GPCR检测--实时测量循环AMP信号
G蛋白偶联受体（GPCRs），是细胞表面的Z大受体家族之一，广泛参与调节细胞对外界信号的响应。它们在多种生理过程中发挥着关键作用，包括视觉、嗅觉、神经传递、激素响应和免疫功能等。GPCR的异常功能与多种疾病有关，因此，GPCR检测在药物发现和疾病诊断中具有极其重要的意义。
Screen Gs偶联GPCR以监测荧光板读取器或成像系统上cAMP的增加。标准库存带有CMV启动子。
在您选择的活细胞中实时测量循环AMP信号。绿色荧光的增加表明cAMP的产生增加。cADDis经基因编码并包装在BacMam病毒载体中，可轻松转导到多种细胞类型中，包括原代和iPSC衍生的细胞系。只需将cADDis添加到你的细胞中，第二天就可以在标准荧光显微镜和自动读板器上测量强大的信号。
Montana Molecular-GPCR检测试剂盒（#U0200G）中包含的材料：
绿色增强型cADDis cAMP传感器BacMam
500 mM的丁酸钠，溶于H2O
带有核红标记的β2肾上腺素受体BacMam
10 mM的异丙肾上腺素，溶于10 mM的盐酸中
GPCR检测参考文献：
S. Hoare, et al. Quantifying the Kinetics of Signaling and Arrestin Recruitment by Nervous System G-Protein Coupled Receptors. Frontiers in Cellular Neuroscience. January 2022.
S. Hoare, T. Hughes. Biosensor Assays for Measuring the Kinetics of G-Protein and Arrestin-Mediated Signaling in Live Cells. The Assay Guidance Manual. September 2021.
S. Hoare, et al. Analyzing kinetic signaling data for G-protein-coupled receptors. Nature Scientific Reports. July 2020.
S. Hoare, et al. A kinetic method for measuring agonist efficacy and ligand bias using high resolution biosensors and a kinetic data analysis framework. Nature Scientific Reports. Feb 2020.
GPCR检测技术：
荧光共振能量转移（FRET）
FRET是一种利用两个荧光分子能量转移来检测蛋白质间相互作用的技术。在GPCR检测中，通过标记GPCR与其下游效应分子，可以实时监测受体激活后的构象变化。
细胞膜片钳技术
细胞膜片钳技术可以用来测量细胞膜上的离子通道电流变化，从而评估GPCR激活后对离子通道的影响。
放射性配体结合分析
通过使用放射性标记的配体，可以检测GPCR与其配体的结合亲和力，是一种传统的GPCR功能检测方法。
酶联免疫吸附测定（ELISA）
ELISA技术可以用来检测GPCR激活后释放的细胞因子或酶的量，从而间接反映GPCR的活性。
GPCR检测相关产品：
#U0600R Red GECO Ca2+ Assay Kit
#D0400R Red PIP2 Assay Kit
#U0601R Mitochondrial-targeted Red GECO Assay Kit
#D0241G Green Membrane-Targeted fS15 cADDis cAMP
https://www.amyjet.com/products/MTA-U0200G-010.shtml
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VitroGel STEM，快速有效地扩增干细胞系，用于多种应用
在生物医学研究中，人类多能干细胞（hPSCs）的使用正在呈指数级增长。hPSCs为研究基本的人类发育和功能提供了一个极好的系统，同时也为在实验室和临床环境中测试基于干细胞的疗法提供了一个强大的平台。hPSCs程序的最新进展为临床试验的使用打开了大门。hPSCs在再生医学中具有巨大的潜力，因为它们可能掌握着逆转由疾病和伤害引起的组织损伤的关键。随着这种巨大潜力而来的是扩大规模的需求，因为由于对大数据需求的不断增长，高通量实验变得越来越普遍。
VitroGel STEM是一种无异种（无动物来源）水凝胶系统，旨在提高三维（3D）静态悬浮培养的性能，并扩大人类多能干细胞（hPSCs）的规模，以创建高通量系统来模拟各种组织和疾病状态。
该水凝胶系统可与优化的配方一起使用，该配方完全支持具有多能特性的高质量3D干细胞球体的快速扩增。使用该系统开发的3D干细胞球体可用于进一步的亚培养、图案化分化、类器官发育或重建2D培养形态。
艾美捷VitroGel STEM 特性：
货号：VHM02
配方：无异种成分，功能性水凝胶
用途：用于人类多能干细胞的三维静态悬浮培养
操作：室温下即用型
生物相容性：生物相容，适合动物研究
注射：可注射的水凝胶，适用于体内研究和实验室自动化
细胞收获：VitroGel组织球回收溶液
5-15分钟细胞恢复
pH值：中性
储存：在2-8°C下储存，常温运输
规格：10毫升和2毫升
使用次数：(10毫升) 适用于90-180毫升的悬浮培养
(2毫升) 适用于15-30毫升的悬浮培养
VitroGel STEM优势：
灵活性：
未分化的干细胞可以轻松与VitroGel STEM混合形成细胞-水凝胶混合物，这些混合物能够高效地转移到多种不同类型的细胞培养容器中，包括96孔板、T型瓶、摇瓶和生物反应器。VitroGel STEM与各种干细胞培养基兼容。此外，使用VitroGel STEM系统扩增后，干细胞球状体可以轻松地在3D条件下进行亚培养，用于扩增或分化，也可以在基质涂层板上重新建立2D培养。
易于使用：
VitroGel® STEM提供了一种能力，可以直接从液氮中培养干细胞，在3D悬浮培养中扩增干细胞库。在2D培养容器（如细胞培养板或瓶）上多次传代的干细胞，也可以轻松地使用VitroGel® STEM平台过渡到3D培养。扩增后，细胞可以高效地收获或亚培养，无需额外的试剂，以进行进一步的分化。
高性能：
结合VitroGel® STEM和生物反应器，可以对干细胞群体进行扩增。在超低搅拌速度下，干细胞悬浮培养可以保持高细胞活性和出色的细胞增长率。使用VitroGel® STEM，扩增的干细胞库维持了完整的多能性特性。
成本效益：
VitroGel® STEM不同于常见的干细胞培养系统，后者需要昂贵的基质涂层程序，这些程序可能既费力又耗时，或者需要使用微载体。使用VitroGel® STEM，也不需要典型的额外实验室设备，如摇床或搅拌器，就能成功地扩增干细胞群体。
VitroGel STEM数据说明：
图：从3D hPSC球体重新建立2D菌落。
可以收获在3D静态悬浮液（A）中培养的hPSC球体并将其接种到2D基质涂层表面。2D细胞集落（B）在附着回基质涂层表面后24小时内形成。
VitroGel STEM的应用：
VitroGel STEM可快速有效地扩增干细胞系，用于多种应用。干细胞悬浮培养物可以分化为组织特异性球体和更复杂的类器官。球体通常更均匀，并已被开发用于研究多种不同细胞类型的细胞行为。相反，类器官具有更多不同的组织特异性细胞类型，并且通常具有一定量的3D结构。组织类器官的发育已被证明高度依赖于初始干细胞球体的大小、密度和多能性。因此，凭借VitroGel STEM有效控制干细胞球体大小的能力，研究人员可以快速确定所需类器官的理想球体起始大小。因此，使用VitroGel STEM系统产生一致的大干细胞球体实际上可以加速类器官的形成过程。此外，不想要的和不可预测的分化往往会困扰2D干细胞培养。任何数量的未定义分化都可能对类器官的产生产生放大的影响。由于VitroGel STEM在hPSC静态悬浮培养物中精确地保持多能性，因此可以放心地产生类器官。通过VitroGel STEM，研究人员有了一个生成大量干细胞的平台，这些干细胞可用于研究人类疾病。
https://www.amyjet.com/products/VHM02.shtml
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Cardiolipin琼脂糖珠--提高实验效率，减少样本损失
Cardiolipin（心磷脂）是一种主要存在于线粒体内膜的重要磷脂，对于维持线粒体功能至关重要。在生物化学研究中，Cardiolipin琼脂糖珠作为一种分析工具，具有特定的应用。
Cardiolipin琼脂糖珠是由心磷脂与琼脂糖基质结合形成的珠状颗粒，通常用于生物化学和分子生物学实验中。这些珠粒可以作为固相支持物，用于亲和层析、酶联免疫吸附测定（ELISA）等多种分析技术。
艾美捷Cardiolipin琼脂糖珠（BGT-OPU-101）裂解缓冲液：
盐（10-20 mM HEPES，pH 7.4，100-150 mM NaCl）
非离子洗涤剂*（如0.1–2%Igepal）
二价阳离子（0-10 mM EDTA和/或EGTA）
蛋白酶抑制剂（完整的迷你蛋白酶片、原钒酸钠、氟化钠）
脂质珠™检测说明：
1. 脂质包被珠有1 mL和0.1 mL两种规格，以50%的浆液形式在1X PBS缓冲液中提供。
2. 订购1 mL脂质珠，附带200 µL的对照珠。
3. 储存于2-8°C。产品对温度和光线敏感，请勿冷冻。
4. 以1,000 x g或更低速度离心珠。不要高速离心珠，因为这可能会压碎珠。
5. 每1 mL珠中总共有10纳摩尔的结合脂质。
6. 珠的直径范围在45至165微米之间。
7. 每个蛋白使用50-100 µL的50%浆液脂质包被珠和对照珠。
脂质珠™ - 蛋白拉下协议：
1. 充分混合珠（不要涡旋）。将50-100 µL的50%珠浆液转移到0.5-1.5 mL的管中。
2. 以1,000 x g或更低速度离心珠以沉淀。小心移除上清液，避免丢失珠。
3. 用洗涤缓冲液的10倍过量洗涤珠。轻轻混合，孵育1-2分钟。重复洗涤步骤两次。
4. 小心移除洗涤上清液，并将珠在含有您的蛋白的结合缓冲液中重新悬浮。
a. 对于纯化的蛋白，使用1-10微克的蛋白，稀释在足够的结合缓冲液中形成50%脂质珠浆液。
b. 对于细胞裂解物、提取物、亚细胞分数：使用大约1毫克的总蛋白对1 mL结合缓冲液。将整个1 mL准备好的样品加入您洗涤过的珠中。
5. 孵育蛋白-珠溶液1-3小时。孵育可以在室温或4°C下进行，取决于您蛋白的稳定性。需要连续运动以保持珠悬浮。
6. 沉淀珠并小心移除上清液。如果需要，上清液可以用来监测未结合的蛋白。
7. 用洗涤缓冲液的10倍过量洗涤珠。轻轻混合，孵育1-2分钟。重复洗涤步骤五次。如果您选择在结合缓冲液中使用牛血清白蛋白（BSA），请确保在进入下一步之前将其彻底洗出。
8. 在最后一次洗涤后，通过向珠中加入等体积的2X Laemmli样品缓冲液（或类似物）并加热至70°C 10分钟来洗脱结合的蛋白。
9. 加热后，沉淀珠并移除上清液。将上清液储存在4°C下，直到分析。丢弃珠。
10. 蛋白可以通过SDS-PAGE分离，并通过凝胶的Coomassie蓝染色、蛋白转移和免疫印迹来检测感兴趣的蛋白，或进行自显影。
研究应用：
Cardiolipin琼脂糖珠在研究线粒体功能、线粒体相关疾病、以及线粒体蛋白质的分离和鉴定中发挥着重要作用。它们可以用来富集和纯化与心磷脂相互作用的蛋白质，进而分析这些蛋白质的功能。
实验操作优势：
使用Cardiolipin琼脂糖珠进行实验操作简便，可以通过简单的吸附和洗脱步骤来分离目标蛋白。这种方法减少了实验步骤，提高了实验效率，并且有助于减少样本损失。
稳定性和重复性：
Cardiolipin琼脂糖珠具有良好的化学和物理稳定性，可以在不同的实验条件下保持一致的性能。这为实验结果的重复性和可靠性提供了保障。
跨学科研究潜力：
Cardiolipin琼脂糖珠不仅在生物学研究中有应用，还在医学、药理学和环境科学等多个领域展现出其潜力，尤其是在研究线粒体功能障碍相关疾病，如帕金森病。
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鸡CCL4重组蛋白，助力鸡的免疫应答机制研究
鸡CCL4（鸡趋化因子C-C motif配体4）重组蛋白是一种重要的细胞因子，属于C-C基序趋化因子家族成员，在鸡的免疫应答和炎症过程中发挥关键作用。
鸡CCL4重组蛋白是一种通过基因工程技术在宿主细胞中表达的蛋白质，具有调节免疫细胞迁移和活化的能力。这种重组蛋白模拟了鸡体内自然产生的CCL4，用于研究和应用在免疫学和炎症反应的领域。
艾美捷鸡CCL4重组蛋白：
货号：BGT-PCT-318
别名 MIP-1β
来源：酵母
配方：不含载体蛋白的冻干制剂。
复溶：使用至少含有0.1%载体蛋白的无菌磷酸盐缓冲生理盐水进行复溶。
稳定性和储存：自收到之日起，在-20°C下稳定保存长达十二个月。在-20°C下，与载体蛋白一起储存的工作量分装可稳定保存至少3个月。避免反复冻融。
分子量：7.8 kDa（计算值）
纯度：通过SDS-PAGE分析，纯度大于95%。
纯化：离子交换色谱
Entrez基因ID：395551
氨基酸序列：APVGSDPPTS CCFTYISRQL PFSFVADYYE TNSQCPHAGVVFITRKGREV CANPENDWVQ DYMNKMELN（69）
氨基酸同源性：与头盔非洲鸵鸟（Numida meleagris，helmeted guineafowl）CCL4的同源性为96%。
生物学功能：
鸡CCL4重组蛋白主要参与免疫细胞，特别是单核细胞和淋巴细胞的趋化，促进它们向炎症部位的迁移。它在病原体清除、组织修复和免疫调节中扮演着重要角色。
研究应用：
在生物医学研究中，鸡CCL4重组蛋白被用于研究鸡的免疫应答机制和疾病防御策略。此外，它还可用于开发新的疫苗和治疗剂，特别是针对那些影响家禽健康的疾病。
生产与纯化技术：
鸡CCL4重组蛋白的生产涉及基因克隆、表达载体构建、宿主细胞转染以及蛋白质的表达和纯化。现代生物技术的应用确保了重组蛋白的高纯度和生物活性。
稳定性与储存条件：
为了保持鸡CCL4重组蛋白的稳定性和生物活性，通常需要在-20°C或更低温度下保存，并避免反复冻融，以确保其在长期储存后仍能保持功能。
序列特性与同源性：
鸡CCL4重组蛋白的氨基酸序列经过精确设计，以确保其与天然CCL4的高度同源性。这种高度同源性对于确保重组蛋白在生物学实验和临床应用中的有效性至关重要。
跨物种研究潜力：
由于鸡CCL4重组蛋白与其他物种的CCL4具有一定程度的序列相似性，它在跨物种比较研究中也显示出潜在的应用价值，有助于科学家们探索不同物种间免疫反应的共性和差异。
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Montana Molecular-Borealis-V2R：荧光成像系统和自动荧光板读取器
arrestin募集的动力学生物传感器测定将arrestin-3（β-arrestin-2）的构象变化转化为荧光强度的变化。该试剂盒在未修饰的加压素2型受体（V2R）处检测arrestin的募集。Borealis Arrestin传感器和V2R包装在BacMam病毒载体中，可轻松输送到大多数细胞类型。已验证可用于荧光成像系统和自动荧光板读取器。
艾美捷 Montana Molecular-Borealis-V2R#D2000G包含的材料：
Green Borealis 抗arrestin 生物传感器，BacMam 表达系统
未修饰的抗利尿激素2型受体（V2R），BacMam 表达系统
丁酸钠，500mM 水溶液
对照受体：血管紧张素II型1受体（AT1R），BacMam 表达系统
对照激动剂：血管紧张素II，5mM 水溶液
Montana Molecular-Borealis-V2R特征：
1、使用受体动力学定量测量G蛋白偶联受体的激动剂偏向性
2、将β-arrestin信号染成绿色，G蛋白信号染成红色：一种新的活细胞检测方法，用于定量测量七次跨膜域受体的激动剂偏向性
3、利用动力学分析平台测量偏置激动作用：一种实时荧光生物传感器数据的实时分析方法
相关产品：
#D0300G 绿色下调DAG（二酰甘油）检测试剂盒
#U0601R 靶向线粒体的红色GECO检测试剂盒
#U0608G 绿色GECO Ca²⁺（Ef1-α）检测试剂盒
#U0600R 红色GECO Ca²⁺检测试剂盒
Montana Molecular产品主要包括GPCR检测、细胞应激和毒性相关检测工具，为客户提供了长时间内观察候选药物对细胞过程影响的能力。艾美捷科技是Montana Molecular的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Montana-Molecular.shtml
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Montana Molecular-红色GECO Ca2+测定试剂盒的可控表达
荧光基因编码的Ca2+指示剂（GECO）是由阿尔伯塔大学的Robert Campbell实验室开发的。R-GECO可以与绿色荧光cADDis、cAMP传感器或我们的向上和向下DAG传感器配对，以同时检测活细胞中的Ca2+和环AMP或Ca2+和二酰基甘油。BacMam递送系统能够在包括iPSC衍生的心肌细胞和神经元在内的多种细胞类型中实现一致和可控的表达。
艾美捷 Montana Molecular-红色GECO Ca2+测定试剂盒#U0600R包含的材料：
Green Borealis 抗arrestin 生物传感器，BacMam 表达系统
未修饰的抗利尿激素2型受体（V2R），BacMam 表达系统
丁酸钠，500mM 水溶液
对照受体：血管紧张素II型1受体（AT1R），BacMam 表达系统
对照激动剂：血管紧张素II，5mM 水溶液
HEK 293细胞中的多重DAG和Ca²+反应。痕量描述了对30μM Carbachol（n=16孔）R-GECO（）的平均响应；绿色DAG（m）。
Montana Molecular-红色GECO Ca2+测定试剂盒相关产品：
#D2040G Borealis-B2AR
#D0231G 绿色膜靶向FMP cADDis cAMP
#D2070G Borealis-5-HT2AR
#U0200G 绿色上调cADDis cAMP检测试剂盒
文献参考：
X. Chen, et al. A PACAP-activated network for secretion requires coordination of Ca2+ influx and Ca2+ mobilization. bioRxiv. January 2024.
C. Amos, et al. Membrane lipids couple synaptotagmin to SNARE-mediated granule fusion in insulin-secreting cells. Molecular Biology of the Cell. December 2023.
J. Wu, et al. Interaction Between HCN and Slack Channels Regulates mPFC Pyramidal Cell Excitability and Working Memory. bioRxiv. March 2023.
M. Thomas, et al. Optically activated, customizable, excitable cells. PLOS One. December 2020.
L. Liu, et al. Diacylglycerol kinases regulate TRPV1 channel activity. Journal of Biological Chemistry. April 2020.
S. Hoare, et al. A kinetic method for measuring agonist efficacy and ligand bias using high resolution biosensors and a kinetic data analysis framework. Nature Scientific Reports Feb 2020.
Montana Molecular产品主要包括GPCR检测、细胞应激和毒性相关检测工具，为客户提供了长时间内观察候选药物对细胞过程影响的能力。艾美捷科技是Montana Molecular的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Montana-Molecular.shtml
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Sicgen antibodies-人IgG蛋白解决方案
从人血清中分离的人IgG全长蛋白。IgG是一种单体免疫球蛋白，具有两条重链和两条轻链。IgG存在于血液中，是Z丰富的免疫球蛋白，占人类血清免疫球蛋白的75%。有4个亚类（IgG1（66%）、IgG2（23%）、IgG3（7%）和IgG4（4%））可以与多种类型的病原体结合，通过补体激活、吞噬调理和毒素中和来保护身体免受病原体的侵害。这种蛋白质可以在生物化学和细胞生物学实验中用作阻断剂、包被蛋白、标准物、参考抗原，用于各种免疫测定，包括蛋白质印迹和斑点印迹、ELISA、免疫扩散和免疫电泳。
艾美捷Sicgen antibodies人IgG蛋白：
目录编号：AB1010
类别：蛋白质
家族：蛋白质对照
应用：西方印迹（WB）、酶联免疫吸附测定（ELISA）、电泳、其他、点印迹
反应性：无
别名：免疫球蛋白G
基因标识符/访问号：不适用（N/A）
形态：人类全长IgG蛋白，以500或1000微升（10毫克/毫升）的小份量供应，含磷酸盐缓冲液（0.1M，pH 7.4）和0.001%的叠氮钠。
浓度：10.00 毫克/毫升
标签：无标签（NO TAG）
表达系统：真核细胞（哺乳动物）
抗原序列：不适用（N/A）
特异性：不适用（N/A）
储存：长期储存请存放于-20°C。短期储存（最多一个月）请存放于2-8°C。
特别指示：避免反复冻融。
SICGEN antibodies专门研发和生产用于生命科学研究的多克隆抗体。它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。艾美捷科技是Sicgen antibodies的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Sicgen-antibodies.shtml
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Sicgen antibodies-ZO1抗体，紧密连接蛋白ZO1的特异性标记
TJP1紧密连接蛋白1（TJP1）的山羊多克隆。TJP1位于细胞间紧密连接的细胞质膜表面，可能参与细胞间连接的信号转导。
艾美捷Sicgen antibodies-ZO1抗体：
目录编号：AB0054
类别：抗体
家族：细胞器标记
来源：山羊
应用：西方印迹（WB）、冰冻组织切片免疫组化（IHC (F)）、石蜡组织切片免疫组化（IHC (P)）、免疫荧光（IF）
反应性：人类、大鼠、小鼠、猴子、犬类
别名：ZO-1 和紧密连接蛋白1抗体。
基因标识符/访问号：基因ID：7082，ENSG00000104067
形态：多克隆抗体，以200微升（3毫克/毫升）的小份量供应，含磷酸盐缓冲液（PBS）、20%甘油和0.05%的叠氮钠。该抗体是从山羊抗血清中亲和纯化得到的。
浓度：3.00 毫克/毫升
类型：免疫球蛋白G（IgG）
克隆性：多克隆
偶联：未偶联
免疫原：来自大肠杆菌生产的人类ZO-1蛋白1580氨基酸残基至C末端的纯化重组肽段。
抗原序列：QGAIPEGVEQEIYFKVCRDNSILPPLDKEKGETLLSPLVMCGPHGLKFLKPVELRLPHCDPKTWQNKCLPGDPNYLVGANCVSVLIDHF
特异性：可通过西方印迹检测全细胞和组织裂解物中内源性总ZO1的水平。
储存：连续使用时，存放在2-8°C下一到两天。长期储存时，存放在-20°C的冰柜中。工作稀释样本若12小时内未使用应丢弃。
特别指示：使用前应轻轻混合抗体溶液。避免反复冻融。
Sicgen antibodies-ZO1抗体使用：
Application Values
WB 1:500-1:2,000
IF 1:50-1:250
IHC (P) 1:200-1:1,000
IHC (F) 1:200-1:1,000
Sicgen antibodies-ZO1抗体图例：
左图：使用ZO1抗体以1/100的稀释度对原代视网膜色素上皮细胞（RPE细胞）进行免疫荧光染色
右图：抗ZO1抗体以1/2,500的稀释度使用。每泳道上样总量为50微克蛋白质。使用针对山羊IgG的兔多克隆抗体（辣根过氧化物酶标记，HRP）以1/10,000的稀释度。
SICGEN antibodies专门研发和生产用于生命科学研究的多克隆抗体。它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。艾美捷科技是Sicgen antibodies的中国代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Sicgen-antibodies.shtml