m7GP3A在RNA转录中的应用
m7GP3A，全称为7-甲基鸟嘌呤核苷酸三磷酸（7-Methylguanosine 5'-triphosphate），是一种在分子生物学和生物化学领域具有特殊用途的修饰核苷酸。它通过在标准鸟嘌呤核苷酸的7号位上添加一个甲基基团来合成，这个小小的化学变化赋予了它独特的性质。m7GP3A通常用于RNA的合成，特别是在制备具有帽子结构（cap）的mRNA时，它扮演着至关重要的角色。帽子结构是真核生物mRNA分子5'端的一个特殊结构，对于mRNA的稳定性、翻译效率以及核糖体识别都至关重要。
艾美捷m7GP3A：
货号：NU-535L
运输：使用凝胶包装运输
储存条件：需在-20°C下储存，可以短期（累计不超过1周）暴露在室温下。
保质期：自交货日期起12个月
分子式：C21H29N10O17P3（游离酸）
分子量：786.44 g/mol（游离酸）
精确质量：786.09 g/mol（游离酸）
CAS号：62828-63-1（酸）
纯度：≥ 95%（高效液相色谱法）
形态：水溶液
颜色：无色至微黄
浓度：100 mM - 110 mM
pH值：7.5 ±0.5
光谱特性：最大吸收波长260 nm，摩尔吸光系数22.7 L mmol^-1 cm^-1（Tris-HCl pH 7.5）
m7GP3A参考文献：
Tomoo et al. (2003) Structural features of human initiation factor 4E, studied by X-ray crystal analyses and molecular dynamics simulations. J Mol Biol.328(2):365-83.
Contreras et al. (1982) Simple, efficient in vitro synthesis of capped RNA useful for direct expression of cloned eukaryotic genes. Nucleic Acids Res.10(20):6353-62.
其他规格：
Cat. No. Amount
NU-535S 10 µl (100 mM)
NU-535L 5 x 10 µl (100 mM)
https://www.amyjet.com/products/NU-535L.shtml