MiTeGen/艾美捷蛋白结晶相关产品的开发与生产方案
MiTeGen 致力于分子结晶研究相关产品的开发与生产，包括晶体生长条件筛选试剂及各种耗材与工具。MiTeGen 设计、制造和分销用于蛋白质、病毒和小分子/无机化合物的冷冻电镜（冷冻电子显微镜）、结晶、晶体学和 X 射线衍射的产品。
艾美捷MiTeGen相关产品结构：
1. 晶体学
提供结晶，晶体收集，冷冻冷却和数据收集所需的试剂和耗材工具。
结晶筛选与优化，使用这些领先的晶体筛选试剂盒和试剂，获得更多&更好的晶体：
M-MD1-134 Kryos Screen 96 x 1mL conditions
包含96种条件的冷冻保护晶体学筛选，使用48种畅销的化学条件，每个条件提供2种不同的冷冻保护剂。
M-MD1-61 CryoProtX
专为蛋白质晶体的低温保护而设计，可在晶体生长后使用。用这个易于使用的预混合冷冻试剂盒充分利用你的蛋白质晶体。
M-MD1-61-ECO CryoProtX Eco Screen
使用易于操作的预混合冷冻套件，保持晶体的最高衍射潜力。
M-MD1-90 CryoSol
用于配体溶解/将疏水配体浸泡到晶体中并随后进行晶体冷冻保护
M-MD1-94 The Cryo Combination
专为蛋白质晶体的冷冻保护而设计，用于晶体生长后。使用这个易于使用的预混合冷冻试剂盒，最大限度地发挥蛋白质晶体的潜力。
M-CS-121 JBScreen Basic 1 One kit
包含96种独特的试剂混合物，用于筛选广泛的pH值和各种盐和沉淀剂。
M-CP-111-095 SSRL Crystallization Plate
SSRL结晶板在晶体筛选和衍射数据收集过程中避免了手工操作样品。它用于固定在磁性样品引脚基座上的底物上的蛋白质的原位结晶。该板还可用于在受控湿度环境中保持晶体，以便随后在同步加速器光束线上安装机器人样品。每个板可以容纳10个样品引脚底座。
2. 低温电子显微镜
网格，存储袋，工具和配件用于冷冻电子显微镜(冷冻电镜)样品处理，冷冻冷却和冷冻储存。
低温电子显微镜实验室工具包，旨在为您的实验室提供开始使用Cryo-EM样品所需的试剂和耗材
M-CEM-LBTK2 Cryo-EM Basic Lab Tool Kit Version 2
cryo-EM样品制备工具箱，专为想要开始准备自己的网格样品的研究实验室设计，但计划利用已经使用标准设备(辉光放电系统等)进行基本cryo-EM的设施。
M-CEM-LATK2 Cryo-EM Advanced Lab Tool Kit Version 2
cryo-EM样品制备工具包，适用于希望在自己的实验室中以较低的预算进行cryo-EM所有基本网格和样品制备的实验室。
M-CEM-LCTK2 Cryo-EM Complete Lab Tool Kit Version 2
低温电镜样品制备工具包，适用于大型研究实验室，希望能够在自己的实验室中进行所有基本网格和低温电镜样品制备，并具有扩展功能。
M-CEM-KIT-CUSTOM
Cryo-EM Build Your Own Lab Tool Kit
通过选择专门满足您实验室需求的低温电镜工具来构建您自己的工具包。包括添加常规工具包中未列出的组件的能力。
下图为MiTeGen公司授权艾美捷科技有限公司（AmyJet Scientific Inc.）作为MiTeGen在中国区的总代理授权书。
艾美捷科技是MiTeGen的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/MiTeGen-new.shtml
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MiTeGen-Kryos筛选HT-96：保护晶体免受低温影响方案
Kryos Screen有两种版本可供选择：
M-MD1-133以96个×10毫升条件的形式呈现。
M-MD1-134以96个×1毫升条件的形式呈现。
艾美捷MiTeGen-Kryos Screen的特点：
48种高度不同的条件
每个条件有2种低温保护剂选择
支持晶体的低温保护
条件1-1至1-48（部分A）采用MPD/甘油进行低温保护
条件2-1至2-48（部分B）采用PEG 400/甘油进行低温保护
低温保护剂对于保护晶体免受低温影响至关重要，它最大程度地减少了在X射线数据收集过程中观察到的辐射损伤。Kryos Screen的开发采用了制造商最畅销的晶体生长条件，并加入了低温保护剂。此筛选屏的低温保护剂是制造商根据内部晶体生长试验和客户反馈选择的，以支持实际的数据收集。
晶体生长条件和低温保护剂的选择：
制造商从他们所有商业晶体筛选屏中购买的单一条件（MDSRs）的广泛列表中筛选，挑选出不包含低温保护的前48个单一条件。这导致从他们的Morpheus系列筛选屏中移除了单一条件以及其他已经包含低温保护的条件。他们还移除了彼此非常相似的条件，以最大化化学空间的探索。每个选出的48个条件分别用25%的MPD（山道年）、25%的PEG 400（聚乙二醇400）、25%的甘油和25%的乙二醇进行了测试，以确定低温保护剂的添加是否会导致相分离或化学溶液的沉淀。
在手动悬挂滴加的24孔板中制备了溶菌酶晶体，每个低温保护条件下都制备了晶体，并且每个条件都做了一个没有添加任何低温保护剂的重复条件。基于添加低温保护剂后观察到的晶体生长成功率以及化学物质的任何相分离/沉淀情况，选择了两种最佳低温保护剂，以包含在Kryos Screen中。
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MiTeGen-CryoProtX：保留晶体超高的衍射潜力
CryoProtX™已经被开发出来，以帮助晶体学家为他们蛋白质晶体找到最佳的低温保护剂。它允许你以一种非常简单易用的方式测试混合配方的低温保护。CryoMixes™（低温混合剂）如图1所示，提供现成的配方，用于单步低温浸泡。此外还提供了盐、PEG（聚乙二醇）和糖类组分，用于微调你的低温保护混合剂，并根据以前的晶体项目改进低温保护剂。
艾美捷MiTeGen-CryoProtX™的特点：
1、保留晶体最高的衍射潜力。
2、现成的混合配方。
3、包含pH值筛选。
4、晶体不太可能出现裂纹或溶解。
5、非常适合重金属原子、配体或回浸处理。
6、筛选对低亲和力、低溶解度抑制剂。
7、可以根据特定项目需求进行定制。
CryoProtX™（表1）包含以下6组：
CryoMixes™：这些混合剂由低温保护剂的多组分配方组成，它们在蛋白质晶体生长中也是有用的沉淀剂
CryoMixes™由于含有的水分少于晶体生长所用的溶液，因此会诱导小的“可重复”的脱水变化。缓冲组分：由广泛的缓冲剂组成（来自Really Useful Buffer Kit）。这些缓冲系统的线性允许快速准备缓冲的低温保护剂溶液。
盐组分（沉淀剂）：由浓缩盐和盐混合物组成。在低温保护过程中，盐所提供的脱水效果可能有助于提高分辨率。这些盐组分可以以其纯形式使用，也可以不经缓冲或与不同pH值的缓冲剂混合并测试。
PEG组分（沉淀剂）：这些低温沉淀剂的存在抵消了‘低温溶解剂’（甘油、乙烯和丙烯醇）的效果。已经包括了较短链的聚乙二醇，如PEG 400和PEG 550 MME，以及较长链的PEG。这些PEG溶液可以以其纯形式或混合物形式使用，并可以在不同pH值的缓冲剂中或不经缓冲测试。
核心组分：这些组分因其适合保持晶体长时间稳定而被选中。这些组分提供用于在定制步骤中微调低温保护剂时使用。
糖组分（添加剂）：糖混合剂已被提供，以便在设计您的低温保护剂溶液时提供更大的灵活性。添加这些可能有助于提高在同步辐射源处的持久性。
文献参考：
Vera, Laura, and Enrico A. Stura. "Strategies for proteincryocrystallography." Crystal Growth & Design 14.2(2013): 427-435.
Holyoak, T., Fenn,T. D., Wilson, M. A, Moulin, A. G.,Ringe D., Petsko G. A. Malonate: A versatilecryoprotectant and stabilizing solution for salt-grownmacromolecular crystals. Acta Cryst D, 2003, 59, 2356–2358.
Newman, J. Novel buffer systems for macromolecularcrystallization. Acta Cryst D, 2004, 60, 610-612.
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MiTeGen-CryoSol，蛋白配体复合物的共晶筛选
CryoSol™是一套多组分溶液，用于利用溶解/低温保护混合剂1-6（SM1-SM6）进行配体溶解和浸泡，以及使用CryoMixes™ 1-18（CM1-CM18）进行晶体低温保护。SM1-SM6和CM1-CM18的成分包括环己烷和丁二醇以及二甲基亚砜（DMSO）。虽然高浓度的DMSO对蛋白质可能有害，但高浓度的环己烷却能很好地被耐受。环己烷单独使用或与其他具有低温保护性能的有机化合物联合使用时，也非常有效地进行配体溶解。这个试剂盒旨在用于配体溶解，准备蛋白-配体复合物进行共晶筛选。它也适用于准备装载配体的低温溶液，用于浸入晶体。
艾美捷MiTeGen-CryoSol™的特点：
溶解疏水性配体。
轻松准备用于浸泡实验的装载配体的低温溶液。
蛋白配体复合物的共晶筛选。
蛋白友好的二甲基亚砜（DMSO/环己烷/乙二醇）混合剂应改善配体溶解。
包含2,3-丁二醇 - 与酶活性兼容。
来自ICCBM 15海报展示的晶体照片。在不同配体存在下生长的野生型人转甲状腺素（TTR）晶体的显微照片。(A) TTR-16α-溴雌醇复合物的晶体。这些晶体是在较低浓度的PEG条件下生长的。PEG可以参与类固醇的溶解，但浓度的微小变化对配体晶体生长几乎没有影响。(B) 在pH7.4条件下，存在姜黄素时生长的TTR晶体。
二恶烷和二醇对蛋白质不溶性有相反的影响，可以用来改善晶体。在蒸汽扩散实验中，二恶烷增加了储层溶液的沉淀能力。二恶烷-PEG混合物允许单独PEG不能沉淀的蛋白质结晶。二恶烷也是蛋白质结晶中常见的沉淀剂/添加剂。
多组分低温保护剂溶液（CM1-CM18）CryoMixes™ CM1-CM18 是一套扩展型多组分溶液（除了在CryoProtX™, MD1-61中提供的之外），用于晶体的低温保护和单步低温浸泡，并且包括了在CryoProtX™中未发现的附加组分，如二恶烷和丁二醇，使这些条件更适合于通常在标准低温溶液中不溶的配体的工作。
配方说明：CryoSol™试剂使用超纯水（>18.0 MΩ）配制，并通过0.22微米过滤器无菌过滤。没有添加防腐剂。可从Molecular Dimensions公司获取用于优化的单独试剂和储备溶液。
MiTeGen-CryoSol文献参考：
Ciccone L, Tepshi L, Nencetti S, Stura EA.N Biotechnol. (2015)“Transthyretin complexes with curcumin and bromoestradiol: Evaluation of solubilizing multicomponentmixtures” 32(1):54-64.
L Vera, EA Stura - Crystal Growth & Design, (2014)“Strategies for Protein Cryocrystallography”,14 (2), 427-435.
Ciccone L., Vera L., Tepshi L., Rosalia L., Rossello A. & SturaE.A. "Multicomponent mixtures for cryoprotection andligand solubilization." Biotechnology Reports 7 (2015): 120-127. Open Access
MiTeGen 致力于分子结晶研究相关产品的开发与生产，包括晶体生长条件筛选试剂及各种耗材与工具。艾美捷科技是MiTeGen的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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CellMosaic/艾美捷ADC抗体药，生物偶联技术方案
CellMosaic的生物偶联物被用作研究工具、诊断试剂，以及药物的新型载体，如抗体药物偶联物（ADCs）。CellMosaic 一直致力于开发创新的连接剂、交联技术和先进的共轭工艺。
艾美捷CellMosaic的主要产品线：
1、Perkit 抗体偶联试剂盒
PerKit抗体偶联试剂盒可用实现抗体IgG ab或F(ab)2和小分子酸，Doxorubicin, Methotrexat, MMAE MMAF, SN38, Deruxtecan的偶联，且试剂盒中含有纯化试剂，最终可产出1-3mg的ADC产物，产物纯度可达到90%以上，整体实验流程可由实验人员在实验室中，一天内完成，且操作时间少于2h。
2、PerKit蛋白药物偶联试剂盒
PerKits蛋白偶联试剂盒可将小分子酸，DM1， MMAE，SN38，Deruxtecan通过蛋白表面的氨基，实现任意的偶联，以此实验最多可产出20nmol的蛋白药物偶联产物。试剂盒中含有纯化试剂，纯化后的产物纯度可达到90%以上。整体实验流程可由实验人员在实验室中，一天内完成，且操作时间少于2h。
3、PerKit蛋白/抗体试剂盒相关产品
CellMosaic同时提供各种预制的药物偶联物，包括BSA、HRP、生物素化、荧光标记以及其他生物聚合物偶联物，以及ADC存储buffer，BSA标准品，HPLCbuffer，HPLC标准品等，以提供更全面的ADC解决方案。
4、AQT ADC 药物构建产品
由于药物的疏水性，抗体在偶联药物后存在聚集并沉淀的风险。 CellMosaic 研发的AqT连接剂，是从一类天然的、可食用的糖醇化合物中化学组装而成，可以与非常疏水的药物结合并形成稳定的ADC药物。
下图为CellMosaic公司授权艾美捷科技有限公司（AmyJet Scientific Inc.）作为CellMosaic在中国区的总代理授权书。
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CellMosaic-ADC和其他药物偶联物（ODC）解决方案
使用CellMosaic的个性化试剂盒（PerKit™）为自己定制药物偶联物进行筛选和概念验证
自2017年以来，CellMosaic一直提供PerKits™，以帮助我们的生命科学客户快速评估他们感兴趣的生物制剂（抗体、蛋白质、肽和寡核苷酸），通过直接偶联一系列关键的载荷（化疗药物和毒素）以及传统的链接化学。
试剂盒有多种配置，采用多种偶联策略。一些药物偶联试剂盒适用于具有特定功能团的通用载荷，例如羧酸和胺。一些试剂盒提供选定的标准链接分子偶联到选定的载荷上，已经具备适当的反应性修饰，可以直接将载荷和链接器连接到您感兴趣的特定生物制剂上。
试剂盒包含了将选定的载荷直接连接到客户生物制剂上并纯化最终药物偶联物的所有试剂和程序。客户需要提供的全部就是他/她的生物制剂和标准实验室设备。
艾美捷CellMosaic-Perkit药物偶联选择指南：
注意：根据客户的要求，可以添加其他试剂盒配置。如果您没有看到您当前感兴趣的配置，请咨询，或请求定制生物偶联服务
CellMosaic-Perkit药物偶联相关产品：
ADC Control hIgG1-Deruxtecan
ADC Control hIgG1-MMAE
ADC Control hIgG1-MMAF with VC-PAB Linker
ADC Control hIgG1-SN38
ADC Control hIgG1-Deruxtecan
ADC Control hIgG1-MMAE
ADC Control hIgG1-MMAF with VC-PAB Linker
ADC Control hIgG1-SN38
ADC Control Kit with VC-PAB Linker
Antibody Deruxtecan Conjugation Kit
Antibody Doxorubicin Conjugation Kit
CellMosaic的生物偶联物被用作研究工具、诊断试剂，以及药物的新型载体，如抗体药物偶联物（ADCs）。艾美捷科技是CellMosaic的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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CellMosaic-Phenyldiazirine oxLink (T2A10)：专有的光交联试剂
CellMosaic的Phenyldiazirine oxLink™ (T2A10) 是CellMosaic®开发的一种专有的光交联试剂，用于研究生物分子间的相互作用。
这种试剂将高效的卡宾生成基团苯基二氮丙啶与方便的肟可逆化学交联以及超亲水的AqueaTether™ (AqT™) 链接器结合起来。这些结构特点使得与传光交联试剂相比，使用这种试剂具有高度的优势。
三氟甲基苯基二氮丙啶(TFMP)基团：TFMP在360纳米左右光解，此时对生物分子的光损伤最小。生成的卡宾在皮秒内在邻近的生物分子伙伴中插入C-H键。由于电子吸引的三氟甲基基团使中间的重氮异构体稳定，因此在正常的标记条件下未检测到任何副产品。
含有酮或醛基团的任何生物分子的化学交联的氨基氧基团。氨基氧-酮连接在肽化学中是正交的，并将允许高度选择性的基于固定相的交联产物的分离。特别是，选择性纯化方法将允许在复杂基质中表征蛋白质复合物，如血浆、细胞膜和细胞裂解物，这些样本可能含有自由硫醇，这些硫醇会干扰标记和纯化过程。图1显示了如何使用可逆的oxLink™来交联相互作用的生物分子伙伴并鉴定交联位点或检测相互作用伙伴。
亲水性AqT™链接器：TFMP基团高度疏水，使用传统的乙烯和乙二醇型链接器标记的生物分子倾向于聚集并破坏标记的蛋白质的稳定性。T2A10 AqT™链接器由两个苏丁醇连接而成，大大增强了oxLink™的亲水性(图2)并提高了其水溶性(>27 mg/mL)。该分子还具有更少的非特异性疏水相互作用，允许高载荷的苯基二氮丙啶基团。
艾美捷CellMosaic-Phenyldiazirine oxLink™ (T2A10)化学信息：
化学品名称：Phenyldiazirine sxLink™ (T2A14)
化学式：不适用
分子量：633.66 Da
CAS编号：不适用
规格：
外观：1.5毫升离心管中的白色冻干粉末
储存温度：-20°C
纯度：高效液相色谱法测定，纯度≥ 95 %
产品应用：
标记含有醛或酮基团的生物分子
通过光交联研究动态生物分子相互作用（例如，研究生物复合物和网络、蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-DNA相互作用、小配体-蛋白质相互作用）
产品关键特性：
高度水溶性（>27 mg/mL）和生物相容性
高载荷量，最小化聚集
包含能够形成可逆链接的正交肽化学交联组
包含高效的卡宾生成光交联组
图1. 使用水溶性Phenyldiazirine oxLink™ (T2A10)的oxLink™工作流程
图2. 4-[3-(三氟甲基)-3H-二氮杂茚-3-基]苯甲酸（TFDB，红色，在DMSO中）和oxLink™（蓝色，在水中）的C18高效液相色谱分析。
CellMosaic-Phenyldiazirine oxLink™ (T2A10)文献参考：
Protein crosslinking reviews: a) Brunner, J. (1993) Annu. Rev. Biochem. 62, 485−514. b) Freedman, R. B. (1979) Trends Biochem. Sci. 193–197. c) Herrmann, J. M., Westermann, B., Neupert, W. (2001) Methods Cell Biol. 65, 217–230. d) Fancy, D. A. (2000) Curr. Opin. Chem. Biol. 4, 28–32. e) Fasold, H., Klappenberger, J., Meyer, C., Remold, H. (1971) Angew. Chem. Internat. Edit. 10, 795–801. f) Bayley, H. Photogenerated Reagents in Biochemistry and Molecular Biology, Vol. 12. Elsevier, Amsterdam, Neth, 1983.
3-Trifluoromethyl-3-phenyldiazirine reference: Brunner, J., Senn, H. & Richards, F. M. (1980) J. Bio. Chem. 255, 3313−3318.
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CellMosaic-BSA蛋白质定量标准方案
蛋白质浓度测定非常复杂，受许多因素的影响，如蛋白质组成、构象和样品基质[1]。最常用的简单方法是使用比尔-朗伯定律通过280nm处的紫外吸光度来确定浓度。280nm紫外吸光度主要归因于蛋白质中芳香族氨基酸（色氨酸和酪氨酸）的数量，并受蛋白质构象、聚集、溶剂和pH值的影响。对于许多蛋白质，在280nm处没有实验确定的消光系数用于浓度测定。其他间接蛋白质定量方法，如Bradford[2,3]和二辛可宁酸（BCA）测定[4]（由Smith等人于1985年引入），基于蛋白质-染料相互作用产生比色信号。信号也随着蛋白质组成和测定条件而变化。BSA通常用作这些测定的标准。
CellMosaic的色谱纯化BSA标准品旨在通过HPLC、MS和其他蛋白质测定定量蛋白质和蛋白质偶联物。该产品由1 mg冻干超纯BSA组成，可在980µL去离子水中快速复溶，在1x PBS缓冲液中获得1 mg/mL溶液，不含任何不溶性颗粒。CellMosaic经常使用该产品进行内部生物偶联相关研究。
艾美捷CellMosaic-BSA蛋白质定量标准：
SKU: CM92006
库存情况：有现货，通常在24小时内发货
产品应用：
通过HPLC（凝胶过滤和尺寸排除柱、反相色谱）定量蛋白质。
任何基于蛋白质的定量分析的标准，如Bradford和BCA分析。
质谱分析（如果用于MALDI-TOF MS，则需要去盐处理）的标准。
产品关键特性：
色谱纯化，SEC HPLC测定的BSA含量≥99%（根据存储、准备和分析方法，可能含有1-3%的聚集BSA）。
冻干粉末，用去离子水复溶后即可使用。
CellMosaic-BSA蛋白质定量标准文献参考：
Kathrin Reinmuth-Selzle et. al. 2022, Determination of the protein content of complex samples by aromatic amino acid analysis, liquid chromatography-UV absorbance, and colorimetry. Analytical and Bioanalytical Chem. 414, 4457-4470.
Bradford MM. 1976, A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem. 72(1), 248-254.
Congdon RW, Muth GW, Splittgerber AG. 1993, The binding interaction of Coomassie blue with proteins. Biochem. 213(2), 407-413.
Wiechlman KJ, Braun RD, Fitzpatrick JD. 1988, Investigation of the bicinchoninic acid protein assay: Identification of the groups responsible for color formation. Biochem. 175(1), 231-237.
CellMosaic-BSA蛋白质定量标准相关产品：
Sku:CM52140 BSA-Deruxtecan Conjugate
Sku:CM52107 BSA-Digoxigenin Conjugate
Sku:CM52113 BSA-MMAE Conjugate
Sku:CM52135 Ciprofloxacin-BSA Conjugate ML
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