DNA Shuffling试剂盒的随机突变&试验准备
Jena Bioscience-DNA Shuffling试剂盒提供了每种技术所需的所有组件,并配有简化的文档,以Z大限度地提高成功率。
艾美捷DNA Shuffling试剂盒 #PP-103组分:
DNase I(黄色瓶盖):0.1单位/微升,100微升
消化缓冲液(蓝色瓶盖):10倍浓度,100微升
DNase终止溶液(黄色瓶盖):100微升
Taq聚合酶(红色瓶盖):5单位/微升,40微升
洗牌缓冲液(绿色瓶盖):10倍浓度,200微升
dNTP混合物(白色瓶盖):每种dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)10 mM,40微升
PCR级水(白色瓶盖):3乘以1毫升
DNA Shuffling的随机突变
DNA Shuffling是一种体外定向进化蛋白质的强大技术。它通过重组来自一个或多个相关基因的基因片段来产生结构多样性。
DNA Shuffling可以分为单基因Shuffling和多基因Shuffling。在单基因Shuffling中,只有一个基因被消化,随后重新组装,导致点突变的发生率约为0.7%。
DNA Shuffling在蛋白质进化中的主要应用是多基因Shuffling(通常称为分子育种)。在这项技术中,多个同源DNA序列被消化,随后重新组装。结果是包含额外点突变的嵌合基因库。
DNA Shuffling中的关键步骤是对感兴趣的基因进行消化,以产生合适大小的片段。因此,试剂盒中的所有试剂都经过优化,以便在方便的时间框架内获得所需大小的片段。
通常,使用平均大小为70-280 bp的片段会获得最佳结果。请注意,完全的DNase I消化会产生非常短的片段,这些片段无法通过后续的PCR进行扩增。
推荐试验准备:
目标基因的DNase I消化
对于总体积为50微升的反应,使用5微升10倍消化缓冲液在一个合适的管中,并添加0.5-2微克的起始DNA
添加PCR级水至最终体积为50微升
每微克起始DNA添加0.1单位(1.0微升)的DNase I
根据所需的片段大小,在37°C下孵化最多8分钟(参见图2)
通过添加5微升DNase终止溶液来中止消化,然后在75°C下加热灭活DNase I 10分钟。
通过琼脂糖凝胶电泳分离所需大小范围的片段,并使用标准程序进行纯化。
第一轮PCR(无引物):
对于50微升的反应,取5微升10倍洗牌缓冲液在一个合适的管中,并添加来自步骤1的纯化DNA片段至最终浓度为10-20纳克/微升
添加1微升dNTP混合物
添加2.5单位(0.5微升)的Taq聚合酶
添加PCR级水至最终体积为50微升
推荐的热循环条件:
变性:94°C 90秒
退火:55°C 30秒
延伸:72°C 30秒
循环次数:30-45
使用标准程序纯化PCR产物
第二轮PCR(有引物):
对于50微升的反应,取5微升10倍洗牌缓冲液,并添加2微升来自步骤2的PCR产物
添加1微升dNTP混合物
添加引物至最终浓度为0.8微摩尔/升
添加2.5单位(0.5微升)的Taq聚合酶
添加PCR级水至最终体积为50微升
推荐的热循环条件:
变性:94°C 30秒
退火:55°C 30秒
延伸:72°C 30秒
循环次数:15
DNA Shuffling试剂盒相关产品:
NU-1005, dNTP Bundle
NU-1008, dUTP - 溶液
NU-408, ATPαS
PR-103, GGTase-II(RabGGTase)
AB-102, 诺索链菌素 - 粉末
NU-1010-SOL, ATP - 溶液
NU-1012-SOL, GTP - 溶液
NU-1018, ddTTP
NU-426, dATPαS
PP-101, JBS dNTP突变试剂盒
https://www.amyjet.com/products/PP-103.shtml
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连接生物素和荧光素的GD2神经节苷脂寡糖:高度特异性和灵敏度的工具
GD2神经节苷脂寡糖作为一种潜在的生物标志物和治疗靶点,在癌症免疫治疗领域具有重要的研究价值。未来的研究可能会揭示更多关于GD2在癌症发展和治疗中的作用,以及如何更有效地利用GD2靶向治疗来提高癌症患者的治疗效果。
生物素和荧光素的结合:
生物素是一种小分子,能够与亲和素或链霉亲和素形成非常稳定的复合物。荧光素则是一种广泛用于生物医学研究的荧光标记物。将这两种分子与GD2神经节苷脂结合,可以为研究者提供一种高度特异性和灵敏度的工具,用于检测和分析GD2的表达、定位和功能。
艾美捷连接生物素和荧光素的GD2神经节苷脂寡糖:
货号:GLY094-BT-FLUO-A
英文名称:GD2 Ganglioside oligosaccharide linked to biotin and fluorescein (Linker-BT-FLUO A)
化学式:C83 H115 N9 O39 S2 Na2
分子量:1972.95
外观:橙色粉末
纯度:≥ 90% (重量比)- 通过1H-NMR测定
鉴定:质谱和1H-NMR分析 - 符合结构
来源:合成
仅用于研究和开发的实验室试剂。不供人类或动物使用。
连接生物素和荧光素的GD2神经节苷脂寡糖应用领域:
1. 细胞标记与成像
通过生物素和荧光素标记的GD2神经节苷脂,可以用于活细胞成像技术,如共聚焦显微镜和流式细胞术,以研究GD2在细胞表面的分布和动态变化。
2. 神经科学研究
GD2的异常表达与多种神经系统疾病相关,如神经母细胞瘤和某些神经退行性疾病。利用标记的GD2,研究者可以更好地理解这些疾病的病理机制。
3. 药物开发
在药物筛选和开发中,生物素和荧光素标记的GD2可以作为靶点,帮助研究者发现和优化潜在的治疗药物。
4. 临床诊断
在临床诊断领域,这种标记的GD2可能有助于开发新型的生物标志物,用于疾病的早期检测和监测。
https://www.amyjet.com/brand/Elicityl-GD2.shtml
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连接至马来酰亚胺的GD2神经节苷脂寡糖:稳定的生物活性和功能性
GD2神经节苷脂是一种与多种生物学过程密切相关的复杂糖脂,尤其在肿瘤生物学中,GD2的异常表达与某些类型的癌症紧密相关。近年来,将GD2神经节苷脂寡糖通过特定的化学链接与马来酰亚胺结合,为生物医学研究和药物开发提供了新的工具。
马来酰亚胺是一种含有活性巯基(-SH)反应基团的化合物,能够与含巯基的分子通过迈克尔加成反应形成稳定的共价键。这种特性使得马来酰亚胺成为连接生物分子和进行生物标记的有效工具。
GD2与马来酰亚胺的连接:
通过化学合成的方法,将GD2神经节苷脂寡糖连接至马来酰亚胺,生成的化合物具有独特的化学和生物学特性。这种连接不仅保留了GD2的生物活性,还增加了其在生物体系中的稳定性和功能性。
艾美捷连接至马来酰亚胺的GD2神经节苷脂寡糖:
产品代码 GLY094-MAL-A
产品名称 连接至马来酰亚胺的GD2神经节苷脂寡糖(连接剂-MAL A)
对离子 钠盐
结构 GalNAcβ1-4(Neu5Acα2-8Neu5Acα2-3)Galβ1-4Glc-O-(CH2)3-NHCO-CH2-
Maleimide
化学式 C51 H77 N5 O35 Na2
公式重量 1366,15
CAS号码
外观 白色粉末
纯度 ≥ 90% (重量比)- 1H-NMR
鉴定 MS和1H-NMR分析 - 符合结构
来源 合成
仅用于研究和开发的实验室试剂。不供人类或动物使用。
连接至马来酰亚胺的GD2神经节苷脂寡糖应用领域:
1. 生物探针
连接至马来酰亚胺的GD2可以作为生物探针,用于研究GD2在细胞表面的行为,以及与其他生物分子的相互作用。
2. 药物载体
这种连接物可以作为药物载体,将治疗分子定向传递到GD2高表达的肿瘤细胞,提高治疗效果并减少副作用。
3. 免疫治疗
GD2的马来酰亚胺衍生物可以用于制备免疫毒素或疫苗,通过特异性结合肿瘤细胞表面的GD2,激活免疫反应,杀伤肿瘤细胞。
4. 细胞生物学研究
在细胞生物学研究中,这种连接物可以用于研究GD2在细胞信号传导和细胞间通讯中的作用。
https://www.amyjet.com/products/ECL-GLY094-MAL-A-1mg.shtml
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GD2神经节苷脂寡糖:在神经系统功能中的多面性角色
GD2神经节苷脂寡糖是由糖和脂质组成的复杂糖脂,其结构特征使其在细胞间的识别、信号传导以及细胞间的相互作用中发挥重要作用。特别是在肿瘤细胞表面,GD2的高表达与肿瘤的侵袭性和转移性密切相关。
GD2神经节苷脂寡糖(>90% NMR)的高纯度形式,通过核磁共振(NMR)分析确认,为实验室研究和药物开发提供了一个强大的新工具。
艾美捷GD2神经节苷脂寡糖:
产品代码 GLY094-90%
产品名称:GD2神经节苷脂寡糖(核磁共振纯度>90%)
对离子:钠盐
结构式:GalNAcβ1-4(Neu5Acα2-8Neu5Acα2-3)Galβ1-4Glc
化学式:C42 H67 N3 O32 Na2
分子量:1171.96
CAS号码:[未提供]
外观:白色粉末
纯度:≥ 90% (重量比)- 1H-NMR
鉴定:质谱(MS)和1H-NMR分析 - 符合结构
来源:合成
仅作为研究和开发的实验室试剂。不适用于人体或动物使用。
通过化学合成或生物合成的方法,可以获得高纯度的GD2神经节苷脂寡糖。这种高纯度的产品(>90% NMR)在结构和功能上与天然GD2非常接近,是进行精确研究的理想材料。
1. 实验室研究
高纯度的GD2寡糖是实验室研究中的重要试剂,可用于探索GD2在细胞生物学中的功能,包括细胞粘附、迁移和信号传导。
2. 药物开发
在药物开发领域,GD2寡糖可以作为药物设计中的潜在靶点,或作为药物载体,用于开发针对特定肿瘤细胞的治疗策略。
3. 诊断工具
GD2寡糖的高纯度特性使其在开发新的诊断工具方面具有潜力,例如作为免疫检测中的标记物或捕获剂。
https://www.amyjet.com/products/ECL-GLY094-90-25mg.shtml
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连接生物素和硬脂酸链的GD2神经节苷脂寡糖的应用潜力
在生物医学研究中,精确的分子探针对于理解复杂的生物过程至关重要。GD2神经节苷脂寡糖,作为一种重要的生物分子,已在多种生物学过程中显示出其关键作用。通过化学合成技术,将生物素和硬脂酸链连接至GD2神经节苷脂寡糖,创造了一种新型的生物探针,为疾病诊断和治疗提供了新的策略。
GD2神经节苷脂是一种与细胞识别、信号传导和细胞间相互作用密切相关的分子。它在神经系统的发育和功能中起着核心作用,并且在某些类型的癌症中,如神经母细胞瘤,GD2的表达水平异常升高。
通过精确的化学合成方法,将生物素和硬脂酸链连接至GD2神经节苷脂寡糖的特定位置,形成一个新的化合物。这种合成不仅保留了GD2的生物活性,还通过生物素和硬脂酸链的引入,增加了其在生物医学研究中的应用潜力。
艾美捷连接生物素和硬脂酸链的GD2神经节苷脂寡糖:
产品代码:GLY094-BT-STEA-A
产品名称:连接至生物素和硬脂链的GD2神经节苷脂寡糖(连接剂BT-STEA A)
对离子:钠盐
结构:GalNAcβ1-4(Neu5Acα2-8Neu5Acα2-3)Galβ1-4Glc-O-(CH2)3-NHCO-CH(NHCOBiotin)-(CH2)4-NHCO-(CH2)16-CH3
化学式:C79 H134 N8 O36 S1 Na2
公式重量:1849.98
CAS号码:[未提供]
外观:白色粉末
纯度:≥ 90% (重量比)- 1H-NMR
鉴定:质谱(MS)和1H-NMR分析 - 符合结构
来源:合成
连接生物素和硬脂酸链的GD2神经节苷脂寡糖应用领域:
1. 细胞生物学研究
这种新型探针可以用于研究GD2在细胞表面的行为,包括其与其他分子的相互作用和信号传导途径。
2. 疾病诊断
利用生物素和亲和素之间的高亲和力,这种探针可以作为疾病诊断的标记物,特别是在癌症检测中。
3. 药物开发
作为药物载体,连接生物素和硬脂酸链的GD2寡糖可以用于靶向药物的传递,提高药物的疗效和减少副作用。
4. 免疫检测
在免疫检测技术中,这种探针可以作为捕获分子,用于检测特定抗体或抗原。
https://www.amyjet.com/brand/Elicityl-GD2.shtml
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GD2神经节苷脂寡糖接枝--细胞标记与成像应用
GD2神经节苷脂是一种在神经细胞膜上发现的复杂糖脂,与多种生物学功能相关,包括细胞信号传导、细胞识别和神经发育。GD2神经节苷脂寡糖接枝技术,即将GD2寡糖结构接枝到其他分子上,为生物医学研究和临床应用提供了新的策略和工具。
接枝技术涉及将GD2神经节苷脂寡糖的结构接枝到不同的载体分子上,如蛋白质、聚合物或药物分子。这种技术可以提高GD2寡糖的稳定性、生物利用度和靶向性。
艾美捷GD2神经节苷脂寡糖接枝:
产品代码:GLY094-CRM197
产品名称:GD2神经节苷脂寡糖嫁接在CRM197上
对离子:钠盐
结构:GalNAcβ1-4(Neu5Acα2-8Neu5Acα2-3)Galβ1-4Glc-CRM197
外观:白色粉末
纯度:主带 - TLC 10 g/L
来源:合成
GD2神经节苷脂寡糖接枝应用领域:
1. 蛋白质药物递送
将GD2寡糖接枝到蛋白质载体上,可以增强其在体内的循环时间和靶向性,从而提高药物的疗效和减少副作用。
2. 免疫治疗
GD2寡糖接枝的免疫毒素可以特异性地结合到肿瘤细胞表面,触发免疫反应,从而杀伤肿瘤细胞。
3. 细胞标记与成像
在细胞生物学研究中,GD2寡糖接枝的荧光分子可以用于细胞标记和活体成像,帮助研究者观察细胞行为和动态过程。
4. 药物筛选
GD2寡糖接枝的化合物库可以用于高通量筛选,以发现新的生物活性分子或药物候选物。
https://www.amyjet.com/products/ECL-GLY094-CRM197-1mg.shtml
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Eurogentec-DNA碱基硫代磷酸连接-1碱基化学性质说明
Eurogentec提供各种数量、长度和纯度水平的DNA基础寡核苷酸。
可以根据要求通过各种修改定制DNA基础寡核苷酸,并以不同格式交付。
磷酸硫代键由于用硫替换了非桥接氧,因此具有增加的核酸酶抵抗力。
艾美捷Eurogentec-DNA碱基硫代磷酸连接-1碱基:
货号:BA-DN010-004
长度:从5到139个碱基
合成规模:40纳摩尔 - 200纳摩尔 - 1000纳摩尔 - 2.5微摩尔 - 5微摩尔 - 10微摩尔 - 20微摩尔(可应要求提供更大量)
修改:提供超过300种修改
纯化:SePOP脱盐、RP-Cartridge-Gold™、HPLC、PAGE、双重HPLC
质量控制:MALDI-TOF MS
格式:干燥(15至39个DNA碱基的未修饰SePOP脱盐寡核苷酸除外:默认为100微摩尔H2O)。其他格式可选
包装:2毫升管、96孔或384孔板。2.5微摩尔以上的更高规模可能以50毫升管交付。
存储与稳定性:
1、重新悬浮条件:短暂旋转管子以将沉淀物收集在管子底部 - 加入适当体积的推荐缓冲液(参考技术数据表) - 让管子静置几分钟 - 用涡旋器旋转管子15秒
2、存储条件:干燥的寡核苷酸在常温下稳定18个月。溶液中的寡核苷酸在-20°C下稳定24个月。(公差-20°C±5°C。)更多信息请参考复溶-存储-稳定性页面
Eurogentec-DNA碱基硫代磷酸连接-1碱基相关产品:
Mupid One Electrophoresis System Complete Apparatus
SmartExtract DNA Kit, DNA Extraction Kit - 100 preps
Takyon ROX SYBR 2X MasterMix dTTP blue
Eurogentec产品包括研究、诊断和治疗级生物分子,如寡核苷酸、质粒、肽、重组蛋白和抗体等。助力于客户在分子生物学分析、诊断测试和新药商业化中的使用。艾美捷科技是Eurogentec的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Eurogentec.shtml
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Eurogentec-SmartExtract DNA试剂盒:12分钟内快速完成提取
Eurogentec-SmartExtract DNA提取试剂盒几乎可以从任何粗样品类型(如血液、人类和动物组织、植物种子和叶子…)中提取基因组DNA。
仅在12分钟内在单管中进行DNA提取。回收的溶液可以直接用于任何扩增反应(PCR或qPCR)。
艾美捷Eurogentec-DNA碱基硫代磷酸连接-1碱基:
货号:SK-DNEX-100
存储条件:如果试剂盒存放在避光、干燥的环境中,并保持室温(15°C-25°C),则稳定期为24个月。
活性:
模板类型:DNA
用途:研究用途
代码Nacres:NA.52
试剂盒组成:
Reagent A (Blue Cap) : 5 x 2 mL
Reagent B ( Yellow Cap) : 2 x 700 µL
Eurogentec--SmartExtract DNA试剂盒优点:
易于使用:仅在1管中提取
快速:提取在12分钟内完成
高效:回收率高
通用:适用于各种样品类型的单一试剂盒
强健:稳定24个月
Eurogentec--SmartExtract DNA试剂盒相关产品:
GeneReleaser DNA Extraction kits
Mupid One Electrophoresis System Complete Apparatus
SmartPure Gel Kit, DNA Purification Kit - 100 preps
Eurogentec产品包括研究、诊断和治疗级生物分子,如寡核苷酸、质粒、肽、重组蛋白和抗体等。助力于客户在分子生物学分析、诊断测试和新药商业化中的使用。艾美捷科技是Eurogentec的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/brand/Eurogentec.shtml