Svar Life ScienceiLite-C5a检测就绪细胞,高通量C5a生物活性分析
C5a是一种由补体蛋白5(C5)产生的74个氨基酸的小蛋白片段。当补体被激活时,C5会被C5转化酶裂解成C5a和C5b。
凝血和纤溶途径的因素也能将C5裂解成C5a。(1) C5a是一种非常强效的过敏毒素和趋化肽,能够增加血管通透性,
刺激髓系细胞释放细胞因子,以及在内皮细胞上表达粘附分子。(2)
主要的促炎效应功能是由C5a与七次跨膜G蛋白偶联受体C5aR1(CD88)结合所诱导的。在C5被裂解成C5a和C5b后不久,C5a会被羧肽酶代谢,该酶去除C末端的精氨酸并形成C5a-desArg,这是一种较不强效的C5aR1配体。C5a也能结合到第二个受体C5aR2(C5L2或GPR77),然而,与C5a结合C5aR2相关的生物效应在文献中尚不清楚,已有抗炎和促炎效应的描述。
C5a受体在多种细胞和组织中表达,C5a激活的效应取决于C5a受体的位置。(3, 4)虽然补体系统是先天免疫防御对抗病原的重要部分,但研究表明,过度的补体激活,包括C5a-C5aR相互作用,在多种自身免疫和神经退行性疾病以及急性和慢性炎症状况中扮演着核心角色。鉴于C5a-C5aR在多种疾病中的病理作用的强有力证据,配体和受体都是有希望的治疗靶点。目前正在进行药理学候选药物抑制C5a和C5aR1的临床研究。(2,3,5)
艾美捷Svar Life Science-C5a检测就绪细胞(#BM4075)应用:
iLite® C5a检测就绪细胞可用于研究C5a、受体C5aR1及其在测试样本中的相互作用,包括人类血清。以下检测的应用说明可供参考:
功能性C5a的定量(LABEL-DOC-0510)
C5aR抑制活性的检测(LABEL-DOC-0511)
注意事项:
仅供研究使用。本产品仅供专业实验室研究使用。使用该产品产生的数据和结果不应用于诊断程序或人类治疗应用。
iLite® C5a检测就绪细胞是一种人类来源的稳定转染细胞系,被归类为一级基因修饰微生物。应按照欧盟指令(2009/41/EC)处理iLite®检测就绪细胞,并在符合这些法规的许可的密闭使用设施中处置。当按照制造商的产品规格使用时,即视为已满足欧盟指令2009/41/EC关于基因修饰微生物密闭使用的要求。
通常被认为是生物危害性废物的化学品和制剂残留物应在处置前通过高压灭菌或使用漂白剂进行灭活。所有此类材料应按照既定的安全程序进行处置。
在接受iLite®检测就绪细胞的交付时,接收方同意不进行这些细胞的次级培养,不尝试进行次级培养或将它们交给第三方,并且只直接在检测中使用它们。iLite®基于细胞的产品受Svar Life Science AB拥有的Z利保护,任何复制所提供的iLite®检测就绪细胞的企图都是对这些Z利的侵犯。
Svar Life Science-C5a检测就绪细胞文献参考:
1. Manthey et al. Complement Component 5a (C5a). Int J Biochem Cell Biol.2009 Nov;41(11):2114-7.
2. Woodruff et al. Inhibiting the C5–C5a receptor axis. Mol Immunol. 2011 Aug;48(14):1631-42.
3. P N Monk et al. Function, Structure and Therapeutic Potential ofComplement C5a Receptors. Br J Pharmacol 2007 Oct;152(4):429-48.
4. Colley et al. Structure and characterization of a high affinity C5a monoclonal antibody that blocks binding to C5aR1 and C5aR2 receptors.MAbs. 2018 Jan;10(1):104-117.
5. Hawksworth et al. New concepts on the therapeutic control of complement anaphylatoxin receptors. Mol Immunol. 2017 Sept;89:36-43.
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Svar Life ScienceiLite-Complement TCC,专为生物材料相容性研究设计
补体TCC是一种酶免疫测定法,用于半定量测定可溶性人EDTA血浆中的末端补体复合物(sTCC,也称为TCC或sC5b-9)。该产品仅供专业人士使用。结果不得用于临床诊断或患者管理,仅供研究使用。
艾美捷Svar Life Science-Complement TCC:
产品代码 COMPL TCC RUO
检测目标 TCC
规格 96孔
技术 ELISA
结果读取 半定量
范围 0-400纳克/毫升
检测时间 2小时
检测系统 辣根过氧化物酶/TMB在450纳米处读取
监管状态 仅供研究使用
Svar Life ScienceiLite-Complement TCC内容:
一个带有微孔板孔(12x8)的框架,孔内涂有抗TCC单克隆抗体,密封在带有干燥剂的铝箔包装中。
1.5毫升低浓度对照(LC)。可直接使用。
1.5毫升高浓度对照(HC)。可直接使用。
2瓶30毫升稀释液(Dil)。可直接使用。
15毫升含有辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗TCC抗体的结合物。可直接使用。
15毫升底物TMB。可直接使用。
15毫升终止液(0.5M硫酸)。可直接使用。
30毫升洗涤液,30倍浓缩。
6瓶1.5毫升的校准液,含有人类纯化的TCC,浓度分别为0纳克/毫升、10纳克/毫升、50纳克/毫升、100纳克/毫升、200纳克/毫升和400纳克/毫升。可直接使用。
Svar Life ScienceiLite-Complement TCC检测原理:
该检测是一种比色夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)。样本在测定稀释液中稀释,并将100微升稀释后的样本转移到微孔板孔中,在室温下孵育60分钟。在第一次孵育期间,样本中的TCC被预先涂覆在微孔板表面的抗TCC单克隆抗体捕获。经过洗涤去除未结合的物质后,添加第二种辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆抗体以检测与孔结合的TCC。再孵育30分钟后,孔再次被洗涤,并添加底物并进行孵育。颜色发展在30分钟后停止,颜色在分光光度计中被测量。颜色与与孔结合的TCC量直接成比例。通过与校准样本的颜色发展进行比较,确定TCC的量。
结果计算
从450纳米波长中减去参考波长,并计算所有样本的平均光密度(OD)值。通过将校准液的OD值与浓度作图,构建校准曲线。六个校准液的值分别为0纳克/毫升、10纳克/毫升、50纳克/毫升、100纳克/毫升、200纳克/毫升和400纳克/毫升。根据校准曲线读取未知样本的浓度。
注意:本使用说明书中的所有性能数据都是使用四参数曲线拟合计算的。用户可以选择不同的曲线拟合。建议每个实验室使用选定的曲线拟合建立参考范围。
注意:计算样本中TCC的浓度时,必须根据上面的协议进行稀释补偿,即10倍稀释。如果样本结果超出校准曲线的范围,建议进行更高倍数的稀释,并在计算样本中的浓度时考虑这一点。
校准器曲线示例:
请注意:上图显示了半定量标准曲线的示例,不应用于实际样品解释
文献参考:
Bergseth et al. Molecular Immunology 56 (2013) 232–239. An international serum standard for
application in assays to detect human complement activation products
Deppisch et al, Kidney Int. 1990 Feb;37(2):696-706. Fluid phase generation of terminal
complement complex as a novel index of bioincompatibility
Harboe et al, Adv Drug Deliv Rev. 2011 Sep 16;63(12):976-87. Advances in assay of
complement function and activation.
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Svar Life Science-iLite CD20(+)Svar-Luc检测就绪细胞,补体依赖性细胞毒性活性检测
补体依赖性细胞毒性(CDC)是一种重要的机制,用于清除目标细胞。当补体因子C1q与抗体结合的目标细胞的Fc结构域结合时,就会启动CDC(1)。C1q复合物触发经典补体级联反应,激活C3和C5转化酶。这导致膜攻击复合物(MAC)的形成,该复合物可以通过形成孔洞破坏细胞膜,导致目标细胞溶解(2,3)。
CDC在人体免疫反应中扮演着重要角色,通过清除包括细菌、细胞外生物和肿瘤细胞在内的病原体来消除疾病。此外,CDC是一种机制,通过这种机制,针对CD20和CD38的治疗性抗体可能会介导它们的效果。因此,研究CDC活性是研究具有抗癌效果的潜在治疗性抗体的重要工具(4,5)。Svar Life Science开发了带有Svar Life Science的荧光素酶构建体的报告细胞,命名为Svar荧光素酶,表达CD20和CD38。这种检测可以用来研究不同样本中补体依赖性细胞毒性的活性。它也可以用来筛选治疗性抗体开发中感兴趣的抗体的效率和/或检测。
Svar Life Science-iLite CD20 (+) Svar Luc检测就绪细胞用于研究测试样本中的补体依赖性细胞毒性,包括人类血清,以调查不同样本中补体依赖性细胞毒性的活性。这些细胞还可以用于评估感兴趣抗体在治疗性抗体开发中的效率和筛选。此外,这些细胞可以用于量化补体依赖性细胞毒性活性的抑制。
iLite CD20 (+) Svar Luc检测就绪细胞是经过基因工程改造的人类B淋巴细胞Ramos细胞(ATCC #CRL-1596),它们能够持续表达Svar荧光素酶。
艾美捷Svar Life Science-iLite CD20(+)Svar-Luc检测就绪细胞:
产品代码 BM5028
检测目标 CDC(补体依赖性细胞毒性)
技术 基于细胞的报告基因检测
结果读取 定量
检测系统 发光
监管状态 仅供研究使用
Svar Life Science-iLite CD20(+)Svar-Luc检测就绪细胞相关产品:
BM5001 iLite ADCC Effector (V) Assay Ready Cells
BM5004 iLite ADCP Effector Assay Ready Cells
BM5005 iLite CD3 Effector Assay Ready Cells
Svar Life Science-iLite CD20(+)Svar-Luc检测就绪细胞文献参考:
1. Lara S, Heilig J, Virtanen A, Kleinau S. Exploring complementdependent cytotoxicity by rituximab isotypes in 2D and 3D-cultured Bcell lymphoma. BMC Cancer. 2022 Dec;22(1):678.
2. Noris M, Remuzzi G. Overview of Complement Activation and Regulation. Semin Nephrol. 2013 Nov;33(6):479–92.
3. Reis ES, Mastellos DC, Ricklin D, Mantovani A, Lambris JD.Complement in cancer: untangling an intricate relationship. Nat Rev Immunol. 2018 Jan;18(1):5–18.
4. Hogarth PM, Pietersz GA. Fc receptor-targeted therapies for the treatment of inflammation, cancer and beyond. Nat Rev Drug Discov.2012 Apr;11(4):311–31.
5. Wang SY, Weiner G. Complement and cellular cytotoxicity in antibody therapy of cancer. Expert Opin Biol Ther. 2008 Jun;8(6):759–68.
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Svar Life Science-WIESLAB补充替代途径,特异性检测人血清中的补体缺乏
Svar Life Science-Wieslab 补体系统替代途径试剂盒是一种免疫测定法,用于定性测定功能性替代补体途径和测定人血清中的补体缺乏。
Wieslab补体测定将途径的特异性激活与使用对补体激活产生的末端补体复合物C5b-9的新表位特异的标记抗体相结合。产生的C5b-9的量与补体系统的功能活性成正比。与传统的溶血检测相比,方便的ELISA技术具有几个优点。
艾美捷Svar Life Science-WIESLAB补充替代途径:
产品代码 COMPLAP330
检测目标 CDC(补体依赖性细胞毒性)
技术 基于细胞的报告基因检测
结果读取 定量
检测系统 发光
监管状态 仅供研究使用
内容:
一个带有无色可分离孔(12x8)的框架,密封在带有干燥剂的铝箔包装中。孔内涂有LPS。
35毫升替代途径稀释液(Dil AP),标记为红色。
13毫升含有碱性磷酸酶标记的抗C5b-9抗体的结合物(蓝色)。
13毫升即用型底物溶液。
30毫升30倍浓缩的洗涤液。
0.2毫升阴性对照(NC),含有人血清(需像患者血清样本一样稀释)。
0.2毫升阳性对照(PC),含有冻干人血清,见下文“阳性对照的重组”。 除了洗涤液和对照品外,试剂盒中的所有试剂都可以直接使用。试剂应储存在2-8°C的环境中,除了阳性对照。阳性对照必须储存在-20°C。
Svar Life Science-WIESLAB补充替代途径检测原理:
Wieslab®补体测定结合了补体溶血测定的原理,使用对新抗原特异性的标记抗体进行活化补体激活。新抗原的产生量与以下物质的功能活性成正比补充途径。
在补体系统AP试剂盒中,微量滴定条的孔涂有特定的活化剂替代途径。患者血清在含有特定阻断剂的稀释剂中稀释,以确保只有替代途径被激活。在将稀释的患者血清在孔中孵育期间,补体被特定的涂层激活。
然后洗涤孔,用标记的特异性碱性磷酸酶检测C5b-9抗MAC形成过程中表达的新抗原的抗体。在进一步的洗涤步骤后,通过与碱性物质孵育来检测特异性抗体磷酸酶底物溶液。补体激活量与颜色相关强度,并以吸光度(光密度(OD))来测量。
Svar Life Science-WIESLAB补充替代途径文献参考:
1.Walport M, Complement (First of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1058-1066.
2.Walport M, Complement (Second of two parts) N Engl J Med 2001, 344, 1140-1144.
3.Roos A, Bouwman L, Munoz J et al., Functional characterization of the lectin pathway of
complement in human serum. Mol Immunol 2003, 39, 655-668.
4.Nordin Frediksson G, Truedsson L, Sjöholm A. New procedure for detection of complement
deficiency by ELISA. J Imm Meth 1993, 166, 263-270.
5.M.A. Seelen et al, Functional analysis of the classical, alternative and MBL pathways of the
complement system: standardization and validation of a simple ELISA. J Imm Meth 2005,
296,187-198.
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FabGennix-StripOBuffer兔抗牛乳铁蛋白多克隆抗体的应用验证方案
FabGennix-StripOBuffer兔抗牛乳铁蛋白多克隆抗体-乳铁蛋白抗体亲和纯化。
艾美捷FabGennix-兔抗牛乳铁蛋白多克隆抗体:
货号 BLAC-101AP
验证应用 CM, ELISA, IF, IHC, IP, WB
物种交叉反应性 牛, 绵羊
宿主 兔
免疫原 纯化的牛乳铁蛋白
替代命名 CKRX抗体, GIG12抗体, 生长抑制蛋白12抗体, Kaliocin 1抗体, LTF抗体, 中性粒细胞乳铁蛋白抗体, Talalactoferrin alfa抗体
数量 100 微克
体积 200 微升
形式 亲和纯化免疫球蛋白
免疫球蛋白及浓度 0.5 毫克/毫升IgG在抗体稳定缓冲液中
储存 长期储存请在-20°C下保存。
推荐稀释比例:
ELISA 1:10,000
免疫细胞化学 1:200
免疫荧光 1:200
免疫组织化学 1:200
免疫沉淀 1:200
西方印迹 1:500
FabGennix-StripOBuffer兔抗牛乳铁蛋白多克隆抗体应用验证:
BLAC-101AP的WB与PC-BLAC。1:500抗体稀释液迪卢奥巴夫。稀释液仅供参考。上面未列出的应用程序不一定排除使用这种抗体。调查人员打算使用尚未使用的应用程序验证后可以要求免费样品。
FabGennix-StripOBuffer兔抗牛乳铁蛋白多克隆抗体文献参考:
1. Sharma AK. Purification, crystallization and preliminary crystallographic analysis of mare lactoferrin.Acta Crystallogr D Biol Crystallogr. 1996 Nov;52(Pt 6):1196-8.
2. Ashida K, Sasaki H, Suzuki YA, Lonnerdal B. Cellular internalization of lactoferrin in intestinal epithelial cells. Biometals. 2004 Jun;17(3):311-5. Related Articles, Links
3. Haridas M. Structure of human diferric lactoferrin refined at 2.2 A resolution. Acta Crystallogr D Biol Crystallogr. 1995 Sep;51(Pt 5):629-46.
4. Zimecki M, Artym J, Chodaczek G, Kocieba M, Kruzel ML. Protective effects of lactoferrin in Escherichia coli-induced bacteremia in mice: relationship to reduced serum TNF alpha level and increased turnover of neutrophils. Inflamm Res. 2004 Jul;53(7):292-6. Epub 2004 Jun 25.
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FabGennix-幽门螺杆菌抗体参数和性能说明
在维持高尔基体复合体、膜运输和胞吐作用中发挥重要作用,通过与肌球蛋白VI和Rab8的相互作用实现。将肌球蛋白VI连接到高尔基体复合体,并在高尔基体带状结构形成中发挥重要作用。对RNA病毒感染引起的IFNB诱导产生负向调节。
艾美捷FabGennix-幽门螺杆菌抗体:
货号 HPYL-101AP
验证应用:CM, ELISA, ICC, IF, IP, IHC, WB
宿主:兔
物种交叉反应性:幽门螺杆菌
免疫原:热杀灭并变性的幽门螺杆菌提取物
数量:100 微克
体积:200 微升
浓度:0.80-1.35 微克/微升的抗体稳定缓冲液中
形式:亲和纯化
克隆性:多克隆
储存:长期储存请在-20°C下保存。
应用协议:
共聚焦显微镜:1:200
酶联免疫吸附测定(ELISA):1:5,000
免疫细胞化学:1:200
免疫荧光:1:300
免疫组织化学:1:200
免疫沉淀:1:150
西方印迹:1:500
FabGennix-幽门螺杆菌抗体应用验证:
HPYL-101AP的IHC与胃黏膜。
DiluObuffer中1:250的抗体稀释液。
FabGennix-幽门螺杆菌抗体结构:
分子功能:多聚泛素结合、Rab GTP酶结合、蛋白质C末端结合
亚细胞位置:细胞质 › 核周区域。高尔基体。高尔基体 › 反式高尔基网络。细胞质囊泡 › 自噬体。细胞质囊泡。回收内体
表达:在眼房水(蛋白水平)中存在。在小梁网中高度表达。在非色素睫状上皮、视网膜、大脑、肾上腺皮质、胎儿、淋巴细胞、成纤维细胞、骨骼肌、心脏、肝脏、大脑和胎盘中表达。
结构:与HD、Rab8(RAB8A和/或RAB8B)(活性GTP结合形式)、GTF3A、TRAF3、TBK1、MYO6和TFRC相互作用。结合线性泛素链。与LC3家族成员MAP1LC3A、MAP1LC3B、GABARAP、GABARAPL1和GABARAPL2相互作用;OPTN磷酸化增加
替代命名:幽门螺杆菌抗体
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FabGennix-Lyn抗体,亲和纯化的酪氨酸蛋白激酶
非受体酪氨酸蛋白激酶,在调节先天和适应性免疫反应、造血、对生长因子和细胞因子的反应、整合素信号传导以及对DNA损伤和基因毒性剂的反应中发挥作用。
FabGennix-Lyn抗体:亲和纯化的酪氨酸蛋白激酶Lyn抗体。
艾美捷FabGennix-Lyn抗体:
货号 LYN-101AP
验证应用:ELISA, IHC, IP, WB
宿主:兔
免疫原:人Lyn蛋白中425-525氨基酸区域的合成肽段。
数量:100 微克
体积:200 微升
浓度:在抗体稳定缓冲液中为0.55-0.75 微克/微升
形式:亲和纯化
克隆性:多克隆
储存:长期储存请在-20°C下保存。
应用协议:
DB:1:10,000
酶联免疫吸附测定(ELISA):1:10,000
免疫组织化学:1:100
免疫沉淀:1:200
西方印迹:1:500
FabGennix-Lyn抗体应用验证:
狒狒脾Lyn
一抗:LYN-101AP;在IHC阻断缓冲液中稀释1:100。DAB(棕色)染色和苏木精Qs(蓝色)复染。在Leica DM4000.FFPE切片上放大40倍。
FabGennix-Lyn抗体结构:
分子功能:激酶、转移酶、酪氨酸蛋白激酶
亚细胞位置:细胞膜、细胞质、高尔基体、膜、细胞核
表达:单核细胞、胎盘、胎儿大脑、肺、肝脏、肾脏和表皮样、造血和神经细胞,以及原发性神经母细胞瘤
结构:属于蛋白激酶超家族。酪氨酸蛋白激酶家族。SRC亚家族
替代命名:
AA407514抗体
EC 2.7.10.2抗体
FLJ26625抗体
Hck 2抗体
JTK 8抗体
Lck/Yes相关新型蛋白酪氨酸激酶抗体
LYN抗体
ONCOGENE LYN抗体
p53Lyn抗体
p56Lyn抗体
酪氨酸蛋白激酶LYN抗体
V yes 1 Yamaguchi肉瘤病毒相关癌基因同源抗体
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FabGennix-葡萄糖-6-磷酸催化亚基抗体解决方案
可能在内质网中将葡萄糖-6-磷酸水解成葡萄糖。可能负责通过糖原分解和糖异生产生葡萄糖。
FabGennix-葡萄糖-6-磷酸催化亚基抗体:亲和纯化的葡萄糖-6-磷酸酶催化亚单位2抗体。
艾美捷FabGennix-葡萄糖-6-磷酸催化亚基抗体:
货号 G6PC2-101AP
验证应用:ELISA, IP, WB
宿主:兔
物种交叉反应性:人类、猴子、小鼠、大鼠
免疫原:G6PC2蛋白的氨基酸区域80-130内的合成肽段,与较大的葡萄糖6磷酸酶变体常见。
数量:100 微克
体积:200 微升
浓度:在抗体稳定缓冲液中为0.55-0.65 微克/微升
形式:亲和纯化
克隆性:多克隆
储存:长期储存请在-20°C下保存。
应用协议:
酶联免疫吸附测定(ELISA):1:10,000
免疫沉淀:1:200
西方印迹:1:500
FabGennix-葡萄糖-6-磷酸催化亚基抗体应用验证:
小鼠小肠葡萄糖-6-磷酸,催化亚基
一抗:G6PC2-101AP;在IHC阻断缓冲液DAB(棕色)染色和苏木精QS(蓝色)复染中稀释1:50。放大20倍。FFPE部分。
FabGennix-葡萄糖-6-磷酸催化亚基抗体结构:
分子功能:糖异生
亚细胞位置:内质网膜;多通道膜蛋白
表达:特异性表达在胰岛细胞中,特别是β细胞来源的细胞。在睾丸、肾脏、肌肉、肝脏、肺、脾脏、大脑、垂体、胃底或心脏中未检测到。
结构:属于葡萄糖-6-磷酸酶家族。
替代命名:
AW107337抗体
G-6-Pase抗体
g6pc抗体
G6PT抗体
葡萄糖-6-磷酸酶α抗体
GSD1抗体
GSD1a抗体
MGC163350抗体
MGC93613抗体
RP23-281C18.19抗体
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