兔BAFF重组蛋白,在临床治疗自身免疫性疾病中的应用与潜力
B细胞激活因子(BAFF,B-cell Activating Factor)是一种在B细胞生物学和自身免疫疾病中发挥关键作用的细胞因子。兔BAFF重组蛋白作为一种生物工程产品,为研究B细胞发育、自身免疫病机制以及开发新的治疗策略提供了重要工具。
艾美捷兔BAFF重组蛋白特征:
货号:BGT-PCT-156
来源:酵母
配方:无载体蛋白的冻干产品。
复溶:用含有至少0.1%载体蛋白的无菌磷酸盐缓冲液复溶。
别名:TNFSF13B
稳定性和储存:自收到之日起在-20°C下稳定保存长达十二个月。在-20°C下,与载体蛋白一起储存的工作量分装至少稳定3个月。避免反复冻融。
分子量:17.1 kDa(计算值)
纯度:通过SDS-PAGE分析显示,纯度>95%。
纯化方法:离子交换色谱
氨基酸序列:AVEGVEETVI QDCLQLIADS DTPIIRKGSY TFVPWLLSFKRGRALEEKEN KIVVKETGYF FIYGQVLYTD STFAMGHLIQRKKVHVFGDE LSLVTLFRCI QNMPETLPNN SCYSAGIAKLEEGDELQLAI PRENAQISRD GDGTFFGALK LL(152个氨基酸)
BAFF的生物学功能:
BAFF是肿瘤坏死因子(TNF)家族的成员之一,主要通过与其受体BAFF-R、TACI和BCMA结合,促进B细胞的存活、增殖和分化。BAFF在正常免疫反应中至关重要,但其异常表达与多种自身免疫疾病相关。
兔BAFF重组蛋白的开发:
通过基因工程技术,兔BAFF重组蛋白可以在哺乳动物细胞、酵母或细菌中高效表达。通过优化表达系统和纯化工艺,可以获得高纯度、高活性的兔BAFF重组蛋白。
兔BAFF重组蛋白应用领域:
1. 基础研究
兔BAFF重组蛋白可用于研究B细胞的发育过程、免疫应答的调控机制以及BAFF与其受体的相互作用。
2. 疾病模型建立
在自身免疫疾病的动物模型中,兔BAFF重组蛋白可用于模拟疾病状态,研究病理过程和筛选潜在的治疗药物。
3. 药物筛选与开发
作为B细胞信号通路的关键因子,兔BAFF重组蛋白在药物筛选中具有重要价值,可用于开发针对BAFF的抗体或小分子药物。
4. 临床治疗
在某些自身免疫疾病中,如系统性红斑狼疮(SLE),BAFF的抑制剂已被证明具有治疗效果。兔BAFF重组蛋白可用于评估新疗法的疗效和安全性。
技术挑战:
尽管兔BAFF重组蛋白具有广泛的应用前景,但在生产和应用过程中仍面临一些技术挑战,如确保蛋白的稳定性、活性和免疫原性,以及降低生产成本。
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PluriSelect/艾美捷阳性细胞分离速度更快,扩张性更小,纯度更高
使用阳性选择,一个特定的抗体直接与感兴趣的细胞类型结合。细胞将被抗体"触及"。所有不需要的细胞保持未绑定,并将从标记和想要的细胞在下面的富集步骤中分离。最简单的方法来保持标记的细胞,当耦合到一个固体相,是使用细胞过滤器或磁铁。
优势:
流过的血液中没有抗体结合的珠子,可用于另一种阳性或阴性细胞富集。使用pluriBead进行富集时,无需对全血进行任何准备。当细胞直接从全血中分离出来时,未结合的细胞,特别是血小板或红细胞的污染非常低。阳性分离速度更快,扩张性更小,纯度更高。
艾美捷PluriSelect-阳性细胞分离相关产品:
CD2 S-pluriBead anti NK细胞, T细胞
CD2 M-pluriBead anti NK细胞, T细胞
CD3 S-pluriBead anti T细胞, 胸腺细胞
CD3 M-pluriBead anti T细胞, 胸腺细胞
CD4 S-pluriBead anti 单核细胞(子集), 辅助T细胞
CD4 M-pluriBead anti 单核细胞(子集), 辅助T细胞
CD5 S-pluriBead anti T细胞, B细胞, 胸腺细胞
CD5 M-pluriBead anti T细胞, B细胞, 胸腺细胞
CD7 S-pluriBead anti NK细胞, T细胞, 胸腺细胞
CD7 M-pluriBead anti NK细胞, T细胞, 胸腺细胞
CD8 S-pluriBead anti NK细胞, 细胞毒性T细胞
CD8 M-pluriBead anti NK细胞, 细胞毒性T细胞
CD9 S-pluriBead anti 血小板, 粒细胞
CD9 M-pluriBead anti 血小板, 粒细胞
CD11a S-pluriBead anti 白细胞
CD11a M-pluriBead anti 白细胞
CD11b S-pluriBead anti 单核细胞, 粒细胞, 巨噬细胞, NK细胞
CD11b M-pluriBead anti 单核细胞, 粒细胞, 巨噬细胞, NK细胞
CD14 S-pluriBead anti 单核细胞
CD14 M-pluriBead anti 单核细胞
CD15 S-pluriBead anti 粒细胞
CD15 M-pluriBead anti 粒细胞
CD16 S-pluriBead anti 嗜中性粒细胞
CD16 M-pluriBead anti 嗜中性粒细胞
CD19 S-pluriBead anti B细胞
CD19 M-pluriBead anti B细胞
CD21 S-pluriBead anti B细胞
CD21 M-pluriBead anti B细胞
CD31 S-pluriBead anti 血小板, 内皮细胞
CD31 M-pluriBead anti 血小板, 内皮细胞
CD43 S-pluriBead anti 单核细胞, T细胞, 粒细胞
CD43 M-pluriBead anti 单核细胞, T细胞, 粒细胞
艾美捷科技是pluriSelect的特约代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/PluriSelect-new.shtml
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PluriSelect/艾美捷阴性细胞分离plurSpin 人NK细胞富集方案
阴性细胞选择可以去除所有不需要的细胞。与阳性富集相反,除了感兴趣的细胞外,所有细胞都将与特定的抗体结合并分离。当不需要的细胞被耗尽时,所需的细胞仍未与样品材料中的抗体或珠子结合并"未受影响"。
pluriSelect已经开发出pluriSpin系统,该系统可以在没有磁铁或柱子的情况下,一步到位地分离出有活力的、未经处理的、高度纯化的细胞。这最大限度地降低了激活或破坏感兴趣的细胞的风险。
优势:
细胞不会受到通过色谱柱的压力。被通缉的细胞不携带任何抗体,也没有珠子。这避免了对感兴趣的细胞群进行不必要的激活或阻断。
plurSpin® 人类NK细胞富集旨在通过阴性分离从全血、血沉棕黄层、脐带血或类似样本材料中分离出纯、活和未接触的NK细胞。该产品标记单核细胞、T细胞、B细胞和粒细胞,而阴性分离的人类NK细胞留在样品中。当在密度培养基上离心时,不需要的细胞会与红细胞一起沉淀。纯化的NK细胞以高度富集的群体存在于血浆和密度培养基之间的界面上。
艾美捷PluriSelect-plurSpin 人NK细胞富集:
货号 19-05001-31
大小 2 ml
品种 人类
细胞类型 NK细胞
样品料 Whole Blood, PBMC, Buffy Coat, Cord Blood, Bone Marrow, Primary Cell Solution
纯度 >80%
储存条件 4-8 °C
规范性声明 For research use only. Not for use in diagnostic procedures,
PluriSelect-plurSpin 人NK细胞富集数据:
左图:PBMC中CD56的表达
右图:使用pluriSpin人NK细胞富集技术富集和未经处理的CD56细胞
从新鲜外周血开始,富集部分的CD56+细胞含量通常为75-90%。
PluriSelect-plurSpin 人NK细胞富集相关产品:
pluriMate - 2毫升离心管
Leuko Spin Medium(白细胞分离介质)
Lympho Spin Medium / PBMC Spin Medium(淋巴细胞分离介质 / 外周血单核细胞分离介质)
Lympho 24+ Spin Medium / PBMC 24+ Spin Medium(淋巴细胞24+分离介质 / 外周血单核细胞24+分离介质)
10倍洗涤缓冲液
PLT Spin Medium(血小板分离介质)
艾美捷科技是pluriSelect的特约代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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PluriSelect/艾美捷多元旋转耗损:plurSpin人血小板耗竭解决方案和优势
细胞分离方法从样品材料中消耗特定的细胞类型。例如,"PLT耗尽"意味着血小板将从样品中被去除。
pluriSpin 人类血小板耗竭系统旨在通过负选择分离技术,从全血、血浆层、脐带血或类似的样本材料中分离出纯净、活性且未受干扰的低血小板人群。该产品标记血小板,而分离出的人类低血小板人群则留在样本中。当在密度介质上离心时,不需要的细胞与红细胞一起沉淀。纯化的无血小板人群作为高度富集的人群存在于血浆和密度介质之间的界面上。
血小板污染的问题:
新鲜血样中的富集细胞纯度降低,如果血样超过8小时,情况更甚。
为了防止血小板激活,含有血小板的样本应轻柔处理。
血小板会干扰你的细胞培养,占据空间并释放生长因子和其他介质。
血小板可以造成细胞聚集。
血小板具有粘性,容易粘附到其他细胞上(例如单核细胞、嗜酸性粒细胞)。
血小板可以影响FACS(流式细胞术)分析,导致DNA含量的大变异。
pluriSpin 人类血小板耗竭解决方案和优势:
不使用珠子进行耗竭。
通过密度梯度离心在一个步骤中提高富集细胞的纯度。
可以与诸如pluriSpin 负选择分离技术结合使用。
稀有细胞富集将得到改善(例如与pluriSpin CD45 耗竭一起使用时)。
由于较短的离心步骤,对血样的操纵最小化(与带有血小板密度梯度的标准协议相比)。
来自超过8小时的血样的细胞富集将得到改善。
艾美捷PluriSelect-plurSpin人血小板耗竭:
货号 19-00002-31
大小 2 ml
交付时间 1-2
品种 人类
细胞类型 血小板
样品料 Whole Blood, PBMC, Buffy Coat, Cord Blood, Bone Marrow, Primary Cell Solution
纯度 >90%
储存条件 4-8 °C
规范性声明 For research use only. Not for use in diagnostic procedures,
PluriSelect-plurSpin人血小板耗竭与plurSpin结合使用:
通过结合pluriSpin提高分离细胞的纯度人类PLT耗竭和其他多能性产品。
左图:plurSpin 人类单核细胞富集
右图:plurSpin 人类单核细胞富集和多核自旋人类PLT耗竭
PluriSelect-plurSpin人血小板耗竭相关产品:
pluriMate - 2毫升离心管
Leuko Spin Medium(白细胞分离介质)
Lympho Spin Medium / PBMC Spin Medium(淋巴细胞分离介质/外周血单核细胞分离介质)
Lympho 24+ Spin Medium / PBMC 24+ Spin Medium(淋巴细胞24+分离介质/外周血单核细胞24+分离介质)
PLT Spin Medium(血小板分离介质)
10倍洗涤缓冲液
艾美捷科技是pluriSelect的特约代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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PluriSelect/艾美捷密度梯度介质:Leuko Spin培养基,白细胞富集分离方案
pluriSelect提供了即用型密度梯度培养基,用于通过单步密度梯度离心分离不同的血细胞群。 PBMC-Spin®在室温下的密度为1,077 g/ml,用于在12小时内从新鲜样品材料中分离出PBMC(外周血单核细胞--包含淋巴细胞和单核细胞)。Leuko Spin是为富集新鲜样本材料中的所有白细胞而优化的。如果您需要处理超过12小时甚至24小时的血液,我们建议使用我们的PBMC24+ Spin,它针对这些条件进行了优化,以减少粒细胞的污染。对于从人类血液中分离单核细胞或血小板,请查看PluriSelect的单核细胞旋流器和PLT旋流器。
Leuko Spin是一种无菌的即用型密度培养基,用于从新鲜的人外周血或水皮层中分离所有白细胞,产量高。单核和多核(多叶核)细胞可通过Leuko Spin培养基的单步密度梯度离心来富集。通过与PBMC Spin双梯度离心相结合,可以在一个步骤中以高产率和高纯度分离粒细胞和PBMCs。富集的细胞可用于广泛的下游应用,如MACS(磁激活细胞分选,Miltenyi Biotec GmbH的商标)或干细胞研究。
艾美捷PluriSelect-Leuko Spin培养基:
货号 60-00091-10
大小 100 ml
交付时间 1-2
储存条件 室温,避光
规范性声明 仅供研究使用。不用于诊断程序。
相位范围 6.8 – 7.4
使用Leuko Spin Medium进行白细胞富集的分离方案:
首先,仔细地将样本材料层叠在Leuko Spin Medium的上方。避免两个阶段混合。或者可以使用pluriMate管。这个隔层防止了两个阶段的混合,并允许在第一次离心步骤后倒出富集的细胞。在密度离心步骤之后,吸出上层(血浆和稀释缓冲液)。然后将单核细胞层和多核细胞层转移到一个新的圆锥形管中并清洗细胞。
左图:用Leuko-Spin密度分离培养基分离所有白细胞。
右图:富集外周血单核细胞和多形核细胞。
文献:
Impact of hydroxyethyl starch and modified fluid gelatin on granulocyte phenotype and function
Nina Doblinger, Andre Bredthauer, Morad Mohrez, Viola Hähnel, Bernhard Graf, Michael Gruber, Norbert Ahrens, 2019
艾美捷科技是pluriSelect的特约代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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PluriSelect/艾美捷分离管:pluriMate离心管使用方案
多选择分离管已经开发出来,用于从全血和骨髓中z佳分离白细胞和外周血单核细胞(PBMC)。plurMate和TwinSpin可防止您耗时费力地叠加样品材料。在离心过程中,根据密度梯度培养基,白细胞、淋巴细胞和外周血单个核细胞与不需要的红细胞和粒细胞分离。
pluriMate是为从全血和骨髓中z佳分离白细胞和外周血单核细胞(PBMC)而开发的。pluriMate的关键特征是离心管底部装有多孔海绵。该屏障由高级聚氨酯组成。它可以防止您耗时费力地覆盖样品材料。抗凝血液或骨髓可以简单地直接从血液取样管倒入pluriMate管。多孔屏障防止样品材料与分离介质混合。
在离心过程中,白细胞、淋巴细胞和外周血单个核细胞与不需要的红细胞和粒细胞分离,这取决于基于其密度使用的密度梯度(Leuko-Spin培养基、Lymphong Spin培养基、Lympho-24+Spin培养基或PLT Spin培养液),并在分离培养基上方的间期富集。当分离完成时,屏障防止富集细胞部分在收获过程中再次污染。无论处理的样本量是大是小。plurMate提供3种不同尺寸的管材。
仅适用于全血、血沉、脐带血、骨髓。
艾美捷PluriSelect-Leuko Spin培养基:
货号 44-00002-15
大小 500 pcs.
预填充 Unfilled
储存条件 Room Temperature
规范性声明 For research use only. Not for use in diagnostic procedures,
使用plurMate的协议离心管,与密度梯度介质结合使用。
艾美捷科技是pluriSelect的特约代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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PluriSelect/艾美捷选择密度梯度介质的管束双自旋管方案
TwinSpin离心管可以填充密度梯度培养基(DGM),以实现细胞与全血和骨髓的最佳分离。TwinSpin由标准15ml和内胎压缩而成。内管底部敞开,浸没在DGM中。稀释的抗凝血液或骨髓可以简单地移入TwinSpin。样品放置在内管内的DGM顶部。在离心过程中,根据DGM,白细胞、淋巴细胞和PBMC与不需要的红细胞和粒细胞分离。结果是在DGM上方富集了靶细胞的相间。
红细胞将通过密度梯度介质从外管底部的内管中沉淀出来。分离完成后,只需拆下内管。弹性盖起到阀门的作用。通过向下推盖子,收集管就变成了移液管。内容物可以一滴一滴地收集。
将TwinSpin管与您选择的DGM捆绑在一起。
DGM解释:
Leuko Spin - 用于从全血或骨髓中分离白细胞
Lympho Spin - 用于从全血或骨髓中分离外周血单核细胞(PBMC)
Lympho Spin 24+ - 用于从超过12小时的全血或骨髓中分离外周血单核细胞(PBMC)
PLT Spin - 用于从全血或骨髓中分离血小板
艾美捷PluriSelect-选择密度梯度介质的管束双自旋管:
货号 45-91006-10
交付时间 1-2
变化 Leuko Spin
储存条件 Room Temperature
运输条件 Room Temperature
PluriSelect-选择密度梯度介质的管束双自旋管应用:
TwinSpin使用协议结合密度梯度介质。
粉红色:密度梯度介质
黄色:等离子
红色:红细胞和不需要的细胞
蓝色:所需细胞
艾美捷科技是pluriSelect的特约代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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PluriSelect/艾美捷1x红细胞裂解缓冲液使用方案
PluriSelect红细胞(RBC)裂解缓冲液经过设计、配方和测试,以确保在对白细胞影响最小的情况下,最佳地裂解单细胞悬浮液中的红细胞。核红细胞不能有效被氯化铵裂解。这种1倍浓度的红细胞裂解缓冲液已经准备好使用。
艾美捷PluriSelect-1x红细胞裂解缓冲液:
货号 60-00050-11
大小 100 ml
交付时间 1-2
不育症 无菌型
相位范围 pH 7.4
运输条件 Room Temperature
储存条件 4-8 °C
规范性声明 For research use only. Not for use in diagnostic procedures
PluriSelect-1x红细胞裂解缓冲液组分:
NH4Cl(155毫摩尔/升)
KHCO3(10毫摩尔/升)
EDTA(0.1毫摩尔/升)
PluriSelect-1x红细胞裂解缓冲液方案:
确保红细胞裂解缓冲液是冷的(4-8°C)。
将细胞悬浮液的1体积与10体积的1×红细胞裂解溶液稀释。
使用血液样本工作时:
振荡5秒钟,并在4-8°C下孵化10-15分钟(不超过15分钟)。
使用组织样本工作时:
振荡5秒钟,并在4-8°C下孵化2分钟。
注意:观察混浊度以评估红细胞的裂解。一旦样本变得清澈红色,裂解就完成了。
振荡5秒钟,然后在室温下以300×g离心10分钟。
完全吸出上清液。
将细胞沉淀在适当的缓冲液中重新悬浮,并继续进行进一步的应用。
艾美捷科技是pluriSelect的特约代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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