ALPCO小鼠超敏胰岛素ELISA试剂盒样本量参考方案
ALPCO小鼠超灵敏胰岛素ELISA是夹心型免疫测定。96孔微孔板用胰岛素特异性单克隆抗体包被。将标准品、对照品和样品加入含有结合物的微孔板威尔斯孔中。然后将微孔板在微孔板振荡器上以700-900 rpm孵育。第一次孵育完成后，用洗涤缓冲液洗涤威尔斯孔并吸干。加入TMB底物，并在微孔板振荡器上以700-900 rpm第二次孵育微孔板。第二次孵育完成后，加入终止液，并通过分光光度计在450 nm处测量光密度（OD）。产生的颜色强度与样品中胰岛素的量成正比。
艾美捷小鼠超敏胰岛素ELISA试剂盒（ALP-80-INSMSU-E01）设计用于5µL或25µL的样本量。适用于该测定的五个标准品和两个对照品将根据所使用的样本量来确定。
供应的材料1：
Component Quantity Preparation
Insulin Microplate(96 wells) 12x8 strips Ready to use
Zero Standard 5mL Ready to use
"Standards (A-G)*
(0.025,0.09,0.188,0.5,1.25,3.75,6.9
ng/mL)" 1 mL each Ready to use
Control Levels 1,2,and 3* 1 vial each Lyophilized
Conjugate Stock 0.9 mL 11X
Conjugate Buffer 9 mL Ready to use
Wash Buffer Concentrate 40 mL 21X
TMB Substrate 12 mL Ready to use
Stop Solution 12 mL Ready to use
Plate Sealers 3 Ready to use
供应的材料2：
Component Quantity Preparation
Insulin Microplate (96 wells) 10x(12x8 strips) Ready to use
Zero Standard 5mL Ready to use
"Standards (A-G)*
(0.025,0.09,0.188,0.5,1.25,3.75,
6.9 ng/mL)" 1 mL each Ready to use
Control Levels 1,2,and 3* 1 vial each Lyophiized
Conjugate Stock 9 mL 11X
Conjugate Buffer 90 mL Ready to use
Wash Buffer Concentrate 2x200 mL 21X
TMB Substrate 120 mL Ready to use
Stop Solution 120 mL Ready to use
Plate Sealers 20 Ready to use
注意事项：
1. 此试剂盒中包含的人血液制品已检测HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在。这些病毒的检测方法不能保证病毒的完全不存在；因此，应将所有试剂视为潜在的感染源。处理和处置应符合所有适当的国家和地方法规，以处理潜在的生物危害材料。
2. 所有来自动物来源的材料均为BSE阴性。然而，应避免与反刍动物接触。
3. 避免直接与皮肤接触。
4. 本产品不可内服。
5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。
6. 不要使用嘴来移液任何试剂。
7. 此试剂盒中的试剂是特定批次的，不得替换。
8. 不要使用超过有效期的试剂。
9. 不建议更改测试程序，可能会影响测试结果。
样本处理：
血清和血浆样本适用于此测定。不需要稀释或处理样本。然而，如果样本的胰岛素浓度高于最高标准，则应将样本稀释在零标准中，并重复分析。为了减少潜在的时间相关的样本漂移，建议在使用前彻底涡旋每个样本，并在不停顿的情况下执行每次移液操作。样本可以在2-8°C下储存24小时，然后在此测定中分析。对于更长时间，建议在<-20°C下储存。避免反复冻融循环。
小鼠超敏胰岛素ELISA试剂盒文献参考：
Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.
小鼠超敏胰岛素ELISA试剂盒5µL样本量：
标准0.188、0.5、1.25、3.75和6.9 ng/mL（C-G）以及对照水平2和3。
https://www.amyjet.com/products/ALP-80-INSMSU-E01.shtml
ALPCO活性GLP-1(7-36)酰胺化学发光ELISA试剂盒样本处理方案
ALPCO活性GLP-1（7-36）酰胺化学发光ELISA用于定量测定人、小鼠和大鼠EDTA血浆中的活性胰高血糖素样肽-1（GLP-1）（7-26）酰胺。仅供研究使用。不用于诊断程序。
艾美捷活性GLP-1(7-36)酰胺化学发光ELISA试剂盒（ALP-80-GLP1A-CH01）检测原理：
ALPCO STELLUX™活性GLP-1 (7-36)酰胺化学发光酶联免疫吸附测定（ELISA）是一种夹心型测定法。96孔微孔板涂有针对活性GLP-1 (7-36)酰胺N端的单克隆抗体。标准品、对照品和样本被加入到含有测定缓冲液的微孔板孔中。然后，微孔板在室温下放置在微孔板振荡器上，以700-900转每分钟的速度振荡孵育。第一次孵育完成后，孔被洗涤缓冲液清洗并吸干。然后加入检测抗体，微孔板再次在设定为700-900转每分钟的微孔板振荡器上孵育。检测抗体孵育后，板被洗涤，每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）结合的链霉亲和素（SA）。板在室温下在设定为700-900转每分钟的板振荡器上孵育，洗涤并吸干。加入化学发光底物，微孔板在2分钟后使用化学发光板读取器读取。产生的光强度与样本中活性GLP-1 (7-36)酰胺的含量成正比。
供应的材料：
Component Quantity Preparation
Active GLP-1 Microplate (96 wells) 12x8 strips Ready to use
"Standards (A-F,Zero)*
(500,120,30,10,4.0,1.5,and O pg/mL)" 1 vial each Lyophilized*
Control Levels 1,2 and 3* 1 vial each Lyophilized*
Assay Buffer 10mL Ready to use
DetectorAntibody 1 vial each Lyophilized*
Detector Antibody Buffer 14 mL Ready to use
Streptavidin-HRP 30μL 501X
Streptavidin-HRP Buffer 12 mL Ready to use
Wash Buffer Concentrate 100 mL 21X
Substrate A 6mL Ready to use
Substrate B 6 mL Ready to use
Plate Sealers 3 Ready to use
*请参阅每个试剂盒随附的分析证书，了解批次特定信息、标准浓度、控制范围和复溶量
所需材料：
用于分配高达1000 μL的精密移液管（带一次性吸头）
用于分配高达100 μL的可重复使用或多通道移液器
用于试剂准备的量筒和移液管
用于试剂准备的蒸馏水/去离子水
微孔板洗涤器或洗涤瓶
注意事项
1. 此试剂盒中包含的人血液制品已检测HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在。这些病毒的检测方法不能保证病毒的完全不存在；因此，所有试剂应被视为潜在的传染性物质。处理和处置应遵循所有适当的国家和地方法规，以处理潜在的生物危害材料。
2. 所有来自动物来源的材料均为牛海绵状脑病（BSE）阴性。然而，所有材料应被视为潜在的传染性物质。
3. 避免直接与皮肤接触。
4. 本产品不可内服。
5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。
6. 不要用嘴吸取任何试剂。
7. 此试剂盒中的试剂是特定批次的，不得替换。
8. 不要使用超过有效期的试剂。
9. 不建议更改测试程序，可能会影响测试结果。
活性GLP-1(7-36)酰胺化学发光ELISA试剂盒样本处理：
人、小鼠和大鼠的EDTA血浆适用于此测定。应使用BD™ P800血液收集和保存系统进行样本收集，该系统含有DPP-IV抑制剂和其他蛋白酶抑制剂混合物（产品编号366420）。或者，可以将全血收集到含有EDTA的冰镇玻璃管中，预先根据制造商的说明加入适量的DPP-IV抑制剂（EMD Millipore Cat #DPP4）和抑蛋白酶。混合后将管子存放在冰浴中。立即以1,000 xg离心管子10分钟，或将管子放在冰上并在一小时内离心。如果样本将在收集后2小时内检测，可以将样本保存在冰上。对于更长时间的储存，应将样本分装后存放在≤ -70°C。避免多次（>3次）冻融循环。样本解冻后，在进行测定前将样本保持在冰上。建议在将样本加载到板上之前，先将所有样本在2 - 8°C下以3,000 xg离心10分钟。含有生物素、溶血、黄疸或脂血的样本在测定中未显示出干扰。然而，建议避免使用明显溶血或脂血的样本。
典型标准曲线：
以下结果仅用于演示目的，不能代替通过测定获得的数据。每次测定都必须运行带有对照的标准曲线。数据分析采用1/y2加权的A5参数曲线拟合。
文献参考：
Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.
https://www.amyjet.com/products/ALP-80-GLP1A-CH01.shtml
ALPCO高特异性超灵敏胰高血糖素ELISA解决方案
胰高血糖素是一种29个氨基酸的多肽激素，由胰岛α细胞合成和分泌。胰高血糖素通常通过促进糖异生和糖原分解来提高血液中葡萄糖的浓度，与胰岛素的作用相反。胰高血糖素和胰岛素根据血糖浓度分泌到血液中是维持血糖水平的主要机制。该胰高血糖素夹心ELISA试剂盒是使用两种胰高血糖蛋白特异性单克隆抗体开发的。该试剂盒对胰高血糖素具有高度特异性，与Glicentin、Oxytomodulin、GLP-1和GLP-2没有明显的交叉反应。
ALPCO超灵敏胰高血糖素ELISA用于定量测定血浆、血清和培养基上清液中的胰高血糖素。仅供研究使用。不用于诊断程序。
艾美捷超灵敏胰高血糖素ELISA（ALP-48-GLUHUU-E01）检测原理：
这种用于测定胰高血糖素的ELISA试剂盒基于含有两种单克隆抗体的夹心酶免疫测定。将标准品或样品以及HRP标记的抗体加入到涂有抗胰高血糖素抗体的平板孔中。在培养过程中，抗体-抗原标记的抗体复合物在孔的表面形成。在孵育和冲洗掉多余的标记抗体后，最终用3,3'，5,5'-四甲基联苯胺（TMB）测定HRP酶活性，并计算胰高血糖素的浓度。
超敏感胰高血糖素ELISA性能总结
该试剂盒可在2.2 143.6 pmol/L的范围内测量胰高血糖素。
该测定在18 20小时+0.5小时内完成。
一个试剂盒可以测量40个样本，每个样本双重测定。
测试样本：血浆（EDTA-2Na）、血清和细胞培养上清。
样本体积：10 μL。
试剂盒中的96孔板由8孔条组成，条可以单独使用。
灵敏度：0.3 pmol/L。
稳定性和储存：
所有组分应储存在2-8ºC。
试剂盒在制造日期后的24个月内在条件下稳定。
有效期在试剂盒的标签上标明。
内容总结：
涂有针对胰高血糖素的单克隆抗体的板
胰高血糖素标准品冻干粉
针对胰高血糖素的HRP标记单克隆抗体溶液
酶底物溶液（TMB）
停止溶液
缓冲液
浓缩洗涤溶液
粘合膜
测定特性：
此ELISA试剂盒用于血浆、血清和细胞培养上清中胰高血糖素的定量测定。该试剂盒以其敏感的定量和高特异性为特点。此外，它不受样本中其他组分的影响。胰高血糖素标准品是高纯度合成产品。
特异性：
此ELISA试剂盒对胰高血糖素具有高特异性，对Glicentin、Oxyntomodulin、GLP-1和GLP-2没有显著的交叉反应。
超灵敏胰高血糖素ELISA性能特点：
超灵敏胰高血糖素ELISA文献参考：
1. Unger, R.H., Eisentraut, A.M., McCall, M.S., Keller, S., Lanz, H.C. and Madison, L.L. (1959)：Glucagon antibodies and their use for immunoassay for glucagon. Proc．Soc．Exp．Biol．Med.,10
2： 621 - 6232. Unger, R.H., Eisentraut, A.M., McCall, M.S. and Madison, L.L. (1961)： Glucagon antibodiesand an immunoassay for glucagon. J．Clin．Invest.,40：1280-1289
3. Nishino, T., Kodaira, T., Shin, S., Imagawa, K., Shima, K., Kumahara, Y., Yanaihara, C. andYanaihara, N.（1981）： Glucagon radioimmunoassay with use of antiserum to glucagon Cterminal fragment. Clin．Chem.,27：1690-1697
4. Jaspan, J.B., and Rubenstein, A.H. (1977)： Cerculating glucagon：Plasma profiles andmetabolism in health and disease. Diabetes., 26：887-902
5. Glucagon related peptides (1993)： (Okuno, G., Ohneta, A. and Shima, K.ed.) pp．52-65．Ishiyaku, Tokyo
https://www.amyjet.com/products/ALP-48-GLUHUU-E01.shtml
ALPCO-c-肽ELISA测定程序及标准曲线参考
ALPCO C肽ELISA用于定量测定人血清和血浆中的C肽。
艾美捷c-肽ELISA（ALP-80-CPTHU-E01.1）检测原理：
ALPCO C肽ELISA是一种夹心型免疫分析法。96孔微孔板涂有针对C肽的单克隆抗体。标准品、对照品和样本与测定缓冲液一起加入微孔板孔中。然后，微孔板在室温下以700-900转每分钟的速度在微孔板振荡器上孵育。第一次孵育完成后，用洗涤缓冲液清洗孔并吸干。然后加入结合物，微孔板再次在设定为700-900转每分钟的微孔板振荡器上孵育，洗涤并吸干。加入TMB底物，微孔板在室温下第三次在设定为700-900转每分钟的微孔板振荡器上孵育。第三次孵育完成后，加入停止溶液，并通过分光光度计在450 nm处测量光密度（OD）。产生的色度强度与样本中C肽的含量成正比。
供应的材料：
Component Quantity Preparation
C-peptide Microplate (96 wells) 12x8 strips Ready to use
Zero Standard (0 pM) 5 mL Ready to use
"Standards (A-E)
(20,100,300,1000,3000 pM)*" 1 vial each Lyophilized*
Diabetes Control Levels 1 and 2* 1 vial each Lyophilized*
Assay Buffer 6 mL Ready to use
Conjugate Stock 1.2 mL 11X
Conjugate Buffer 12 mL Ready to use
Wash Buffer Concentrate 40 mL 21X
TMB Substrate 12 mL Ready to use
Stop Solution 12 mL Ready to use
Plate Sealers 3 Ready to use
*请参阅每个试剂盒随附的分析证书，了解批次特定的标准浓度、控制范围和复溶量。
c-肽ELISA测定程序：
使用前应将所有试剂和微孔板条平衡至室温（18-25°C）。使用前轻轻混合所有试剂。每次测定运行和每次使用多个微孔板时，都必须进行标准曲线测定。所有标准品、对照品和样本都应双重测定。
1. 在打开铝箔袋之前，应将微孔板平衡至室温。为标准品、对照品和样本的双重测定准备足够的微孔板条。剩余的微孔板条应存放在含有干燥剂的紧闭铝箔袋中，储存在2-8°C。
2. 分别向各自孔中移液25 µL的标准品、对照品和样本。参见试剂准备。
3. 向每个孔中移液50 µL的测定缓冲液。
4. 用板封膜覆盖微孔板，在室温下振荡孵育1小时，振荡速度为700-900 rpm。
5. 倒掉孔中的内容物，并使用微孔板洗涤器每次用350 µL的工作强度洗涤缓冲液洗涤微孔板6次（参见试剂准备）。或者，使用配备洗涤喷嘴的洗涤瓶将工作强度洗涤缓冲液注入孔中。（不建议使用多通道移液器。必须用足够且相等的力量分配洗涤缓冲液，以便正确洗涤孔。）在洗涤之间，将微孔板倒置以丢弃液体，并在吸水纸上用力拍打倒置的微孔板。在最后一次洗涤后（自动或手动），通过倒置并在吸水纸上用力拍打微孔板，从孔中去除任何残留的洗涤缓冲液和气泡。
6. 向每个孔中移液100 µL的工作强度结合物（参见试剂准备）。
7. 用板封膜覆盖微孔板，在室温下振荡孵育1小时，振荡速度为700-900 rpm。
8. 倒掉孔中的内容物，并使用350 µL的工作强度洗涤缓冲液洗涤微孔板6次（参见步骤5）。
9. 向每个孔中移液100 µL的TMB底物。
10. 用板封膜覆盖微孔板，在室温下振荡孵育15分钟，振荡速度为700-900 rpm。
11. 向每个孔中移液100 µL的停止溶液，并轻轻摇晃微孔板以混合内容物。在进行下一步之前去除任何气泡。
12. 将微孔板放入能够读取450nm吸光度的微孔板读取器中。在加入停止溶液后应立即分析微孔板，且不得超过30分钟。
典型标准曲线：
以下结果仅用于演示目的，不能代替通过测定获得的数据。
c-肽ELISA文献参考：
Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.
https://www.amyjet.com/products/ALP-80-CPTHU-E01.1.shtml
ALPCO-超敏胰岛素ELISA检测原理&结果计算
ALPCO超敏胰岛素ELISA用于定量测定人血清和血浆中的胰岛素。
艾美捷超敏胰岛素ELISA（ALP-80-CPTHU-E01.1）检测原理：
ALPCO超敏感胰岛素ELISA是一种夹心型免疫分析法。96孔微孔板涂有针对胰岛素的单克隆抗体。标准品、样本和对照品与检测抗体一起加入微孔板孔中。然后，微孔板在室温下以700-900转每分钟的速度在微孔板振荡器上孵育。第一次孵育完成后，用洗涤缓冲液清洗孔并吸干。加入TMB底物，微孔板在室温下第二次在微孔板振荡器上以700-900转每分钟的速度孵育。第二次孵育完成后，加入停止溶液，并通过分光光度计在450 nm处测量光密度（OD）。产生的色度强度与样本中胰岛素的含量成正比。
供应的材料：
Component Quantity Preparation
Insulin Microplate (96 wells) 12x8 strips Ready to use
Zero Standard (0 μlU/mL) 5 mL Ready to use
"Standards (A-E)
(0.15,1,3,10,20 μlU/mL)" 1 mL each Ready to use
Diabetes Control Level 1* 1 vial each Lyophilized*
Detection Antibody 12 mL Ready to use
Wash Buffer Concentrate 40 mL 21X
TMB Substrate 12 mL Ready to use
Stop Solution 12 mL Ready to use
Plate Sealers 3 Ready to use
**请参阅每个试剂盒随附的分析证书，了解批次特定的控制范围和复溶量。
超敏胰岛素ELISA测定程序：
使用前应将所有试剂和微孔板条平衡至室温（18-25°C）。使用前轻轻混合所有试剂。每次测定运行和每次使用多个微孔板时，都必须进行标准曲线测定。所有标准品、样本和对照品都应双重测定。
1. 在打开铝箔袋之前，应将微孔板平衡至室温。为标准品、对照品和样本的双重测定准备足够的微孔板条。剩余的微孔板条应存放在含有干燥剂的紧闭铝箔袋中，储存在2-8°C。
2. 分别向各自孔中移液25 µL的标准品、对照品和样本。参见试剂准备和分析证明书中的对照品重组说明。
3. 向每个孔中移液100 µL的检测抗体。
4. 用板封膜覆盖微孔板，在室温下振荡孵育1小时，振荡速度为700-900 rpm。
5. 倒掉孔中的内容物，并使用微孔板洗涤器每次用350 µL的工作强度洗涤缓冲液洗涤微孔板6次（参见试剂准备）。或者，使用配备洗涤喷嘴的洗涤瓶将工作强度洗涤缓冲液注入孔中。（不建议使用多通道移液器。必须用足够且相等的力量分配洗涤缓冲液，以便正确洗涤孔。）在洗涤之间，将微孔板倒置以丢弃液体，并在吸水纸上用力拍打倒置的微孔板。在最后一次洗涤后（自动或手动），通过倒置并在吸水纸上用力拍打微孔板，从孔中去除任何残留的洗涤缓冲液和气泡。
6. 向每个孔中移液100 µL的TMB底物。
7. 用板封膜覆盖微孔板，在室温下振荡孵育30分钟，振荡速度为700-900 rpm。
8. 向每个孔中移液100 µL的停止溶液，并轻轻摇晃微孔板以混合内容物。在进行下一步之前去除任何气泡。
9. 将微孔板放入能够读取450nm吸光度的微孔板读取器中。在加入停止溶液后应立即分析微孔板，且不得超过30分钟。
超敏胰岛素ELISA结果计算：
从标准品构建标准曲线。零标准品应作为空白，其平均值应从每个孔中减去。建议使用软件程序计算标准曲线并确定样本的浓度。ALPCO超敏感胰岛素ELISA是一种配体结合测定法，其响应与分析物浓度呈S形关系。目前接受的此类曲线的参考模型使用4或5参数逻辑（pl）拟合，因为这些模型在更大范围内优化了准确性和精确性。尽管三次样条和其他模型是可接受的方法，但它们通常在低高端的范围内显示出较低的测定内准确性和精确性。
在以下示例中，使用了5-pl曲线拟合，以最大化低浓度样本的准确性和精确性。然而，由于个别实验室条件的影响，所有模型在可检测范围的最低和最高端的准确性和精确性都是有限的。因此，在解释分析物响应变得非线性的结果时，应始终谨慎。
典标准曲线：
以下结果仅用于演示目的，不能代替通过测定获得的数据。
超敏胰岛素ELISA文献参考：
Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.
https://www.amyjet.com/products/ALP-80-INSHUU-E01.1.shtml
ALPCO高特异性总GIP ELISA试剂盒，3.5小时内完成
肠促胰岛素激素，包括依赖葡萄糖的胰岛素促进多肽（GIP）和胰高血糖素样肽1（GLP-1），是一组在摄食后促使兰氏岛β细胞释放更多胰岛素的胃肠激素。肠肽GIP最初是从猪的上小肠中分离出来的。猪、牛和人的GIP序列已被确定，每个都包含42个氨基酸，且序列高度保守。猪和牛的肽与人的在两个和三个位点上有所不同。Takeda等人已经分离出编码GIP前体的人类cDNA，并确认GIP属于血管活性肠肽（VIP）/胰高血糖素/分泌素家族。GIP是一种在吸收葡萄糖或脂肪后由十二指肠内分泌K细胞释放的胃肠肽激素。GIP是实验动物和人类中胰岛素的强效释放剂，前提是血糖水平高于基础水平。在正常人中，口服葡萄糖负荷或餐后GIP的血浆水平会升高。在新诊断的胰岛素依赖型糖尿病患者中，餐后这种增加低于正常水平。现在人们认识到GIP受体也表达在如十二指肠、小肠、胰岛α细胞、脂肪细胞和成骨细胞等器官和细胞中。这些结果表明，除了它们的血糖调节效应外，GIP可能还具有许多生理效应。GIP通过酶二肽基肽酶4（DPP-4）迅速失活为GIP，血液半衰期仅为几分钟。DPP-4抑制剂可以延长GIP的半衰期。
ALPCO总GIP ELISA试剂盒用于定量测定人EDTA血浆和培养基上清液中的总GIP[GIP（1-42）和GIP（3-42）]。仅供研究使用。不适用于诊断程序。
艾美捷总GIP ELISA试剂盒（ALP-48-GIPHU-E01）检测原理：
此ELISA试剂盒用于测定人总GIP，基于夹心酶免疫测定法。板孔涂有高纯度的小鼠单克隆抗体，针对人GIP。标准品或样本加入进行第一步免疫反应。孵育和洗涤后，作为第二步，加入针对人GIP的HRP标记抗体溶液，形成孔表面抗体-抗原-标记抗体复合物。经过第二次孵育和冲洗掉多余的标记抗体后，通过3,3',5,5'四甲基联苯胺（TMB）测定HRP酶活性，并计算总人GIP的浓度。
总GIP ELISA试剂盒性能特点：
总GIP ELISA试剂盒性能总结：
该试剂盒可在3.1~200 pM的范围内测量血浆中的总GIP。
测定在3.5小时内完成。
一个试剂盒可以测量40个样本，每个样本双重测定。
测试样本：人血浆（EDTA-2Na）和细胞培养上清。
样本体积：50µL
96孔板试剂盒由8孔条组成，可以单独使用。
稳定性和储存：
所有组分应储存在2-8°C。
从生产日期起，该试剂盒在这种条件下稳定24个月。
有效期在试剂盒盒标签上标明。
测定特性：
此ELISA试剂盒用于定量测定人血浆和细胞培养上清样本中的总GIP。该试剂盒以其敏感的定量和高特异性为特点。GIP标准品是一种高纯度的合成产品。
分析特异性：
此ELISA试剂盒对人类GIP(1-42)和GIP(3-42)具有高特异性，对胰高血糖素、GLP-1(7-37)、GLP-1(7-36) NH2、GLP-1(9-36) NH2和GLP-2无交叉反应。
文献参考：
1. Brown,J.C., Mutt, V. and Pedersen,R.A. (1970) Further purification of a polypeptide demonstratingenterogastrone activity. J.Physiol. 209, 57-64
2. Jörnvall H, Carlquist M, Kwauk S, Otte SC, McIntosh CH, Brown JC, Mutt V. (1981) Amino acidsequence and heterogeneity of gastric inhibitory polypeptide (GIP). FEBS Lett. 123,205-210.
3. Moody,A.J., Damm Jorgensen, K.and Thim, L.(1981)Diabetologia 21, 306, abstr.
https://www.amyjet.com/products/ALP-48-GIPHU-E01.shtml
ALPCO小鼠胰岛素ELISA试剂盒准备材料、样本处理及结果计算
ALPCO小鼠胰岛素ELISA用于定量测定小鼠血清和血浆中的胰岛素。仅供研究使用。不用于诊断程序。
艾美捷小鼠胰岛素ELISA试剂盒（ALP-80-INSMS-E01）检测原理：
ALPCO小鼠胰岛素ELISA是一种夹心型免疫测定法。96孔微孔板上涂有胰岛素特异性单克隆抗体。将标准品、对照品和样品与共轭物一起加入微孔板孔中。然后将微孔板在室温下在微孔板振荡器上以700-900rpm的速度孵育。第一次孵育完成后，用洗涤缓冲液洗涤细胞并吸干。加入TMB底物，在室温下在微孔板振荡器上以700-900rpm第二次孵育微孔板。第二次孵育完成后，加入终止溶液，用分光光度计在450nm处测量光密度（OD）。产生的颜色强度与样品中胰岛素的量成正比。
所需材料：
用于分配高达100 µL的精密移液管（带一次性吸头）
用于分配高达100 µL的可重复使用或多通道移液器
用于试剂准备的量筒和移液管
用于试剂准备的蒸馏水或去离子水
微孔板洗涤器或洗涤瓶
能够达到700-900 rpm的微孔板振荡器
带有450 nm滤光片的微孔板读取器
用于样本准备的涡旋混合器
注意事项：
1. 此试剂盒中包含的人血液制品已检测HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）的存在。这些病毒的检测方法不能保证病毒的完全不存在；因此，所有试剂应被视为潜在的感染源。处理和处置应遵循所有适当的国家和地方法规，以处理潜在的生物危害材料。
2. 所有来自动物来源的材料均为BSE阴性。然而，所有材料应被视为潜在的感染源。
3. 避免直接与皮肤接触。
4. 本产品不可内服。
5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。
6. 不要用嘴吸取任何试剂。
7. 此试剂盒中的试剂是特定批次的，不得替换。
8. 不要使用超过有效期的试剂。
9. 不建议更改测试程序，可能会影响测试结果。
储存条件：
试剂盒应存放在2-8°C。试剂盒在盒标签上的有效期前是稳定的。
小鼠胰岛素ELISA试剂盒样本处理：
血清和血浆样本适用于此测定。不需要稀释或处理样本。然而，如果样本的胰岛素浓度高于最高标准，应将样本稀释在零标准中，并重复分析。建议1）在使用前彻底涡旋每个样本，2）执行移液动作时不要停顿。样本可以在2-8°C下储存24小时，然后在此测定中分析。对于更长时间的储存，建议在≤ -20°C下储存。避免反复冻融循环。
结果计算：
从标准品构建标准曲线。将零标准作为曲线的一部分绘制。建议使用软件程序来计算标准曲线并确定样本的浓度。ALPCO小鼠胰岛素ELISA是一种配体结合测定法，其响应与分析物浓度呈S形关系。目前接受的此类曲线的参考模型使用5参数逻辑（pl）拟合，因为该模型在更大范围内优化了准确性和精确性。尽管三次样条和其他模型是可接受的方法，但它们通常在可检测范围的低端和高端显示出较低的测定内准确性和精确性。
在下面的示例中，使用了5参数曲线拟合，以最大化低浓度样本的准确性和精确性。然而，由于个别实验室条件的影响，所有模型在可检测范围的最低和最高端的准确性和精确性都是有限的。因此，在解释分析物响应变得非线性的结果时，应始终谨慎。不建议将样本浓度值外推到标准浓度值的范围之外。
典型标准曲线：
以下结果仅供演示之用，不能替代实际测定中获得的数据。每次测定运行和测试的板都必须进行标准曲线的绘制。
小鼠胰岛素ELISA试剂盒文献参考：
Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays. AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.
https://www.amyjet.com/products/ALP-80-INSMS-E01.shtml
钙离子荧光探针Cal-520，AM：稳健的均相荧光检测工具
钙离子荧光探针Cal-520，AM提供了一种稳健的均相荧光检测工具，用于检测细胞内钙动员。Cal-520 AM是一种新型的荧光发生型钙敏感染料，与现有的绿色钙指示剂（如Fluo-3 AM和Fluo-4 AM）相比，具有显著提高的信噪比和细胞内保留能力。表达感兴趣GPCR或钙通道的细胞，这些通道通过钙信号传导，可以预加载Cal-520 AM，它能够穿过细胞膜。一旦进入细胞内，Cal-520™ AM的亲脂性阻断基团被酯酶裂解，产生一种带负电荷的荧光染料，留在细胞内。其荧光在结合钙时大大增强。当细胞被激动剂刺激时，受体会信号释放细胞内钙，这显著增加了Cal-520的荧光。其长波长、高灵敏度和>100倍荧光增强的特性，使Cal-520 AM成为测量细胞钙的理想指示剂。高信噪比和更好的细胞内保留能力使Cal-520钙测定成为评估GPCR和钙通道靶点以及筛选它们的激动剂和拮抗剂的有力工具。
艾美捷钙离子荧光探针Cal-520，AM（AAT-21130）：
制备母液：
除非另有说明，所有未使用的母液应在制备后分装成单次使用的小份，并在-20°C下储存。避免反复冻融。
Cal-520 AM母液
在高质量的无水DMSO中制备2到5 mM的Cal-520 AM母液。
注意：在DMSO中重组时，Cal-520 AM是一种清澈无色的溶液。
制备工作溶液：
Cal-520 AM工作溶液
在实验当天，将Cal-520 AM溶解在DMSO中，或将指示剂母液的小份解冻至室温。
在您选择的缓冲液中（例如，Hanks和Hepes缓冲液）用0.04%的Pluronic F-127制备2到20 µM的Cal-520 AM工作溶液。对于大多数细胞系，建议使用最终浓度为4-5 μM的Cal-520 AM。细胞加载所需的指示剂的确切浓度必须通过实验确定。
注意：非离子洗涤剂Pluronic F-127有时被用来增加Cal-520 AM的水溶性。可以从AAT Bioquest购买各种Pluronic F-127溶液。
注意：如果您的细胞含有有机阴离子转运体，可能会向染料工作溶液中添加probenecid（1-2 mM）（最终在孔中的浓度将是0.5-1 mM），以减少去酯化指示剂的泄漏。可以从AAT Bioquest购买各种ReadiUse™ Probenecid产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液。
样本实验协议：
以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的协议。此协议仅提供指导方针，应根据您的具体需求进行修改。
在生长介质中准备细胞过夜。
第二天，向您的细胞板中添加1X Cal-520 AM工作溶液。
注意：如果您的化合物与血清发生干扰，在染料加载前用新鲜的HHBS缓冲液替换生长介质。
将染料加载的板在37°C的细胞培养箱中孵育1到2小时。
注意：孵育染料超过2小时可以提高某些细胞系的信号强度。
用HHBS或您选择的缓冲液（如果适用，含有阴离子转运体抑制剂，如1 mM probenecid）替换染料工作溶液，以去除任何多余的探针。
根据需要添加刺激剂，并同时使用带有FITC滤光片组的荧光显微镜或含有可编程液体处理系统的荧光板读取器（如FDSS、FLIPR或FlexStation）测量荧光，Ex/Em = 490/525 nm截止515 nm。
图1. 在相同条件下，ATP刺激的CHO-K1细胞内源性P2Y受体的钙反应，分别用Cal-520™ AM（红色曲线）或Fluo-4 AM（蓝色曲线）处理，并且在左侧有probenecid，右侧则没有。CHO-K1细胞在Costar黑色壁/透明底的96孔板中以每孔100 µL、50,000个细胞的密度过夜培养。向细胞中加入100 µL的5 µM Fluo-4 AM或Cal-520™ AM（在HHBS中，含或不含probenecid），并在37°C下孵育1小时。然后使用FlexStation添加ATP（50 μL/孔），以达到最终指示的浓度。
钙离子荧光探针Cal-520，AM文献参考：
Measurement and simulation of myoplasmic calcium transients in mouse slow-twitch muscle fibres
Authors: Hollingworth S, Kim MM, Baylor SM.
Journal: J Physiol (2012): 575
Mononucleated and binucleated cardiomyocytes in left atrium and pulmonary vein have different electrical activity and calcium dynamics
Authors: Huang CF, Chen YC, Yeh HI, Chen SA.
Journal: Prog Biophys Mol Biol (2012): 64
Changes in serum levels of HBV DNA and alanine aminotransferase determine risk for hepatocellular carcinoma
Authors: Chen CF, Lee WC, Yang HI, Chang HC, Jen CL, Iloeje UH, Su J, Hsiao CK, Wang LY, You SL, Lu SN, Chen CJ.
Journal: Gastroenterology (2011): 1240
A near-infrared fluorescent calcium probe: a new tool for intracellular multicolour Ca2+ imaging
Authors: Matsui A, Umezawa K, Shindo Y, Fujii T, Citterio D, Oka K, Suzuki K.
Journal: Chem Commun (Camb) (2011): 10407
Application of fluorescent indicators to analyse intracellular calcium and morphology in filamentous fungi
Authors: Nair R, Raina S, Keshavarz T, Kerrigan MJ.
Journal: Fungal Biol (2011): 326
https://www.amyjet.com/products/AAT-21130.shtml