BGT-IgY (鸡) ELISA Kit:一种成本效益高的解决方案
BGT的IgY (鸡) ELISA Kit具备高灵敏度和特异性,能够准确检测到样本中微量的IgY抗体。其设计确保了对目标抗体的特异性识别,减少了交叉反应和假阳性结果的风险。
该试剂盒遵循标准化的ELISA操作流程,使得实验步骤简便易懂,即使是初学者也能快速掌握。从样本处理到结果读取,整个过程设计得直观高效。
艾美捷BGT-IgY (鸡) ELISA Kit:
货号:BGT-KET-132
抗体类型:酶联免疫吸附测定(ELISA)
宿主:山羊
特异性/靶标:IgY h+l(蛋黄免疫球蛋白重链和轻链)
规格:1.0
检测范围:6.25 ng/ml - 400 ng/ml
灵敏度:1.508 ng/ml
测定时间:70 分钟
样本类型:血浆、血清
储存条件:2-8°C
检测方法:比色法
试验类型:夹心法(定量)
反应对象:鸡(Chicken在此上下文中可能指鸡的血浆或血清样本)
IgY (鸡) ELISA Kit的代表性标准曲线:
结果计算方法:
从每个样本的测试值中减去平均背景值(标准零的平均吸光度读数)。
对每个标准品的重复读数取平均值,并使用这些结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来降低数据,构建标准曲线。也可以使用二阶多项式(二次)或其他曲线拟合;然而,它们对数据的拟合将不够精确。
从标准曲线中插值测试样本值。校正血清稀释因子,以得出原始样本中的IgY浓度。
应用广泛性:
IgY (鸡) ELISA Kit广泛应用于兽医研究、疾病诊断、免疫学研究和食品安全检测等领域。它为研究人员提供了一种快速评估鸡只免疫状态和疫苗效果的手段。
研究与诊断价值:
在研究环境中,IgY ELISA Kit可用于监测鸡只对特定病原体的免疫反应,帮助科学家理解免疫机制和疾病进程。在临床诊断中,它可用于检测和评估鸡只的感染状态和免疫保护水平。
食品安全与质量控制:
在食品安全领域,IgY (鸡) ELISA Kit可用于检测鸡蛋中特定病原体的抗体,这有助于评估鸡蛋产品的安全性和质量。此外,它还可以作为评估生物制品和疫苗效力的工具。
经济高效性:
与传统的抗体检测方法相比,IgY ELISA Kit提供了一种成本效益高的解决方案,减少了实验成本和时间。同时,批量测试的能力进一步提高了其经济性和实验效率。
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QA-Bio-BioQuant NANA标准品:Neu5Ac和Neu5Gc单糖的可靠定量参照
QA-Bio-NANA标准品(N-乙酰神经氨酸或Neu5Ac)是可追溯至NIST-F和USP的Neu5Ac单糖的定量标准。N-糖基神经氨酸定量标准(Neu5Gc或NGNA)也可用。
它也是LudgerTag DMB唾液酸释放和标记试剂盒(LT-KDMB-A1)的组成部分。
LudgerSep-uR2 1,2-二氨基-4,5-亚甲二氧基苯.2HCl(DMB)标记的Neu5Ac标准品的HPLC图谱
形式:干燥。通过离心蒸发从水溶液中干燥。
艾美捷QA-Bio-Ludger唾液酸分析指南:
唾液酸化指南I:Neu5Ac和Neu5Gc的定量
唾液酸化指南II:高度唾液酸化的糖蛋白
应用说明:定量唾液酸分析
供应量:
CM-NEU-AC-01 1纳摩尔
CM-NEUAC-100 100纳摩尔
储存:溶解前后均在-20°C下保存。按照供应条件,该产品至少稳定5年。
运输:NANA标准品在干燥状态下可以在常温下运输。溶解后,需在干冰上运输。
操作:让未开封的小瓶达到室温,并在坚硬表面上轻敲未开封的小瓶,以确保大部分冻干物料位于小瓶底部。轻轻取下盖子,加入所需体积的复溶介质,重新盖紧并彻底混合,使所有寡糖进入溶液。为了最大限度地回收寡糖,请确保盖子内衬也被冲洗,并在使用前短暂离心复溶的小瓶。确保使用的任何玻璃器皿、塑料器皿或溶剂不含糖苷酶和环境碳水化合物。尽量减少暴露在高温或极端pH下。高温和低pH会导致去唾液酸化。高pH会导致还原末端GlcNAc的表观异构化。
安全:该产品是非危险的,并已从天然来源纯化,经认证不含所有危险物质,包括病原体生物制剂。
QA-Bio-BioQuant NANA标准品文献参考:
Fernandes, D. Biopharmaceutical Sialylation. European Biopharmaceutical Review. Spring 2006. pp 100 -104
Bhide GP, Colley KJ. Sialylation of N-glycans: mechanism, cellular compartmentalization and function. Histochem Cell Biol. 2017 Feb;147(2):149-174. doi: 10.1007/s00418-016-1520-x. Epub 2016 Dec 14.
Anumula KR. Rapid quantitative determination of sialic acids in glycoproteins by high-performance liquid chromatography with a sensitive fluorescence detection. Analytical Biochemistry 230: pp24-30, 1995,
艾美捷科技是QA-Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/QA-Bio-new.shtml
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QA-Bio-Neu5,9Ac2标准品,应用于色谱标准品
QA-Bio-Neu5,9Ac2标准品是一种多种唾液酸的混合物。其中主要的唾液酸种类,5-N-乙酰-9-O-乙酰神经氨酸(Neu5,9Ac2),占混合物的77%。该产品仅用作色谱标准品,不应用于定量标准。
LudgerSep-R1 1,2-二氨基-4,5-亚甲二氧基苯.2HCl(DMB)标记的Neu5,9Ac2标准品的HPLC图谱
形式:干燥。通过离心蒸发从水溶液中干燥。
艾美捷QA-Bio-Neu5,9Ac2标准品:
唾液酸化指南I:Neu5Ac和Neu5Gc的定量
唾液酸化指南II:高度唾液酸化的糖蛋白
应用说明:定量唾液酸分析
供应量:约1纳摩尔(其中Neu5,9Ac2为770皮摩尔)
储存:溶解前后均在-20°C下保存。按照供应条件,该产品至少稳定5年。
运输:NGNA标准品在干燥状态下可以在常温下运输。溶解后,需在干冰上运输。
操作:让未开封的小瓶达到室温,并在坚硬表面上轻敲未开封的小瓶,以确保大部分冻干物料位于小瓶底部。轻轻取下盖子,加入所需体积的复溶介质,重新盖紧并彻底混合,使所有寡糖进入溶液。为了最大限度地回收寡糖,请确保盖子内衬也被冲洗,并在使用前短暂离心复溶的小瓶。确保使用的任何玻璃器皿、塑料器皿或溶剂不含糖苷酶和环境碳水化合物。尽量减少暴露在高温或极端pH下。高温和低pH会导致去唾液酸化。高pH会导致还原末端GlcNAc的表观异构化。
QA-Bio-Neu5,9Ac2标准品文献参考:
Fernandes, D. Biopharmaceutical Sialylation. European Biopharmaceutical Review. Spring 2006. pp 100 -104
Bhide GP, Colley KJ. Sialylation of N-glycans: mechanism, cellular compartmentalization and function. Histochem Cell Biol. 2017 Feb;147(2):149-174. doi: 10.1007/s00418-016-1520-x. Epub 2016 Dec 14.
Anumula KR. Rapid quantitative determination of sialic acids in glycoproteins by high-performance liquid chromatography with a sensitive fluorescence detection. Analytical Biochemistry 230: pp24-30, 1995,
相关产品:
Neuraminidase Cp
MonoMix BioQuant Monosaccharide Standard
BioQuant NANA standard
艾美捷科技是QA-Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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QA-Bio-DMB唾液酸标记试剂盒的特性和应用
QA-Bio-DMB唾液酸标记试剂盒包含两套标记试剂和一套唾液酸参考板:
标准品:
NeuAc和NeuGc定量标准品
唾液酸参考板
释放和标记试剂
DMB染料(1,2-二氨基-4,5-亚甲二氧基苯.2HCl):
醋酸
醋酸中的巯基乙醇
次亚硫酸钠(还原剂)
唾液酸对于治疗性糖蛋白的稳定性和三维构象非常重要。已经证明它们影响糖蛋白在血清中的半衰期,并通过这些生物治疗剂影响患者的抗炎和免疫反应。基于这些原因,监测这些治疗性糖蛋白上发现的唾液酸的水平和类型至关重要。
艾美捷QA-Bio-DMB唾液酸标记试剂盒(LT-KDMB)提供了从糖蛋白中释放唾液酸并用DMB进行标记所需的一切。试剂盒包含用于22个或96个糖蛋白样品(每个样品50-100微克糖蛋白)的试剂和材料。每次标记应该能够处理每个样品大约10皮摩尔到2.5纳摩尔的唾液酸。
QA-Bio-DMB唾液酸标记试剂盒中包括一个唾液酸参考板(包含Neu5Ac;Neu5Gc;Neu5,7Ac2;Neu5,Gc9Ac;Neu5,9Ac2;Neu5,7,(8),9Ac3Gc)以及NeuAc和NeuGc定量标准品。这三种标准品可以与释放的唾液酸样品一起用DMB进行标记。NeuAc和NeuGc定量标准品的连续稀释准备使定量分析成为可能。
作为阳性对照,建议使用QA-Bio的胎蛋白糖蛋白,它包含NeuAc和NeuGc唾液酸,和/或作为阳性对照的定量糖肽(BQ-GPEP-A2G2S2-10U)。水可以用作阴性对照。
唾液酸的释放 从糖蛋白中释放唾液酸是通过温和的酸水解进行的。样品和对照在80°C下用2M醋酸孵育2小时。
唾液酸标记反应 释放的唾液酸用1,2-二氨基-4,5-亚甲二氧基苯-2HCl(DMB)进行荧光标记。酸水解样品和过程对照加上Ludger唾液酸标准品:Neu5Ac、Neu5Gc、唾液酸参考板,如果使用的话还有Neu5,9Ac2,在50°C下用DMB孵育3小时。
通过HPLC或UHPLC分析 利用Neu5Ac和Neu5Gc标准品计算标准曲线。唾液酸参考板和Neu5,9Ac2用于唾液酸鉴定。可以使用LudgerSep R1x150mm色谱柱进行HPLC分析,或使用LudgerSep uR2x100mm色谱柱通过UHPLC进行分析。
QA-Bio-DMB唾液酸标记试剂盒文献参考:
Thomson RI, Gardner RA, Strohfeldt K, Fernandes DL, Stafford GP, Spencer DIR, Osborn HMI. Analysis of Three Epoetin Alpha Products by LC and LC-MS Indicates Differences in Glycosylation Critical Quality Attributes, Including Sialic Acid Content. Anal Chem. Jun 20;89(12):6455-6462.( 2017)
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QA-Bio-唾液酸参考面板的操作说明
QA-Bio-唾液酸参考板包含Neu5Ac、Neu5Gc、Neu5,7Ac2、Neu5,Gc9Ac、Neu5,9Ac2、Neu5,8Ac2和Neu5,7,(8),9Ac3Gc。它也是LudgerTag DMB唾液酸释放和标记试剂盒(LT-KDMB-A1)的组成部分。
在LudgerSep-R1 HPLC柱(A)或LudgerSep-uR2 UHPLC柱(B)上运行的DMB标记唾液酸对照板(CM-SRP-01)的色谱图
峰值:1=Neu5Gc;2=Neu5Ac;3=中性5,7Ac2;4=Neu5Gc,9Ac;5=中性5,8Ac2;6=中性5,9Ac2;7=Neu5,x,xAc3(其中x是未知的乙酰基位置)*=试剂
艾美捷QA-Bio-唾液酸参考面板(CM-SRP-01)分析指南:
唾液酸化指南I:Neu5Ac和Neu5Gc的定量
唾液酸化指南II:高度唾液酸化的糖蛋白
应用说明:定量唾液酸分析
来源:牛颌下粘液素
形态:干燥。通过离心蒸发从水溶液中干燥。
数量:1.25纳摩尔
储存:溶解前后均在-20°C下保存。按照供应条件,该产品至少稳定5年。
运输:唾液酸参考板在干燥状态下可以在常温下运输。溶解后,需在干冰上运输。
操作:让未开封的小瓶达到室温,并在坚硬表面上轻敲未开封的小瓶,以确保大部分冻干物料位于小瓶底部。轻轻取下盖子,加入所需体积的复溶介质,重新盖紧并彻底混合,使所有寡糖进入溶液。为了最大限度地回收寡糖,请确保盖子内衬也被冲洗,并在使用前短暂离心复溶的小瓶。确保使用的任何玻璃器皿、塑料器皿或溶剂不含糖苷酶和环境碳水化合物。尽量减少暴露在高温或极端pH下。高温和低pH会导致去唾液酸化。高pH会导致还原末端GlcNAc的表观异构化。
安全:该产品是非危险的,并已从天然来源纯化,经认证不含所有危险物质,包括病原体生物制剂。
QA-Bio-唾液酸参考面板文献参考:
Fernandes, D. Biopharmaceutical Sialylation. European Biopharmaceutical Review. Spring 2006. pp 100 -104
Bhide GP, Colley KJ. Sialylation of N-glycans: mechanism, cellular compartmentalization and function. Histochem Cell Biol. 2017 Feb;147(2):149-174. doi: 10.1007/s00418-016-1520-x. Epub 2016 Dec 14.
Anumula KR. Rapid quantitative determination of sialic acids in glycoproteins by high-performance liquid chromatography with a sensitive fluorescence detection. Analytical Biochemistry 230: pp24-30, 1995,
相关产品:
MonoMix BioQuant Monosaccharide Standard
BioQuant NANA standard
Neu5,9Ac2
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QA-Bio-唾液酸醛缩酶活性测定:对于糖链生物学的重要作用
QA-Bio-唾液酸醛缩酶(N-乙酰神经氨酸丙酮酸裂解酶,EC 4.1.3.3)催化唾液酸(N-乙酰神经氨酸)与N-乙酰甘露糖胺和丙酮酸的可逆反应。
这种酶存在于几种细菌菌株中,这些细菌利用逆反应来降解N-乙酰神经氨酸(唾液酸)。正反应特别适用于通过定量转化为N-乙酰甘露糖胺和丙酮酸来确定唾液酸浓度。
由于唾液酸既带负电荷又是非还原糖,它的直接分析比传统糖类更为困难。然而,N-乙酰甘露糖胺可以通过各种技术如荧光染料或放射性标记作为传统还原糖进行检测。
或者,反应中产生的丙酮酸可以使用酶如乳酸脱氢酶,结合NADH氧化,来还原丙酮酸。NADH氧化可以通过分光光度法定量。另一种方法使用丙酮酸氧化酶产生过氧化氢,通过比色法测量。
艾美捷QA-Bio-唾液酸醛缩酶(E-ALD01):
来源: 重组大肠杆菌K1克隆
EC: 4.1.3.3
内容:60微升的酶制剂(6单位)在20 mM Tris-HCl,pH 7.5中
比活性 :15单位/毫克
活性: 100单位/毫升
分子量: ~32,000道尔顿
除了游离的神经氨酸外,N-乙酰神经氨酸醛缩酶还可以用来确定以下物质中神经氨酸的总量:
糖蛋白
细胞表面
多唾液酸
荚膜多糖(仅由多唾液酸组成)
首先用QA-Bio唾液酸酶Au(E-S001)消化整个细胞、糖蛋白或多糖,然后确定总的N-乙酰神经氨酸。
QA-Bio-唾液酸醛缩酶文献参考:
Kolisis, F.N. An immobilized bienzyme system for assay of sialic acid. Biotechnol Appl Biochem 8:).
Simpson, H., G. D. Ghusney, M. A. Crook and J. C. Pickup. Serum sialic acid enzymatic assay based on microtitre plates: application for measuring capillary serum sialic acid concentrations. Br J Biomed Sci 50:164-167 (1993).
Sugahara K, K. Sugimoto, O. Nomura and T. Usui. Enzymatic assay of serum sialic acid. Clin Chim Acta 108:).
Lilley, G.G., M. von Itzstein and N. Ivancic. High-Level Production and Purification of Escherichia coli N-Acetylneuraminic Acid Aldolase (EC 4.1.3.3) Protein Expression and Purification 3:434-440 (1992).
Ohta,Y., K. Watanabe and A. Kimura. Complete Sequence of E. coli N-acetylneuraminate lyase. Nucleic Acids Res.13:8843-8852(1985).
相关产品:
Sialidase Testing Panel
Neuraminidase Sp
Sialic Acid Reference Panel
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QA-Bio-高稳定性过甲基化试剂盒,用于糖苷的甲基化处理
QA-Bio-甲基化板(LC-PERMET-96)是可扩展的,可以用于1到96个样本的数量。将未用的试剂盒组分和未用的反应板孔存放在推荐的储存条件下,以便日后进一步的样本准备。
注意:由于对碘甲烷/甲基碘的运输限制,无法将这一组分随试剂盒提供。建议从您当地的化学品供应商处购买纯度≥99.0%(气相色谱法)的甲基碘。甲基碘的同义词:碘甲烷,CAS编号:74-88-4。
艾美捷QA-Bio-过甲基化试剂盒(LT-PERMET-VP96)组成:
96 well Permethylation plate 1 Plate
Dimethyl sulfoxide (DMSO) 40.0 ml
Dichloromethane (DCM) 60.0 ml
96 well Balance Plate 1 Plate
96 well Plate Lid 1 Lid / Mat
QA-Bio-过甲基化试剂盒用于糖苷的甲基化处理。甲基化可以稳定唾液酸,以便进行MALDI质谱分析,并有助于连接分析研究(MALDI-MS,ESI-MS)。
提高并增强质谱中糖苷的电离效率
增加糖苷的疏水性能,使其能够进行液相色谱-质谱(LC-MS)分析
可执行相对定量和绝对定量
稳定唾液酸基团
更容易确定分支和糖苷键的位置
能够在正离子模式下检测中性糖苷和酸性糖苷
时间表
步骤1:样品的过甲基化
a. Preparation of glycans As required
b. Addition of DMSO and sample to plate 15 minutes
c. Incubation 15 minutes
d. Addition of MeI to permethylation plate 15 minutes
e. Incubation 60 minutes
步骤2:全甲基化样品的提取和储存
a. Extraction of samples 3-4 hours
b. Drying permethylated samples 10-30 minutes
c. Addition of 70% MeOH for storage 10-20 minutes
QA-Bio-过甲基化试剂盒文献参考:
A. Dell; A. J. Reaseon; Kay-Hooi Khoo; M. Panico; A. McDowell and H. R. Morris Mass Spectrometry of Carbohydrate containing Biopolymer Methods in Enzymology 230: 108-132 (1994)
I.Ciucanu; C. E. Costello Elimination of Oxidative Degradation during the per-O-Methylation of Carbohydrates J. Am. Chem. Soc. 125: 16213-16219 (2003)
I.Ciucanu Per-O-Methylation reaction of structural analysis of carbohydrates by mass spectrometry Analytica Chimica Acta 576: 147-155 (2006)
I.Ciucanu; R. Caprita Per-O-Methylation of neutral carbohydrates directly from aqueous samples for gas chromatography and mass spectrometry analysis Analytica Chimica Acta 585: 81-85 (2007)
Shubhakar, A., Kozak, R.P., Reiding, K.R., Royle, L., Spencer, D.I.R., Fernandes, D.L., Wuhrer, M. Automated High-Throughput Permethylation for Glycosylation Analysis of Biologics using MALDI- TOF-MS Analytical Chemistry. acs.analchem. 6b01639 (2016).
艾美捷科技是QA-Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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QA-Bio-2-AB标记试剂盒,一种明显更安全的还原剂
传统的2-AA和2-AB标记试剂盒在糖苷标记过程中使用氰硼氢化钠作为还原剂。这种试剂是有毒的,因此在操作时应使用通风柜。为了符合新兴的健康和安全法规,用新的VP糖苷试剂盒替换它们,该试剂盒使用的是苯并吡啶硼烷,这是一种明显更安全的还原剂。
QA-Bio-2-AB标记试剂盒包含以下试剂的两套(每个试剂盒可处理15个样本),存放在纯氮气下密封的玻璃安瓿中:
LT-KAB-A2
2-氨基苯甲酰胺(2-AB染料)
二甲基亚砜(DMSO)
醋酸
氰硼氢化钠
LT-KAB-VP24
2-氨基苯甲酰胺(2-AB染料)
二甲基亚砜(DMSO)/醋酸溶液
2-苯并吡啶硼烷
艾美捷QA-Bio-2-AB标记试剂盒:
货号:LT-KAB
样本数量:一个2-AB标记试剂盒包含的试剂足以标记每个试剂盒多达30个独立的分析样本
染料纯度: >99%(高效液相色谱法)
分子量: 137
激发波长: λex 250 nm
发射波长: λem 428 nm
样本量 :每个样本从25皮摩尔到25纳摩尔的糖苷。
适用样本: 任何具有自由还原末端的纯化糖苷都可以被标记。
结构完整性 :未检测到(<2摩尔百分比)唾液酸、岩藻糖、硫酸或磷酸的损失。
标记效率 :通常>85%(取决于样本)。
标记选择性: 基本上是化学计量的标记。
协议:
1.纯化糖苷:LudgerClean EB10柱(LC-EB10-A6)设计用于从蛋白质、盐和洗涤剂中纯化糖苷。
2.将样本转移到反应瓶中:对于从典型糖蛋白中获得的糖苷池,样本量应在100皮摩尔至50纳摩尔的范围内。即使是单一纯糖苷,只要低至5皮摩尔也可以在随后的高效液相色谱(HPLC)分析中被标记和检测。合适的反应瓶包括小型聚丙烯微量离心管和PCR工作用管。
3.干燥样本:如果样本体积超过10微升,则需要将样本干燥。如果需要将样本干燥,则应使用离心蒸发仪进行。如果这不可能,则可以谨慎使用冷冻干燥(真空干燥),特别是要确保样本在管底干燥成一个小的、紧凑的团块。不要将样本暴露于高温(>28°C)或极端pH值,因为这些条件会导致酸性催化的唾液酸损失(高温、低pH)或糖苷还原末端的表观异构化(在高pH值时)。
一旦样本干燥,然后在10微升的水中重新溶解糖苷。
4.(仅限LT-KAB-A2)准备DMSO-醋酸混合物:向DMSO的瓶中加入150微升的冰醋酸,并通过移液管混合。
5.添加染料:将DMSO-醋酸混合物加入2-AB(2-氨基苯甲酰胺酸)染料的瓶中,混合直至染料溶解。
6.添加还原剂:将溶解的染料加入氰硼氢化钠或苯并吡啶硼烷的瓶中,并通过移液管混合,直至还原剂完全溶解,制成最终的标记试剂。
7.将标记试剂加入样本:将标记试剂加入每个干燥的糖苷样本中,盖紧微管,彻底混合。
8.孵化:将反应瓶放入加热块、沙浴或设置在65°C的干燥箱中孵化3小时。在大多数情况下,孵化时间可以缩短至2小时或延长至4小时,而不会显著改变标记反应的结果。
9.离心和冷却:孵化期结束后取出样本,简短离心微管,然后让它们完全冷却至室温。
10.样本清洁:建议在标记后进行样本清洁,以去除多余的染料和其他标记试剂。可以使用LudgerClean T1柱(LC-T1-A6)或S柱(LC-S-A6)进行清洁。
QA-Bio-2-AB标记试剂盒文献参考:
Anumula KR, Dhume ST. High resolution and high sensitivity methods for oligosaccharide mapping and characterization by normal phase high performance liquid chromatography following derivatization with highly fluorescent anthranilic acid. Glycobiology 8 685-694(1998)
艾美捷科技是QA-Bio的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/QA-Bio-new.shtml