Hypoxyprobe--Pacific Blue兼容性好,稳定性高
Pacific Blue是一种明亮的蓝色荧光染料,它在生物医学研究中有着广泛的应用。这种染料能够被紫外激光器的405纳米光线最佳激发,并且在410/455纳米处具有激发/发射特性。Pacific Blue染料的缀合物即使在中性pH条件下也表现出强烈的荧光,这使得它成为流式细胞术、细胞标记和检测等应用中的理想选择。
艾美捷Pacific Blue:
货号:HPB-Pacific Blue
应用:免疫化学检测细胞和组织缺氧,包括免疫荧光、免疫过氧化酶法或流式细胞术。该Hypoxyprobe™-1 Pacific Blue试剂盒在福尔马林固定的石蜡包埋大鼠肿瘤组织中提供强烈的免疫染色,并且背景非常低。
规格:
a. Hypoxyprobe™-1 Pacific Blue试剂盒包含100 mg、200 mg或1000 mg的Hypoxyprobe™-1(匹莫噻唑盐酸盐)。通常,动物研究中使用的剂量为60 mg/kg体重。
b. 一小瓶(100 mg和200 mg试剂盒)或两小瓶(1000 mg试剂盒)含有200微升稀释的Pacific Blue染料结合的IgG1大鼠单克隆抗体(克隆11.23.22.R)。每小瓶包含200微升0.50 mg/ml的Pacific Blue染料-MAb1溶液,稀释液为含1% BSA和0.09%叠氮化钠的PBS。Pacific Blue染料-MAb1的最佳稀释度需由研究人员确定,但发现1:50-100的稀释度能在大鼠肿瘤组织中产生强烈的免疫荧光染色。Pacific Blue染料-MAb1专为免疫荧光设计,能够在荧光显微镜下或用于流式细胞术和Western Blotting应用中观察。免疫荧光中的抗体稀释度通常低于免疫过氧化酶检测系统中使用的稀释度。
不提供:
用于免疫组化分析的标准试剂。
存储:
a. 将Hypoxyprobe™-1固体存放在室温下避光保存(也可在2-8摄氏度下避光存放)。
b. 将Pacific Blue染料-MAb存放在2-8摄氏度避光保存。切勿冷冻。
Pacific Blue的应用:
流式细胞术:Pacific Blue染料常用于流式细胞术中,它可以与各种抗体、肽、蛋白质、示踪剂和扩增底物结合,用于细胞标记和检测。由于其在405纳米激光下具有强烈的荧光,它常与Pacific Green和Pacific Orange染料一起使用,实现三色分析。
免疫组织化学:Pacific Blue也用于免疫组织化学,通过与特定的抗体结合,可以对组织切片中的蛋白质进行标记和检测。
分子生物学:在分子生物学研究中,Pacific Blue琥珀酰亚胺酯可以通过与生物分子上的氨基反应,生成稳定的共价键,从而将染料分子标记到生物分子上。这种标记方法有助于提高核酸检测的灵敏度和特异性。
细胞标记:Pacific Blue用于标记细胞内的特定分子或结构,通过其强荧光性在显微镜下进行观察或通过流式细胞仪进行分选。
Pacific Blue的特点:
高荧光强度:即使在中性pH下,Pacific Blue的缀合物也表现出强烈的荧光,这使得它在各种生物医学实验中都能提供清晰的信号。
兼容性好:Pacific Blue可以与多种生物分子结合,包括抗体和蛋白质,这使得它在多种实验设置中都能使用。
稳定性高:在适当的储存条件下,Pacific Blue染料非常稳定,不易降解。
储存条件:
Pacific Blue染料及其缀合物应在室温下避光存放,也可以存放在2-8摄氏度的环境中。对于兔抗血清等生物制品,建议存放在2-8摄氏度,切勿冷冻。
Pacific Blue染料的这些特性使其成为生物医学研究中不可或缺的工具,尤其是在需要高灵敏度和特异性的实验中。随着生物技术的不断进步,Pacific Blue染料的应用范围预计将进一步扩大。
https://www.amyjet.com/products/HPB-Pacific%20Blue.shtml
Hypoxyprobe--CY 7缺氧探针在细胞培养中的应用
Hypoxyprobe--CY 7是免疫组织化学检测细胞和组织缺氧的一种高效工具。这种创新的试剂盒提供了一种可靠的方法,可以可视化和量化细胞和组织内的缺氧区域,使其成为肿瘤生物学、病理学和药物开发等领域的研究人员的宝贵资源。
Hypoxyprobe--CY 7试剂盒具有几个关键优势。首先,它可以在福尔马林固定、石蜡包埋的组织样本中,实现对缺氧区域的强免疫染色和最小背景的检测。这确保了准确和可靠的结果,对于科学研究和临床研究至关重要。
此外,试剂盒提供多种不同的数量,使实验设计更加灵活。无论使用100毫克、200毫克还是1000毫克的Hypoxyprobe--1,研究人员都可以根据特定的实验需求进行剂量调整。此外,CY 7染料偶联的鼠IgG1单克隆抗吡唑噻唑盐酸盐抗体的包含进一步增强了试剂盒的多功能性,促进了免疫荧光、流式细胞术和Western印迹等应用。
艾美捷CY 7:
货号:HPB-CY 7
应用:用于细胞和组织缺氧的免疫化学检测,包括免疫荧光、免疫过氧化物酶法或流式细胞术。该Hypoxyprobe™-1 CY 7试剂盒在福尔马林固定、石蜡嵌入的鼠肿瘤组织中提供强烈的免疫染色,背景极低。
数量:
a. Hypoxyprobe™-1 CY 7试剂盒包含100 mg、200 mg或1000 mg的Hypoxyprobe™-1(哌莫地尔盐酸盐)。通常,动物研究中使用的剂量为60 mg/kg体重。
b. 一个小瓶(100 mg和200 mg试剂盒)或两个小瓶(1000 mg试剂盒)含有200微升的稀释的CY 7染料偶联IgG1大鼠单克隆抗体(克隆11.23.22.R)。每个小瓶含有200微升的0.50 mg/ml CY 7染料-MAb1溶液,溶剂为PBS,含1% BSA和0.09%叠氮化钠。CY 7染料-MAb1的最佳稀释度由研究人员确定,但发现1:50-100的稀释度在鼠肿瘤组织中能产生强烈的免疫荧光染色。CY 7染料-MAb1专为免疫荧光设计,可在荧光显微镜下或流式细胞术和西方印迹应用中观察。免疫荧光中的抗体稀释通常低于免疫过氧化物酶检测系统中使用的稀释度。
不提供:
用于免疫组织化学分析的标准试剂。
储存:
a. 将Hypoxyprobe™-1固体在室温下避光保存(也可在2-8°C避光保存)。
b. 将CY 7染料-MAb在2-8°C避光保存。请勿冷冻。
需要注意的是,试剂盒未提供用于免疫组织化学分析的标准试剂,因此研究人员在进行实验之前需要确保他们准备好了这些试剂。
https://www.amyjet.com/products/HPB-CY%207.shtml
Sirius Red Total Collagen Detection Kit天狼星红总胶原检测试剂盒
Sirius Red Total Collagen Detection Kit天狼星红总胶原检测试剂盒:
货号 9062
名称 Sirius Red Total Collagen Detection Kit天狼星红总胶原检测试剂盒
样本数量 40个样本(2个重复)
样本类型 来自昆虫细胞的活性重组N末端His标签COX-2 N580A突变体纯化蛋白
胶原蛋白是细胞外基质中的关键结构蛋白,其含量和分布的异常与多种疾病的发展密切相关。准确测定样本中的总胶原蛋白含量对于研究和诊断结缔组织疾病、纤维化疾病以及其他涉及胶原蛋白改变的病理状态至关重要。Chondrex提供的天狼星红染色试剂盒(Sirius Red Total Collagen Detection Kit,货号9062)是一款专为研究设计的高灵敏度检测工具,能够帮助科研人员和临床医生精确测量各种样本中的总胶原蛋白含量。
Sirius Red Total Collagen Detection Kit天狼星红总胶原检测试剂盒检测原理:
天狼星红是一种独特的染料,它能特异性地结合到纤维胶原蛋白(类型I至V)上的[Gly-X-Y]n螺旋结构,并且不区分胶原种类和类型。天狼星红染色试剂盒利用这一特性,通过比色法检测各种含胶原蛋白样本(如组织标本、细胞培养基和培养细胞)中的总胶原蛋白含量。整个检测过程仅需30分钟,每板可测量多达40个(双倍)样本,为胶原蛋白研究提供了快速、高效的检测方案。
应用前景:
基础研究:在组织工程、细胞生物学和分子生物学研究中,用于测定细胞培养和组织样本中的胶原蛋白含量。
疾病诊断:在临床诊断中,用于评估纤维化疾病和结缔组织疾病中胶原蛋白的沉积情况。
药物开发:在新药开发过程中,用于监测药物对胶原蛋白合成和分解的影响。
质量控制:在生物材料和组织工程产品的质量控制中,确保产品中胶原蛋白含量的一致性和准确性。
Sirius Red Total Collagen Detection Kit天狼星红总胶原检测试剂盒优势:
高灵敏度和特异性:天狼星红染料对胶原蛋白的高亲和力确保了检测结果的准确性。
快速检测:整个检测流程仅需30分钟,大大提高了实验效率。
操作简便:试剂盒采用96孔板格式,操作简便,易于自动化。
广泛的样本适用性:适用于组织匀浆、细胞培养基和培养细胞等多种样本类型。
灵活的样本处理:可根据样本类型调整推荐稀释比例,适应不同的实验需求。
长时间的稳定性:试剂在-20°C下可保存12个月,确保了试剂的长期稳定性。
高样本通量:每板可测量多达40个样本,提高了实验的效率和样本处理能力。
宽动态范围:标准范围从500 ug/ml到8 ug/ml,覆盖了从高到低的不同胶原蛋白浓度,适用于广泛的研究和检测需求。
天狼星红染色试剂盒是研究和检测胶原蛋白含量的理想工具,以其快速、准确、简便的操作流程,为您提供了一个可靠的选择。选择Chondrex的天狼星红染色试剂盒,为您的研究和诊断工作带来前所未有的便捷和精确。
https://www.amyjet.com/brand/9062.shtml
Norgen-FFPE RNA纯化试剂盒的高效提取和纯化方案
Norgen的FFPE RNA纯化试剂盒提供了一种快速的方法,可以在短短1小时内从福尔马林固定石蜡包埋(FFPE)组织样本中分离和纯化总RNA(包括microRNA)。使用福尔马林固定组织会导致RNA和蛋白质的交联,包埋组织样本的过程也会导致RNA随着时间的推移而断裂。诺根的FFPE RNA纯化试剂盒提供了允许部分逆转福尔马林修饰的条件,从而获得高质量和高产量的RNA。这些试剂盒能够纯化各种大小的RNA,从大mRNA和核糖体RNA到microRNA(miRNA)和小干扰RNA(siRNA),具体取决于FFPE组织的年龄,因为已知RNA会随着时间的推移而发生断裂。RNA优先从其他细胞成分中纯化,不使用苯酚或氯仿。
用于从 FFPE 样品中快速高效地提取和纯化 RNA(包括 microRNA)
左:高质量和高产量的总RNA
中:使用 Norgen 的 FFPE RNA 纯化试剂盒分离的 FFPE RNA 产量更高
右:多种 RNA 种类的高产量
FFPE RNA Purification Kits FFPE RNA纯化试剂盒:
货号:25300
最大色谱柱结合载量 :高达 50 μg RNA
每个离心柱的最大上样量:650 微升
纯化的 RNA 大小:所有大小,包括小 RNA (< 200 nt)
完成 10 次净化的时间:1-4 小时*
起始材料的最大使用量:
5 片 < 20 μm 厚的石蜡片
25 mg 未切片块
平均收益率:因石蜡块的年龄而异 ~每 1 mg 新鲜 FFPE 仓鼠肾 ~2-3 μg 总 RNA
* 纯化所需的时间因蛋白酶 K 孵育和福尔马林交联逆转的时间而异
FFPE RNA Purification Kits FFPE RNA纯化试剂盒:
从FFPE样本中提取总RNA(包括微型RNA)
无苯酚提取步骤
含有可选择性进行在线DNA去除的DNase
分离的RNA具有最高的质量和完整性
可以分离多种RNA物种
纯化的RNA适用于各种下游应用,包括小RNA测序。
FFPE RNA纯化试剂盒(旋转柱)
每柱最大装载量为650μL,每柱最大结合量为50μg。
FFPE RNA纯化96孔试剂盒(高通量)
纯化基于96孔柱色谱法,使用诺根专有树脂作为分离基质。纯化可以使用真空歧管或离心进行。每孔最大装载量为400μL,每孔最大结合量为50μg。
储存条件和产品稳定性:
所有溶液应保持密封,并在室温下储存。DNA酶I和蛋白酶K应在到达时储存在-20°C下。此套件自装运之日起稳定使用1年。
Component Cat. 25300 (50 preps) Cat. 25400 (2 x 96 preps)
Digestion Buffer A 25 mL 2 x 25 mL
Buffer RL 30 mL 2 x 30 mL
Enzyme Incubation Buffer 6 mL 2 x 6 mL
Wash Solution A 38 mL 2 x 38 mL
Elution Solution A 6 mL 2 x 20 mL
Proteinase K 12 mg 2 x 20 mg
DNase I 1 vial 2 x 500μL
Micro Spin Columns 50 -
96-Well Incubation Plate - 2
96-Well Plate - 2
Adhesive Tape - 8
Collection Tubes 50 -
96-Well Collection Plate - 2
Elution Tubes (1.7 mL) 50 -
96-Well Elution Plate - 2
Product Insert 1 1
https://www.amyjet.com/products/NGB-25300.shtml
牛血清白蛋白BSA,优质牛血浆专有的两步净化/热休克工艺生产
牛血清白蛋白,英文名称为Bovine Serum Albumin,简称BSA。这是一种单体蛋白,具有一个由583个氨基酸残基组成的单一无碳水化合物多肽链。牛血清白蛋白在体内的主要生物学功能是调节牛血液中的胶体渗透压和pH值,以及在循环系统周围运输各种内源性和外源性化合物,如脂肪酸、氨基酸、激素和药物。
Biogradetech的BSA产品,采用优质牛血浆专有的两步净化/热休克工艺生产,得到非常稳定的高质量 BSA 产品。
艾美捷牛血清白蛋白BSA产品列表:
货号 产品名称 规格 备注
BGT-CRS-108 牛血清白蛋白,BSA粉末,低内毒素 10g/50g/100g/500g/1kg 低内毒素
BGT-CRS-109 牛血清白蛋白,BSA粉末,无脂肪酸 10g/50g/100g/500g/1kg 无脂肪酸
BGT-CRS-110 牛血清白蛋白,BSA粉末,标准等级 10g/50g/100g/500g/1kg 标准等级
BGT-CRS-111 牛血清白蛋白,BSA粉末,诊断级 10g/50g/100g/500g/1kg 诊断级
牛血清白蛋白的分类有哪些?
低内毒素BSA:
低内毒素牛血清白蛋白是细胞和组织培养非常理想的选择。可作为无血清和合成培养基营养补充剂的载体,另外作为实验室的一般试剂用来稳定和稀释敏感 蛋白溶液,也可以作为诊断、分析工具,如ELISA。如Biogradetech的BGT-CRS-108系列产品Low Endotoxin, Bovine Serum Albumin/BSA, Powder,内毒素含量低于1.0 EU/mg。
无脂肪酸BSA:
无脂肪酸BSA可用于脂肪代谢相关分析的载体蛋白,也可与某种特异性的脂肪酸结合以形成白蛋白,可应用于增强细胞培养体系的性能;若实验中脂肪或脂肪酸的存在影响激素或者胆固醇的读数时,这个产品是首选。如Biogradetech的BGT-CRS-109系列产品Fatty Acid Free, Bovine Serum Albumin/BSA, Powder。
标准级BSA:
经热处理的普通BSA产品,可作为组织细胞(微生物、动物及昆虫细胞等)培养养料和培养成分以及蛋白分子量标准组份,为性价比较高的BSA产品。如Biogradetech的BGT-CRS-110系列产品Standard Grade, Bovine Serum Albumin/BSA, Powder。
诊断级BSA:
诊断级牛血清白蛋白粉末是专门用于减少可能会产生背景干扰以及细胞培养体系抑制等因素,不含蛋白酶、生物负载以及IgG,具有很低活性的内毒素 (低于3.0 EU/mg)。可用于蛋白标准品、稀释剂、偶联物或者酶稳定剂,也可以应用于高灵敏度的免疫分析实验、细胞培养以及杂交实验等。如Biogradetech的BGT-CRS-111系列产品Diagnostic Grade, Bovine Serum Albumin/BSA, Powder。
无蛋白酶/IgG BSA:
不含有蛋白酶以及RNase酶活性,同时不含IgG,纯度等级更高,作为稀释液或封闭液应用于EIA和ELISA等试验中。
无蛋白酶BSA:
无蛋白酶的牛血清白蛋白可用于细胞培养生产蛋白实验,尤其适用于表达对蛋白酶活性敏感的蛋白。另外无蛋白酶的牛血清白蛋白也非常适合。
无IgG试剂级BSA:
试剂纯级BSA比BSA第五组分具有更好的纯度,该粉末中不含有可能会干扰分析的球蛋白IgG成分。可作为组织细胞培养养料和培养成分以及蛋白分子量标准组份。
BSA第五组分:
BSA第五组分较普通的BSA纯度更高。BSA第五组分使用Cohn方法纯化而来,是生物技术级的产品,一般可用于细胞培养,也可作为半抗原载体、保护剂以及蛋白补充物对照等。
BSA牛血清白蛋白有哪些应用?
牛血清白蛋白是一种重要的蛋白质,具有高度稳定性且对许多生物反应无干扰,同时很容易从商业肉类生产的副产品牛血液中获得。因此,在生物技术中,牛血清白蛋白被广泛应用,包括作为一种通用的阻断剂、PCR稳定剂和细胞培养过程中的营养补充剂。
培养基添加剂:用牛血清白蛋白补充细胞培养基可以促进细胞生长和存活,在细胞和组织培养时,可作为无血清和合成培养基营养补充剂的载体。
通用阻断剂:牛血清白蛋白被广泛用作稀释抗体的载体蛋白,并在免疫测定和免疫检测方案中作为一种常用的蛋白质阻断剂,通过饱和未被占用的结合位点来减少其他非目标分子的蛋白的结合,从而减少样本中抗体的非特异性结合。
稳定剂:牛血清白蛋白也被用作蛋白质试剂反应中的稳定成分,因为它倾向于结合、隔离和稳定溶液中感兴趣的酶,而不与其他蛋白质或分子的功能相互作用或影响。牛血清白蛋白可以作为PCR反应中的稳定剂,增加DNA聚合酶的稳定性,提高反应效率。此外,牛血清白蛋白还可以在容器壁上形成保护膜,防止在免疫分析和PCR反应中酶被粘附在微孔板、管壁或尖端表面,减少酶的损失,从而提高产量。
https://www.amyjet.com/brand/BGT-CRS-111.shtml
Mucin 1 (MUC1) 重组蛋白在肿瘤生物学中的重要作用
Mucin 1(MUC1)是一种高度糖基化的跨膜蛋白,属于粘蛋白家族。它在正常上皮细胞表面形成保护层,起到润滑、保湿和物理屏障的作用。MUC1由多肽核心和侧链糖组成,其核心肽的胞外段含有多个20个氨基酸序列的串联重复序列(VNTRs),这些序列能够被多种MUC1抗体识别,并表现为显性表位。
在肿瘤细胞中,MUC1的表达往往上调,并且其结构、糖基化水平和空间分布可能发生改变。这些改变使得MUC1在肿瘤细胞中的生物学功能与在正常细胞中的不同,它参与了癌症的侵袭、转移、血管生成和凋亡等过程。MUC1的异常糖基化导致新的抗原表位暴露,这些表位可以作为治疗和诊断的特异性靶点。
MUC1在多种肿瘤中高度表达,包括乳腺癌、膀胱癌、胰腺癌和卵巢癌,并与不良预后相关。在正常组织中,正常糖基化的MUC1在上皮细胞表面形成保护性屏障,而在癌细胞中,MUC1的异常高表达和糖基化改变其在细胞内的定位,通过多种信号通路参与细胞活动的调节。
艾美捷Mucin 1 (MUC1) 重组蛋白:
来源:来自E. 杆菌
纯度:≥95%
内毒素:1.0 EU/1 ug(LAL法测定)
Accession No:P15941
片段:Pro 1034 ~ Gln 1151(Accession No:P15941)
序列:MGSSHHHHHH SSGLVPRGSH MASMTGGQQM GRGSEF- PQLSTGV SFFFLSFHIS NLQFNSSLED PSTDYYQELQ RDISEMFLQI YKQGGFLGLS NIKFRPGSVV VQLTLAFREG TINVHDVETQ FNQYKTEAAS RYNLTISDVS VSDVPFPFSA Q
表位标签:N-末端标签:His-标签和T7-标签
分子量:17.2kD
用途:适用于ELISA、Western Blot、免疫沉淀、SDS-PAGE。 其他未测试的应用程序。
推荐稀释度:最佳稀释度由研究人员确定。
储存和稳定性:可在4°C下短期储存。 等分以避免重复冷冻和解冻。 储存于-80 ° C。 等分试样自运输之日起至少稳定12个月。 为了最大限度地回收产品,解冻后和取下瓶盖前离心原始小瓶。
由于MUC1在肿瘤生物学中的重要作用,它已成为免疫和靶向治疗的重要潜在靶点。针对MUC1的治疗策略包括单克隆抗体、抗体药物偶联物(ADCs)、适配子和肿瘤疫苗,其中一些已经进入临床试验阶段。MUC1重组蛋白的开发为这些研究提供了重要的工具和平台。
https://www.amyjet.com/products/155920.shtml
Arbor Assays文献支持产品:皮质酮ELISA试剂盒
文献标题:Adreno-immunological response to healthcare facility noise during rehabilitation of Tropical Screech Owls
研究背景:
野生动物,尤其是那些受到城市扩张影响的动物,经常面临车辆碰撞和与家犬相遇等挑战。这些动物在康复设施中通常在非自然环境下进行康复,这可能会引发压力反应和免疫抑制,进一步影响它们的健康。该研究旨在评估在人类护理下猫头鹰的内分泌和免疫参数。
研究内容:
研究了12只成年猫头鹰在连续49天的时间内,暴露于救援中心音频录音的影响。
分析了猫头鹰的应激反应,包括粪便中的糖皮质激素代谢物(GCM)、血浆皮质酮水平、细菌杀伤能力(BKA)和异嗜细胞与淋巴细胞比率(H/L)。
研究方法:
研究遵守了巴西关于野生物种研究的规范,并获得了相应的伦理许可。
猫头鹰被安置在救援中心的隔离围栏中,暴露于自然环境条件下。
在实验的第15至35天,猫头鹰暴露于模拟救援中心日常管理的声音录音。
收集了每个猫头鹰的粪便样本和8只猫头鹰的血液样本,用于后续的生理参数分析。
研究结果:
粪便样本分析显示,暴露于噪音期间,GCM浓度增加了,而血浆皮质酮水平没有变化。
细菌杀伤能力(BKA)在噪音暴露期间比治疗前有所下降,但H/L比率在不同时间点之间没有差异。这些结果表明,救援中心的噪音暴露会引起猫头鹰的应激反应,导致其体内的调节因子发生变化,需要进一步研究以解决其他可能影响个体在人类护理下恢复和维持的生理变化。
结论:
该研究表明,救援中心的噪音暴露对猫头鹰的健康有潜在的负面影响,这提示在护理和康复野生动物时,需要考虑噪音污染的影响,并采取相应的缓解措施。
在这篇文献中,Corticosterone ELISA Kits皮质酮ELISA试剂盒(K014-H1)被用来测定猫头鹰血浆中的皮质酮(corticosterone)水平。皮质酮是一种糖皮质激素,通常用作评估动物压力反应的生物标志物。以下是ELISA试剂盒在这项研究中的主要用途和作用:
1. 定量分析:试剂盒允许研究人员通过特定的酶免疫测定方法准确测量血浆样本中的皮质酮浓度。
2. 评估压力反应:通过测定皮质酮水平,研究人员能够评估猫头鹰在救援中心的噪音环境中所经历的压力程度。
3. 分析验证:研究人员使用试剂盒进行了分析验证,以确保测试的准确性和可靠性。这包括检查试剂盒对猫头鹰血浆样本的特异性,以及通过稀释测试来确定样本的最佳稀释比例。
4. 数据比较:通过比较噪音暴露前后的皮质酮水平,研究人员能够评估噪音对猫头鹰内分泌系统的影响。
5. 支持研究假设:研究假设是救援中心的噪音会导致猫头鹰的内分泌和免疫参数变化。ELISA试剂盒提供了一种方法来测试这一假设,通过比较不同时间点(噪音暴露前、暴露期间和暴露后)的皮质酮水平。
6. 非侵入性监测:虽然这项研究也使用了粪便样本来测量糖皮质激素代谢物,但ELISA试剂盒允许研究人员通过血液样本来评估短期的压力反应,这是一种非侵入性的方法。
总的来说,Corticosterone ELISA Kits在这项研究中发挥了关键作用,使研究人员能够深入了解噪音对猫头鹰健康影响的生理机制。
除了在上述文献中提到的评估野生动物的压力反应外,这些试剂盒还有多种应用,包括但不限于:
1.基础研究:在生物学和医学研究中,用于研究皮质酮在不同生理和病理状态下的作用,如应激反应、免疫调节、能量代谢和生殖功能。
2.压力评估:在动物福利研究中,用于评估不同物种(包括宠物、农场动物、野生动物和实验室动物)的压力水平,以改善它们的生活环境和管理实践。
3.生态和保护项目:监测野生动物种群的皮质酮水平,以评估环境变化(如栖息地破坏、气候变化和人类活动)对它们健康的影响。
4.内分泌学研究:研究皮质酮在内分泌系统中的作用,包括它如何与其他激素相互作用,以及在疾病状态下的变化。
5.行为研究:探讨皮质酮水平与动物行为之间的关系,如社交行为、领地行为和繁殖行为。
https://www.amyjet.com/products/K014-H1.shtml
Hypoxyprobe:HP-100试剂盒的研究方法和在各种实验中的应用价值
解析文章《Tumour reoxygenation after intratumoural hydrogen peroxide (KORTUC) injection: a novel approach to enhance radiosensitivity》
作者:
Samantha Nimalasena 1,2,5 , Selvakumar Anbalagan 1,5 , Carol Box 1 , Sheng Yu 1 , Jessica K. R. Boult 1 , Nigel Bush 1 , Louise Howell 3 ,Victoria Sinnett 2 , William Murphy 4 , John Yarnold 1 , Simon P. Robinson 1 and Navita Somaiah 1,2
一、研究背景
1.肿瘤缺氧与放疗抗性
肿瘤缺氧是放疗抗性的一个重要原因。自 20 世纪 50 年代 Gray 等人的开创性研究以来,人们一直在寻求增加氧合以提高放疗效果的策略。
2.KORTUC 的潜在作用
前期临床和临床研究报道了瘤内注射过氧化氢(HO)作为实体瘤潜在放疗增敏剂的可能性。KORTUC 是将 HO与 0.83% 透明质酸钠凝胶混合制成的 0.5% HO溶液,用于体内注射,以确保稳定性并减少注射疼痛。作者所在的 I 期临床试验已证实其在局部晚期乳腺癌中的安全性,并显示出有希望的肿瘤反应。当 HO与电离辐射联合应用于放疗抗性细胞系和小鼠肿瘤模型时,观察到增强的细胞毒性作用和显著的肿瘤生长延迟,其机制不仅与辐射导致的 DNA 损伤增强有关,还涉及溶酶体膜透化、重金属离子释放、线粒体膜破坏和细胞凋亡等。瘤内注射 KORTUC 后,HO分解产生水和氧气,或在亚铁离子存在下产生氧气和羟基自由基,氧气微泡的形成可用于引导药物在肿瘤内的传递,这促使作者研究其是否可通过再氧合作用来增强放疗敏感性。
二、研究方法
1.细胞培养
培养人 HCT116 结直肠癌细胞和 LICR - LON - HN5 头颈部癌细胞,使用 Dulbecco’s modified eagle’s medium 补充 10% 胎牛血清,在特定条件下培养,并通过短串联重复(STR)分析和 PCR 分析对细胞系进行验证和支原体检测。
2.药物制备
在完全细胞培养基中制备过氧化氢的系列稀释液(0 - 9.6 mM)。对于瘤内 KORTUC 注射,将 3% v/v 过氧化氢与透明质酸钠凝胶混合,在无菌条件下制备成最终临床浓度为 150mM 0.5% v/v 的溶液。
3.Spheroid 实验
(1)将细胞接种在超低附着 96 孔板中形成球状体。在第 4 天,用不同浓度的 HO处理球状体。
(2)对于缺氧的免疫组化检测,球状体在固定前用 200M pimonidazole(Hypoxyprobe - 1,HP - 100)孵育 24h,然后进行一系列处理和染色,包括用抗 pimonidazole 抗体检测生物还原加合物以及用 DAPI 复染细胞核等,并对球状体直径和平均荧光强度进行量化。
(3)对于实时缺氧成像,球状体用 5M Image - iT Red Hypoxia Reagent 孵育 24h,然后用相同浓度范围的 HO处理,在不同时间点获取明场和荧光图像。
4.Xenograft 实验
(1)将肿瘤细胞注射到六周龄雌性 Foxn1 裸鼠皮下,当肿瘤体积达到约 400mm 时进行处理,将小鼠随机分为三组:非注射对照组、载体注射对照组(仅透明质酸钠)和 KORTUC 组(透明质酸钠 + HO)。
(2)瘤内 KORTUC 注射时,小鼠经腹腔注射麻醉,在超声引导下进行注射,注射后对肿瘤进行不同时间的观察和处理。
5.Dual hypoxia marker 技术
通过腹腔注射 2 - nitroimidazole CCI - 103F(Hypoxyprobe - F6,HP4 - 100)确定基线肿瘤缺氧情况,然后在超声引导下瘤内注射 KORTUC 或载体,再腹腔注射 pimonidazole(Hypoxyprobe,60mg/kg),最后处死小鼠,获取肿瘤组织进行一系列处理和染色,包括用不同抗体检测相关标记物,并进行图像采集和分析。
6.图像分析
使用 cellSens 和 Fiji(ImageJ 应用)对图像进行分析,包括定义和量化缺氧加合物形成,确定再氧合区域,以及对 phospho - ATM 焦点进行量化等。
三、Hypoxyprobe 的 HP - 100试剂盒产品的作用和价值
Substance Name :Pimonidazole Hydrochloride
Brand Name :Hypoxyprobe-1
Company :Hypoxyprobe, Inc (HPI)
1.在 Spheroid 实验中的作用
在球状体缺氧的免疫组化检测中,使用 Hypoxyprobe - 1(HP - 100)试剂盒中的 pimonidazole。球状体在固定前用 200M pimonidazole 孵育 24h,通过检测生物还原加合物来确定缺氧情况。这对于研究 HO处理对球状体缺氧的影响至关重要,能够提供球状体内部缺氧状态的准确信息,帮助研究人员了解不同浓度 HO处理下球状体缺氧的变化规律。
2.在 Xenograft 实验中的作用
在 Dual hypoxia marker 技术中,首先腹腔注射 2 - nitroimidazole CCI - 103F(Hypoxyprobe - F6,HP4 - 100)来确定基线肿瘤缺氧情况。然后在瘤内注射操作后,又腹腔注射 pimonidazole(Hypoxyprobe,60mg/kg)来进一步检测肿瘤缺氧的变化。这些操作能够全面、准确地评估瘤内注射 KORTUC 前后肿瘤缺氧状态的改变,为研究肿瘤再氧合机制提供了关键的数据支持。
Hypoxyprobe F6 Kit
(HPI Catalog # HP4-XXX)
Kit contents:
Solid CCI-103F (Hypoxyprobe-F6)
Diluted Rabbit anti-CCI-103F antisera (PAbF6)
应用: 使用Hypoxyprobe-F6 Kit通过免疫化学检测(包括免疫过氧化物酶、免疫荧光或流式细胞术)测量组织和细胞中的缺氧。
3.总体价值
Hypoxyprobe 品牌的相关试剂盒产品为研究肿瘤缺氧和再氧合提供了有效的工具。通过使用这些试剂盒中的试剂,可以准确地标记和检测肿瘤组织及球状体中的缺氧区域,使得研究人员能够定量分析缺氧程度的变化,对于深入了解 KORTUC 对肿瘤缺氧的影响以及其放疗增敏机制具有不可替代的价值。
四、实验结果
1.HO诱导的再氧合在 3D 球状体模型中呈剂量和时间依赖性
Pimonidazole 加合物形成证实了 HCT116 和 HN5 球状体模型中存在缺氧。Image - iT Red 荧光在 HO处理后 1h 呈剂量依赖性降低,在 [HO]≥1.2 mM 时显著,与球状体再氧合一致。在 HCT116 球状体中,缺氧降低可持续到处理后 6h(≥2.4 mM HO),但在 24h 时荧光重新出现,表明缺氧再次出现。HO处理 24h 后对球状体进行 pimonidazole 加合物染色也进一步证实了球状体再氧合,且在 [HO]>1.2 mM 时观察到该效果。
2.超声成像证实瘤内 KORTUC 注射后 O持续释放
在临床和实验中,瘤内注射 KORTUC 后会立即形成氧气微泡,在异种移植模型中也观察到了这种现象。对 HCT116 肿瘤的超声成像显示,氧气微泡的回声性逐渐降低,但在注射后可持续 1h,而注射透明质酸钠时未观察到微泡形成,证实瘤内 HO可导致氧气微泡持续释放。
3.瘤内 KORTUC 显著降低 HCT116 和 HN5 异种移植物的肿瘤缺氧
通过对 CCI - 103F 和 pimonidazole 加合物形成的量化,发现瘤内 KORTUC 注射导致两种异种移植物模型中的肿瘤缺氧显著降低,与载体或非注射对照组相比,差异显著。而注射透明质酸钠的肿瘤缺氧降低不显著。
4.KORTUC 治疗导致 phospho - ATM 焦点增加,提示再氧合和 ROS 增加
在 HCT116 异种移植物中,对 phospho - ATM 焦点进行评分,发现 KORTUC 注射组中 > 5 phospho - ATM 焦点的细胞显著多于对照组。在 CCI - 103F 阳性和阴性细胞中均有此现象,推测 CCI - 103F 阳性细胞中增加的 phospho - ATM 表达可能是由于 ROS 和 / 或再氧合诱导的 ROS 的共同作用,而 CCI - 103F 阴性细胞中可能是由于 ROS 单独作用。
五、研究结论
1.肿瘤缺氧的改善
瘤内注射 KORTUC 可导致肿瘤缺氧减少,在 3D 球状体和来自两种不同癌细胞系的异种移植物模型中均得到证实,且在体内注射后 1h 内缺氧降低得以维持。
2.放疗增敏机制
这种机制可用于克服缺氧诱导的放疗抗性,且与正在进行的 II 期临床试验中放疗的实施时间相吻合。此外,瘤内 KORTUC 注射还导致 ATM 激活,表明除再氧合外,还增加了 ROS 水平。
3.临床应用前景
如果正在进行的乳腺癌随机对照试验(KORTUC II 期)证实其疗效,该方法可能在其他肿瘤类型中广泛应用,尤其是在放疗是主要治疗手段且缺氧是不良预后和预测生物标志物的肿瘤中。
https://www.amyjet.com/brand/Pimonidazole-Hydrochloride.shtml