PluriSelect/艾美捷细胞和蛋白质分离系统解决方案
PluriSelect专注于细胞和蛋白质分离系统，产品用于诊断，可提供种类繁多的细胞过滤器。 PluriSelect主要技术领域：通过特殊的筛子能从全血、培养的细胞、组织中筛选出目的细胞，主要包括：T细胞、B细胞、NK细胞、粒细胞、红细胞和一些干细胞。
艾美捷PluriSelect-pluriStrainer 是经济实惠的细胞过滤器系统的选择，具有流量控制功能（与连接器环相结合）。pluriStrainer Mini是极为灵活的小型细胞过滤器，已针对小样本量进行了优化，几乎适合任何反应管（15 mL到1.5 mL，24/48孔板）。多用途的berStrainer完成了细胞过滤器的广泛谱系。
1. pluriStrainer细胞过滤器
PluriStrainer是一种多功能筛分设备，用于颗粒/细胞分离直径在1,000 um和1 um之间。它适合任何50毫升标准管。它可以翻转，从网格冲洗回样品。漏斗将过滤器的容积从6毫升增加到24毫升。带luer-lock帽的连接环形成一个密闭的工作室过滤管。封闭的盖子允许在网格上处理样品。打开的盖子可以用来增加流量，用注射器抽出50毫升的管子。
2. 迷你样品/细胞过滤器
pluriStrainer Mini是一种筛分设备（或细胞过滤器），适用于需要过滤和纯化液体的各种实验室应用。它已针对小样本量进行了优化。其独特的设计允许安装在各种不同的管子上，例如1.5ml/2.0ml反应管、15ml锥形离心管、FACS 管、冷冻瓶、24孔板和48孔板。
3. 注射器过滤器
Syringe Strainer注射器过滤器，筛分或过滤装置，用于大量排除或浓缩液体中的颗粒。滤器可以通过带鲁尔锁适配器的螺旋帽与注射器或管子连接，在正压或负压下工作。
4. 密度梯度离心产品
密度梯度离心法是分离PBMC（骨髓周围血单核细胞-含有淋巴细胞和单核细胞）和红细胞（RBC、红细胞）的常用方法。根据每个血细胞群的不同密度，它们可以用相应的密度梯度培养基进行单步离心分离。除了常用的分离PBMCs的溶液（密度1077 g/ml），pluriSelect还提供优化的密度梯度培养基，用于从旧血中分离白细胞、单核细胞、血小板和PBMCs。此外，pluriMate 和TwinSpin 离心管简化了处理过程，加快了纯化速度。
艾美捷科技是pluriSelect的特约代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/PluriSelect-new.shtml
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PluriSelect/艾美捷细胞过滤器：pluriStrainer 1000 µm的多种应用
pluriStrainer 1000 µm：功能丰富的筛分装置，用于过滤和纯化样品材料和其他生物液体。
多菌株® 是一种筛分装置（或细胞过滤器），适用于需要过滤和净化液体的各种实验室应用。其独特的设计特点是改善了通风，避免了堵塞，从而实现了智能样品制备。过滤器® 可堆叠，允许直接过滤不同筛孔尺寸，也可倒置以回收筛分材料。对于大样本量，它可以与漏斗结合使用。它适用于所有主要品牌的50毫升离心（锥形）管。多菌株的组合® 连接器环允许使用支持过滤的低压。此外，还可以阻断通过筛网的流动，并将液体滞留在筛网顶部。网状物顶部的液体可用于样品制备和培养，如组织分离或用细胞裂解试剂（如缓冲液RLT、TRIzol）处理细胞®).
艾美捷PluriSelect-pluriStrainer 1000 µm（#43-51000-03）：
交付时间 1-2
网眼尺寸 1000 µm
变化 25 pcs, sterile
包装 Individual single packed
大小 25 pcs.
颜色 黑色
流量控制 Yes, in combination with Connecting Ring
Mesh Fixation Injected in housing for strong hold
布料 PET(聚乙二醇酯)
外壳材料 LD-PE (低密度聚乙烯)
Mesh Type woven
处理 Extended lip on strainer enables aseptic handling
不育症 无菌型
相当于 Corning Cell Strainer, EASYstrainer™ Cell sieve, Falcon™ cell strainer, Reversible Strainer, MACS® SmartStrainer
稳定性 Buffer RLT®, TRIzol®, Isopropanol, organic solvent
离心 Yes
组织解离 Yes
可消毒 Yes, with 70% ethanol
感兴趣的领域 免疫学, 细胞生物学, 植物生物学, 微生物学, 肿瘤学, 生态学
运输条件 Room Termperature
储存条件 Room Temperature
规范性声明 For research use only. Not for use in diagnostic procedures,
PluriSelect-pluriStrainer 1000 µm特点：
过滤器：将pluriStrainer®连接到一个无菌的50毫升离心管上。然后，将样品材料加入到过滤器上并过滤样品。
反转：为了获得较大的分数，取下pluriStrainer®，将其倒置在另一个50毫升的管子上，并将样品从pluriStrainer®中冲洗回来。
增加样品负载：使用漏斗，您可以在顶部添加多达24毫升的样品材料。
堆叠：不同网目的pluriStrainer®堆叠允许同时过滤不同大小的细胞。
流量控制：通过打开或关闭Luer-Lock，可以控制流速，例如，用于初级组织的物理分离（大脑、脾脏等）。
低压：如果将注射器添加到连接环上，可以在拉动活塞的同时施加低压，以支持粗糙样品材料的过滤。
PluriSelect-pluriStrainer 1000 µm的应用：
1、消化乳腺组织和类器官后获得真正的单细胞悬浮液
2、使用pluriBead技术富集特定细胞
3、从骨髓、胰腺、胸腺、淋巴结等制备血细胞的单细胞悬浮液
4、从其他初级组织中分离细胞
5、为流式细胞术（FACS™）准备真正的单细胞悬浮液
6、比纱布过滤更快更易的替代方案
7、筛选复杂和粘稠的液体（结合使用连接器环和注射器进行真空抽吸）
8、细胞/细胞因子的短时间孵化（结合使用pluriBead和连接器环）
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PluriSelect/艾美捷迷你样品/细胞过滤器：pluriStrainer Mini 5 µm
多菌株® Mini是一种筛分装置（或细胞过滤器），适用于需要过滤和净化液体的各种实验室应用。它已针对小样本量进行了优化。其独特的设计允许安装在各种各样的试管上，例如1.5 ml/2.0 ml反应管、15 ml锥形离心管、FACS™ 试管、冷冻小瓶、24孔板和48孔板。
艾美捷PluriSelect-pluriStrainer Mini 5 µm（#43-10200-40）
网眼尺寸 5 µm
变化 Bag-packed
包装 50 pcs. (25 pcs. / Bag) - The tube for flow cytometry is not included.
大小 50 pcs.
颜色 黄
流量控制 No
Mesh Fixation Injected in housing for strong hold
布料 PET(聚乙二醇酯)
外壳材料 PP（聚丙烯）
Mesh Type woven
符合 1.5ml反应管2.0ml反应管流式细胞仪™ 试管冷冻小瓶5ml/10ml带盖反应管5ml/10ml带有螺旋盖反应管14-15ml锥形离心管24孔板48孔板
处理 抓握表面便于无菌处理.
不育症 无菌型
相当于 康宁细胞过滤器EASYtrainer™ 细胞筛猎鹰™ 可逆细胞株™ MACS过滤器® 智能过滤器MACS® 预分离过滤器
稳定性 RLT® 缓冲液TRIzol® 异丙醇有机溶剂
离心 Yes
组织解离 Yes
可消毒 Yes
运输条件 Room temperature
储存条件 Room temperature
规范性声明 For research use only. Not for use in diagnostic procedures
适合多种管径：
从左到右：15ml锥形离心管、采血管、流式细胞仪（FACS）™) 试管、3 ml试管、2 ml冷冻管、5 ml锥形管螺旋盖、5 ml反应管卡扣盖、2 ml反应管、1.5反应管、48孔板、24孔板
PluriSelect-pluriStrainer 1000 µm的应用：
1、在消化乳腺组织和类器官后获得真正的单细胞悬浮液
2、制备骨髓、胰腺、胸腺、淋巴结等血细胞的单细胞悬浮液
3、细胞从其他原代组织中分离
4、流式细胞术（FACS）用真单细胞悬液的制备™
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PluriSelect/艾美捷注射器过滤器：Syringe Strainer,500 um
Syringe Strainer注射器过滤器，筛分或过滤装置，用于大量排除或浓缩液体中的颗粒。滤器可以通过带鲁尔锁适配器的螺旋帽与注射器或管子连接，在正压或负压下工作。
艾美捷PluriSelect-Syringe Strainer,500 um, sterile（#43-71500-03）
网眼尺寸 500 µm
变化 12 pcs sterile
大小 12 pcs.
流量控制 是
外壳材料 LD-PE (低密度聚乙烯)
Mesh Type woven
不育症 无菌型
运输条件 室温
储存条件 室温
仅供研究使用。不用于诊断程序。
PluriSelect-Syringe Strainer,500 um, sterile相关产品：
43-71400-03 Syringe Strainer,400 um, sterile 12pcs
43-71300-03 Syringe Strainer,300 um, sterile 12pcs
43-71200-03 Syringe Strainer,200 um, sterile 12pcs
43-71100-03 Syringe Strainer,100 um, sterile 12pcs
43-71085-03 Syringe Strainer,85 um, sterile 12pcs
43-71070-03 Syringe Strainer,70 um, sterile 12pcs
43-71060-03 Syringe Strainer,60 um, sterile 12pcs
43-71050-03 Syringe Strainer,50 um, sterile 12pcs
43-71040-03 Syringe Strainer,40 um, sterile 12pcs
43-71030-03 Syringe Strainer,30 um, sterile 12pcs
43-71020-03 Syringe Strainer,20 um, sterile 12pcs
43-71015-03 Syringe Strainer,15 um, sterile 12pcs
43-71010-03 Syringe Strainer,10 um, sterile 12pcs
43-71005-03 Syringe Strainer,5 um, sterile 12pcs
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PluriSelect/艾美捷注射器过滤器：Syringe Strainer,500 um使用指南
pluriMate是为从全血和骨髓中z佳分离白细胞和外周血单核细胞（PBMC）而开发的。pluriMate的关键特征是离心管底部装有多孔海绵。该屏障由高级聚氨酯组成。它可以防止您耗时费力地覆盖样品材料。抗凝血液或骨髓可以简单地直接从血液取样管倒入pluriMate管。多孔屏障防止样品材料与分离介质混合。在离心过程中，根据所使用的密度梯度（Leuko-Spin、Lympho-Spin、PLT-Spin等），白细胞、淋巴细胞和PBMC与不需要的红细胞和粒细胞分离，并在分离介质上方的间期富集。当分离完成时，屏障防止富集细胞部分在收获过程中再次污染。无论处理的样本量是大是小。plurMate提供3种不同尺寸的管材。
艾美捷PluriSelect-plurMate-2毫升离心管，50个（#44-00002-10）
大小 50 pcs.
预填充 Unfilled
变化 50 pcs, unfilled
储存条件 室温
规范性声明 For research use only. Not for use in diagnostic procedures,
PluriSelect-pluriMate 管的使用方法指南：
1、检查推荐的培养基、血样、密度梯度介质和离心机是否都在室温下。
2、准备pluriMate®管：在使用前彻底摇匀Spin Medium®，将瓶子倒置几次。
3、向pluriMate®管中加入密度梯度介质（例如PBMC Spin Medium）。
4、以1000 x g离心10秒，然后丢弃上清液。
5、添加样品材料：在海绵上填充样品材料（见图1）。 注意：为了减少血小板污染，您可以添加pluriSpin® PLT Depletion（订单号19-00002-31）。
6、根据以下密度梯度介质规格进行带制动的离心：收集。
7、通过移液管吸出血浆，直到白色细胞层（见图4）。
8、将白色层中的细胞收集到一个新的管中（见图5）。
9、清洗：根据所使用的密度介质，按照协议中解释的清洗步骤（清洗部分）进行后续操作。
艾美捷科技是pluriSelect的特约代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/PluriSelect-new.shtml
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Molday ION罗丹明B荧光标记物--细胞标记和装载特性分析
随着干细胞治疗应用的增长，对其移植后体内检测方法的开发和完善需求也在增加。磁共振成像已成为追踪移植干细胞的主要方式之一。MRI的优势在于它是一种非侵入性方法，不沉积电离能量，适合进行纵向研究。为了使用MRI区分特定细胞，这些细胞必须用磁性对比剂进行标记。目前，最彻底表征的试剂，Feridex，一种FDA批准的用于肝脏成像的超顺磁性氧化铁（SPIO）对比剂，已不再可用。来自Biopal的Molday ION Rhodamine-B TM（MIRB）是一种新型SPIO对比剂，专为细胞标记应用而配制。MIRB的磁性核心和流体动力学尺寸分别大约为8和35纳米，Zeta值为-31毫伏，与Rhodamine-B（Rh-B）（每个颗粒2个荧光体）结合，可以通过MRI和荧光显微镜观察。Rh-B的激发波长为555纳米，发射波长为565-620纳米。在这项研究中，我们定性和定量地表征了MIRB在非人灵长类动物（NHP）间充质干细胞（MSC）上的标记和装载特性，包括在不同标记浓度下的平均内部铁/MSC，以及细胞内MIRB对MSC活性、增殖能力和功能的影响。我们对MIRB标记的MSC的体外MR特性进行了全面评估，描述了弛豫率测量、最佳成像序列的确定以及在临床1.5 T西门子交响曲MRI设备上的理想检测极限。这些研究为新的SPIO对比剂用于细胞标记和体内MRI检测的未来应用奠定了基础，并提供了原理证明。
艾美捷Molday ION罗丹明B荧光标记物（BPL-CL-50Q02-6A-50）部分结果分析：
1 细胞标记和装载特性分析
1.1 细胞内MIRB分布
经过20小时的孵化，观察到内化的MIRB定位在MSC的细胞质中，特别是在核周体的内吞体中。这种定位模式在光学和荧光显微镜下都很明显，并且适用于所有考虑的标记条件。图1显示了通过普鲁士蓝染色增强的光显微镜图像，用于铁（Fe）的可视化，以及MSC细胞质中Rh-B的荧光显微镜图像。
1.2 标记效率
标记效率，通过流式细胞仪检测Rh-B阳性细胞的百分比，对于用5 mg Fe/ml标记的细胞范围从65.9%，对于用MIRB浓度达到或超过20 mg Fe/ml标记的细胞则超过95%。图2显示了在高达100 mg Fe/ml的MIRB浓度下标记的MSC中Rh-B存在的流式细胞术数据。
1.3 MIRB摄取量
平均每MSC中内化的MIRB量，以pg Fe计，如图3所示。平均Fe/MSC的计算是手动在血细胞计数板上进行的细胞计数的直接函数。手动细胞计数引入的误差，估计在10-15%（37），代表了主要误差以及细胞内铁含量估算的准确性限制。来自六项检测的数据表明，随着MIRB标记浓度的增加，出现了饱和现象。在20至30 mg Fe/ml之间的标记浓度达到平台期，结果平均每MSC摄取量约为15-20 pg Fe。
Molday ION罗丹明B荧光标记物部分文献参考：
1. Budde MD, Frank JA. Magnetic tagging of therapeutic cells forMRI. J Null Med 2009; 50(2): 171–174.
2. Adler ED, Bystrup A, Briley-Saebo KC, Mani V, Young W, Giovanonne S, Altman P, Kattman SJ, Frank JA, Weinmann HJ, KellerGM, Fayad ZA. In vivo detection of embryonic stem cell-derivedcardiovascular progenitor cells using Cy3-labeled Gadofluorine Min murine myocardium. JACC Cardiovasc Imag 2009; 2(9):1114–1122.
3. Brekke C, Williams SC, Price J, Thorsen F, Modo M. Cellularmultiparametric MRI of neural stem cell therapy in a rat gliomamodel. Neuroimage 2007; 37(3): 769–782.
4. Guzman R, Uchida N, Bliss TM, He D, Christopherson KK, Stellwagen D, Capela A, Greve J, Malenka RC, Moseley ME, Palmer TD,Steinberg GK. Long-term monitoring of transplanted humanneural stem cells in developmental and pathological contextswith MRI. Proc Natl Acad Sci USA 2007; 104(24): 10211–10216.
5. Higuchi T, Anton M, Dumler K, Seidl S, Pelisek J, Saraste A, WellingA, Hofmann F, Oostendorp RA, Gansbacher B, Nekolla SG, BengelFM, Botnar RM, Schwaiger M. Combined reporter gene PET andiron oxide MRI for monitoring survival and localization of transplanted cells in the rat heart. J Nucl Med 2009; 50(7): 1088–1094.
6. Onda T, Honmou O, Harada K, Houkin K, Hamada H, Kocsis J.D.Therapeutic benefits by human mesenchymal stem cells (hMSCs)and Ang-1 gene-modified hMSCs after cerebral ischemia. J CerebBlood Flow Metab 2008; 28(2): 329–340.
7. Chang NK, Jeong YY, Park JS, Jeong HS, Jang S, Jang MJ, Lee JH,Shin SS, Yoon W, Chung TW, Kang HK. Tracking of neural stemcells in rats with intracerebral hemorrhage by the use of 3T MRI.Korean J Radiol 2008; 9(3): 196–204.
8. Dousset V, Tourdias T, Brochet B, Boiziau C, Petry KG. How to tracestem cells for MRI evaluation? J Neurol Sci 2008; 265(1–2):122–126.
https://www.amyjet.com/products/BPL-CL-50Q02-6A-50.shtml
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Sortase A Pentamutant，S. 金黄色，His标签，助力酶动力学研究！
葡萄球菌分选酶A是一种细菌转肽酶，通过在LPXTG识别基序处的苏氨酸和甘氨酸之间切割，将蛋白质共价附着在细菌细胞壁上，并催化苏氨酸的羧基和细胞壁肽聚糖的氨基之间形成酰胺键。这种化学物质已被用作分子“缝合器”，将具有C末端LPETGX基序的蛋白质特异性地连接到具有甘氨酸或氨基亚甲基基序的其他蛋白质或分子上。Sortase A五突变体表现出比野生型蛋白更高的活性。这种反应适用于溶液和活细胞表面的蛋白质。
重组金黄色葡萄球菌分选酶A（srtA），包含氨基酸26-206（末端）。这个结构包含一个N端His标签（6xHis）。该蛋白包含五个感兴趣的突变（P94R）、（D160N）、（D1 65A）、（K190E）和（K196T）。结合蛋白经亲和纯化。
艾美捷Sortase A Pentamutant，S. 金黄色，His标签：
货号：BPS-71046
物种：金黄色葡萄球菌（S. Aureus）
构建：Sortase A（His-26-206(结束)）（金黄色葡萄球菌）
突变：P94R, D160N, D165A, K190E, K196T
浓度：1.10 mg/ml
表达系统：大肠杆菌（E. coli）
纯度：≥90%
格式：水溶液
配方：25 mM MES, pH 6.5, 382 mM NaCl 和 10% 甘油
分子量（MW）：22 kDa
基因库访问号：AF162687
稳定性：至少在-80°C下保存6个月
存储：-80°C
使用说明：使用前在冰上解冻并轻轻混合。不要使用涡旋混合。开启前进行快速离心。分装成小体积并快速冷冻以长期保存。避免多次冻融循环。
检测条件：根据Sortase A检测试剂盒（BPS Bioscience #79937）进行检测，使用不同量的Sortase A。
应用：适用于研究酶动力学、筛选抑制剂和选择性分析。
Sortase A Pentamutant，S. 金黄色，His标签质量控制数据：
Sortase A Pentamutant，S. 金黄色，His标签文献参考：
1. Chen, I. et al., Proc Natl. Acad. Sci. (USA). 2011; 108(28): 11399-11404.
2. Kappel, K., et al., Protein Sci. 2012 Dec;21(12):1858-71.
https://www.amyjet.com/products/BPS-71046.shtml
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抗CD 19 CAR慢病毒（CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z; SIN载体）应用介绍
CD19（也称为分化簇19、B淋巴细胞表面抗原B4或CVID3）是在B细胞成熟的大多数阶段在B淋巴细胞表面表达的糖蛋白。它是B细胞终末分化的严格要求。CD19基因的突变会导致与受影响的抗体产生相关的严重免疫缺陷综合征，如CVID3（常见变量免疫缺陷3）。大多数B细胞恶性肿瘤表达正常至高水平的CD19，使其几乎成为癌症免疫疗法的理想靶点。Blinatumomab是一种CD19/CD3双特异性T细胞接合剂（BiTE），已被批准用于复发/难治性B前体ALL（急性淋巴细胞白血病），CD19是首个获批的CAR-T细胞疗法的靶点。CD19功能和表达谱的研究将继续扩大我们的知识，并支持在癌症治疗中更广泛的应用。
抗CD19 CAR慢病毒是复制能力不强的、基于HIV的VSV-G假型慢病毒颗粒，可以转导大多数哺乳动物细胞，包括原代细胞和非分裂细胞。这些病毒转导与第二代CAR（嵌合抗原受体）连接的抗CD19（克隆FMC63）的ScFv部分，含有CD8铰链、4-1BB和CD3ζ信号结构域（图1）。
图1. (A) 用于产生抗CD19 CAR慢病毒的慢病毒载体示意图。这个载体是一个自我灭活（SIN）载体。没有包含任何哺乳动物选择标记。 (B) 构建图示显示了抗CD19 CAR的组成部分。注意：该产品转导了与其他可获得的抗CD19 CAR慢病毒（BPS Bioscience # 78600, 78602 和 78775）相同的抗CD19 CAR构建（CD19 ScFv-CD8-4-1BB-CD3ζ），但在关键方面有所不同。请见图2。
艾美捷抗CD 19 CAR慢病毒（CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z; SIN载体）（#BPS-78601）应用：
作为T细胞中抗CD19 CAR评估的阳性对照。
转导优化实验。
产生抗CD19 CAR-T细胞（仅限研究使用，不得用于治疗目的）。
配方：
慢病毒颗粒由HEK293T细胞生产、浓缩，并在DMEM中重新悬浮。根据特殊请求，可以按定制配方包装病毒颗粒，需额外收费。
尺寸和滴度：
每瓶（50 µl）抗CD19 CAR的滴度≥ 3 x 10^8 转导单位（TU）/ml。每批的滴度会有所不同；确切的数值随每次发货提供。
存储：
慢病毒通过干冰运输。长期存储建议将病毒存放在-80°C。避免反复冻融循环。每次冻融循环都可能导致滴度显著下降。
生物安全：
慢病毒是使用第三代自我灭活（SIN）慢病毒载体生产的，确保慢病毒载体在转导和整合到目标细胞的基因组DNA后自我灭活。由于它们来自缺乏包装信号的包装质粒，因此转导细胞中不会表达任何HIV基因（gag、pol、rev）。尽管假型慢病毒是复制能力不足的，但它们需要在生物安全等级2的设施中使用。BPS建议遵循所有地方联邦、州和机构的规定，并采取所有适当的安全预防措施。
未提供的必需材料：
这些材料不随慢病毒提供，但必须按照设计协议使用。BPS Bioscience培养基、试剂和荧光素酶检测系统都经过验证和优化，建议使用这些材料以获得z佳结果。
抗CD 19 CAR慢病毒（CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z; SIN载体）相关产品：
Anti-CD19 CAR / NFAT (Luciferase) Reporter Jurkat Cell Line (CD19 SCFV-CD28-4-1BB-CD3ζ)
Anti-CD19 CAR-T Cells
Firefly Luciferase CD19 Knockout Raji Cell Line
CD19 Knockout Raji Cell Line
Firefly Luciferase CD19 Knockout NALM6 Cell Line
ONE-Step™ Luciferase Assay System
https://www.amyjet.com/products/BPS-78601.shtml