GPCR检测的性能和技术优势介绍
GPCR的异常功能与多种疾病有关，因此，GPCR检测在药物发现和疾病诊断中具有极其重要的意义。
GPCR检测试剂盒功能介绍：
信号传导分析：GPCR检测能够评估GPCR激活后的信号传导路径，包括cAMP产生、钙离子释放和细胞内磷酸化事件等。
药物筛选：通过监测GPCR与药物候选分子的相互作用，该检测技术有助于快速识别和筛选潜在的活性化合物。
细胞功能分析：GPCR检测可以评估细胞对特定配体或药物的反应，包括细胞增殖、迁移和分化等。
受体选择性研究：该技术能够区分不同GPCR亚型对药物的反应，为受体选择性药物的开发提供数据支持。
Montana Molecular-GPCR检测试剂盒（#U0200G）中包含的材料：
绿色增强型cADDis cAMP传感器BacMam
500 mM的丁酸钠，溶于H2O
带有核红标记的β2肾上腺素受体BacMam
10 mM的异丙肾上腺素，溶于10 mM的盐酸中
GPCR检测性能介绍：
高灵敏度：GPCR检测技术采用高灵敏度的检测方法，能够检测到微小的信号变化，确保即使是低浓度活性分子也能被准确识别。
高通量能力：该技术支持高通量筛选，可以在单次实验中同时测试多个样品或化合物，大大提高了药物筛选的效率。
操作简便性：GPCR检测平台通常设计为用户友好，简化了实验操作流程，使得即使是非专业人员也能轻松进行实验。
数据可靠性：通过先进的数据分析软件，GPCR检测能够提供准确可靠的结果，帮助研究人员做出科学决策。
应用范围广泛：GPCR检测技术适用于多种细胞类型和组织样本，能够满足不同研究领域的需求。
GPCR检测技术优势：
实时监测：某些GPCR检测技术能够提供实时监测功能，使研究人员能够观察到药物作用的动态过程。
多功能集成：集成了多种检测模式，GPCR检测技术可以同时评估多个信号通路，提供全面的生物学信息。
定制化服务：根据不同的研究需求，GPCR检测可以定制实验方案，包括特定的细胞系、配体或检测指标。
成本效益：尽管GPCR检测技术在性能上具有高标准，但其成本效益高，为药物研发和基础研究提供了经济实惠的选择。
GPCR检测相关产品：
#U0600R Red GECO Ca2+ Assay Kit
#D0400R Red PIP2 Assay Kit
#U0601R Mitochondrial-targeted Red GECO Assay Kit
#D0241G Green Membrane-Targeted fS15 cADDis cAMP
https://www.amyjet.com/products/MTA-U0200G-010.shtml
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VitroGel STEM，更加简单和高效的细胞收获方案
VitroGel STEM与大多数hPSC培养基和组织培养器皿兼容。由于D特的静态悬浮培养方案，在大型生物反应器中使用时不需要微载体，从而使细胞收获更加简单和高效。使用VitroGel STEM 培养的 3D hPSCs细胞团可用于进一步的传代培养、分化或重新建立 2D 培养形态。
艾美捷VitroGel STEM 参数：
货号：VHM02
配方：无异种成分，功能性水凝胶
用途：用于人类多能干细胞的三维静态悬浮培养
操作：室温下即用型
细胞收获：VitroGel组织球回收溶液
5-15分钟细胞恢复
pH值：中性
储存：在2-8°C下储存，常温运输
规格：10毫升和2毫升
初始静态悬浮培养方案：
推荐的材料和试剂
VitroGel STEM
hPSCs培养基（mTeSR-PLUS、StemFlex、mTeSR-1、Essential 8、NutriStem hPSC 等）
Y-27632 （10 mM/mL）
VitroGel Cell Recovery Solution（cat#MS03-100）（可选）
40、70 或 100 μm 可逆过滤器 （可选）
细胞消化液 （可选）
锥形离心管 （15 mL 或 50 mL）
血清移液器
细胞培养器皿（孔板、T培养瓶、锥形培养瓶）
注意：VitroGel STEM与各种培养器皿兼容，在静态悬浮培养中培养hPSCs。根据所需的培养规模和每个实验室的可用系统，可能需要针对单独的细胞类型优化培养体积。
设备：
生物安全柜（ II类）
CO2 培养箱（37℃、5% CO2 和 95% 湿度）
离心机
移液器
定轨摇床、旋转瓶或生物反应器，低速 10-40 rpm （可选）
VitroGel STEM的培养周期：
①7 天培养周期，第 3/4 天增加培养基
②3 天/4 天培养周期，无需额外培养基
操作指南：
1.从 2D包被凝胶表面收获的hPSC; 或直接使用液氮冻存的细胞。（离心得到细胞沉淀以除去细胞消化液或细胞冷冻液）。
2.在含有10μm/mL Y-27632的hPSCs培养基中制备细胞悬液。建议细胞密度为0.2-5×106个/ mL，用于水凝胶悬浮培养的最终细胞密度约为0.1-5×105个/ mL。
如果需要，可通过小心地上下吸取悬浮液，将细胞团打散到30-70μm的大小。不建议使用单细胞悬液。
根据所需的培养条件和hPSCs细胞团的最终尺寸，应针对单独的细胞类型优化细胞接种密度。
3.以2：1的体积比例轻轻地将VitroGel STEM与细胞团悬液混合（例如，将2mL的VitroGel STEM与1mL的 细胞团悬液混合。
4.以5：1的体积比例将hPSCs培养基（可选：10μm/mL Y-27632）添加到细胞-水凝胶混合物中（例如，将15 mL hPSCs培养基与3 mL细胞-水凝胶混合物混合）。小心地上下吸取，使培养基和混合物均匀混合。
hPSCs培养基和细胞-水凝胶混合物的混合体积比例可以在1：1至20：1之间调节，具体取决于最终混合物所需粘度和培养条件。如果混合体积比高于 5：1，则可能需要定轨摇床或旋转瓶，并将其设置为10-40rpm的速度以维持细胞悬液。
5.将所需体积的混合物加入培养器皿中，并在含有5% CO2的37℃环境中孵育。
7天的培养周期添加额外的培养基：在第3天或第4天，将所需体积的hPSCs培养基（不含Y-27632）直接加入培养皿中。
注意：
选择3天/4天培养周期或7天培养周期取决于hPSCs细胞团的接种密度和所需条件。对于高细胞接种密度，3天/4天周期可以培养出100-200μm大小的细胞团。
每当培养基颜色开始变黄时，需要添加一个培养周期所需的额外培养基。（当水凝胶悬液中的初始细胞接种密度高于1×105个/ mL时，可能需要添加3天或4天的培养周期额外的细胞培养基。
如果在培养周期内加入额外的培养基超过一次，则可能需要定轨摇床10-40rpm以维持细胞悬液。
https://www.amyjet.com/products/VHM02.shtml
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Montana Molecular-强大的多功能DAG多重检测试验
DAG测定性能：
现成的试剂盒包括BacMam中的DAG传感器，这是一种BSL-1病毒载体，可有效输送到大多数细胞类型。纯化的BacMam，AAV，Lenti载体可根据要求提供。
1、在读板器或成像系统上容易检测到响应
2、一致的良好表达
3、高信噪比
艾美捷 Montana Molecular-DAG多重检测试验：
单通道，非FRET信号
可提供红色或绿色荧光的DAG（二酰基甘油）传感器版本
通过结合红色和绿色传感器，可以同时测量多个GPCR信号通路。
Montana Molecular强大的多功能DAG检测试剂盒：
实时检测二酰基甘油信号
在活细胞中筛选与Gq蛋白偶联的GPCRs
病毒载体传递，适用于几乎所有细胞类型
靶向混合培养中的微域或特定细胞
简单的操作流程：
z小化的液体处理
无需细胞裂解
兼容96孔或384孔板
为您选择合适的传感器：上升型还是下降型？
左图：下降型DAG在二酰基甘油水平增加时，荧光强度从亮变暗。这种检测方法在荧光板读数器上容易被检测到，有助于成像那些表达效率低的细胞。
右图：上升型DAG在二酰基甘油水平增加时，荧光强度从暗变亮。这种DAG检测方法在荧光板读数器或成像系统上容易被检测到。
文献参考：
X. Chen, et al. A PACAP-activated network for secretion requires coordination of Ca2+ influx and Ca2+ mobilization. bioRxiv. January 2024.
Z. Miller, et al. Lidocaine induces apoptosis in head and neck squamous cell carcinoma through activation of bitter taste receptor T2R14. Cell Reports. November 2023. (bioRxiv)
N. Zaïmia, et al. GLP-1 and GIP receptors signal through distinct β-arrestin 2-dependent pathways to regulate pancreatic β cell function. Cell Reports. October 2023.
G. Sanchez, et al. Coincident Regulation of PLCβ Signaling by Gq-Coupled and μ-Opioid Receptors Opposes Opioid-Mediated Antinociception. Molecular Pharmacology. December 2022.
M. Doepner, et al. Endogenous DOPA inhibits melanoma through suppression of CHRM1 signaling. Science Advances. September 2022.
A. Kim, et al. Arginine-vasopressin mediates counter-regulatory glucagon release and is diminished in type 1 diabetes. eLife. November 2021. (bioRxiv)
S. Hoare, T. Hughes. Biosensor Assays for Measuring the Kinetics of G-Protein and Arrestin-Mediated Signaling in Live Cells. The Assay Guidance Manual. September 2021.
E. Maguire, et al. The Alzheimer's disease protective P522R variant of PLCG2, consistently enhances stimulus-dependent PLCγ2 activation, depleting substrate and altering cell function. bioRxiv. April 2020.
L. Liu, et al. Diacylglycerol kinases regulate TRPV1 channel activity. Journal of Biological Chemistry. April 2020.
S. Hoare, et al. A kinetic method for measuring agonist efficacy and ligand bias using high resolution biosensors and a kinetic data analysis framework. Nature Scientific Reports Feb 2020.
Montana Molecular产品主要包括GPCR检测、细胞应激和毒性相关检测工具，为客户提供了长时间内观察候选药物对细胞过程影响的能力。艾美捷科技是Montana Molecular的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Montana-Molecular.shtml
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Montana Molecular-PIP2检测试剂盒：低毒性，实时动态读数
Montana Molecular-PIP2检测试剂盒的性能：
基因编码，低毒性
PIP2传感器和对照组包含在BSL-1级的BacMam载体中，可在多种细胞中有效表达
单通道读数可以与额外的GPCR检测结合使用
实时动态读数
多重检测试验：
结合红色和绿色传感器，可以同时测量多个GPCR信号通路
艾美捷 Montana Molecular-PIP2检测试剂盒简单的操作流程：
无需细胞裂解
单通道读数
BSL-1级载体
控制表达水平
Montana Molecular-PIP2检测试剂盒文献参考：
L. Brueggemann, et al. Structural Determinants of Kv7.5 Potassium Channels that Confer Changes in Phosphatidylinositol 4,5-Biphosphate (PIP2) Affinity and Signaling Sensitivity in Smooth Muscle Cells. Molecular Pharmacology. March 2020.
L.Liu, et al. Gαq sensitizes TRPM8 to inhibition by PI(4,5)P2 depletion upon receptor activation. J.Neurosci. May 2019.
Alexey N. Pronin, Qiang Wang and Vladlen Z. Slepak Teaching an Old Drug New Tricks: Agonism, Antagonism, and Biased Signaling of Pilocarpine through M3 Muscarinic Acetylcholine Receptor Molecular Pharmacology Nov. 2018
Y. Ding, et al. Ratiometric biosensors based on dimerization dependent fluorescent protein exchange. Nature Methods, 2015.
P. Tewson, et al. A multiplexed fluorescent assay for independent second-messenger systems: decoding GPCR activation in living cells. J. Biomolecular Screening 18, 2013.
Montana Molecular产品主要包括GPCR检测、细胞应激和毒性相关检测工具，为客户提供了长时间内观察候选药物对细胞过程影响的能力。艾美捷科技是Montana Molecular的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Montana Molecular-基因cGMP检测方案
GENIe是一种下降型传感器，具有明亮的初始绿色荧光，在细胞内cGMP增加时荧光会减少。作为一种单色生物传感器，它可以与红色荧光传感器结合使用，以在同一细胞或孔中监测同时发生的信号。
艾美捷 Montana Molecular-GENIe在HEK293细胞中响应30μM的SNP：
使用GENIe检测cGMP信号：
GENIe是一种基因编码的荧光cGMP检测方法
使用单一传感器实时测量cGMP信号
研究cGMP产生或磷酸二酯酶（PDE）抑制
筛选PDE抑制剂
检查PDE生物学
在自动化板阅读器或成像系统上监测荧光变化
以BacMam包装，实现强健的哺乳动物细胞表达
PDE选择性检测：
检查cAMP和cGMP对PDE抑制剂的反应
检查PDE选择性
Montana Molecular基因cGMP检测文献参考：
R. Carey, et al. HSP90 Function is Required for T2R Bitter Taste Receptor Nitric Oxide Production and Innate Immune Responses in Human Airway Epithelial Cells and Macrophages. Cells. April 2022. (bioRxiv)
D. McMahon, et al. The bitter end: T2R bitter receptor agonists elevate nuclear calcium and induce apoptosis in non-ciliated airway epithelial cells. Cell Calcium. January 2022. (bioRxiv)
I. Gapallawa, et al. Bitter taste receptors stimulate phagocytosis in human macrophages through calcium, nitric oxide, and cyclic-GMP signaling Cell. Mol. Life Sci. Feb, 2020 (bioRxiv).
Montana Molecular产品主要包括GPCR检测、细胞应激和毒性相关检测工具，为客户提供了长时间内观察候选药物对细胞过程影响的能力。艾美捷科技是Montana Molecular的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Sicgen antibodies-Wee1抗体特异性和反应性分析
山羊抗Wee1。它是一种大的1525残基酪氨酸激酶蛋白，在玉米黑罗非鱼中是必需的。
艾美捷Sicgen antibodies-Wee1抗体：
目录编号：AB0078
类别：抗体
来源：山羊
应用：WB
反应性：玉米黑粉菌（Ustilago maydis）
替代名称：um06337蛋白抗体。
基因标识符/访问号：不适用（N/A）
形态：多克隆抗体，以200微升（3毫克/毫升）的小瓶装供应，含PBS（磷酸盐缓冲液）、20%甘油和0.05%叠氮钠。此抗体是从山羊抗血清中通过表位亲和层析纯化的。
浓度：3.00 毫克/毫升
类型：免疫球蛋白G（IgG）
克隆性：多克隆
结合：未结合
免疫原：从大肠杆菌中产生的玉米黑粉菌Wee1蛋白的1,440位氨基酸至羧基末端的纯化重组肽段。
抗原序列：
MSARTSISTSMSSFSSHQAVIRVRGALIQEPEEDFMREVMGADPIEQRYVGSKGAFTRCAAERPALAAVQPLQESSAMLSGSYSMDLDG
特异性：可通过西方墨点法检测免疫原。
储存：持续使用时，储存于2-8°C下一到两天。长期储存，请放置在-20°C的冰柜中。工作稀释样本若12小时内未使用应丢弃。
特别指示：使用前应轻轻混合抗体溶液。
Sicgen antibodies-Wee1抗体使用：
Application Values
WB 1:500-1:2,000
反应性图表：
Sample WB IHC (F) IHC (P) IF ELISA
Ustilago maydis +++ ND ND ND ND
SICGEN antibodies专门研发和生产用于生命科学研究的多克隆抗体。它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。艾美捷科技是Sicgen antibodies的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Sicgen-antibodies.shtml
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Sicgen antibodies-抗-VSV-G标签对转染效率和蛋白表达的评估
山羊VSV-G表位标签多克隆抗体。VSV-G表位标签可用于通过免疫沉淀、免疫染色和免疫印迹技术标记和检测蛋白质。由于其体积小，不太可能影响标记蛋白质的生化特性。
艾美捷Sicgen antibodies-抗-VSV-G标签：
目录编号：AB0113
类别：抗体
来源：山羊
应用：WB
反应性：转染细胞
替代名称：VSV-G表位，YTDIEMNRLGK抗体。
基因标识符/访问号：不适用（N/A）
形态：多克隆抗体，以100微升（3毫克/毫升）的小瓶装供应，含PBS（磷酸盐缓冲液）、20%甘油和0.05%叠氮钠。此抗体是从山羊抗血清中通过表位亲和层析纯化的。
浓度：3.00 毫克/毫升
类型：免疫球蛋白G（IgG）
克隆性：多克隆
结合：未结合
免疫原：从大肠杆菌中产生的囊泡性口腔炎病毒糖蛋白（VSV-G）第501至511位氨基酸对应的纯化重组肽段YTDIEMNRLGK。
抗原序列：MYTDIEMNRLGKNPMYTDIEMNRLGK
特异性：该抗体能够识别转染细胞中目标蛋白的氨基端或羧基端融合有YTDIEMNRLGK表位标签的重组蛋白。
储存：持续使用时，储存于2-8°C下一至两天。长期储存，请放置在-20°C的冰柜中。工作稀释样本若12小时内未使用应丢弃。
特别指示：使用前应轻轻混合抗体溶液。
Sicgen antibodies-抗-VSV-G标签使用：
Application Values
WB 1:500-1:5,000
反应性图表：
Sample WB IHC (F) IHC (P) IF ELISA
Transfected cells +++ ND ND ND ND
Sicgen antibodies-抗-VSV-G标签图例：
2500稀释的抗VSV标签Ab；293细胞用VSV-G转染；1/10000稀释的兔多克隆山羊IgG（HRP）；
SICGEN antibodies专门研发和生产用于生命科学研究的多克隆抗体。它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。艾美捷科技是Sicgen antibodies的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Sicgen-antibodies.shtml
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Sicgen antibodies-山羊抗波形蛋白多克隆抗体在免疫荧光WB中的应用
山羊抗波形蛋白多克隆抗体。VIM是中间丝族的一员。细胞骨架由这些中间丝以及肌动蛋白微丝和微管组成。VIM负责细胞质的完整性、细胞骨架相互作用的稳定和维持细胞形状。这种蛋白质控制低密度脂蛋白衍生的胆固醇从溶酶体转运到酯化位点，并参与免疫反应。它是参与迁移、附着和细胞信号传导的许多关键蛋白质的组织者。
艾美捷Sicgen antibodies-山羊抗波形蛋白多克隆抗体：
目录编号：AB252253
类别：抗体
来源：山羊
应用：WB，免疫荧光（IF）
反应性：人类、大鼠、小鼠、猴子、犬类
替代名称：CTRCT30、附睾腔蛋白113、FLJ36605、HEL113、VIM抗体
基因标识符/访问号：基因ID：7431，ENSG00000026025
形态：多克隆抗体，以100微升（2毫克/毫升）的小瓶装供应，含PBS（磷酸盐缓冲液）、20%甘油和0.05%叠氮钠。此抗体是从山羊抗血清中通过表位亲和层析纯化的。
浓度：3.00 毫克/毫升
类型：免疫球蛋白G（IgG）
克隆性：多克隆
结合：未结合
免疫原：从大肠杆菌中产生的人类VIM蛋白第390位氨基酸至羧基末端的重组肽段。
抗原序列：
ALDIEIATYRKLLEGEESRISLPLPNFSSLNLRETNLDSLPLVDTHSKRTLLIKTVETRDGQVINETSQHHDDLE
特异性：可通过WB检测VIM的内源性水平。
储存：持续使用时，储存于2-8°C下一至两天。长期储存，请放置在-20°C的冰柜中。工作稀释样本若12小时内未使用应丢弃。
特别指示：使用前应轻轻混合抗体溶液。
Sicgen antibodies-山羊抗波形蛋白多克隆抗体使用：
Application Values
WB 1:500-1:5,000
IF 1:100-1:500
反应性图表：
Sample WB IHC (F) IHC (P) IF ELISA
Human +++ ND ND +++ ND
Rat +++ ND ND +++ ND
Mouse +++ ND ND +++ ND
Canine +++ ND ND +++ ND
Monkey +++ ND ND +++ ND
Sicgen antibodies-山羊抗波形蛋白多克隆抗体图例：
左图：使用1/250稀释度的抗VIM抗体在原代人角膜上皮细胞（hCEC）中进行染色；细胞用甲醇固定；
右图：使用1/2,500稀释度的抗VIM抗体；每个样品槽加载50微克的裂解物；使用1/10,000稀释度的针对山羊IgG的兔多克隆抗体（辣根过氧化物酶标记）。
参考文献：
1. Galderisi S, Cicaloni V, Milella MS, et al. J Cell Physiol 2021 Jan.
SICGEN antibodies专门研发和生产用于生命科学研究的多克隆抗体。它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。艾美捷科技是Sicgen antibodies的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Sicgen-antibodies.shtml