Montana Molecular/艾美捷基于BacMam系统的荧光生物传感器方案
Montana Molecular公司开发了一系列基于BacMam系统的荧光生物传感器和报告系统,专用于药物发现和活细胞研究。其产品主要包括GPCR检测、细胞应激和毒性相关检测工具,为客户提供了长时间内观察候选药物对细胞过程影响的能力。通过在药物筛选的早期阶段提供更多信息,这些产品降低了药物发现的风险和成本。科学家们可以借助这些产品观察和测量对维护健康和治疗疾病至关重要的细胞过程。
艾美捷 Montana Molecular的主要产品线:
1. 基于BacMam系统的Gi, Gs, Gq偶联受体(CGRP)构建体:
BacMam是一种修饰的杆状病毒载体,可在包括原代细胞和干细胞 (iPSC衍生细胞) 的大多数细胞系中,高效转导和表达, 非常省力且毒性极小。生命科学和药物发现领域的研究人员多年来一直使用BacMam在其感兴趣的细胞中瞬时递送靶受体、基因编码的生物传感器和其他构建体。
BacMam 技术的基础是,使用双链 DNA 昆虫病毒(杆状病毒)作为载体实现基因在哺乳动物细胞中的高效递送和表达。通过哺乳动物表达盒对杆状病毒进行了工程改造,从而实现在哺乳动物细胞中的转基因表达。杆状病毒在哺乳动物细胞中不复制,因此具有很好的安全性,并且细胞耐受性良好。BacMam 试剂已用于基于细胞的检测、活细胞成像、干细胞生物学及许多其他应用。
BacMam 系统的优点包括:
1)高效转导哺乳动物细胞系,包括原代细胞和干细胞
2)安全(在哺乳动物细胞中不复制)且无可见的细胞病变效应
3)冻存的预转导细胞可直接用于检测
4)可转导性(对药理学相关细胞类型进行分析)
5)检测开发速度(无需花费时间生成稳态细胞系)
2. 细胞应激和毒性荧光检测工具
当细胞承受内质网(ER)应激或未折叠蛋白反应(UPR)时,细胞应激检测试剂盒可以产生一种亮绿色荧光蛋白。这种可靠的分析可以在标准荧光板阅读器或成像系统上检测到。
3. cADDis: 活细胞cAMP检测工具
用我们的cAMP检测试剂盒通过cADDis实时检测Gs或Gi信号来检测cAMP;
4. GECO:活细胞钙测定试剂盒
5. DAG:活细胞二酰甘油检测试剂盒
6. 活细胞PIP2检测
下图为Montana Molecular公司授权艾美捷科技有限公司(AmyJet Scientific Inc.)作为Montana Molecular在中国区的D家代理授权书。
Montana Molecular热门产品:
货号 产品名称 规格
U0200G Green Up cADDis cAMP 30ml
D0231G Green Membrane-Targeted fMP cADDis cAMP 30ml
D0200G Green Down cADDis cAMP 30ml
U0200R Red Up cADDis cAMP 30ml
X0200G Green Gi cADDis cAMP 30ml
D0201G Green Cilia-Targeted cADDis cAMP 30ml
D0211G Ratiometric Cilia-Targeted cADDis cAMP 30ml
D2090G Borealis —PAR2 30ml
C1120G Pseudo SARS-CoV-2 D614G Green Reporter 30ml
C1160G 3CLglow 30ml
Z0600N Human Glucagon-like Peptine GLP-1 Receptor(GLP1R) 30ml
艾美捷科技是Montana Molecular的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Montana-Molecular.shtml
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Montana Molecular/艾美捷新型IRE1-XBP1 ER应力测定方案
IRE1-XBP1细胞应激测定#U0921G:
使用明亮的IRE1-XBP1比率电池应力传感器在读板器上检测应力响应。CMV启动子。
该传感器基于在内质网应激期间由IRE1蛋白剪接的XBP1 mRNA。当细胞经受内质网(ER介导的)应激或经历未折叠蛋白反应(UPR)时,红色荧光蛋白组成性表达,而传感器产生非常亮的绿色荧光。只使用绿色荧光测量应力,或者取绿色和红色通道的比例。此外,红色和绿色荧光蛋白都是核定位的,用于简单的细胞分割和图像分析。
艾美捷 Montana Molecular新型IRE1-XBP1 ER应力测定试剂盒特点:
1、通过UPR的IRE1-XBP1臂检测细胞应激
2、细胞在承受压力时产生亮绿色荧光,并组成性表达红色FP用于比率分析或监测细胞健康
3、测量绿色荧光或取绿色/红色荧光比,两者都具有高Z’
4、绿色和红色荧光以细胞核为目标,以简化使用显微镜或高含量成像系统的图像分析
5、这是#U0901G的更新,使用明亮、快速折叠的Montana Paintbrush RFP对读板器进行更强大的检测
左图:HEK293细胞对Thapsigargin处理的应激反应。使用#U0921G使用绿色/红色荧光比测量应力。
右图:HEK293细胞对Thapsigargin处理的应激反应。仅使用绿色荧光用#U0921G测量应力。
Montana Molecular新型IRE1-XBP1 ER试剂盒中包含的材料:
IRE1-XBP1比例计量细胞应激感应器BacMam
丁酸钠,500 mM水溶液
芍药苷(阳性对照)
Montana Molecular新型IRE1-XBP1 ER应力测定试剂盒期刊参考:
M. Ho, et al. Molecular mechanisms involved in alcohol craving, IRF3, and endoplasmic reticulum stress: a multi-omics study. Nature Translational Psychiatry. March 2024.
L. Scheherazade Milane. Combination Organelle Mitochondrial Endoplasmic Reticulum Therapy (COMET) for Multidrug Resistant Breast Cancer. Journal of Controlled Release. October 2023.
S. Sanchez-Martinez, et al. Labile assembly of a tardigrade protein induces biostasis. bioRxiv. July 2023.
N. Mohammed, et al. Mechanisms of cell death induced by hexabromocyclododecane (HBCD) involves apoptosis, autophagy, and ER stress. Journal of Biochemical and Molecular Toxicology. June 2023.
K. Harlen, et al. Live-Cell Assays for Cell Stress Responses Reveal New Patterns of Cell Signaling Caused by Mutations in Rhodopsin, α-Synuclein and TDP-43 Frontiers Cellular Neuroscience. December 2019.
K. Harlen, et al. Live-cell biosensors reveal novel insight into neurotoxic and cardiotoxic compound mediated cellular stress response. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. October 2019
Montana Molecular产品主要包括GPCR检测、细胞应激和毒性相关检测工具,为客户提供了长时间内观察候选药物对细胞过程影响的能力。艾美捷科技是Montana Molecular的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Montana-Molecular.shtml
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Montana Molecular/艾美捷绿细胞应激测定试剂盒,用于细胞分割和图像分析
细胞应激传感器是一种基因编码的荧光生物传感器,当细胞承受内质网(ER介导的)应激或经历未折叠蛋白反应(UPR)时,它会产生非常亮的绿色荧光。重要的是,绿色荧光信号是核定位的,用于简单的细胞分割和图像分析。该传感器基于在内质网应激期间由IRE1蛋白剪接的XBP1 mRNA[Iwawaki等人2003]。
该产品用于测量96孔板活细胞上的细胞应激反应。它已在活体HEK293T细胞以及iPSC衍生的心肌细胞和神经元中得到验证。可以在活细胞成像系统、自动荧光板阅读器或荧光显微镜上检测到测定的荧光。
艾美捷 Montana Molecular绿细胞应激测定试剂盒#U0900G包含的材料:
绿色细胞应激感应器BacMam
丁酸钠,500 mM水溶液
芍药苷100 μM(对照品)
存储:BacMam存货应在4℃的温度下储存,并在原始包装中加以保护。储存HDAC内部温度为4℃。储存温度控制在-20℃。避免重复冻融循环。我们建议在储存超过12个月后重新测试BacMam库存。如果您的BacMamstock已被纯化,请在30天内使用以获得结果
HEK293T表达细胞应激传感器和野生型(WT)或野生型视紫红质或超氧化物歧化酶(SOD)的细胞。每种疾病突变蛋白都是一种已知的突变,导致蛋白质错误折叠或聚集。红细胞色素P23H导致视网膜色素变性,SOD G85R导致ALS。表达18小时后对细胞进行分析。
Montana Molecular绿细胞应激测定试剂盒文献参考:
1.Iwawaki,Takao,Ryoko Akal,Kenji Kohno,and Masayukl Miura.2003."ATransgenlc Mouse Model for Monitor-ing Endoplasmic Reticulum Stress"NatureMedicine 10(1).NaturePublishing Group:98-102.
2.Rong,Juan,lanPass,PaulW.Dlaz,Tram A.Ngo,Michelle Sauer,GavinMagnuson,Fu-Yue Zeng,etal.2015."CellBasedHigh-Throughput Luciferase ReporterGene Assaysforldentifying and ProfilingChemicalModulatorsofEndoplasmic ReticulumSignaling Protein,IRE1.Journal of Biomolecular Screening 20(10).SAGEPublications:1232-45.
3.GrahamFL,Smiley J,Russell WC,Nairn R:CharacterlstIcsof a human cell lIne transformed byDNAfromhuman adenovlrus type5.JGen VIrol 1977,36(1):59-74.
4.DulbeccoR and Vogt M:Plaque formatlonand Isolatlon ofpure llneswith pollomyelltlsviruses.The Jour-nalof experimental medicine 1954.
5.ChalflieM,TuY,EuskirchenG,Ward wW,Prasher DC:Greenfluorescent proteln asa markerfor gene expresslon.Science 1994.
6.KostT,Condreay J,Ames R,Rees S,Romanos M:ImplementatlonofBacMam vIrus gene dellvery technol-ogy In adrug discovery settIng.Drug DiscoveryToday 2007,12(9-10):396-403
7.Tewson PH,Martinka S,Shaner N,HughesTE,Quinn AM:NewDAG andcAMP sensors optimized for live cellassaysin automatedlaboratoriles.Journal of BlomolecularScreening 2015.
8.Shaner,N.C,Lambert,G.G,Chammas,A,Ni,Y,Cranfil,PJ,Baird,M.A.,Sell,B.R,Allen,JR,Day,R.N,Israelsson M,Davidson,M.W,&Wang,J.(2013)"A bright monomericgreen fluorescent protein derivedfrom Branchios-toma lanceolatum."Nature Methods,May;10(5):407-9.dot:10.1038/nmeth.2413.
Montana Molecular产品主要包括GPCR检测、细胞应激和毒性相关检测工具,为客户提供了长时间内观察候选药物对细胞过程影响的能力。艾美捷科技是Montana Molecular的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Montana Molecular绿色下调cADDis cAMP检测试剂盒:快速分裂、优化
在您选择的活细胞中实时测量循环AMP信号。荧光的减少表明cAMP的产生增加。cADDis经基因编码并包装在BacMam病毒载体中,可轻松转导到多种细胞类型中,包括原代和iPSC衍生的细胞系。只需将cADDis添加到你的细胞中,第二天就可以在标准荧光显微镜和自动读板器上测量强大的信号。
cADDis检测协议已针对在96孔板上测量快速分裂、永生化细胞系中的cAMP反应进行了优化,并已在活体HEK293T细胞中验证。CADDIs用户已在多种细胞类型中发表了结果。这项检测非常稳健,可用于活细胞成像或在自动荧光板阅读器上进行筛选。
艾美捷 Montana Molecular绿色下调cADDis cAMP检测试剂盒#D0200G包含的材料:
绿色下调cADDis cAMP感应器BacMam
丁酸钠,500 mM水溶液
带有核红色标签的β2肾上腺素受体BacMam
异丙肾上腺素10 mM,溶于10 mM盐酸中
左图:荧光减少表明异丙肾上腺素刺激β2-肾上腺素能受体后cAMP产生增加
右图:cADDis测定表明,在BMG CLARIOstar平板读数器上用30μM异丙肾上腺素(o)刺激β2-肾上腺素能受体后,与载体对照PBS相比,cAMP产生增加。
GPCR测定参考:
H. Schiff, et al. β-arrestin-biased proteinase-activated receptor-2 antagonist C781 limits allergen-induced airway hyperresponsiveness and inflammation. British Journal of Pharmacology. June 2022.
S. Hoare, et al. Quantifying the Kinetics of Signaling and Arrestin Recruitment by Nervous System G-Protein Coupled Receptors. Frontiers in Cellular Neuroscience. January 2022.
S. Hoare, T. Hughes. Biosensor Assays for Measuring the Kinetics of G-Protein and Arrestin-Mediated Signaling in Live Cells. The Assay Guidance Manual. September 2021.
S. Hoare, et al. Analyzing kinetic signaling data for G-protein-coupled receptors. Nature Scientific Reports. July 2020.
S. Hoare, et al. A kinetic method for measuring agonist efficacy and ligand bias using high resolution biosensors and a kinetic data analysis framework. Nature Scientific Reports. Feb 2020.
Montana Molecular绿色下调cADDis cAMP检测试剂盒相关产品:
#D0221G Green Nuclear-Targeted cADDis cAMP
#U0221R Red Nucleus-Targeted cADDis cAMP
#D0331G Green Membrane-Targeted DAG
#D0241G Green Membrane-Targeted fS15 cADDis cAMP
Montana Molecular产品主要包括GPCR检测、细胞应激和毒性相关检测工具,为客户提供了长时间内观察候选药物对细胞过程影响的能力。艾美捷科技是Montana Molecular的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Sicgen antibodies/艾美捷--验证抗体,多克隆抗体方案
与单克隆抗体相比,多克隆抗体具有多表位、生产速度快、竞争力强等优点。作为一抗或二抗,它们可用于各种不同的技术,如ELISA, FACS, IF, IHC, IP, WB等。SICGEN antibodies专门研发和生产用于生命科学研究的多克隆抗体。它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。可用的抗体包包括抗原设计、抗原合成、抗原偶联、免疫、ELISA测试、纯化、抗体标记和表征。多年来,SICGEN一直为国内外主要大学、科研机构、制药企业和生物技术公司生产定制的多克隆抗体。
艾美捷Sicgen antibodies产品线:
验证抗体;多克隆抗体;荧光抗体;新抗体;蛋白;定制服务
下图为Sicgen antibodies公司授权艾美捷科技有限公司(AmyJet Scientific Inc.)作为Sicgen antibodies在中国区的D家代理授权书。
Sicgen antibodies部分热门产品推荐:
AB0318-100 Anti-ADORA2AIES
AB0232-200 Anti-AlbuminIES
AB0327-100 Anti-ALIXIES
AB0276-100 Anti-ARD1IES
AB0083-200 Anti-ATG12IES
AB0306-100 Anti-ATP1a1IES
AB0089-500 Anti-ATXN3IES
AB0048-100 anti-AzurinIES
AB0164-200 Anti-BAXIES
AB0145-200 Anti-beta-ActinIES
AB0095-200 Anti-beta-CateninIES
AB0235-100 Anti-beta-LactoglobulinIES
AB0041-500 Anti-CANXIES
AB0245-200 Anti-CatalaseIES
AB0043-500 Anti-Cathepsin DIES
AB0055-200 Anti-CAV1IES
AB0094-200 Anti-CAV2IES
AB0097-200 Anti-CD19IES
AB240241-100 Anti-CD2IES
AB0092-200 Anti-CD31IES
AB0091-200 Anti-CD4IES
AB0100-500 Anti-CD45IES
AB0272-100 Anti-CD5IES
AB0047-500 Anti-CD63IES
AB0115-200 Anti-CDH1IES
AB0139-100 anti-CDH11IES
AB0071-200 Anti-CDH2IES
AB0059-200 Anti-Clathrin HCIES
AB236237-200 Anti-C-peptideIES
AB0124-500 anti-CreIES
AB0016-500 Anti-CX43IES
AB0289-100 Anti-Dis3L2IES
AB0085-200 anti-DYKDDDDKIES
AB0005-200 Anti-EEA1
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Sicgen antibodies/艾美捷抗ADORA2A抗体,探索神经生物学新工具
山羊抗ADORA2A多克隆抗体。它是鸟嘌呤核苷酸结合偶联受体(GPCR)超家族的成员。受体是七通跨膜蛋白,对细胞外刺激作出反应并激活细胞内信号转导途径。它在许多生物功能中发挥着重要作用,包括脑和肾血流量、免疫功能、心律和循环、疼痛调节和睡眠。它与神经退行性疾病和炎症性疾病等病理生理条件有关。
艾美捷Sicgen antibodies抗ADORA2A抗体:
目录编号:AB0318
分类:抗体
领域:神经生物学
来源:山羊
应用:Western blot, 免疫组织化学(冰冻切片), 免疫组织化学(石蜡包埋)
反应性:人、大鼠、小鼠、猴、犬
别名:A2aR, ADORA2, RDC8 抗体。
形态:多克隆抗体作为100微升(3毫克/毫升)的小包装,以PBS(磷酸盐缓冲液)、20%甘油和0.05%叠氮钠的形式供应。该抗体是从山羊抗血清中通过表位亲和层析纯化的。
浓度:3.00 毫克/毫升
同种型:IgG
克隆性:多克隆
偶联:未偶联
免疫原:源自大肠杆菌中产生的人类ADORA2A蛋白第360个氨基酸至C末端的重组肽段。
抗原序列:YALGLVSGGSAQESQGNTGLPDVELLSHELKGVCPEPPGLDDPLAQDGAGVS
特异性:通过Western blot检测大脑中内源性ADORA2A水平。
储存:持续使用时,存放在2-8摄氏度下一到两天。长期储存,请置于-20摄氏度的冰柜中。工作稀释样本若12小时内未使用应丢弃。
特别指示:使用前应轻轻混合抗体溶液。
Sicgen antibodies抗ADORA2A抗体使用:
Application Values
WB 1:500-1:2,000
IHC (F) 1:250-1:1,000
IHC (P) 1:250-1:1,000
Sicgen antibodies抗ADORA2A抗体图例:
左图:热诱导抗原回收后使用抗ADORA2A抗体和FFPE组织的小鼠脑的IHC。1:500/DAB检测的抗ADORA2A-Ab。
右图:1/1000稀释的抗-ADORA2A抗体;每个泳道50µg的裂解物;1/10000稀释的兔多克隆山羊IgG(HRP);
SICGEN antibodies专门研发和生产用于生命科学研究的多克隆抗体。它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。艾美捷科技是Sicgen antibodies的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Sicgen antibodies/艾美捷山羊白蛋白多克隆抗体--稳定细胞外液体积
山羊白蛋白多克隆抗体。白蛋白是一种可溶性、单体、球状的66kDa的无糖基化血清蛋白。这种蛋白质约占血清蛋白质的一半。它在稳定细胞外液体积方面发挥作用,是脂肪酸和类固醇的载体蛋白。
艾美捷Sicgen antibodies山羊白蛋白多克隆抗体:
目录编号:AB0232
分类:抗体
领域:心血管
来源:山羊
应用:Western blot
反应性:人、大鼠、小鼠、猴、犬
别名:ALB, ANALBA, FDAH, PRO0883, PRO0903 和 PRO1341 抗体。
基因ID:213, ENSG00000163631
形态
多克隆抗体,以200微升(3毫克/毫升)的小包装形式供应,包含PBS(磷酸盐缓冲液)、20%甘油和0.05%叠氮钠。该抗体是从山羊抗血清中通过表位亲和层析纯化的。
浓度:3.00 毫克/毫升
同种型:IgG
克隆性:多克隆
偶联:未偶联
免疫原:纯化的全长天然白蛋白。
特异性:使用血清样本可通过Western blot检测到约66 kDa大小的条带。
储存:持续使用时,存放在2-8摄氏度下一至两天。长期储存,请置于-20摄氏度的冰柜中。工作稀释样本若12小时内未使用应丢弃。
特别指示:使用前应轻轻混合抗体溶液。
Sicgen antibodies山羊白蛋白多克隆抗体使用:
Application Values
WB 1:500-1:5,000
Sicgen antibodies山羊白蛋白多克隆抗体图例:
1/2500稀释的抗白蛋白抗体;每条泳道10µl稀释的人血清;1/10000稀释的兔多克隆山羊IgG(HRP)
SICGEN antibodies专门研发和生产用于生命科学研究的多克隆抗体。它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。艾美捷科技是Sicgen antibodies的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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Sicgen antibodies深入解析内源性ALIX水平:山羊抗ALIX多克隆抗体
山羊抗ALIX多克隆抗体。程序性细胞死亡6相互作用蛋白(ALIX)在ESCRT途径中的胞质分裂、细胞凋亡和紧密连接完整性的维持、膜修复、腔内内涵体小泡形成和病毒出芽中发挥作用。
艾美捷Sicgen antibodies山羊抗ALIX多克隆抗体:
目录编号:AB0327
分类:抗体
领域:凋亡
来源:山羊
应用:Western blot
反应性:人、大鼠、小鼠、猴、犬
别名:AIP1, DRIP4, HP95, PDCD6IP, 程序性细胞死亡6相互作用蛋白抗体。
形态:多克隆抗体,以100微升(2毫克/毫升)的小包装形式供应,包含PBS(磷酸盐缓冲液)、20%甘油和0.05%叠氮钠。该抗体是从山羊抗血清中通过表位亲和层析纯化的。
浓度:2.00 毫克/毫升
同种型:IgG
克隆性:多克隆
偶联:未偶联
免疫原:源自人类ALIX蛋白第840个氨基酸至C末端的肽段。
抗原序列:APSIPTPAYQSLPAGGHAPTPPTPAPRTMPPTKPQPPARPPPPVLPANRAPSATAPSPVGAGTAAPAPSQTPGSAPPPQAQGPPYPTYPGYPGYCQMPMPMGYNPYAYGQYNMPYPPVYHQSPGQAPYPGPQQPSYPFPQPPQQSYYPQQ
特异性:可通过Western blot检测HUH、MDCK、AtT20、MCF7、COS7、HT1080和MCR细胞中内源性ALIX水平。
储存:持续使用时,存放在2-8摄氏度下一至两天。长期储存,请置于-20摄氏度的冰柜中。工作稀释样本若12小时内未使用应丢弃。
特别指示:使用前应轻轻混合抗体溶液。
Sicgen antibodies山羊抗ALIX多克隆抗体使用:
Application Values
WB 1:500-1:2,000
Sicgen antibodies山羊抗ALIX多克隆抗体图例:
1/1000稀释的抗ALIX抗体;每个泳道50µg的裂解物;1/10000稀释的兔多克隆山羊IgG(HRP)
文献参考:
Garbayo E, Ruiz-Villalba A, Hernandez SC, et al. Acta Biomater 2021 May PMID: 33716175
SICGEN antibodies专门研发和生产用于生命科学研究的多克隆抗体。它的主要业务是发现和销售用于研究和科学目的的新抗体。艾美捷科技是Sicgen antibodies的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Sicgen-antibodies.shtml