QA-Bio/艾美捷多聚糖分析工具解决方案
QA-Bio 致力于为生物制药行业提供分析多聚糖所需的工具。QA-Bio的产品被S界各地的生物制药公司用于美国食品药品监督管理局（FDA）和欧洲药品管理局（EMA）批准的程序，并对试剂盒和试剂的化学成分、材料、制造和储存程序进行了优化，以确保产品达到高标准的准确性和再现性。
艾美捷QA-Bio主要产品线：
1. 糖苷内切酶（Endoglycosidases）
内切酶是用于分析糖蛋白的Z广泛使用的酶之一。这些酶可以从糖蛋白中释放完整的聚糖，而外切酶则释放单糖（如唾液酸、半乳糖、β-N-乙酰葡萄糖胺、甘露糖等）。包括PNGase F、Endo F1、Endo F2、Endo F3、Endo H、O-糖苷酶等。
2. 糖苷外切酶（Exoglycosidases）
糖苷外切酶可以从聚糖的非还原端去除单糖。
3. 去糖基化试剂盒（Deglycosylation）
PNGase F通常用于去糖基化N端连接糖基的蛋白质，在变性和天然条件下均可使用。对于被PNGase F缓慢裂解或在PNGase F消化后沉淀的天然样品，建议使用Endo F Multi-Kit。这两种方法均可使糖基保持完整，可供进一步分析。如果糖基类型未知，或者同时包含N-连接和O-连接的糖基，则建议使用我们的Enzymatic CarboRelease Kit或Enzymatic DeGlycoMx Kit。这些去糖基化试剂盒包括许多酶，可将糖基去除并消化成单糖。LudgerLiberate Hydrazinolysis Kit包含用于从糖蛋白中释放N-连接和O-连接糖基的试剂。释放的糖基具有自由还原末端，可通过还原氨基化进行荧光标记。对于O-连接糖基的释放和回收，推荐使用Ludger Orela kit。
4. 唾液酸（Sialic Acid Products）
唾液酸（神经氨酸的衍生物家族）通常是N-连接和O-连接聚糖的末端结构。唾液酸位于聚糖的末端位置，可能是许多糖蛋白相互作用的接触点。它们对糖蛋白的稳定性和3D构象也很重要，并参与许多生物相互作用。
5. 聚糖标记（Glycan Labeling）
LudgerTag聚糖标记试剂盒试剂纯化至分析级，并在清洁、惰性的环境中分配和密封。2-AB和2-AA用于HILIC-（U）HPLC、WAX-HPLC和MALDI-MS测定。它们是生物制药分析中引用Z多的聚糖标签。2-AA也用于单糖分析。DMB唾液酸标记试剂盒已开发用于唾液酸的定性分析。Procainamide标记的聚糖通常用于HILIC-（U）HPLC和ESI-MS测定。与2-AB标记的聚糖相比，Procainamide在HPLC测定中的响应增加了3倍以上，在ESI-MS中的响应则增加了30倍以上。过甲基化（Permethylation）稳定唾液酸用于MALDI-MS技术和辅助连锁分析研究（MALDI-MS，ESI-MS）。
6. 捕获和纯化（Capture and Cleanup）
QA-Bio提供多种产品，用于酶消化和分子标记后的聚糖捕获和纯化。小柱和微孔板结合聚糖，但允许污染物通过。
下图为QA-Bio公司授权艾美捷科技有限公司（AmyJet Scientific Inc.）作为QA-Bio在中国区域的代理授权书。
QA-Bio 热门产品：
货号 产品名称 规格
E-PNG01 PNGaseF 60uL
KE-EFX3 EndoFMμlti-Kit,KE-EFX3 Kit
E-G001 O-glycosidase 60uL
E-RPNG01-20 RecombinantPNGaseF 20uL
KE-DG01 EnzymaticCarboReleaseKit Kit
E-F006-60 Alpha-(1-6)Fucosidase 60uL
E-XBG01 Endo-Beta-Galactosidase 60uL
E-S001 NeuraminidaseAu 60uL
E-PNG01-200 PNGaseF(PeptideNGlycosidaseF) 200uL
E-F006-200 Alpha-(1-6)Fucosidase 200uL
E-BG07 Beta-(1-4)-galactosidase 60uL
E-BG02 Beta-(1-3,4,6)-Galactosidase 60uL
E-PNG01-20 PNGaseF 20uL
E-G001-200 O-Glycosidase 200uL
E-XBG01-200 Endo-Beta-Galactosidase 200?L
E-F006-20 Alpha-(1-6)Fucosidase 20uL
E-S001-200 NeuraminidaseAu 200uL
E-G001-20 O-Glycosidase 20uL
KE-DGMX EnzymaticDeGlycoMxKit 20microliters
艾美捷科技是QA-Bio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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QA-Bio/艾美捷糖苷内切酶：N-糖酰胺酶F/PNGase F使用说明
PNGase F，也称为肽N-糖苷酶F，是一种在分子生物学和生物化学研究中常用的酶。它在研究糖蛋白方面发挥着重要作用，糖蛋白是附着有糖分子（糖链）的蛋白质。PNGase F用于从糖蛋白中移除N-连接的糖链，使其成为各种科学应用中的重要工具。
PNGase F的使用：
糖蛋白去糖基化：PNGase F酶促地从糖蛋白中切割N-连接的糖链。N-连接的糖链是一种特定类型的糖链，它附着在蛋白质氨基酸序列中的天冬酰胺（N）残基上。
在糖蛋白分析中的重要性：从糖蛋白中移除糖链对于研究其底层蛋白质结构和功能至关重要。它允许研究人员分析蛋白质核心，准确确定其分子量，并研究其生物活性。
应用：PNGase F在各种应用中广泛使用，包括蛋白质组学、结构生物学、免疫学和药物研究。它在表征糖蛋白、理解它们在细胞过程中的作用以及开发治疗药物方面发挥着重要作用。
生物医学研究：在生物医学研究中，PNGase F用于分析与癌症、糖尿病和传染病等疾病相关的糖蛋白。它有助于识别生物标志物和潜在的药物靶标。
质量控制：在生物制药行业中，PNGase F被用来确保基于糖蛋白的药物（如单克隆抗体）的质量和一致性，通过验证糖链结构和监测糖基化模式。
糖蛋白工程：研究人员可以使用PNGase F对糖蛋白进行特定目的的修改，例如提高药物效果或改变糖链结构，用于研究或治疗应用。
Endo F1、Endo F2、Endo F3、Endo H和PNgase F的活性比较
艾美捷QA-Bio-PNGase F内容：
PNGase F 在 20 mM Tris-HCl，pH 7.5
随附20 µL 和 60 µL 包装大小：
5倍反应缓冲液 7.5 – 250 mM 磷酸钠，pH 7.5
变性溶液 – 2% SDS，1 M β-巯基乙醇
Triton X-100 – 15% 溶液
比活性 >25 U/mg
活性 5 U/ml
分子量 35,000 道尔顿
pH 范围 6-10，Z佳 pH 7.5
QA-Bio-PNGase F 协议：
向 Eppendorf 管中添加最多 200 µg 的糖蛋白。用去离子水调整至 35 µl 的最终体积。
添加 10 µl 的 5倍反应缓冲液 7.5 和 2.5 µl 的变性溶液。在 100°C 下加热 5 分钟。
冷却。添加 2.5 µl 的 Triton X-100 并混合。
向反应中添加 2.0 µl 的酶。在 37°C 下孵育 3 小时。
特异性 切割所有天冬酰胺连接的复杂型、混合型或高甘露糖寡糖，除非是α(1-3)核心岩藻糖化的；天冬酰胺必须在两端都有肽键，无Endo F
比活性 定义为在 37°C，pH 7.5 的条件下，每分钟催化 1 微摩尔变性的牛胰核糖核酸酶 B 释放 N-连接寡糖所需的酶量。通过 SDS-PAGE 监测切割（切割后的牛胰核糖核酸酶 B 迁移更快）。
QA-Bio-PNGase F文献参考：
Bayer, E.A., F. De Meester, T. Kulik and M. Wilchek. Preparation of deglycosylated egg white avidin. Appl Biochem Biotech 53: 1-9 (1995)
Elder, J.H. and S. Alexander. Endo-b-N-Acetylglucosaminidase F: endoglycosidase from Flavobacterium meningosepticum that cleaves both high-mannose and complex glycoproteins. Proc Natl Acad Sci USA 79: 4540-4544 (1982)
Tarentino, A .L., C.M. Gomez and T.H. Plummer, Jr. Deglycosylation of asparagine-linked glycans by peptide :N-glycosidase F. Biochemistry 24: 4665-4671 (1985)
Tarentino A.L. and T.H. Plummer. Enzymatic deglycosylation of asparagine -linked glycans: purification, properties, and specificity of oligosaccharide-cleaving enzymes from Flavobacterium meningosepticum. Meth Enzymol 230: 44-57 (1994)
Trimble R.B. and A.L. Tarentino. Identification of distinct endoglycosidase (endo) activities in Flavobacterium meningosepticum: endo F1 , endo F2 and endo F3. Endo F1 and endo H hydrolyze only high mannose and hybrid glycans. J Biol Chem 266: 1646-1 651 (1991)
Taga, E. M., A. Waheed and R. L. Van Etten. Structural and chemical characterization of a homogeneous peptide-N-glycosidase from almond. Biochemistry 23: 815-22 (1984)
Tarentino AL, Trimble RB, Plummer TH. Enzymatic approaches for studying the structure, synthesis, and processing of glycoproteins. Methods in Cell Biology: 32: 111–39 (1989)
Anthony L. , Tarentino and Thomas H. Plummer Jr. Enzymatic deglycosylation of asparagine-linked glycans: Purification, properties, and specificity of oligosaccharide-cleaving enzymes from Flavobacterium meningosepticum. Methods in Enzymology: 230: 44-57. (1994)
Tarentino AL, Plummer TH. Oligosaccharide accessibility to peptide:N-glycosidase as promoted by protein-unfolding reagents. The Journal of Biological Chemistry. 257 (18): 10776–80. (1982)
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QA-Bio/艾美捷神经氨酸酶Au：精准切割唾液酸残基，助力生物医药研究
α-(2-3,6,8,9) 神经氨酸酶Au能够从复杂碳水化合物和糖蛋白中切割所有非还原末端的唾液酸残基。不同连接方式的相对切割速率为：α(2-6) > α(2-3) > α(2-8), α(2-9)。
此外，该酶还能切割分支唾液酸（连接到内部残基）。这一特性使其在神经氨酸酶中独一无二。切割分支残基可能需要较高浓度的酶和较长的孵育时间。若仅切割非还原末端的α(2-3)非分支唾液酸残基，请使用唾液酸酶SP，编号E-S007。
α-(2-3,6,8,9) 神经氨酸酶是从产尿素棒状杆菌的一个克隆中分离出来的。该酶已使用寡糖标准品进行了广泛的表征。
艾美捷QA-Bio-神经氨酸酶Au：
来源 来自大肠杆菌中产尿素棒状杆菌的重组。
EC 3.2.1.18
内容 20 mM Tris-HCl, 25 mM NaCl, pH 7.5 中的神经氨酸酶
随附20 µL 和 60 µL 包装大小：
5倍反应缓冲液 250 mM 磷酸钠，pH 6.0
比活性 >135 U/mg
活性 >5 U/ml
分子量 70,000 道尔顿
pH 范围 4.5-7，最佳 pH 6.0
推荐的缓冲液浓缩物为标准底物提供酶活性的最佳pH。如果由于糖蛋白的溶解度或活性要求而在非Z佳pH下进行糖苷酶处理，预计酶活性会有所降低。
建议用法：
向管中添加最多100 μg的糖蛋白或1 nmol的寡糖。
加水至14 μL。
添加4 μL 5X 反应缓冲液。
添加2 μL α-(2-3, 6,8,9) 神经氨酸酶。
在37°C下孵育1小时。
如果天然和去唾液酸化的蛋白质之间的大小差异足够大以便于检测，可以通过SDS-PAGE监测去唾液酸化。
注意：如果存在分支唾液酸，则需要更长的孵育时间。
特异性 切割所有非还原末端的分支和非分支唾液酸
比活性 定义为在37℃，pH 5.0条件下，每分钟产生1 µmole的甲基伞形酮所需的酶量，从MU-NANA [2′-(4-甲基伞形基)-α-D-N-乙酰神经氨酸]。
储存 将酶存放在4℃。
纯度 每批α-(2-3,6,8,9) 神经氨酸酶都经过以下测试以检测污染的蛋白酶；10 μg的变性牛血清白蛋白与2 μL的酶孵育24小时。经处理的BSA的SDS-PAGE分析显示没有降解迹象。
生产宿主菌株经过广泛测试，不产生任何可检测的糖苷酶。
稳定性 妥善储存至少12个月稳定。几天暴露在常温下不会降低活性。酶在37℃下至少保持一周活性。
QA-Bio-神经氨酸酶Au文献参考：
Corfield, A. P., H. Higa, J. C. Paulson and R. Schauer. The specificity of viral and bacterial sialidases for alpha(2-3) and alpha(2-6)-linked sialic acids in glycoproteins. Biochim Biophys Acta 744: 121-12 6 (1983).
Dwek, R. A., C. J. Edge, D. J. Harvey, M. R. Wormald and R. B. Parekh. Analysis of glycoprotein-associated oligosaccharides. Ann Rev Biochem 62: 65-100 (1993).
Kobata, A. Use of endo- and exoglycosidases for structural studies of glycoconjugates. Anal Biochem 100: 1-14 (1979).
Ohta, Y., Y. Tsukada and T. Sugimori. Purification and properties of neuraminidase isoenzymes in Arthrobacter ureafaciens mutant. J Biochem (Tokyo) 106: 1086- 1089 (1989).
Prime, S., J. Dearnley , A. M. Venton, R. B. Parekh and C. J. Edge. Oligosaccharide sequencing based on exo- and endoglycosidase digestion and liquid chromatographic analysis of the products. J Chromatogr A 720: 263-274 (1996).
Uchida, Y., Y. Tsukada and T. Sugimori. Enzymatic properties of neuraminidases from Arthrobacter ureafaciens. J Biochem (Tokyo) 86: 573-58 5 (1979).
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QA-Bio/艾美捷Endo F多酶试剂盒的应用及使用说明
Endo F多酶试剂盒推荐用于去糖基化那些在非变性条件下对PNGase F切割有抵抗力的天然蛋白质，这是由于糖链在蛋白质三维结构中的位置，这些酶被认为对蛋白质构象的敏感性较低。
每种酶具有不同的N-连接糖链特异性：
内切糖苷酶F1切割高甘露糖和一些混合型N-糖链
内切糖苷酶F2释放双天线和高甘露糖糖链（速率降低40倍）
内切糖苷酶F3将释放三天线和岩藻糖化的双天线N-糖链
艾美捷QA-Bio-Endo F多酶试剂盒应用：
去糖基化对PNGase F切割有抵抗力的天然蛋白质
确定糖链类型（高甘露糖、双天线、三/四天线）
去糖基化通常在去糖基化时沉淀的蛋白质
X射线晶体学
这三种酶在糖链核心的两个GlcNAc残基之间切割天冬酰胺连接（N-连接）的寡糖，生成一个截断的糖分子，保留一个N-乙酰葡萄糖胺残基在天冬酰胺上，增强了蛋白质的溶解性。与此相反，PNGase F完整地移除寡糖。
QA-Bio-Endo F多酶试剂盒使用说明：
向Eppendorf管中添加Z多200微克的糖蛋白。用去离子水调整至34微升的最终体积。
添加10微升Endo F2/F3 5倍反应缓冲液，250 mM 醋酸钠 pH 4.5。如果单独使用Endo F1酶，请使用Endo F1缓冲液，250 mM 磷酸钠 pH 5.5。
向反应中添加每种酶2.0微升。在37°C下孵育3小时。 通过SDS-PAGE监测切割情况。
QA-Bio-Endo F多酶试剂盒文献参考：
Maley P., R. B. Trimble, A. L. Tarentino and T. H. Plummer Jr. Characterization of glycoproteins and their associated oligosaccharides through the use of endoglycosidases. Anal Biochem 180:195-204 (1989).
Plummer, T. H. Jr, A. W. Phelan and A. L. Tarentino. Porcine fibrinogen glycopeptides: substrates for detecting endo-N-acetylglucosaminidases F2 and F3. Anal Biochem 235:98-101 (1996).
Tarentino A. L., G. Quinones, L. M. Changchien, and T. H. Plummer Jr. Multiple endoglycosidaseF activities expressed by Flavobacterium meningosepticum endoglycosidases F2 and F3: Molecular cloning, primary sequence, and enzyme expression. J Biol Chem 268(13):9702-9708 (1993).
Tarentino A. L. and T. H. Plummer Jr. Substrate specificity of Flavobacterium meningosepticum: Endo F2 and endo F3: purity is the name of the game. Glycobiology 4:771-773 (1994).
艾美捷科技是QA-Bio的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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泛素/泛素化蛋白，亲和磁珠：多泛素化蛋白质的一步回收
基于已知具有泛素亲和力的蛋白质结构域，已开发出串联泛素结合实体（TUBEs），用于分离和鉴定泛素化蛋白质。与单一泛素结合相关域（UBA）相比，TUBEs对多泛素部分的亲和力提高了高达1000倍。此外，TUBEs能够保护多泛素化蛋白质免受去泛素化和蛋白酶体降解，允许在相对低丰度下进行检测。这些特性有效地使TUBEs能够“捕获”处于多泛素化状态的蛋白质。TUBEs可用于从细胞和组织提取物中分离、富集和鉴定泛素化蛋白质。与TUBE 1偶联的磁性珠允许在不使用离心机的情况下，通过单一步骤高效回收多泛素化蛋白质。磁性TUBEs允许更完全地去除未结合的上清液，这导致背景更低。多泛素化蛋白质可以容易地从TUBEs中分离出来，用于蛋白质组学研究或通过西方印迹法鉴定。
艾美捷泛素/泛素化蛋白，亲和磁珠：
货号 BGT-OPU-131
标签 不适用
物理状态 液体
数量 1 毫升
浓度 可变
储存 +4°C，避免低于此温度储存
泛素/泛素化蛋白，亲和磁珠应用：
从细胞系、组织和器官中拉取多泛素化蛋白质
为蛋白质组学研究分离多泛素化蛋白质
保护多泛素化蛋白质免受去泛素化和蛋白酶体降解
泛素/泛素化蛋白，亲和磁珠优点：
多泛素化蛋白质的一步回收
无需离心机且背景更低
从TUBEs中高效分离多泛素化蛋白质
比单一UBA域的亲和力高达1000倍
避免在拉取过程中过度表达带有亲和标签的泛素
泛素/泛素化蛋白，亲和磁珠相关产品：
UM301: TUBE 1 (Biotin)
UM101-200µg Anti-Ub Tube1, GST
UM101-200µg Anti-Ub Tube1, GST
UM413M: K63 Linkage Specific UbiTest – Magnetic TUBE Elution Kit
UM101-200µg Anti-Ub Tube1, GST
UM411M: UbiTest Magnetic TUBE Elution Kit
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K63连接的泛素化蛋白，亲和磁珠，比大多数泛素抗体更高的亲和力
串联泛素结合实体（TUBEs）的使用正成为泛素研究的一项不可或缺的策略（1, 2）。这些TUBEs的第一代能够以个位数纳摩尔级的Kds与K48-和K63-连接的四聚体Ub链结合，比单体UBAs的结合紧密约100到1000倍。TUBEs还能在没有通常需要用来阻止此类活性的抑制剂的情况下，保护蛋白质免受去泛素化酶（DUBs）和蛋白酶体的侵害。这允许在不太可能改变细胞生理学条件的情况下，从细胞系、组织和器官中高效地分离出天然的多泛素链和附着的蛋白质，这些条件比上述条件更不易改变细胞生理学。最近已经证明，TUBE 1和TUBE 2能够无差别地富集所有多泛素链连接类型，即使对于感兴趣的蛋白质的连接类型未知，这些试剂也是合适的。
K63 TUBE是为了展示对K63-连接的多泛素链（约20 nM）相对于所有其他连接（>2 µM）具有增强的选择性而开发的。磁性-TUBEs是直接与磁性珠偶联的TUBE部分，用于通过西方印迹法和/或下游的蛋白质组学研究来鉴定和表征多泛素化蛋白质。磁性-TUBEs方便地促进了多泛素化蛋白质的“一步”拉取。
艾美捷K63连接的泛素化蛋白，亲和磁珠：
货号：BGT-OPU-132
标签：不适用
物理状态：液体
数量：1 毫升
浓度：可变
储存：+4°C，避免低于此温度储存
K63连接的泛素化蛋白，亲和磁珠应用：
从细胞和组织提取物中分离和富集K63-多泛素化蛋白质
为蛋白质组学研究分离K63-多泛素化蛋白质
K63连接的泛素化蛋白，亲和磁珠优点：
对K63多泛素链比其他所有连接类型有100倍的偏好
TUBEs对多泛素的亲和力比大多数泛素抗体更高
避免了在拉取过程中对表位标记泛素的过度表达
K63连接的泛素化蛋白，亲和磁珠相关产品：
UM502F: TUBE 2 (Fluorescein)
UM502M: TUBE 2 (High Capacity Magnetic Beads)
PA630: K63 Ubiquitin Linkage ELISA Kit (Chain Selective)
UM500M: High Capacity Control Magnetic Beads (negative control)
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K48连接的泛素化蛋白，亲和磁珠的偏好是其他所有连接类型的100倍
串联泛素结合实体（TUBE）的使用正在成为泛素研究不可或缺的策略。第一代这些TUBE以个位数的纳摩尔Kds结合K48和K63连接的四Ub链，比单体UBA紧密约100至1000倍。TUBE还保护蛋白质免受DUBs和蛋白酶体的影响，即使在缺乏通常阻断这种活性所需的抑制剂的情况下也是如此。这允许在比上述条件更不可能改变细胞生理学的条件下，从细胞系、组织和器官中有效分离天然polyUb链和附着的蛋白质。最近已经证明，TUBE 1和TUBE 2富集所有polyUb链连接类型，而没有区别，使得这些试剂是合适的，即使连接类型对于感兴趣的蛋白质是未知的。开发K48 TUBE HF是为了显示对K48连接的多泛素链（~20 nM）比所有其他连接（>2µM）的选择性增强。磁性TUBE是直接与磁珠偶联的TUBE部分，用于通过蛋白质印迹和/或下游蛋白质组学研究鉴定和表征多泛素化蛋白质。磁性TUBE有助于方便地“一步”下拉多泛素蛋白。
艾美捷K48连接的泛素化蛋白，亲和磁珠：
货号：BGT-OPU-133
标签：不适用
物理状态：液体
数量：1 毫升
浓度：可变
储存：+4°C，避免低于此温度储存
K48连接的泛素化蛋白，亲和磁珠应用：
从细胞和组织提取物中分离和富集K48-多泛素化蛋白质
为蛋白质组学研究分离K48-多泛素化蛋白质
K48连接的泛素化蛋白，亲和磁珠优点：
对K48多泛素链的偏好是其他所有连接类型的100倍
TUBEs对多泛素的亲和力比大多数泛素抗体更高
避免了在拉取过程中对带有表位标签的泛素的过度表达
K48连接的泛素化蛋白，亲和磁珠相关产品：
UM607: K48 TUBE HF (FLAG)
UM201-1MG Anti-Ub TUBE 1, His6
UM107: K48 TUBE HF (GST)
UM101-200µg Anti-Ub Tube1, GST
UM507T: K48 TUBE HF (TAMRA)
UM201-1MG Anti-Ub TUBE 1, His6
UM500M: High Capacity Control Magnetic Beads (negative control)
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BGT-D-荧光素(游离酸)在药物筛选与生物检测中的创新应用
D-荧光素（游离酸）作为一种重要的生物化学底物，在多个科学领域中发挥着关键作用。随着科学技术的不断进步，D-荧光素的应用范围将进一步扩大，为人类对生命科学的探索提供更多可能性。未来，D-荧光素的稳定性、溶解性以及生物兼容性等特性的改进，将为科学研究和临床应用带来更多的创新机遇。
萤火虫D-荧光素自由酸 >99%（来自Photinus pyralis、pyrophorus和Elateridea的底物荧光素）这是自由酸形式，而非水溶性盐，例如钾盐或钠盐。这需要使用碱性缓冲液进行重构。
艾美捷BGT-D-荧光素(游离酸)：
货号 BGT-CHM-609
化合物ID D-荧光素（萤火虫型）
分子式 C11H8N2O3S2
IUPAC名称 (4S)-2-(6-羟基-1,3-苯并噻唑-2-基)-4,5-二氢噻唑-4-羧酸
分子量 280.32 克/摩尔
D-荧光素(游离酸)应用领域：
生物发光研究：
D-荧光素是研究生物发光机制的关键底物。在萤火虫等生物体内，D-荧光素在荧光素酶的催化下与氧气反应，产生激发态的氧化荧光素，当其返回到基态时释放出光能。这一过程为研究者提供了一种观察和测量生物体内化学反应的直观方法。
分子和细胞生物学：
在分子和细胞生物学领域，D-荧光素被广泛用于标记蛋白质和细胞器，通过生物发光成像技术，研究者可以实时监测活细胞内的生物过程。
药物筛选与检测：
D-荧光素的发光特性也使其成为药物筛选和生物检测的理想标记物。在高通量筛选中，D-荧光素标记的底物可以用来评估药物对特定酶活性的影响。
环境监测：
D-荧光素还可以用于环境监测，例如通过测量水体中荧光素酶活性的变化来评估污染程度。