胶质母细胞瘤细胞U - 87 MG:神经肿瘤学研究中的常用实验平台
胶质母细胞瘤细胞是一种致病细胞,引发胶质母细胞瘤,常见于男性。有研究发现原发性胶质母细胞瘤与继发性胶质母细胞瘤的分子发生机制不同。原发性胶质母细胞瘤的分子改变以表皮生长因子受体(EGFR)的扩增与过量表达为主,而继发性胶质母细胞瘤则以p53的突变为主。
艾美捷胶质母细胞瘤细胞 U - 87 MG细胞是一种人类原发性胶质母细胞瘤细胞系,常用于研究胶质母细胞瘤的因果关系和进展。
U-87MG(U87MG)人脑星形胶质母细胞瘤细胞是由Ponten·J等建立,源于恶性神经胶质瘤;U-87MG细胞裸鼠皮下接种可成Chemicalbook瘤。细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌,培养条件:RPMI-1640+10%FBS;37℃,5%CO2。
U-87MG(U87MG)人脑星形胶质母细胞瘤细胞
细胞培养
U - 87 MG细胞在添加了10%FBS和1x pen - strep的Eagle最低必需培养基中维持培养。当培养物达到80 - 90%汇合时进行传代。对于2D水凝胶涂层培养和3D细胞培养,根据用户手册,使用VitroGel 3D - RGD和VitroGel RGD - PLUS,如下所述。
2D涂层培养方法
用VitroGel稀释溶液(类型1)以1:0、1:1和1:3的稀释度制备2D涂层水凝胶,然后与无细胞的U - 87 MG培养基以4:1的比例混合;向每个24孔板中加入300μL。水凝胶在室温下稳定20分钟,然后将细胞添加到悬浮在300μL覆盖培养基中的水凝胶顶部。每隔一天更换培养基。
3D涂层培养方法
根据制造商的方案,用VitroGel稀释溶液(类型1)以1:1和1:3的稀释度制备水凝胶。对于共聚焦/荧光成像,使用底部有盖玻片的8孔室培养细胞,每孔使用200μL水凝胶。每隔一天更换培养基。
荧光(IF)成像
对于IF成像,细胞在有盖玻片的腔室载玻片上生长,而不是在8孔板上。每个腔室容纳200μL水凝胶/细胞混合物。根据制造商的方案,使用Image - iT?固定/透化试剂盒、ActinGreen?488 ReadyProbes?试剂和NucBlue?固定细胞ReadyProbes?试剂(ThermoFisher)对细胞进行固定和染色。使用带有ZEN软件和ImageJ的Zeiss Axiovert 200M荧光细胞成像显微镜拍摄图像。
胶质母细胞瘤细胞U - 87 MG部分参考文献:
Kutwin, M. et al. Investigation of platinum nanoparticle properties against U87 glioblastoma multiforme. Arch Med Sci 13, 1322–1334 (2017).
Liu, H. et al. Differentiation of human glioblastoma U87 cells into cholinergic neuron. Neurosci. Lett. 704, 1–7 (2019).
Miyai, M. et al. Current trends in mouse models of glioblastoma. J. Neurooncol. 135, 423–432 (2017).
Wu, M. & Swartz, M. A. Modeling tumor microenvironments in vitro. J Biomech Eng 136, 021011 (2014).
Stock, K. et al. Capturing tumor complexity in vitro: Comparative analysis of 2D and 3D tumor models for drug discovery. Sci Rep 6, 28951 (2016).
https://www.amyjet.com/brand/U-87MG.shtml
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95%高纯度人血浆转铁蛋白:确保实验准确性的生物分子工具
转铁蛋白是一种单体糖蛋白,存在于血浆中,平均浓度为250mg/100ml。血浆中的特异性铁结合蛋白,在铁在身体器官之间的运输和分布、铁代谢和预防肾脏铁流失方面发挥作用。它以Tf结合铁的形式储存在骨髓中,还具有抑菌和抑菌活性。临床上,先天性疾病、新生儿、炎症性疾病、低蛋白血症和肾病综合征中观察到转铁蛋白的减少;妊娠、缺铁性贫血和接种肝炎的发病率都有所增加。培养物中所有类型的细胞都需要转铁蛋白才能最大限度地生长。
艾美捷人血浆转铁蛋白基本信息:
货号:16-16-032001
同义词:人转铁蛋白、侧营养因子
储存条件:≤ -20°C
纯度:≥95%(通过SDS-PAGE测定)
铁含量:≥每克1100微克
经FDA要求的检测,显示用于制备的血浆对HBsAg、抗-HCV、抗-HBc无反应,并且抗-HIV 1 & 2呈阴性。
不得用于人体或任何药物用途。仅限研究使用。
引用文献:
Enns, Caroline A., Riffat Ahmed, Jiaohong Wang, Akiko Ueno, Christal Worthen, Hidekazu Tsukamoto, and An-Sheng Zhang. "Increased Iron Loading Induces Bmp6 Expression in the Non-Parenchymal Cells of the Liver Independent of the BMP-Signaling Pathway." PloS one 8, no. 4 (2013): e60534.
SDS-PAGE:
4-12%Bis-Tris-NuPAGE凝胶
1. LMW Standard (BIO-RAD Cat. No. 161-0304)
2. Transferrin - 5 µg (non-reduced / no heat)
3. Transferrin - 10 µg (non-reduced / no heat)
4. Transferrin - 20 µg (non-reduced / no heat)
人血浆转铁蛋白文献参考:
MacGillivray, R.T.A. et al. 1982 Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 79,2504; Rivat,C. et al. 1992 J. Chromatogr. 576,71
Athens Research & Technology 的人血浆转铁蛋白都能发挥关键作用。对于从事细胞生物学研究的科学家来说,它是优化细胞培养条件的得力助手。在血液学和免疫学领域,有助于深入了解铁代谢与免疫系统之间的微妙关系。而在肿瘤研究中,转铁蛋白的异常表达和功能失调往往与肿瘤的发生、发展和转移密切相关。
https://www.amyjet.com/brand/16-16-032001.shtml
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DNMT Activity试剂盒,灵敏度是前身试剂盒的五倍
EpiQuik DNMT Activity试剂盒是包含溶液和试剂一套完整实验组件,它能允许实验者以极快的速度在96孔板上通过比色法测定DNA甲基转移酶激活/抑制.这个试剂盒简单方便,能提供成功执行DNMT激活/抑制实验所需的所有试剂,该实验不需要放射性物质或者任何特殊设备.该试剂盒比它前任试剂盒更精致,能显著增强样本信号和显著降低背景信号,此外的它的灵敏度是前任5倍.
EpiQuik DNMT(DNA甲基转移酶)活性/抑制分析超级试剂盒是无放射性实验.通用的DNMT底物稳定的包被在孔板里,甲基转移酶把甲硫氨酸的甲基集团转移给胞嘧啶,甲基化DNA底物.甲基化的DNA能被抗-5-甲基化胞嘧啶的抗体所识别.比率或者大量甲基化的DNA与酶的活性成比例,然后类似Elisa的反应,比色法测定DNMT的活性,其吸收波长为450nm,DNMT的活性与光密度值成比例.
艾美捷DNMT Activity试剂盒(P-3009)特点:
1、快捷的实验操作,完成实验不超过3个小时45分钟;
2、安全创新性的比色实验不需要放射性物质,提取或者亲和层析;
3、超灵敏检测极限:核提取物低至0.5ug,纯化酶低至0.5ng,灵敏度是前任试剂盒的5倍;
4、优化的抗体和增强液能高特异性的检测5-mc,与未甲基化的胞嘧啶没有交叉反应;
5、微孔板分析,既能适用手工操作,又能适用于高通量分析。
DNMT Activity试剂盒检测原理:
EpiQuik™ DNMT 活性/抑制测定超试剂盒(比色法)包含了测量 DNMT 活性或抑制所需的所有试剂。在这种测定中,一个通用的 DNMT 底物被稳定地包被在微孔板孔中。DNMT 酶从 AdoMet 转移一个甲基基团到胞嘧啶上,使 DNA 底物发生甲基化,并且甲基化的 DNA 可以被抗 5-甲基胞嘧啶抗体识别。然后,通过在微孔板分光光度计上读取 450 纳米波长下的吸光度,以类似于 ELISA 的反应测量甲基化 DNA 的比例或数量,这与酶活性成正比。测量到的光密度强度与 DNMT 酶的活性成正比。
图1:piQuik™ DNA甲基转移酶活性/抑制检测超套件(比色法)的示意图程序
图2:通过使用EpiQuik™ DNA甲基转移酶活性/抑制检测超套件(比色法)和MCF-7细胞核提取物展示DNA甲基转移酶活性检测的高灵敏度和特异性。MCF-7细胞的核提取物是通过使用EpiQuik™ 核提取物提取套件(目录号 OP-0002)制备的。
图3:通过使用重组DNA甲基转移酶1和EpiQuik™ DNA甲基转移酶活性/抑制检测超套件(比色法)展示DNA甲基转移酶活性/抑制检测的高灵敏度和特异性。
DNMT Activity试剂盒相关产品:
核提取物制备
OP-0002-1 EpiQuik™ 核提取物提取套件
DNA甲基转移酶活性/抑制检测及含量定量
P-3010 EpiQuik™ DNA甲基转移酶活性/抑制检测超套件(荧光法)
P-3011 EpiQuik™ DNA甲基转移酶1检测套件
P-3012 EpiQuik™ DNA甲基转移酶3A检测套件
P-3013 EpiQuik™ DNA甲基转移酶3B检测套件
https://www.amyjet.com/products/P-3009-48.shtml
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5-hmC DNA ELISA试剂盒:仅需2h,快速实验!
DNA羟甲基化修饰是基因组表观遗传学的重要调控方式,指5-甲基胞嘧啶(5-mC)在TET蛋白家族的催化作用下氧化生成5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC),完成DNA胞嘧啶的去甲基化过程。基因组甲基化异常导致了多种肿瘤的发生,DNA甲基化和羟甲基化是两种独立的表观改变,有研究表明两者有相反的功能作用,羟甲基化修饰作为去甲基化的一种,同样与肿瘤发生密不可分。
艾美捷5-hmC DNA ELISA试剂盒(P-1032)是经过全新优化的、完整的的试剂组合,可以利用抗体结合和ELISA原理方式,定量分析DNA中5-hmc。它可以直接检测哺乳动物,植物,真菌细菌,病毒,细胞,组织,血清/血浆以及其它体液中的总DNA样本的5-hmc的甲基化程度。
5-hmC DNA ELISA试剂盒具有以下优点和特性:
快速实验:优化实验操作,完成实验仅需2h
灵敏度:最低可检测0.01%的羟甲基化水平DNA
特异性:不与未修饰的胞嘧啶或者其它修饰的胞嘧啶有任何交叉反应
精确性:最优化的阳性对照标准品,提供堪比HPLC-MS的可靠结果
一致性:简化的操作流程,有效降低复孔间的变异系数(CV%)
完整性:试剂盒提供阳性对照与阴性对照,而无需额外试剂
5-hmC DNA ELISA试剂盒的原理与操作流程:
这个试剂盒包含了量化全局 DNA 羟甲基化所需的所有试剂。在这个测定中,DNA 被绑定到经过特殊处理以具有高 DNA 亲和性的条形孔中。DNA 的羟甲基化部分使用基于 5-hmC 单克隆抗体的检测复合物以一步法检测,然后通过在微孔板分光光度计中读取吸光度来进行比色定量。羟甲基化 DNA 的百分比与所测量的 OD 强度成正比。
5-hmC DNA ELISA试剂盒相关产品:
EpiQuik™ 全组蛋白提取套件
EpiQuik™ 核提取物提取套件
EpiQuik™ m6A RNA甲基化定量检测套件(比色法)
MethylFlash 全基因组DNA甲基化(5-mC)ELISA简易套件(比色法)
MethylFlash 甲基化DNA 5-mC定量检测套件(比色法)
BisulFlash™ DNA修饰检测套件
EpiQuik™ 组蛋白H3修饰多重检测套件(比色法)
https://www.amyjet.com/products/P-1032-48.shtml
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BGT-Ins(1,3,4,5)P4琼脂糖珠:更高的亲和力和选择性
Ins(1,3,4,5)P4 琼脂糖珠是一种生物化学研究中使用的亲和层析介质,主要用于分离和纯化与四磷酸肌醇(Ins(1,3,4,5)P4),也称为肌醇四磷酸或IP4有关的蛋白质和酶。
脂质包被珠被设计用于蛋白质下拉实验。用于检测纯化蛋白质、细胞裂解物中蛋白质的脂质结合,或放射性标记的体外翻译产物的结合。
BGT-Ins(1,3,4,5)P4珠由琼脂糖组成,每毫升珠含有10纳摩尔的结合Ins(1,4,4,5)P4,足以进行几次蛋白质结合实验。每1mL的Ins(1,3,4,5)P4珠粒含有少量的对照珠粒。
艾美捷Ins(1,3,4,5)P4琼脂糖珠(BGT-OPU-105)应用领域:
广泛应用于生物化学、分子生物学和药理学研究,特别是在研究细胞信号传导、钙离子动员和磷脂酰肌醇信号通路中。通过使用“Ins(1,3,4,5)P4 琼脂糖珠”,研究人员可以有效地从复杂样品中分离出与之相互作用的蛋白质,进而研究其功能和调控机制。
操作流程:
在使用“Ins(1,3,4,5)P4 琼脂糖珠”进行实验时,首先需要将介质平衡至适当的缓冲液中。然后,将含有目标蛋白质的样品加载到层析柱中,通过特异性结合,目标蛋白质将被固定在珠子上。非特异性结合的蛋白质则被洗脱,最后通过改变缓冲液条件或使用特定的洗脱缓冲液来洗脱目标蛋白质。
Ins(1,3,4,5)P4琼脂糖珠优势:
与传统的亲和层析介质相比,“Ins(1,3,4,5)P4 琼脂糖珠”提供了更高的亲和力和选择性,减少了非特异性结合,从而提高了纯化效率和蛋白质的回收率。此外,琼脂糖珠的稳定性和生物相容性使其成为长期存储和重复使用的理想选择。
研究案例引用:
在多个科研出版物中,“Ins(1,3,4,5)P4 琼脂糖珠”已被成功应用于识别和表征与Ins(1,3,4,5)P4结合的蛋白质,例如磷脂酰肌醇激酶和某些类型的磷脂酰肌醇磷酸酶。这些研究为理解细胞内信号传导机制提供了新的视角,并为相关疾病的药物开发提供了潜在的靶点。
Ins(1,3,4,5)P4琼脂糖珠文献参考:
1. Gálvez-Santisteban, M., Rodriguez-Fraticelli, A. and Martin-Belmonte, F. (2014). Phosphoinositides Coated Beads Binding Assay. Bio-protocol 4(3): e1039.
https://www.amyjet.com/featured/BGT-OPU-105.shtml
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Moss Bio专用偶联物:适用于各种免疫测定和应用
艾美捷Moss Bio-专用偶联物以均质、液体稳定的形式分批生产。它们适用于各种免疫测定和应用,包括ELISpot、ELISA、流式细胞术和Luminex等多路复用平台。MOSS偶联物产生z越的信噪比,可以定制以获得z佳性能。
液体稳定48个月以上
可定制以满足检测规范
出色的批次间再现性
所列标记物为1mL体积,浓度为1mg/mL。体积和浓度可以定制。Moss Bio还清除了IgG、IgGF(ab')2、IgM、IgA、IgE偶联物。
Moss Bio藻红蛋白(PE)偶联物:
Catalog # Description Concentration
SAPE-SK2 Test kit that contains 4 versions of SAPE conjguate 1 mg/mL
SAPE-001 Streptavidin-PE conjugate 1 mg/mL
SAPE-001G75 Same as SAPE-001 with modified buffer to allow storage at -20 deg C. Contains 75 mgs/mL of BSA 0.6 mg/mL
SAPE-001NB Streptavidin-PE conjugate (No BSA) 1 mg/mL
SAPE-003 Provides differentiated activity vs SAPE-001 through segregated population of conjugate during purification. 1 mg/mL
GTIG-001 Goat anti-Human lgG-PE conjugate 1 mg/mL
GTIGF-001 Goat anti-Human lgG,F(ab')2-PE conjugate 1 mg/mL
GTIM-001 Goat anti-Human lgM-PE conjugate 1 mg/mL
GTIA-001 Goat anti-Human lgA-PE conjugate 1 mg/mL
GTIE-001 Goat anti-Human lgE-PE conjugate 1 mg/mL
GRIG-001 Goat anti-Rabbit IgG-PE conjugate 1 mg/mL
GMIG-001 Goat anti-Mouse IgG-PE conjugate 1 mg/mL
DRIG-001 Donkey anti-Rabbit IgG-PE conjugate 1 mg/mL
DGIG-001 Donkey anti-Goat IgG-PE conjugate 1 mg/mL
Moss Bio辣根过氧化物酶(HRP)结合物:
Catalog # Description Concentration
SAHRP-001 Streptavidin-HRP conjugate 1 mg/mL
GTIG-002 Goat anti-Human lgG-HRP conjugate 1 mg/mL
GTIGF-002 Goat anti-Human lgG,F(ab')2-HRP conjugate 1 mg/mL
GTIM-002 Goat anti-Human lgM-HRP conjugate 1 mg/mL
GTIA-002 Goat anti-Human lgA-HRP conjugate 1 mg/mL
GTIE-002 Goat anti-Human lgE-HRP conjugate 1 mg/mL
GRIG-002 Goat anti-Rabbit IgG-HRP conjugate 1 mg/mL
GMIG-002 Goat anti-Mouse IgG-HRP conjugate 1 mg/mL
DRIG-002 Donkey anti-Rabbit IgG-HRP conjugate 1 mg/mL
DGIG-002 Donkey anti-Goat IgG-HRP conjugate 1 mg/mL
Moss Bio碱性磷酸酶(AP)结合物:
Catalog # Description Concentration
SAAP-001 Streptavidin-AP conjugate 1 mg/mL
GTIG-003 Goat anti-Human lgG-AP conjugate 1 mg/mL
GTIGF-003 Goat anti-Human lgG,F(ab')2-AP conjugate 1 mg/mL
GTIM-003 Goat anti-Human lgM-AP conjugate 1 mg/mL
GTIA-003 Goat anti-Human lgA-AP conjugate 1 mg/mL
GTIE-003 Goat anti-Human lgE-AP conjugate 1 mg/mL
GRIG-003 Goat anti-Rabbit IgG-AP conjugate 1 mg/mL
GMIG-003 Goat anti-Mouse IgG-AP conjugate 1 mg/mL
DRIG-003 Donkey anti-Rabbit IgG-AP conjugate 1 mg/mL
DGIG-003 Donkey anti-Goat IgG-AP conjugate 1 mg/mL
Moss Bio专注于高品质液体稳定免疫测定试剂的生产,涵盖底物、结合物以及其他关键检测组分。艾美捷科技是Moss Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/Moss-Bio-new.shtml
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Moss Bio--MOSS-Link HRP-IgG试剂盒,无需重构,即混即用!
Moss Bio-MOSS HRP-IgG 偶联试剂盒利用一种新颖的化学技术,通过一个简单的程序生成高度可重复的IgG-HRP偶联物。结果表明,这些偶联物具有极高的稳定性,在37ºC下储存60天后,即使在0.5μg/mL的浓度下也能保持100%的活性。
艾美捷Moss Bio-MOSS-Link HRP-IgG试剂盒特点:
基于液体的试剂 - 无需重构,即混即用!
完全可扩展 - 每次反应可以偶联0.1至1克IgG。
提供足够的活化HRP以4:1的HRP:IgG比例偶联所有IgG。
高效的HRP结合 - 通常不需要偶联物纯化。
自定义HRP:IgG比例,为不同应用创建优化的偶联物。
与Lightning-Link™和其他常见化学方法相比,偶联物的稳定性大大提高。
每个试剂盒包括所有必需的试剂,以4:1的HRP-IgG比例偶联所述数量的IgG。
Moss Bio--MOSS-Link HRP-IgG试剂盒:
目录号 描述
HRP-Link-AC 用于偶联0.1毫克IgG的试剂盒(1 × 0.1mg)
HRP-Link-CC 用于偶联0.3毫克IgG的试剂盒(3 × 0.1mg)
HRP-Link-AF 用于偶联1毫克IgG的试剂盒(1 × 1mg)
HRP-Link-AH 用于偶联10毫克IgG的试剂盒(1 × 10mg)
有关MOSS-Link HRP和生物素标记试剂盒的详细信息和使用方法:
使用快速IgG生物素化和RPE-IgG标记试剂盒在MagPlex®-Avidin微球上开发IL-6检测方法。
Moss Bio专注于高品质液体稳定免疫测定试剂的生产,涵盖底物、结合物以及其他关键检测组分。艾美捷科技是Moss Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Moss Bio--MOSS标记稀释剂,降低每个反应的成本
Moss Bio-MossGuard™ HRP偶联物稳定稀释液:
在长期储存过程中,保持辣根过氧化物酶偶联抗体和其他蛋白质在极低浓度下的功能完整性和活性。
艾美捷Moss Bio-MOSS标记稀释剂特点:
储存即用稀释液(1:1000至1:100,000),在冰箱中保持酶活性,无需分装或冷冻。
提供无蛋白质和无牛血清白蛋白(BSA)的配方,以满足您特定的背景和检测要求。
在酶联免疫吸附测定(ELISA/EIA)、酶联免疫斑点法(ELISpot)、放射免疫分析(RIA)、免疫印迹和微阵列中稳定酶和对照材料。
降低每个反应的成本。
配方选项:
定制牛血清白蛋白(BSA)浓度(标准为5毫克/毫升)。
用其他蛋白质或非动物阻断剂替代BSA。
替代的防腐剂配方。
定制偶联物活性水平以匹配当前配方。
颜色选项:
使用兼容的染料制作一系列颜色。
独特地识别您的试剂。
通过可见试剂减少检测错误。
Moss Bio-HRP偶联物的稳定稀释剂:
Catalog # Diluent Name Description
MGP4A-001 MossGuard Test Pack 100 mL of all 4 versions (M, T, S, D) of MossGuard
MGHRP011 MossGuard-M 1000 mL stabilizing HRP conjugate diluent (green)
MGHRP022 MossGuard-T 1000 mL stabilizing HRP conjugate diluent (orange)
MGHRP033 MossGuard-S 1000 mL stabilizing HRP conjugate diluent (amber)
MGHRP044 MossGuard-D 1000 mL stabilizing HRP conjugate diluent (red)
HRPD-100 HRP diluent 100 mL HRP conjugate diluent
HRPD-500 HRP diluent 500 mL HRP conjugate diluent
HRPD-1000 HRP diluent 1000 mL HRP conjugate diluent
Moss Bio-PE偶联物的稳定稀释剂:
Catalog # Diluent Name Description
PECD-100 Phycoerythrin Conjugate Diluent 100 mL stabilizing diluent for PE conjugates
PECD-500 Phycoerythrin Conjugate Diluent 500 mL stabilizing diluent for PE conjugates
PECD-1000 Phycoerythrin Conjugate Diluent 1000 mL stabilizing diluent for PE conjugates
Moss Bio-AP偶联物的稳定稀释剂:
Catalog # Diluent Name Description
ALPD-100 Alkaline Phosphatase Conjugate Diluent 100 mL stabilizing diluent for AP conjugates
ALPD-500 Alkaline Phosphatase Conjugate Diluent 500 mL stabilizing diluent for AP conjugates
ALPD-1000 Alkaline Phosphatase Conjugate Diluent 1000 mL stabilizing diluent for AP conjugates
Moss Bio专注于高品质液体稳定免疫测定试剂的生产,涵盖底物、结合物以及其他关键检测组分。艾美捷科技是Moss Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/Moss-Bio-new.shtml