Moss Bio/艾美捷底物试剂,优质的灵敏度、极低的背景值
Moss Bio专注于高品质液体稳定免疫测定试剂的生产,涵盖底物、结合物以及其他关键检测组分。液体状态稳定是其核心技术、大规模高效生产流程,助力满足客户从检测开发到生产的个性化需求。多数产品的保质期超 36 个月,具有优质的灵敏度、极低的背景值以及良好的批间一致性。
艾美捷Moss Bio产品线优势特点:
1. 专生产HRP、AP底物(液态形式,产品稳定)、高灵敏度和精确度的偶联物(荧光及化学发光)、偶联试剂盒等,IVD原料生产厂家;
2. 产品大多可稳定36个月以上,有多篇文献支撑,产品性能可靠;
3. Moss可接受各种底物定制,生产符合ISO 9001:2015认证。
下图为Moss Bio授权艾美捷科技有限公司(AmyJet Scientific Inc.)作为Moss Bio在中国区域的代理授权书。
Moss Bio特色产品:
货号 名称 规格
TMBHK-SK TMBHK diluent 1Pack
TMB-SK2 TMBUS Evaluation Pack 1Pack
TMB-SK TMB Evaluaiton Pack 1Pack
TMBHK-100 TMB-High Kinetic 100mL
TMBHK-1000 TMB-High Kinetic 1L
TMBHKD-100 TMB-High Kinetic Diluent 100mL
TMBHKD-1000 TMB-High Kinetic Diluent 1L
TMBUS-100 TMB-Ultrasensitive 100mL
TMBUS-1000 TMB-Ultrasensitive 1L
TMBUSD-100 TMB-Ultrasensitive Diluent 100mL
TMBUSD-1000 TMB-Ultrasensitive Diluent 1L
TMBE-100 TMB-ELISA 100mL
TMBE-1000 TMB-ELISA 1L
TMBED-100 TMB-ELISA 100mL
TMBED-1000 TMB-ELISA 1L
TMBES-100 TMB Stable Stop Substrate for ELISA 100mL
TMBES-1000 TMB Stable Stop Substrate for ELISA 1L
ABTS-100 ABTS Substrate 100mL
ABTS-1000 ABTS Substrate 1L
NPPD-100 pNPP for ELISA 100mL
NPPD-1000 pNPP for ELISA 1L
NPPDD-100 Substrate Diluent for NPPD 100mL
NPPDD-1000 Substrate Diluent for NPPD 1L
TMBM-100 TMB for Membranes 100mL
TMBM-1000 TMB for Membranes 1L
TMBH-100 TMB for Histo 100mL
TMBH-1000 TMB for Histo 1L
TMBMX-100 TMB for Microarrays 100mL
TMBMX-1000 TMB for Microarrays 1L
NBTM-100 BCIP/NBT for membranes 100mL
NBTM-1000 BCIP/NBT for membranes 1L
NBTH-100 BCIP/NBT plus 100mL
NBTH-1000 BCIP/NBT plus 1L
ChemiHRP-100 ChemiHRP substrate (A+B) 100mL
ChemiHRP-1000 ChemiHRP substrate (A+B) 1L
ChemiHRP-DIL ChemiHRP-Diluent 1L
ChemiAP-RK100 ChemiAP Rapid Kinetic Chemiluminescent Substrate 100mL
https://www.amyjet.com/news/Moss-Bio-new.shtml
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Moss Bio/艾美捷:HRP的可溶性底物全方案
艾美捷Moss Bio-HRP的可溶性底物分为以下六种:
1、TMBHK
TMB-HK(高动力学)是Moss Bio的高反应活性液态稳定底物。为了提高速度而设计,TMB-HK可以在短短1分钟内提供快速且强烈的比色反应,非常适合需要快速发育信号的工作流程。
特点
10-15分钟的阅读时间
无毒性
单一成分
48个月的稳定性
目录编号 描述
TMBHK-100 100毫升TMB-HK(高动力学)底物
TMBHK-500 500毫升TMB-HK(高动力学)底物
TMBHK-1000 1000毫升TMB-HK(高动力学)底物
TMBHKD-1000 1000毫升TMB-HK(高动力学)底物稀释液
2、TMBUS
TMB-US是一种超灵敏的液态底物。TMB-US能在几分钟内提供快速且强烈的比色反应。与TMB-HK相比,其反应活性大约低20%,但具体会根据检测方法而有所不同。
特点:
15-30分钟的阅读时间
无毒性
单一成分
目录编号 描述
TMBUS-100 100毫升TMB-US(超灵敏)底物
TMBUS-500 500毫升TMB-US(超灵敏)底物
TMBUS-1000 1000毫升TMB-US(超灵敏)底物
TMBD-1000 1000毫升TMB-US(超灵敏)底物稀释液
3、TMBE
TMB-E是一种液态稳定底物,是TMB-US的反应性较低的版本。Moss Bio优化了TMB-E,为那些可能不需要如此高灵敏度的检测方法提供一种反应较慢的HRP(辣根过氧化物酶)底物。
特点:
15-30分钟的阅读时间
无毒性
单一成分
目录编号 描述
TMBE-100 100毫升TMB-E底物
TMBE-500 500毫升TMB-E底物
TMBE-1000 1000毫升TMB-E底物
TMBED-1000 1000毫升TMB-E底物稀释液
4、TMBES
TMB-ES(稳定停止)是Moss Bio开发Z慢的液态稳定TMB底物,但在加入停止溶液后仍能保持信号数小时。TMB-稳定停止非常适合那些有延迟阅读时间的工作流程。
特点:
20-30分钟的阅读时间
无毒性
单一成分
目录编号 描述
TMBES-100 100毫升TMB-稳定停止底物
TMBES-500 500毫升TMB-稳定停止底物
TMBES-1000 1000毫升TMB-稳定停止底物
5、TMB评估包
介绍MOSS的TMB测试包——这是一个宝贵的资源,为客户提供了测试和选择Z适合其检测优化和开发需求的完美TMB变体的灵活性。这个全面的包装展示了一系列的TMB配方,使您能够微调您的检测以获得Z佳性能。有了MOSS TMB测试包,您拥有了实现您在诊断、研究和工业应用中Z高准确性和灵敏度水平所需的工具,确保您在科学发现的世界中取得成功。
目录编号 描述
TMBHK-SK 包含100%、80%、60%、40%、20%稀释度的TMB-HK,以及一瓶TMBHK稀释液,如有需要可进一步定制。
TMB-SK 包含Moss Bio所有的底物及其相应的稀释液。
TMB-SK2 包含100%、80%、60%稀释度的TMB-US及其稀释液。还包括TMBE和TMBES。
6、ABTS
ABTS是TMB底物的替代品。液态稳定的ABTS能产生一种在405纳米处可测量的强烈蓝绿色。
特点:
24个月稳定性
20-30分钟的阅读时间
无毒性
单一成分
目录编号 描述
ABTS-100 100毫升ABTS底物
ABTS-500 500毫升ABTS底物
ABTS-1000 1000毫升ABTS底物
Moss Bio专注于高品质液体稳定免疫测定试剂的生产,涵盖底物、结合物以及其他关键检测组分。艾美捷科技是Moss Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Moss Bio/艾美捷:AP可溶性底物,15-30分钟,无毒性
Moss Bio-pNPP:
这是一种极好的磷酸酶基础酶联免疫吸附测定(ELISA)的底物。它产生的最终产物是可溶性的,呈黄色,可在405纳米至410纳米处读取。可以进行动力学和终点测定。该产品在DEA中进行了缓冲处理。
艾美捷Moss Bio-pNPP特色:
1、在DEA缓冲液中的单一成分
2、15-30分钟的阅读时间
3、无毒性
Moss Bio-pNPP相关产品:
目录编号 描述
NPPD-100 100毫升p-NPP底物,用于碱性磷酸酶(AP)
NPPD-500 500毫升p-NPP底物,用于碱性磷酸酶(AP)
NPPD-1000 1000毫升p-NPP底物,用于碱性磷酸酶(AP)
NPPDD-1000 1000毫升p-NPP底物稀释液
Moss Bio专注于高品质液体稳定免疫测定试剂的生产,涵盖底物、结合物以及其他关键检测组分。艾美捷科技是Moss Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Moss Bio/艾美捷:时间短,无毒性的HRP不溶性底物
艾美捷Moss Bio-HRP的不溶性底物分为以下三种:
1、TMBM
TMBM是一种过氧化物酶底物,它在反应位点产生一种稳定的不溶性蓝绿色沉淀,几乎没有背景。它非常适合许多免疫印迹程序,并能显著提高在各种膜上进行的检测的检测限。
特点:
10-30分钟的阅读时间
无毒性
单一成分
48个月稳定性
目录编号 描述
TMBM-100 100毫升不溶性TMB底物
TMBM-500 500毫升不溶性TMB底物
TMBM-1000 1000毫升不溶性TMB底物
2、TMBH
在过氧化物酶活性位点产生一种稳定的不溶性蓝色反应产物。与TMBM相同,但还可以用于免疫组织化学程序和原位杂交技术。它也可以被采用用于印迹方法。
特点:
10-30分钟的阅读时间
无毒性
单一成分
目录编号 描述
TMBH-100 100毫升不溶性TMBH底物
TMBH-500 500毫升不溶性TMBH底物
TMBH-1000 1000毫升不溶性TMBH底物
3、TMBMX
推荐用于微阵列应用和免疫印迹。这是一种过氧化物酶底物,它在反应位点产生一种不溶性蓝色沉淀,几乎没有背景。
特点:
10-30分钟的阅读时间
无毒性
单一成分
48个月稳定性
目录编号 描述
TMBMX-100 100毫升不溶性TMB-MX底物
TMBMX-500 500毫升不溶性TMB-MX底物
TMBMX-1000 1000毫升不溶性TMB-MX底物
Moss Bio专注于高品质液体稳定免疫测定试剂的生产,涵盖底物、结合物以及其他关键检测组分。艾美捷科技是Moss Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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胶质母细胞瘤细胞U - 87 MG的二维和三维VitroGel可调支架培养
胶质母细胞瘤是一种发生在大脑或脊髓的侵袭性癌症。多年来,为了帮助理解胶质母细胞瘤的发病机制和进展,人们开发了各种胶质母细胞瘤模型。然而,由于促进这种疾病的遗传和环境因素多种多样且复杂,以及其起源组织的不确定性,这一过程变得复杂。
各种研究表明,在二维环境中培养的肿瘤细胞在细胞增殖能力、抗凋亡能力、分化能力、侵袭能力甚至生物标志物表达方面表现出明显的差异。此外,仅仅研究肿瘤来源的细胞是不够的;肿瘤本质上是三维的,这种形态在肿瘤进展中起着作用,即血管生成,这是恶性肿瘤的关键因素。此外,在胶质母细胞瘤中发现了具有类似干细胞特性的癌细胞,它们被认为是导致对常规治疗的高抗性和高复发率的原因。因此,准确有效地开发胶质母细胞瘤的治疗方法将需要三维模型,这些模型能够紧密模拟三维肿瘤中表现出的细胞 - 细胞相互作用。
艾美捷-胶质母细胞瘤细胞U - 87 MG细胞是一种人类原发性胶质母细胞瘤细胞系,常用于研究胶质母细胞瘤的因果关系和进展。在这里,我们讨论使用我们的二维和三维VitroGel可调支架培养这些细胞的生长情况。
细胞培养
U - 87 MG细胞在添加了10%FBS和1x pen - strep的Eagle最低必需培养基中维持培养。当培养物达到80 - 90%汇合时进行传代。对于2D水凝胶涂层培养和3D细胞培养,根据用户手册,使用VitroGel 3D - RGD和VitroGel RGD - PLUS,如下所述。
2D涂层培养方法
用VitroGel稀释溶液(类型1)以1:0、1:1和1:3的稀释度制备2D涂层水凝胶,然后与无细胞的U - 87 MG培养基以4:1的比例混合;向每个24孔板中加入300μL。水凝胶在室温下稳定20分钟,然后将细胞添加到悬浮在300μL覆盖培养基中的水凝胶顶部。每隔一天更换培养基。
3D涂层培养方法
根据制造商的方案,用VitroGel稀释溶液(类型1)以1:1和1:3的稀释度制备水凝胶。对于共聚焦/荧光成像,使用底部有盖玻片的8孔室培养细胞,每孔使用200μL水凝胶。每隔一天更换培养基。 免疫
荧光(IF)成像
对于IF成像,细胞在有盖玻片的腔室载玻片上生长,而不是在8孔板上。每个腔室容纳200μL水凝胶/细胞混合物。根据制造商的方案,使用Image - iT?固定/透化试剂盒、ActinGreen?488 ReadyProbes?试剂和NucBlue?固定细胞ReadyProbes?试剂(ThermoFisher)对细胞进行固定和染色。使用带有ZEN软件和ImageJ的Zeiss Axiovert 200M荧光细胞成像显微镜拍摄图像。
结果:
在2D VitroGel系统上培养U - 87 MG细胞促进球体形态的形成。 为了研究我们的2D VitroGel系统是否有利于U - 87 MG细胞在二维系统中的生长,我们在我们的两种VitroGel产品的各种稀释液中培养它们。U - 87 MG细胞从人类胶质母细胞瘤肿瘤中收获,尽管在标准的2D培养中它们的固有性质是聚集,但它们采用成纤维细胞样形态,仅形成小聚集体(图1A)。在VitroGel水凝胶中,细胞表现出更多的球体聚集,即使在较低的稀释度下(图1B - E)。在两种水凝胶的1:3稀释度下(图1C,E),形成的集落较小,但在新的更软的VitroGel RGD - PLUS中,细胞聚集体表现出一种有趣的形态特征:它们在聚集体之间形成桥梁(图1E)。
图1:U - 87 MG细胞在VitroGel 3D - RGD和VitroGel RGD - PLUS的2D水凝胶厚涂层表面上生长2天。在1:0稀释度下,细胞在两种水凝胶的表面聚集形成球体(B,C)。在1:3稀释度下(C,E),柔软的物质有助于细胞在VitroGel RGD - PLUS表面的不同球体之间建立连接(黄色箭头)。 VitroGel RGD - PLUS在3D培养7天后促进细胞间网络的发展 为了进一步研究VitroGel RGD - PLUS促进细胞间网络形成的能力,我们在不同稀释度的三维培养中培养U - 87 MG细胞。我们发现,在原始VitroGel 3D - RGD的两种浓度下,细胞都可以在水凝胶中沉淀和生长(第2天,图2A - B),但在7天后(图2D - E),它们的总体扩散没有改变,它们可以形成簇状结构,但没有表现出细胞间网络连接(图2E)。在VitroGel RGD - PLUS中,细胞不仅在第2天就沉淀到水凝胶中,而且它们表现出与VitroGel 3D - RGD中细胞明显不同的形态:它们更长,并开始建立细胞间网络。7天后,它们在3D水凝胶中表现出广泛的细胞 - 细胞连接(图2H - I),其簇比VitroGel 3D - RGD中的簇大得多(图2J)。
图2:U - 87 MG细胞在VitroGel 3D - RGD和VitroGel RGD - PLUS中培养。细胞可以在两种水凝胶的1:1和1:3稀释度的3D水凝胶中生长。细胞在VitroGel 3D - RGD中融入水凝胶(A - D),但无法形成网络连接(E)。然而,在新的VitroGel RGD - PLUS中,细胞在2天后融入(F - G),但在第7天能够形成细胞间肌动蛋白连接(H - J)。
https://www.amyjet.com/brand/U-87MG.shtml
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高纯度,来源可靠且稳定的人血浆转铁蛋白
转铁蛋白在生物体内承担着至关重要的职责。它是一种关键的铁结合糖蛋白,负责在体内运输和调节铁离子的分布。这一功能对于细胞的生长、代谢和生存来说不可或缺。
在科研中,深入研究转铁蛋白的特性和作用机制,对于理解众多生理和病理过程具有深远意义。 而 Athens Research & Technology 的人血浆转铁蛋白具有诸多显著优势。
首先,其纯度极高,确保了实验结果的准确性和可重复性。每一批次都经过严格的质量控制检测,以满足z苛刻的科研标准。这意味着您在进行实验时,无需担忧杂质的干扰,能够专注于探索转铁蛋白的奥秘。
其次,它的来源可靠且稳定。来源于人类血浆的转铁蛋白,经过精心的提取和纯化工艺,z大程度地保留了其天然的结构和生物学活性。这使得在实验中能够更真实地模拟体内环境,为研究提供更具可靠性的数据。无论是在细胞培养中,为细胞提供必需的铁元素,促进细胞的健康生长和增殖;还是在生物化学研究中,用于探究转铁蛋白与其他分子的相互作用;亦或是在疾病研究中,揭示转铁蛋白在各类疾病发生发展中的角色。
艾美捷人血浆转铁蛋白基本信息:
Transferrin, Human Plasma
ART Catalog No. 16-16-032001
分子量:80,000蛋白质测定:双缩脲法铁含量:≥1100ug/g纯度:SDS-PAGE纯度:≥95%来源:人血浆检测:对HBsAg、抗- HCV、抗- HBC无反应。 经FDA批准的抗HIV 1和2测试呈阴性。
Athens Research & Technology 的人血浆转铁蛋白都能发挥关键作用。对于从事细胞生物学研究的科学家来说,它是优化细胞培养条件的得力助手。在血液学和免疫学领域,有助于深入了解铁代谢与免疫系统之间的微妙关系。而在肿瘤研究中,转铁蛋白的异常表达和功能失调往往与肿瘤的发生、发展和转移密切相关。
https://www.amyjet.com/brand/16-16-032001.shtml
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ChIP-Seq试剂盒:EpiNext ChIP-Seq高灵敏度试剂盒
蛋白质-DNA相互作用在信号转导、基因转录、染色体分离、DNA复制和重组以及表观遗传沉默等细胞功能中扮演着关键角色。识别DNA结合蛋白的遗传靶标并了解基因组范围内蛋白质-DNA相互作用的机制对于理解细胞过程非常重要。染色质免疫沉淀(ChIP)随后进行下一代测序(ChIP-Seq)为研究基因组范围内的蛋白质-DNA相互作用提供了一个有利的工具。它允许检测特定蛋白在活细胞中结合到特定序列。特别是,针对各种转录因子(TF)的ChIP抗体,用于通过ChIP-Seq进行全基因组转录因子结合位点分析的需求很高。这种分析要求ChIPed DNA含有Z小的背景,以便可靠地识别真正的TF富集区域。目前使用的ChIP-Seq方法在识别基因组范围内的蛋白质-DNA相互作用中发挥着重要作用。然而,这些方法仍有几个缺点:1) 需要大量的细胞/组织以获得足够的文库DNA产量,因此这些方法不能用于数量有限的生物样本,如肿瘤活检和胚胎组织;2) ChIPed DNA的背景水平高;3) 程序耗时(超过3天)且不便。
为了解决这个问题,EpigenTek开发了EpiNext™ ChIP-Seq高灵敏度试剂盒,通过结合其基于微孔板的超ChIP和高灵敏度DNA文库构建技术。
艾美捷ChIP-Seq试剂盒(P-2030)具有以下特点:
1、优化的缓冲液和协议通过克服导致非特异性富集的弱点,允许Z小的ChIP背景,从而提高ChIP反应的灵敏度和特异性。
2、通过使用独特的嵌合蛋白,其中包含Z大数量的IgG结合域,涂覆在条形孔上,增加抗体的选择性和捕获效率。这允许在广泛的pH范围内强烈结合任何IgG亚型抗体,无论其是单克隆还是多克隆形式。
3、高效的目标DNA富集。正负对照的富集比率> 500。
4、高灵敏度和灵活性:可用于非条形码(单重)和条形码(多重)DNA文库准备。输入细胞数量可少至50,000个,范围从50,000到1,000,000个细胞。可以使用包括数量有限的样本在内的广泛的细胞/组织样本。
5、快速和简化的程序:从细胞/组织到文库DNA的过程少于7小时。从ChIPed DNA到大小选择的每个步骤之间不需要清洁,所有反应都在同一管中进行,从而节省时间并防止处理错误或丢失宝贵的样本。无需凝胶的大小选择进一步减少了准备时间。
6、高度方便使用:试剂盒包含ChIP-Seq每个步骤所需的所有组分,这些组分足以进行ChIP和ChIPed DNA文库准备,从而使ChIP-Seq成为Z方便、可靠和一致的结果。
7、Z小化偏差:超高频放大和可选的无PCR步骤允许以Z小的序列偏差和低错误率获得可重复的高产量DNA文库。
ChIP-Seq试剂盒检测原理:
EpiNext™ChIP-Seq高灵敏度试剂盒包含从哺乳动物细胞或组织开始成功进行ChIP-Sex所需的所有试剂。在ChIP反应中,染色质从细胞/组织中分离出来,靶蛋白-DNA复合物使用感兴趣的抗体进行免疫沉淀。然后清洗、释放和洗脱免疫沉淀的DNA。试剂盒中包括阳性对照抗体(RNA聚合酶II)、阴性对照非免疫IgG和GAPDH引物,它们可以用作阳性对照,以证明试剂盒试剂和方案的有效性。RNA聚合酶II被认为富含GAPDH基因启动子,预计在大多数生长的哺乳动物细胞中进行转录,可以被RNA聚合酶II抗体免疫沉淀,但不能被非免疫IgG免疫沉淀。在文库制备中,ChIPed DNA片段同时进行末端修复和dA末端抛光。然后将接头连接到抛光的DNA片段的两端进行扩增和测序。使用MQ结合珠对连接片段进行尺寸选择和纯化,从而可以快速准确地选择DNA的尺寸。用高保真PCR混合物扩增选定大小的DNA片段,确保从Z少量的起始材料中获得Z大产量,并以低错误率和Z小偏差提供高精度的文库DNA扩增。
左图.EpiNext™ ChIP-Seq高灵敏度试剂盒的工作流程
右图.高灵敏度ChIP:从不同数量的MBD-231细胞中分离出的剪切染色质用于GAPDH启动子中RNA聚合酶II富集的ChIP-qPCR分析。
运输与储存:
试剂盒分两部分运输:第一部分在常温下运输,第二部分则在4°C的冰冻冰袋上运输。收到后:立即将以下组分存放在-20°C:富集增强剂、核糖核酸酶A、10X末端修饰缓冲液、末端修饰酶混合物、末端修饰增强剂、2X连接缓冲液、T4 DNA连接酶、接头、2X HiFi PCR 主混合物、引物U、引物I和洗脱缓冲液。将以下组分存放在4°C:WB、AB、CB、BS、蛋白酶抑制剂混合物、非免疫IgG、抗RNA聚合酶II、蛋白酶K、GAPDH引物 - 前向、GADPH引物 - 反向,以及8孔分析条(带1框架)和MQ结合珠。所有其他组分存放在室温下。如果储存得当,试剂盒的所有组分从发货日期起稳定6个月。注意:使用前检查WB和CB是否含有盐析物。如果有,可短暂在室温或37°C下加热并摇动缓冲液,直到盐分重新溶解。
https://www.amyjet.com/products/P-2030-12.shtml
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HDAC Activity试剂盒:组蛋白去乙酰化酶HDAC活性/抑制直接分析试剂盒
ε-氨基特定赖氨酸残基的乙酰化是核心组蛋白中Z可靠的表观遗传标记之一,对于调节多种细胞过程至关重要。组蛋白乙酰转移酶(HATs)催化的组蛋白乙酰化似乎特别重要,因为它与基因组的活性区域相关联。相比之下,组蛋白去乙酰化酶(HDACs)催化的组蛋白去乙酰化导致转录抑制。到目前为止,至少已经鉴定出4类HDACs。I类HDACs包括1、2、3和8。II类HDACs包括4、5、6、7、9和10。III类酶,即sirtuins,需要NAD+辅因子,包括SIRTs 1-7。IV类酶只包含HDAC11,具有I类和II类的特征。图1. HATs和HDACs催化的组蛋白乙酰化和去乙酰化
HDACs紧密参与细胞周期调控、细胞增殖以及人类疾病的发展,包括癌症、心血管疾病和肺部疾病以及神经系统疾病。例如,在各种肿瘤细胞中,发现HDAC酶过度表达。在慢性阻塞性肺病(COPD)中,观察到HDACs减少。在亨廷顿病中,HDAC4显著参与其中。检测HDACs的活性和抑制对于阐明表观遗传调控基因激活和沉默的机制,以及促进癌症诊断和治疗具有重要意义。
检测HDAC活性/抑制的方法只有几种。这些方法基于通过赖氨酸内肽酶或胰蛋白酶测量去乙酰化的组蛋白裂解,存在显著的弱点:(1) 由于来自提取物的赖氨酸内肽酶的干扰,不能使用细胞/组织的核提取物;(2) 胰蛋白酶敏感的HDAC抑制剂不适合用这些方法测试,因为当化合物库中存在胰蛋白酶抑制剂时,胰蛋白酶消化可能导致假阳性;(3) 酶溶液或测试化合物溶剂中常见的DMSO和含巯基化学物质的高干扰;(4) 直接测量HDAC转化的去乙酰化产物的准确性较低。这些问题通过EpigenTek早期的EpiQuik™ HDAC活性/抑制检测试剂盒避免了,这是一种流行的HDAC活性和抑制检测方法。
艾美捷 HDAC Activity试剂盒(P-4034):HDAC活性/抑制直接检测试剂盒(比色法)是其前身的进一步改进——这种Z新方法保留了前一版本中的简单性、快速性、高通量能力和非放射性,同时提供了以下优势:
1、改进的试剂盒组成使背景信号非常低,这使得检测更准确、敏感、可靠和一致。
2、创新的比色检测方法通过直接检测HDAC转化的去乙酰化产物来测量HDAC活性/抑制,而不是基于胰蛋白酶的肽裂解,从而消除了由DMSO、含巯基化学物质、胰蛋白酶和细胞赖氨酸内肽酶引起的检测干扰。
3、可以使用细胞/组织提取物和纯化的HDAC酶,这允许检测HDAC抑制剂在体内和体外的抑制效果。
4、新颖的检测原理实现了高灵敏度。可以从低至0.5纳克的纯化HDAC酶中检测到活性,这比通过基于胰蛋白酶的肽裂解检测方法获得的灵敏度高出约10倍。
5、包含去乙酰化组蛋白标准品,允许定量HDACs的特异性活性。
6、曲古菌素A(TSA),一种强效的I类和II类HDAC活性抑制剂,作为HDAC抑制的阳性对照。
7、条形孔微孔板格式使检测灵活快速:手动或高通量分析可在3.5小时内完成。
HDAC Activity试剂盒:组蛋白去乙酰化酶HDAC活性/抑制直接分析试剂盒检测原理:
Epigenase™HDAC活性/抑制检测试剂盒包含测量HDAC活性或抑制所需的所有试剂。在该测定中,乙酰化组蛋白HDAC底物被稳定地固定在微孔板孔上。活性HDACs与底物结合,并从底物中去除乙酰基。HDAC脱乙酰产物可以用特异性抗体识别。然后,通过在450nm处读取微孔板分光光度计的吸光度,可以用比色法测量与酶活性成比例的脱乙酰基产物的比例。HDAC酶的活性与测量的OD强度成正比。
HDAC Activity试剂盒相关产品:
核提取物制备
OP-0002 EpiQuik™ 核提取物提取试剂盒
HDAC活性/抑制检测
P-4035 Epigenase™ HDAC活性/抑制直接检测试剂盒(荧光法)
P-4036 Epigenase™ SIRT活性/抑制检测试剂盒(比色法)
P-4037 Epigenase™ SIRT活性/抑制检测试剂盒(荧光法)
HDAC水平定量
P-4005 EpiQuik™ HDAC1检测试剂盒
P-4006 EpiQuik™ HDAC2检测试剂盒
P-4007 EpiQuik™ HDAC8检测试剂盒
https://www.amyjet.com/products/P-4034-48.shtml