MiTeGen-IMISX结晶板套件,助力可溶性和膜蛋白的原位连续X射线晶体学研究
MiTeGen-IMISX™板设计用于进行可溶性和膜蛋白的原位连续X射线晶体学研究[1]。
96孔双夹心IMISX™板可以手工或使用LCP分配机器人轻松设置。符合SBS标准96孔微孔板尺寸,使此板与标准机器人和成像设备兼容。
通过将标准的LCP晶体板格式与先进的X射线透明薄膜设计相结合,IMISX™板允许进行前所未有的晶体生长和X射线衍射数据收集。
用于晶体生长的薄膜夹心设计可以轻松分拆并安装到适配器上,用于标准测角仪上的原位X射线衍射数据收集。
该产品是与Dr. Martin Caffrey和Dr. Meitian Wang合作开发的。
艾美捷MiTeGen-IMISX结晶板套件:
产品型号:M-IMISX-B-01
分类:96孔板、晶体板和配件、原位衍射、LCP晶体板、膜蛋白晶体学、膜蛋白晶体板、连续晶体学、起始试剂盒
MiTeGen-IMISX结晶板套件组件:
- (20) 已安装周边垫圈的玻璃LCP基板
- (20) 玻璃LCP顶盖板
- (40) 极薄LCP薄膜(带有保护衬里)用于内部三明治
- (20) 96孔粘性垫圈用于LCP薄膜三明治
- (1) 原位测角仪适配器及支架
- (5) 测角仪适配器安装垫圈
- (1) 硅烷化液体瓶
- (6) 清洁擦拭器
- (1) 组件使用说明
LCP中的结晶蛋白质96孔双三明治IMISX™板可以用手或LCP分配机器人轻松设置。SBS标准96孔微孔板足迹使该板与标准机器人和成像仪兼容。
MiTeGen-IMISX结晶板套件文献参考:
[1] Huang et al. (2015) In meso in situ serial X-ray crystallography of soluble and membrane proteins. Acta Cryst D 71:1238.
科学方法评论:
Advances in membrane protein crystallography: in situ and in meso data collection. Weyand, S. & Tate, C. G. (2015). Acta Cryst. D71, 1226-1227.
MiTeGen 致力于分子结晶研究相关产品的开发与生产,包括晶体生长条件筛选试剂及各种耗材与工具。艾美捷科技是MiTeGen的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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MiTeGen-晶体学取样器套件,助力晶体采集和数据收集
如果你一直在使用尼龙环进行晶体采集和数据收集,那么MiTeGen的通用和专用工具收藏可能会有点压倒性。为了帮助您了解我们的产品,小编整理了一些比较受欢迎的工具的采样套件。
艾美捷MiTeGen-晶体学取样器套件:
产品型号:MSK-
分类:水晶收获,入门套件
MiTeGen-晶体学取样器套件:
晶体收获取样试剂盒1 - 包含40个用于晶体收获和数据收集的支架:
- 双厚度微型支架MicroMounts™ - 分别为50微米和100微米孔径各5个
- 微型网状支架MicroMeshes™ - 400/25微米孔径5个
- 双厚度微型环支架Dual-Thickness MicroLoops™ - 200微米孔径5个
- 双厚度微型环支架LD Dual-Thickness MicroLoops LD™ - 分别为50微米和150微米孔径各5个
- 微型环状支架E MicroLoops E™ - 50×500微米垂直孔径5个
- 微型夹持器MicroGrippers™ - 50微米孔径5个,安装在18毫米/脊柱杆上
晶体收获取样试剂盒2 - 包含120个用于晶体收获和数据收集的支架:
- 20个双厚度微型支架MicroMounts™ (M2-L18SP-A2)
- 20个双厚度微型环支架LD Dual-Thickness MicroLoops LD™ (M5-L18SP-A2LD)
- 20个双厚度微型环支架Dual-Thickness MicroLoops (M5-L18SP-A4)
- 20个微型网状支架MicroMeshes™ (M3-L18SP-A1)
- 20个微型环状支架E MicroLoops E (M8-L18SP-VA1)
- 20个微型夹持器MicroGrippers™ (M7-L18SP-A1)
均安装在18毫米/脊柱杆上。
储存与清洁架:
一旦安装在测角仪底座(盖子)上,MiTeGen支架和环可以安全地使用我们方便的底座架进行储存和清洁。
使用和清洁说明:
通过正确的使用和保养,充分利用您在MiTeGen支架上的投资。阅读我们的清洁和处理技术说明。
MiTeGen 致力于分子结晶研究相关产品的开发与生产,包括晶体生长条件筛选试剂及各种耗材与工具。艾美捷科技是MiTeGen的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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MiTeGen-JBS晶体脱水和打捞试剂盒使用方法
自蛋白质晶体学的早期以来,脱水一直被用作诱导蛋白质晶体结构变化的工具。
艾美捷MiTeGen-JBS晶体脱水和打捞试剂盒:
产品型号:M-CO-
分类:室温筛查,入门套件
自从蛋白质晶体学诞生之初,脱水就被用作诱导蛋白晶体结构变化的工具。尽管被忽视,脱水仍然是一个强大的工具,用于改善或至少改变蛋白晶体的衍射特性。
脱水移除了多余的溶剂,紧缩了蛋白质分子的堆积,并减小了溶剂通道的大小。因此,有时它可以提高晶体的有序性并改善衍射分辨率。
通过移除多余的溶剂,脱水可以使快速冷冻更容易成功,特别是对于那些初始溶剂含量较高的晶体。
当充分脱水时,许多蛋白晶体会经历结构转变,产生可能在晶体生长过程中难以或无法直接实现的替代晶体堆积。
在所有晶体后的处理中,脱水已被证明是提高晶体衍射特性最有效的方法。当然,脱水也经常严重降低晶体衍射,但(令人惊讶的是!)通过重新水合,通常可以完全恢复原始的晶体有序性。
脱水盐和晶体脱水与抢救试剂盒被设计为一种简单、可控和可靠的方法,用于脱水蛋白晶体,从而提供一种有效的工具来改变/改善它们的衍射特性。
MiTeGen-JBS晶体脱水和打捞试剂盒包含12种饱和盐溶液,每种1毫升,产生的相对湿度范围在22.5至97.3%之间。
MiTeGen-JBS晶体脱水和打捞试剂盒使用方法:
为了使晶体脱水,将10-20µl的盐溶液注入MicroRT毛细管。使用凝胶加载移液管尖端将液体一直向下注入管的密封端。这将使晶体和溶液很好地分离。将MicroMount、MicroLoop或其他安装环插入测角仪底座,然后收获水晶。将MicroRT毛细管拉到晶体上,然后拉到测角仪底座上。显微镜或低倍放大镜可以更容易地引导毛细管穿过晶体。在测角仪底座上涂抹少量油或油脂可以改善毛细管的密封,但一般来说不是必需的。在X射线检查之前,让晶体与盐溶液平衡30分钟(对于100µm或更小的晶体)至2小时(对于~500µm的晶体)。
图1:脱水盐的使用
脱水策略:
要快速确定是否存在能够改善衍射的相对湿度,选择一种给出相对较低最终相对湿度的盐溶液——在60-75%的范围内。在将样品封闭在MicroRT毛细管中后,立即将样品置于X射线束中,并开始获取一系列短曝光帧。继续进行,直到单元格停止变化(表明晶体已与盐溶液达到平衡)或衍射显著恶化。
对于更系统的研究表明,选择一系列覆盖不同相对湿度范围的盐溶液,比如从93%到68%。将相对湿度最高的盐溶液注入MicroRT毛细管中,收获一个晶体,并把毛细管拉过晶体并放到测角仪底座上。让晶体达到平衡,然后获取一些X射线数据帧,足够确定单元格参数和分辨率。移除MicroRT毛细管,立即用含有下一个最高相对湿度溶液的毛细管替换它,让晶体达到平衡,然后拍摄一些更多的帧。重复此过程,直到您探索了感兴趣的相对湿度范围。然后,戴上提供最佳衍射的盐溶液毛细管,达到平衡,并进行快速冷冻,以评估低温下的衍射质量。在这种“连续”方法中,晶体逐渐积累辐射损伤,这种损伤可能会掩盖脱水引起的改善。
脱水实验也可以同时进行。收获几个晶体,并将每个晶体封闭在含有不同盐溶液的毛细管中。让晶体达到平衡,然后检查它们的衍射,以确定最佳盐/湿度。在脱水过程中,晶体周围可能会形成一些盐晶体。这些的衍射点或环很容易识别,并且通常可以从您的分析中排除。
文献参考:
[1] Greenspan (1977) Humidity Fixed Points of Binary SaturatedAqueous Solutions. J. Res. Nat. Bureau Standards 81A:89.
[2] Rockland (1960) Saturated Salt Solutions for Static Control ofRelative Humidity between 5° and 40° C. Analytical Chemistry32:1375.
[3] Crowfoot et al. (1941) Crystal Structures of the Proteins An XRay Study of Palmar's Lactoglobulin. Nature 141:521.
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MiTeGen-MicroRT室温入门试剂盒,评估晶体和冷冻保存方案
MiTeGen的MicroRT™毛细管系统是室温衍射筛选和数据收集的答案。在室温下,从一滴晶体快速轻松地变成X射线束中的晶体。从同一晶体中收集室温和低温数据,以评估您的晶体和冷冻保存方案。并使用饱和盐溶液来可控地使晶体脱水并改善其有序性。
为什么要在室温下收集衍射数据?
室温筛选在蛋白质晶体学中尤为重要。在结构生物学束线上收集的低温数据集中,大约98%的衍射数据质量不足以确定结构。室温测量对于确定衍射不良的原因是否是生长晶体质量差、配体和/或冷冻保护剂浸泡造成的样品损坏和/或闪冷过程本身造成的样品损伤至关重要。对于一开始就秩序混乱的晶体,寻找低温保护条件浪费了太多的精力。太多的同步加速器时间浪费在本应在家庭源筛选中被拒绝的晶体上。
MicroRT系统为提高衍射管道的效率提供了一种极具成本效益的工具。
设计
在MicroRT系统中,样品被安装在插入测角仪底座的MicroMount或MicroGripper上,就像冷冻晶体学一样。然后将MicroRT毛细管抽到样品上并放在基座上。
标准的10μm壁玻璃X射线毛细管被一端预密封的25μm壁透明聚合物毛细管所取代。尽管聚合物更厚,但它的C和H散射X射线比玻璃的Si和O弱得多,因此整体背景散射降低了60%。毛细管直径为2毫米,比您的水晶和MicroMount大得多,与我们改进的测角仪底座配合使用,既能固定MicroMount,又能捕获管道。
与传统的X射线毛细管安装不同,MicroRT毛细管只是提供了一个保护盖,样品不会与之接触。
艾美捷MiTeGen-MicroRT™试剂盒组成:
MicroRT™ 室温启动试剂盒 #1
开始准备室温筛选样品
1一个(1) MicroRT™ 管子试剂盒 (RT-T1)
2一个(1) MicroRT™ 对齐器 (RTA-1)
3十个(10) 可重复使用的测角仪底座 (GB-B3S-R)
4一盒(1) 20个双厚度微型支架 (M2-L18SP-A2)
5一对(1) 锯齿端镊子 (TW-1)
每个MicroRT™ 毛细管 (RT-T1) 包含20根 – 1.5英寸(37毫米)长的一端封闭的透明聚酯毛细管,一个额外锋利的剃须刀片用于将管子切割到所需长度,以及一小管用于润滑底座的油脂。
MicroRT™ 室温启动试剂盒 #2
一个更全面的试剂盒,提供额外的材料,如低粘度油、更小的MicroMounts和饱和盐溶液。这个试剂盒允许用户更多地使用该系统,例如处理更小的晶体和进行脱水测试。
1一个(1) MicroRT™ 管子试剂盒 (RT-T1)
2一个(1) MicroRT™ 对齐器 (RTA-1)
3两盒(2) 20个双厚度微型支架 (M2-L18SP-A1, M2-L18SP-A2)
4一对(1) 锯齿端镊子 (TW-1)
5二十个(20) 可重复使用的测角仪底座 (GB-B3S-R-20)
6一套(1) 脱水盐 (M-CO-121)
7一个(1) 低粘度冷冻油 (5毫升) (LVCO-5)
8一包(1) 凝胶装载移液管尖 (200个尖) (GLPT-1)
现在使用Mitegen的专利MicroRT系统更容易。MiTeGen 的新型MicroRT对准器使毛细管滑过您的水晶并到达我们的测角仪底座变得轻而易举。无需使用显微镜或放大镜,也不用担心颤抖的手会撞到水晶。
将母液或其他湿度稳定溶液注入MicroRT毛细管,并将其放置在对准器的左侧。使用插入我们的测角仪底座的MicroMount(或我们的任何其他底座)来收获您的水晶。将底座连接到标准磁棒上。
MiTeGen 致力于分子结晶研究相关产品的开发与生产,包括晶体生长条件筛选试剂及各种耗材与工具。艾美捷科技是MiTeGen的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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CellMosaic-带纯化的硫醇检测试剂盒解决方案
CellMosaic的含纯化试剂的巯基测定试剂盒设计用于在生物大分子还原或用小分子巯基修饰试剂标记后,测定其游离巯基。CellMosaic通常将其内部生物结合相关研究中使用此试剂盒。
艾美捷CellMosaic-带纯化的硫醇检测试剂盒可以与我们的抗体或其他生物大分子标记和结合试剂盒一起使用,以优化负载。这些试剂盒的例子包括:
- 抗体MMAE结合试剂盒(含VC-PAB连接)(目录号:CM11409, CM11409x3)
- 抗体Mc-MMAF结合试剂盒(CM11422和CM11422x3)
- 抗体MMAF结合试剂盒(含VC-PAB连接)(CM11425和CM11425x3)
- F(ab')2 MMAE结合试剂盒(含VC-PAB连接)(CM11416和CM11416x3):
请按照使用巯基测定试剂盒的协议,同时使用这些结合试剂盒。
关于测定:
该测定基于Ellman测定法,使用5'5'-二硫双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)(Ellman, G.L. 1959, 组织硫化氢基团。Arch Biochem Biophys. 82, 70–77)。巯基与DTNB反应生成2-硝基-5-巯基苯甲酸(TNB)。TNB呈橙色,具有在412 nm处的消光系数为14,150 M^-1cm^-1(Riddles, P.W. Blakeley, R. L., 和 Zerner, B. 1983, Ellman试剂的重新评估。Methods Enzymol. 91, 49-60)。巯基的量将根据生成的TNB量来计算。
产品应用:
1在还原或巯基标记反应后纯化少量生物大分子
2测定游离巯基
产品关键特性:
1准备和测定时间不到30分钟。快速且易于使用。
2每个包装足够进行10次纯化和5次测定(每次测定体积为100 μL)。
CellMosaic的生物偶联物被用作研究工具、诊断试剂,以及药物的新型载体,如抗体药物偶联物(ADCs)。艾美捷科技是CellMosaic的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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CellMosaic-SEC(凝胶过滤)HPLC低分子量(LMW)蛋白质标准品的应用
CellMosaic的尺寸排阻色谱(SEC)HPLC LMW蛋白标准品专为日常使用而设计,用于检查HPLC柱性能和分析生物偶联物。该试剂盒由四种分子量范围为6.5至43 KDa的蛋白质和一种分子量为154 Da的小分子组成。蛋白质分子量覆盖范围广,便于识别生物偶联混合物中的小分子、偶联物和聚集体,如蛋白质和肽标记和偶联。CellMosaic经常使用该产品进行内部生物偶联相关研究。
一个包装中共有两个微型离心管。每个微量离心管含有从100µL标准溶液冻干的蛋白质混合物。该产品在100µL去离子水中重新配制后即可使用。
艾美捷CellMosaic-SEC(凝胶过滤)HPLC低分子量(LMW)蛋白质标准品:
产品型号:CM92005
库存情况:有现货,通常在24小时内发货
注射数量:25次
CellMosaic-SEC组成:
# Name MW (Da)
1 2,5-dihydroxybenzoic acid 154
2 Aprotinin 6,511
3 RNase A 13,700
4 Carbonic anhydrase 29,000
5 Ovalbumin (albumin chicken egg) 43,000
CellMosaic-SEC(凝胶过滤)HPLC低分子量(LMW)蛋白质标准品应用:
1凝胶过滤和尺寸排阻色谱柱的校准
2估计蛋白质的大小和分子量
3分析小分子、生物结合物和聚集体
产品关键特性:
1冻干固体,用水溶解后即可用于高效液相色谱(HPLC)分析
2分子量覆盖范围:154 Da至43 kDa
CellMosaic-SEC(凝胶过滤)HPLC低分子量(LMW)蛋白质标准品应用说明
1蛋白质和结合物分子量的校准
2通过比较未知蛋白质或蛋白质结合物的保留时间与蛋白质标准,可以确定其大致的分子量。图1提供了尺寸排阻色谱(SEC)的示例。为了更精确的计算,推荐使用SEC分子量标准曲线(图2)。
图1:TSKgel BioAssist G300SWxl色谱柱(7.8毫米 x 30厘米,5微米,部件编号08541)中蛋白质标准的SEC高效液相色谱(HPLC)图谱。HPLC条件:等浓度PBS缓冲液,流速0.5毫升/分钟。仪器:安捷伦1100 HPLC系列。
图2:TSKgel BioAssist G3SWxl色谱柱(7.8毫米 x 300毫米,部件编号0008541)的SEC分子量标准曲线。数据来源于图1。
相关产品:
Sku:CM92004 SEC (Gel Filtration)HPLC ProteinStandard (7 components,
Sku:CM52415 HRP-Protein Conjugation Kit(LMW)
Sku:AS0027 C4 HPLC Analysis of Protein andConjugate
Sku:AS0023 SEC HPLC Analysis ofBiopolymer,Conjugate,andADC
CellMosaic的生物偶联物被用作研究工具、诊断试剂,以及药物的新型载体,如抗体药物偶联物(ADCs)。艾美捷科技是CellMosaic的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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CellMosaic马来酰亚胺检测试剂盒,助力内部生物偶联相关研究
CellMosaic的马来酰亚胺检测试剂盒旨在检测改性生物聚合物(如抗体、蛋白质、肽或寡聚物)的马来酰酰亚胺官能团含量。CellMosaic®常规使用该试剂盒进行内部生物偶联相关研究。
该测定基于Ellman使用5'5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)对半胱氨酸的测定(Ellman,G.L.1959,组织巯基。Arch Biochem Biophys.82,70-77)。首先,已知量的过量半胱氨酸与生物聚合物的马来酰亚胺基团反应,然后未反应的半胱氨酸与DTNB反应生成2-硝基-5-硫代苯甲酸(TNB)。TNB呈橙色,在412 nm处的消光系数为14150 M-1cm-1(Riddles,P.W.Blakeley,R.L.和Zerner,B.1983,Ellman试剂的再评估。方法Enzymol.9149-60)。半胱氨酸的初始量和未反应的半胱氨酸的量之间的差异对应于生物聚合物的马来酰亚胺官能团。
每个包装有四个微型离心管。每个包装足以进行10次测定(每个测定体积100μL)。
艾美捷CellMosaic-马来酰亚胺检测试剂盒:
产品型号:CM90002
库存情况:有现货,通常在24小时内发货
产品应用:
测定马来酰亚胺功能团
产品关键特性:
准备和测定时间不到1小时。快速且易于使用。
CellMosaic马来酰亚胺检测试剂盒相关产品:
Sku:CM90004
Thiol Assay Kit
Sku:CM90005
Thiol Assay Kit with Purification
Sku:CM71301
SepSphere"PeptideImmobilization Kit via Maleimide
Sku:CM52111
Maleimide Activated BSA HL
CellMosaic的生物偶联物被用作研究工具、诊断试剂,以及药物的新型载体,如抗体药物偶联物(ADCs)。艾美捷科技是CellMosaic的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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CellMosaic-ADC稳定缓冲器的应用和用法说明
用于长期储存抗体药物偶联物(ADC)、蛋白质药物偶联物或任何用非常疏水的小分子修饰的抗体/蛋白质的稳定缓冲液。
抗体药物偶联物(ADC)是许多制药和生物技术公司目前正在开发的新型疗法。ADC通常涉及将非常疏水的化合物连接到抗体上。随着时间的推移,通过经典连接体连接的ADC往往会聚集并从溶液中沉淀出来。CellMosaic®的一般指导方针是在使用前立即使用我们的偶联试剂盒制备ADC。一些ADC可以在4°C下储存数周或数月。通常不建议将ADC冷冻保存,因为冷冻过程中可能会加速聚集或沉淀。
CellMosaic 开发了专有的ADC稳定缓冲器,可用于ADC的长期存储。缓冲液含有稳定剂,以防止疏水性药物相互作用,并在冷冻条件下储存时将ADC保持在溶液中。稳定剂还有助于在冻干过程中保持ADC的结构。冻干后,ADC可以溶解在去离子水中,而不会改变其性质。冻干的ADC也可以在室温下临时运输或储存。此外,稳定缓冲液具有生物相容性,不会干扰任何体外或体内研究。缓冲液不含防腐剂、蛋白酶抑制剂、还原剂、EDTA等金属螯合剂或其他载体蛋白。如果需要,所有缓冲液成分都可以在用于下游分析之前通过透析或脱盐去除。
艾美捷CellMosaic-ADC稳定缓冲器:
产品型号:CM02022
库存情况:有现货,通常在24小时内发货
体积:10毫升
CellMosaic-ADC稳定缓冲器应用:
稳定和储存抗体-药物偶联物、蛋白质-药物偶联物,或通过经典疏水性链接器(包括PEG)标记的任何蛋白质与非常疏水的小分子。
产品用法:
将5倍浓缩的稳定缓冲液在相同的缓冲系统中以五分之一的浓度稀释到ADC溶液中。例如,如果您的ADC在PBS缓冲液中,使用稳定的PBS缓冲液。如果您的ADC在其他缓冲液中,请使用稳定的通用缓冲液。稳定的柠檬酸缓冲液具有略微酸性的pH环境(pH 6.5),是储存ADC的首选。为了获得最佳效果,将5倍浓缩的稳定柠檬酸缓冲液稀释至1倍,然后与您的ADC进行缓冲液交换。将ADC样本分装到几个试管中,冻干至干燥,并储存在-20°C以下。分装的ADC也可以在-20°C以下冷冻储存。
CellMosaic-ADC稳定缓冲器可用产品:
CellMosaic-ADC稳定缓冲器相关产品:
Sku:CM51100 ADC Control hlgG1-MMAE
Sku:CM51102 ADC Control hlgG1-SN38
Sku:CM51103 ADC Control hlgG1-Deruxtecan
Sku:RS0001 Routine Small-Scale ADCSynthesis
CellMosaic的生物偶联物被用作研究工具、诊断试剂,以及药物的新型载体,如抗体药物偶联物(ADCs)。艾美捷科技是CellMosaic的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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