Svar Life Science-iLite CD3效应器,评估CD3介导的T细胞激活
CD3是T细胞表面的一组蛋白质复合物,它参与活化细胞毒性T细胞(CD8+幼稚T细胞)和T辅助细胞(CD4+幼稚T细胞)。
T细胞在癌症和自身免疫等许多疾病中起着重要作用,并已经使用了各种免疫疗法策略,以靶向T细胞/T细胞亚群,诱导生理反应,抑制病理反应或通过基因工程改造T细胞(1)。
几种单克隆治疗抗体已经在临床上用于抑制肿瘤进展或抑制自身免疫。近年来,双特异性抗体(BsAbs)已被用于将免疫细胞重定向到肿瘤细胞,同时与CD3 T细胞和肿瘤细胞结合(2)。双特异性T细胞结合剂Blinatumomab,针对B细胞上的CD19和T细胞上的CD3,并于2014年获得FDA批准用于治疗B细胞恶性肿瘤(1)。
Svar Life Science-iLite® CD3效应体测定细胞可以用于评估CD3介导的T细胞激活。
iLite CD3效应体测定细胞是经人工工程处理的细胞(Jurkat,ATCC #TIB-152)。
CD3效应体测定细胞可以单独使用或与靶细胞结合,当CD3受体在效应体细胞上被激活并诱导NFAT通路时,会导致记者酶素表达,从而测量生物应答。
艾美捷Svar Life Science-iLite CD3效应器:
货号:BM5005
检测目标:CD3
技术:基于细胞的报告基因检测
结果读取:定量
检测系统:发光
监管状态:仅限科研使用
Svar Life Science-iLite CD3效应器相关产品:
BM5025 iLite CD19 (+) Target Assay Ready Cells
BM5026 iLite CD19 (-) Target Assay Ready Cells
BM5001 iLite ADCC Effector (V) Assay Ready Cells
BM5004 iLite ADCP Effector Assay Ready Cells
Svar Life Science-iLite CD3效应器文献参考:
1. Houot R, Schultz LM, Marabelle and A, Kohrt H. T-cell-based Immunotherapy: Adoptive Cell Transfer and Checkpoint Inhibition.Cancer Immunol Res 3(10):1115-22 (2015)
2. Goebeler M-E and Bargou R. Blinatumomab: a CD19/CD3 bispecific T cell engager (BiTE) with unique anti-tumor efficacy 57(5):1021-32.(2016)
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Svar Life Science-iLite AAV应答报告检测就绪细胞的四大特点
iLite® AAV Responsive Reporter Assay Ready Cells基于人类胚胎肾细胞293(HEK293)细胞系,非常适合中和抗体检测研究。这些细胞设计用于对iLite® AAV包装检测细胞中制备的AAV载体的转导(相互作用、摄取和核效应)做出反应。
艾美捷Svar Life Science-iLite AAV应答报告检测就绪细胞:
产品代码:BM6100
测定目标:AAV
技术:基于细胞报告基因的分析方法
结果读取:定量
检测系统:发光法
监管状态:仅限研究用途
Svar Life Science-iLite AAV应答报告检测就绪细胞特点和优势:
火萤荧光酶的表达受AAV转导驱动
常规的仁玛荧光酶表达作为内部对照:
可以用于测定生物样本的细胞毒作用
结果不受细胞数量影响
Svar Life Science-iLite AAV响应性报告基因检测细胞与任何血清型的iLite AAV包装检测细胞可以用作AAV载体的中和抗体的测定和滴定的转导抑制(TI)检测。
以下测定的应用说明可用:
使用iLite AAV包装和iLite AAV响应性报告基因检测细胞测定人血清中针对AAV的中和抗体(LABEL-DOC-00580)。
使用iLite AAV包装和iLite AAV响应性报告基因检测细胞滴定人血清中针对AAV的中和抗体(LABEL-DOC-0599)。
相关产品:
BM6002 iLite AAV2 Packaging Assay Ready Cells
BM6005 iLite AAV5 Packaging Assay Ready Cells
BM6006 iLite AAV6 Packaging Assay Ready Cells
BM6008 iLite AAV8 Packaging Assay Ready Cells
BM6009 iLite AAV9 Packaging Assay Ready Cells
Svar Life Science-iLite AAV应答报告检测就绪细胞文献参考:
Gupta V, Lourenço SP, Hidalgo IJ. Development of Gene Therapy
Vectors: Remaining Challenges. J Pharm Sci. 2020
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Svar Life Science-Easy Extract一般操作步骤说明
Svar Life Science-Easy Extract是一种预充式提取装置,建议与CalproGold、CALP0170和CALP0270一起使用。
缓冲液产生了非常稳定的提取物,该设备与称重方法的黄金标准显示出非常好的相关性。提取物也可以通过邮件发送,从而使患者可以在家进行提取。
艾美捷Svar Life Science-Easy Extract(CAL0510)组成:
A. 一个装满提取缓冲液的管子
B. 一个蓝色的接头(盖子)螺在管子上。
C. 一个红色的帽子,带有一个样本棒(白色带凹槽的棒子)
Svar Life Science-Easy Extract提取装置包括:
A. 填充了提取缓冲液的管子
B. 螺旋固定在管子上的蓝色适配器(盖帽)
C. 带有样品杆(白色带有末端凹槽的棍子)的红色盖帽
Svar Life Science-Easy Extract一般操作步骤:
使用Calpro Easy Extract™设备提取Calprotectin的步骤如下所述和说明:
从盒子中取出所需数量的Easy Extract™装置。这些管子可以直接使用,无需与室温平衡。
固定住蓝色适配器,通过逆时针旋转红色盖帽释放棍子(图片1)。
取出附着在红色盖帽上的白色棍子。
将棍子放入粪便样品中,并搅拌以获取代表性的样品。确保棍子的凹槽填满。避免颗粒和种子。还要避免陷入空气泡。重新插入棍子到管子中时,在凹槽周围留有多余的粪便是可取的。
通过管上的蓝色适配器上的孔重新插入棍子。插入棍子时,在漏斗插入部分将超额的粪便擦拭掉。推进直到停止(图片2和3)。
顺时针旋转红色盖帽,直到它扣入锁定位置。确保蓝色适配器和红色盖帽都处于锁定位置(图片4)。
强烈震荡已装配的装置约3分钟,以破碎大颗粒。应完全悬浮粪便在提取缓冲液中。必要时,可以进一步震荡,以使凹槽不含粪便并分解更大的颗粒(图片5和6)。
如果样品将在第二天或以后进行分析,可以在震荡后按照3.2中的表格进行存储。然后重复震荡以确保制备的均匀性。在运行前跳过震荡可能会导致测量到较低水平的Calprotectin。
样品可以安全地存储以便以后分析。有关提取物稳定性的信息,请参考本手册中的3.2。
提取物代表粪便样品的1:50稀释(重量/体积)。现在可以根据所使用的分析试剂盒的说明书进一步稀释。
进行分析时,通过逆时针扭转蓝色适配器并移除适配器、红色盖帽和棍子来打开管子。
文献参考:
1. Tøn H et al.: Improved assay for fecal calprotectin. Clinica Chimica Acta 2000; 292: 41-54.
2. PackageinsertforCalproLabCalprotectinELISA, prod.No.CALP0170andCALP0270(CalproAS)
3. Røseth et al.: Assessment of the neutrophil dominating protein calprotectin in feces. Scand J Gastroenterol 1992;27:793-798.
4. Acevedo et al.: Fecal Calprotectin: A Comparison of Two Commercial Enzymoimmunoassays and Study of Fecal Extract Stability at Room Temperature. Journal of Clinical Medical Research 2018;10:396-404
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Svar Life Science-PhiCal高灵敏度测量人类粪便中粪便钙卫蛋白浓度
PhiCal™检测是一种定量ELISA,用于测量人类粪便中粪便钙卫蛋白的浓度,一种中性粒细胞蛋白,是粘膜炎症的标志。PhiCal™测试可用作体外测试诊断以帮助诊断炎性肠病(IBD):克罗恩病和溃疡性结肠炎,并将IBD与肠易激综合征区分开来。
艾美捷Svar Life Science-PhiCal(#CPT400)检测原理:
PhiCal™粪便钙卫蛋白免疫测定是一种酶联免疫吸附测定系统通过比色检测。该测试使用了一种针对钙卫蛋白的多克隆抗体,该抗体与一种酶连接免疫吸附测定系统。稀释样品中存在的钙卫蛋白被吸附的抗体结合到塑料井的表面。酶偶联抗体与捕获的抗原结合随后,酶催化底物转化为有色产物。强度颜色与结合的共轭物的量成正比,因此与捕获的钙卫蛋白的量成比例。使用提供的标准计算样品中钙卫蛋白的浓度。
Svar Life Science-PhiCal试剂盒包含的试剂:
抗体涂层板:12条条带,每条带8个孔,涂有针对钙保护蛋白的抗体。该板存放在密封袋中,并附有干燥剂。
结合物:15毫升碱性磷酸酶标记的免疫亲和纯化IgG抗体(来自兔子),针对钙保护蛋白,溶解在含Proclin 300作为防腐剂的缓冲液中。
底物:1瓶含有15毫升底物的缓冲液。随时可用。
洗涤液:50毫升20倍浓缩液,需要用蒸馏水稀释。
稀释液:20毫升10倍浓缩液,含Proclin 300作为防腐剂,需要用蒸馏水稀释。
提取液:2瓶50毫升的2.5倍浓缩液,含Proclin 300作为防腐剂,需要用蒸馏水稀释。该浓缩液对眼睛和皮肤有刺激性。
校准品:5瓶各含1毫升已知浓度的钙保护蛋白溶液(6.25、12.5、25、50和100 ng/ml),含Proclin 300作为防腐剂。每个标准的值印刷在瓶标签上。
对照品:含Proclin 300作为防腐剂。
对照品1(低浓度):1瓶含有1.0毫升。随时可用。请勿稀释。该批次的特定范围值印刷在瓶标签上,以ng/ml表示。近似范围 = 20-40 ng/ml 或(50-100 µg/g)。
对照品2(高浓度):1瓶含有1.0毫升。随时可用。请勿稀释。该批次的特定范围值印刷在瓶标签上,以ng/ml表示。近似范围 = 45-75 ng/ml 或(112.5-187.5 µg/g)。
性能特征
水相线性:
水相线性通过稀释Calprotectin参考材料(来自挪威奥斯陆的Magne Fagerhol博士)进行测试。对每个稀释水平进行了三次重复测量。每个水平的平均观察值与相应的预期值进行比较,如下图所示。水相线性的评估表明,该检测在6.25 - 100 ng/ml或15.625 - 250 µg/g范围内具有可接受的线性和准确性。这项研究还作为第二源标定验证,因为用于标定的标准随试剂盒提供,而用于评估线性的标准则是稀释的纯化第二源材料。
功能灵敏度:
功能灵敏度(FS)与线性数据一起确定了结果准确和精确的最低浓度;低于检测的功能灵敏度的患者结果报告为<FS。为了确定PhiCal™测试的功能灵敏度,使用试剂盒标准品的3个浓度(12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.125 ng/ml)在6天内进行了三次或四次的测定;通过使用稀释缓冲液将6.25 ng/ml的标准品稀释获得3.125 ng/ml水平。每个水平的%CV与其相应的浓度进行绘图。对于测定的浓度3.125 ng/ml,6.25 ng/ml和12.5 ng/ml的准确性和精确性是可接受的。可报告范围将受限于最低校准值:6.25 ng/ml。
在典型的样本稀释比例为1:2500的情况下,6.25 ng/ml相当于每克粪便中的15.6(µg Calprotectin)/(g stool)。
Svar Life Science-PhiCal文献参考:
1. Fagerhol MK, et al. Calprotectin (The L1 leukocyte protein) in: Smith V.L. and Dedman J.R. (eds.): Stimulus response coupling: The role of intracellular calcium-binding proteins. CRC Press, Boca Raton 1990,p.187-210
2. Røseth AG, et al. Assessment of the neutrophil dominating protein calprotectin in feces. A methodologic study. Scand J Gastroenterol 1992;27:793-798.
3. Røseth AG, et al. Correlation between faecal excretion of Indium-111-labelled granulocytes and
calprotectin, a granulocyte marker protein, in patients with inflammatory bowel disease. Scand J
Gastroenterol 1999;34:50-54.
4. Tibble J, et al. A simple method for assessing intestinal inflammation in Crohn’s disease. Gut 2000;47:506-513.
5. Bunn SK, et al. Fecal calprotectin: Validation as a noninvasive measure of bowel inflammation in childhood inflammatory bowel disease. J Pediatr Gastroenterol Nutr 2001;33:14-22
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FabGennix-染色剂硝化纤维膜蛋白染色剂,传统Ponceau S染色的更好替代品
StainODye 是一种可逆且灵敏的工具,用于检测蛋白质在硝酸纤维素膜上的转移效率。它具有快速的反应时间,每条带的最低检测限为25-50 ng,且协议简单快速,是传统Ponceau S染色的更好替代品。与其他如Amido Black或Coomassie等永久性结合蛋白质的染料不同,StainODye对蛋白质具有很高的亲和力,但可以在PBS或封闭溶液中被洗去。此外,StainODye能高亲和力地标记糖基化蛋白,结果可视化总蛋白。
定量西方印迹实验需要将蛋白质均匀转移到膜上,以便比较结果分析。虽然在电泳前有准确的方法将固定数量的蛋白加载到凝胶上,但目前很少有方法能够定量蛋白质在硝酸纤维素/带电膜上的转移效率。转移不均匀、未转移和气泡是可能影响定量西方印迹结果的一些问题。StainODye 允许在蛋白质转移到带电膜后,立即在硝酸纤维素或其他转移介质上直接可视化蛋白质。膜在StainODye中显现的蛋白带呈红色或粉红色。这些染色膜可以拍照保存为永久记录。StainODye是可逆的,可以通过用水或PBS冲洗来洗去。或者,它们也可以直接在西方印迹的封闭缓冲液(BlockOBuffer)中孵育。StainODye配有防腐剂,室温下大约具有1年的保质期。
艾美捷FabGennix-染色剂硝化纤维膜蛋白染色剂:
货号 FGI-1933
描述:FabGennix的StainODye是一种用于硝基纤维素膜的可逆蛋白染料,它是对Ponceau S染料在硝基纤维素/带电膜上用于定量蛋白转移效率的高效而准确的替代品。
体积:200毫升
浓度:即用型溶液
储存:室温
应用:25毫升的StainODye可用于25-50个迷你印迹。
FabGennix-染色剂硝化纤维膜蛋白染色剂优点:
快速确定纯硝化纤维/支撑硝化纤维和带电膜上蛋白质的转移效率
避免由于转移不均匀、不转移和气泡而导致西方印迹的重做
染色膜可用于拍摄照片,在西方印迹方案的质量控制步骤中
与硝基纤维素和PVDF膜兼容
防腐剂可使产品在常温下的货架寿命达1年
FabGennix-染色剂硝化纤维膜蛋白染色剂方案:
在一个干净的玻璃容器中倒入大约10-15毫升染料,用于10 x 12厘米的膜。
在摇摆平台上缓慢摇动膜1-2分钟进行孵育。
移开并丢弃多余染料,用蒸馏水或PBS洗涤膜,直到背景清晰。
为获得最佳的信噪比,可能需要进行多次冲洗。
膜可以立即拍照,干燥的膜可以处于湿润状态下拍照。
长期存储时可能会有条带轻微消退。最好的结果是通过立即记录颜色强度获得的。
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FabGennix-PDEase套件,在2-3小时内提供可重复的结果
cAMP是一种普遍存在于所有哺乳动物细胞中的第二信使。这种信使调节各种激素、神经递质、生长因子、细胞因子和其他配体受体的信号转导。cAMP磷酸二酯酶是水解和截断源自受体激活的cAMP信号传导的唯一途径。cAMP水解活性由一个相当大的多酶家族提供,该家族具有独特的细胞内定位和调节特性。在各种PDE家族(PDE1-PDE11)中,PDE4有4个基因(PDE4A、PDE4B、PDE4C、PDE4D)以多剪接变体形式表达。
PDE4活性测量需要两步反应,在第一步反应中,cAMP被PDE活性水解成非环状。通过使PDE源变性或加入PDE4选择性抑制剂来停止该反应,然后通过第二步酶反应将AMP转化为腺苷达到平衡。由于腺苷是中性的,因此通过离子交换色谱法用电荷分离cAMP或AMP。为了避免其他PDE的背景贡献,该PDE测定在针对PDE4优化的底物浓度下进行。PDE4酶活性与第一反应中形成的腺苷成正比。
PDE4活性测量在2-3小时内提供可重复的结果。该试剂盒提供足够的试剂,与内部控制一起处理50或100个样本。试剂盒试剂在推荐条件下储存可稳定6个月。该试剂盒的内容物必须按照瓶子标签和规格表上的指示在不同温度下储存。
艾美捷FabGennix-PDEase套件(PDEase-100)组成成分:
孵育缓冲液试剂A:5毫升
孵育缓冲液试剂B:5毫升
孵育缓冲液试剂C:5毫升
PDE底物缓冲液D:10毫升
PDE底物:2倍200微升
抑制剂缓冲液:50毫升
第二酶源(10倍浓缩液): 2倍250微升
树脂悬浮液(10倍浓缩液):100毫升
PDE4酶对照:1倍200微升
文献参考:
Joshi, Rashika, et al. "Phosphodiesterase (PDE) inhibitor torbafylline (HWA 448) attenuates burn-induced rat skeletal muscle proteolysis through the PDE4/cAMP/EPAC/PI3K/Akt pathway." Molecular and cellular endocrinology 393.1 (2014): 152-163. PMID24973766
Al-Tawashi, Azza, and Chris Gehring. “Phosphodiesterase Activity Is Regulated by CC2D1A That Is Implicated in Non-Syndromic Intellectual Disability.” Cell Communication and Signaling?: CCS 11 (2013): 47. PMC3704924
Gobejishvili, Leila et al. “Rolipram Attenuates Bile Duct Ligation–Induced Liver Injury in Rats: A Potential Pathogenic Role of PDE4.” The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 347.1 (2013): 80–90. PMC. PMC3781411
Gobejishvili, Leila et al. “S-Adenosylmethionine Decreases Lipopolysaccharide-Induced Phosphodiesterase 4B2 and Attenuates Tumor Necrosis Factor Expression via cAMP/Protein Kinase A Pathway.” The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 337.2 (2011): 433–443. PMC3083110
Li, Yuting et al. “Regulation of Amygdalar PKA by β-Arrestin-2/phosphodiesterase-4 Complex Is Critical for Fear Conditioning.”Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 106.51 (2009): 21918–21923. PMC2799795
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FabGennix-脂联素抗体,生物标志物的潜力及在心血管疾病中的作用
脂联素:一种仅由脂肪细胞(脂肪细胞)产生和分泌的蛋白质激素,可调节脂质和葡萄糖的代谢。 脂联素影响身体对胰岛素的反应。 脂联素对血管壁上的细胞也有抗炎作用。 高血脂水平与降低心脏病发作的风险有关。
艾美捷FabGennix-脂联素抗体:
货号:ADPN-101AP
验证应用:ELISA、IHC、IP、WB
宿主:兔子
物种交叉反应性:人、小鼠、猪
免疫原:取自猪脂联素蛋白氨基酸区域150-243的合成肽。
数量:100 µg
体积:200 µl
浓度:0.64-0.65 µg/µl,在抗体稳定缓冲液中
免疫球蛋白:IgG
形式:亲和纯化
纯化方法:固定抗原亲和色谱法
克隆性:多克隆
储存:长期存储于-20⁰C。
应用:
ELISA 1:10,000
Immunohistochemistry 1:50-1:150
Immunoprecipitation 1:200
Western Blot 1:500
小鼠肝脂联素
一抗:ADPN-101AP;在IHC阻断缓冲液DAB(棕色)染色和苏木精QS(蓝色)复染中稀释1:100,放大40倍。FFPE部分。
FabGennix-脂联素抗体基本信息:
概述:参与棕色脂肪细胞分化、对药物的反应、检测氧化应激、葡萄糖稳态和脂肪酸氧化。参与调节DNA生物合成过程。
分子功能:激素活性;受体结合
细胞亚定位:细胞周缘;胶原三聚体;细胞外空间;细胞表面;内质网;细胞核周质
表达:分泌
替代命名:30 kDa脂肪细胞相关蛋白抗体;ACDC抗体;ACRP 30抗体;脂肪细胞抗体;脂肪细胞C1q和胶原结构域含蛋白抗体;脂肪细胞相关30 kDa蛋白抗体;脂肪细胞特异性分泌蛋白抗体;脂联素抗体;脂肪细胞、C1Q和胶原结构域含蛋白抗体;AdipoQ抗体;脂肪最丰富基因转录本1抗体;脂肪特异性胶原样因子抗体;ADIPQTL1抗体;ADPN抗体;APM 1抗体;C1q和胶原结构域含蛋白抗体;GBP 28抗体;明胶结合蛋白抗体;明胶结合蛋白28抗体
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FabGennix-脂联素阻断肽在调节代谢及能量平衡中的关键角色
脂联素:一种仅由脂肪细胞(脂肪细胞)产生和分泌的蛋白质激素,可调节脂质和葡萄糖的代谢。 脂联素影响身体对胰岛素的反应。 脂联素对血管壁上的细胞也有抗炎作用。 高血脂水平与降低心脏病发作的风险有关。
艾美捷FabGennix-脂联素阻断肽:
货号:P-ADPN
已验证的应用:免疫去除、免疫竞争
免疫原:在猪脂联素蛋白的氨基酸区域150-243内取得的合成肽。
数量:250 微克
体积:100 微升
形式:抗原阻断肽
储存:长期储存在-20⁰C
使用冷冻切片机在20μm厚的冷冻组织切片上切割ADPN-101AP的IHC。切片固定在适合免疫染色的明胶涂层载玻片上。切片用pH 7.4的10 mM PBS中的0.5%Triton-X100渗透15分钟。用含阻断蛋白的5X DiuOBuffer阻断1小时以降低背景,然后用一抗ADPN-101AP(在1XDiluOBuffer中稀释1:100)孵育过夜。用PBS洗涤3次后,加入生物素化的抗兔IgG(在1X DiluOBufer中稀释1:200)作为二次抗体,并插管2小时。使用Vector的链霉抗生物素蛋白偶联HRP和ABC试剂盒开发颜色。载玻片用甲基绿反染,用乙醇浓度逐渐增加,然后用二甲苯逐渐脱水。幻灯片是使用Thermo Scientific的派拉蒙介质安装的。样品用福尔马林固定。图A为阴性对照,图B和C用ADPN-101AP染色
FabGennix-脂联素阻断肽基本信息:
概述:参与棕色脂肪细胞分化、对药物的反应、检测氧化应激、葡萄糖稳态和脂肪酸氧化。参与DNA生物合成过程的调节。
分子功能:激素活性;受体结合能力。
亚细胞定位:细胞周边;胶原三聚体;细胞外空间;细胞表面;内质网;细胞质周核区域。
表达:分泌。
其他命名方式:
30 kDa脂肪细胞互补相关蛋白抗体。
ACDC抗体。
ACRP 30抗体。
脂肪细胞抗体。
脂肪细胞C1q和胶原结构域蛋白抗体。
脂肪细胞互补相关30 kDa蛋白抗体。
脂肪细胞特异性分泌蛋白抗体。
脂联素抗体。
脂联素、C1Q和胶原结构域蛋白抗体。
脂肪最丰富基因转录本1抗体。
脂肪特异性胶原样因子抗体。
ADIPQTL1抗体。
ADPN抗体。
APM 1抗体。
C1q和胶原结构域蛋白抗体。
GBP 28抗体。
明胶结合蛋白抗体。
明胶结合蛋白28抗体。
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