ROS-ID缺氧/氧化应激检测试剂盒:高灵敏度和特异性的荧光探针
氧化应激检测试剂(绿色)是一种非荧光的、可透过细胞的总ROS检测染料,可与多种活性物质直接反应。可使用配备标准荧光素(490/525 nm)和德克萨斯红(596/670 nm)滤光片的宽场荧光显微镜、共聚焦显微镜或配备蓝色(488 nm)激光的流式细胞仪进行细胞分析。
艾美捷ROS-ID缺氧/氧化应激检测试剂盒(#ENZ-51042-0125、ENZ-51042-K500)
替代名称:ROS / 硝基还原酶
应用:流式细胞术、荧光显微镜、荧光检测、高通量筛选(HTS)
应用说明:此试剂盒设计用于荧光显微镜和/或流式细胞术,适用于贴壁或悬浮细胞。
质量控制:使用流式细胞术方法进行测试,以评估缺氧细胞和/或与试剂盒中提供的染料结合的具有高水平总氧化应激的细胞。还获得显微镜图像。
对于-K500规格:500次荧光显微镜检测或100次流式细胞术检测。
对于-0125规格:125次荧光显微镜检测或25次流式细胞术检测。
使用/稳定性:在适当的储存条件下,试剂盒组分的稳定性可达到产品标签上注明的日期。
处理:避免冻融周期。
运输:干冰
储存:-20°C
内容物:缺氧红色检测试剂
氧化应激检测试剂(绿色)
ROS诱导剂(吡咯烷菌素)
缺氧诱导剂(DFO)
ROS-ID缺氧/氧化应激检测试剂盒亮点:
1、高灵敏度和特异性的荧光探针,可用于检测活细胞的缺氧和氧化应激
2、可用于分析贴壁或悬浮细胞系
3、试剂盒内包含整套试剂,包括ROS和缺氧诱导剂
ROS-ID缺氧/氧化应激检测试剂盒实验示例:
图 . 培养的人HeLa和HL-60细胞缺氧和氧化应激水平的检测。用缺氧诱导剂(DFO)和ROS诱导剂(脓青蛋白)处理细胞。每个象限中的数字反映了细胞(群体)的百分比。结果表明,缺氧和氧化应激染料具有特异性。
部分发表文章:
Dimethyloxalylglycine (DMOG), a Hypoxia Mimetic Agent, Does Not Replicate a Rat Pheochromocytoma (PC12) Cell Biological Response to Reduced Oxygen Culture: R. Chen, et al.; Biomolecules 12, 541 (2022)
Hydrogel microcapsules containing engineered bacteria for sustained production and release of protein drugs: C. Han, et al.; Biomaterials 287, 121619 (2022)
Inhibiting autophagy flux and DNA repair of tumor cells to boost radiotherapy of orthotopic glioblastoma: Q. Xu, et al.; Biomaterials 280, 121287 (2022)
Intracellular glucose starvation affects gingival homeostasis and autophagy: R. Li, et al.; Sci. Rep. 12, 1230 (2022)
Intrinsic radical species scavenging activities of tea polyphenols nanoparticles block pyroptosis in endotoxin-induced sepsis: Y. Chen, et al.; ACS Nano 16, 2429 (2022)
https://www.amyjet.com/products/ENZ-51042-0125.shtml
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可固定线粒体超分辨探针--适用于超分辨线粒体成像
PKMITO 系列的Red、Orange及Deep Red具有非常低的化学毒性、光学毒性和优秀的线粒体定位能力。综合这些优异的性能,PKMITO 系列产品非常适合用于线粒体成像,尤其在SIM和STED等超分辨成像和细胞分选等领域。除此之外,PKMITO® 系列产品也已经在斑马鱼等小动物实验中用于线粒体成像。
目前Genvivo证明了该探针与常规免疫标记和其他常用的固定样品荧光标记策略的兼容性。此外,我们发现PKMO FX促进了相关的超分辨率光学和电子显微镜,使多色荧光图像和透射电镜图像通过线粒体模式的相关性。我们的探针进一步扩展了线粒体工具包,用于纳米分辨率的多模态显微镜。
艾美捷Genvivo可固定线粒体超分辨探针(#PKMOF-1)可参考以下步骤:
1.在 PK Mito Red/ Orange/ Deep Red 中加入 100 μL(25 nmol)/ 20μL(5 nmol)新鲜干燥的 DMSO,混合均匀,得到 250 μM 母液。
2.将培养基预热至 37 ℃,将 PK Mito Red/ Orange/ Deep Red 母液按照1000- 5000倍稀释比例加入到预热的培养基中,稀释后的染液建议尽快使用,久置后可能导致部分染料分解或沉淀。
3.吸去细胞原有的培养基,更换为稀释好的培养基染液,在培养箱中孵育15 分钟。
4.用预热的培养基清洗细胞一至两次,即可用于荧光成像。
注:我们建议对大多数细胞系和原代细胞使用 200-300 nM,如HeLa、COS7、U-2OS、Vero细胞、原代神经元、脂肪细胞和肝细胞;对组织染色使用500-600 nM。不同样品染色条件有所差异,建议起始染色方法为 1000 倍稀释,15 分钟染色,请根据实际染色效果进行调整。
目前PKMITO 系列主要供应3款不同颜色的探针:
可固定线粒体超分辨探针文献参考:
1. Yang, Zhongtian, et al. "Cyclooctatetraene-conjugated cyanine mitochondrial probes minimizephototoxicity in fluorescence and nanoscopic imaging." Chemical Science (2020).
2. Liu, Tianyan, et al. "Multi-color live-cell STED nanoscopy of mitochondria with a gentleinnermembrane stain." Proceedings of the National Academy of Sciences 119.52 (2022): e2215799119.
3. Chen, Jingting, et al. "An aldehyde-crosslinking mitochondrial probe for STED imaging infixedcells."Proceedings of the National Academy of Sciences 121.19 (2024): e2317703121.
https://www.amyjet.com/brand/pk-mito-orange-fix.shtml
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人IFN-βELISA试剂盒,为免疫学研究提供精确的数据
PBL Assay Science 高灵敏度人IFN-β ELISA试剂盒:
货号:41415
样品类型:血清、血浆、组织培养基
特异性:人IFN-β
检测范围:
Protocol A: 1.2 - 150 pg/ml(提高血清性能)
Protocol B: 2.3 - 150 pg/ml
灵敏度(LLOQ):1.2 pg/ml
实验时间:
Protocol A: 3小时30分
Protocol B: 3小时
变异系数:
Inter-Assay < 8%
Intra-Assay < 10%
Spike Recovery > 90% in Serum
艾美捷人IFN-βELISA试剂盒设计用于测量自身免疫性疾病血清、健康血清/血浆或组织培养基样品中低水平或基础水平的人IFN-β,LLOQ灵敏度为1.2 pg/ml。
该测定法适用于测量人类血清样品中的商标治疗分子。研究人员和临床研究人员检查a)IFN-β分子的药代动力学,b)作为生物标志物的IFN-β,或c)作为TLR制剂或其他免疫反应调节剂活性的药效学标志物的IFN-β,将发现这种免疫测定是一种重要的实验室工具。
人IFN-βELISA试剂盒标准曲线:
使用ProtocolA从1.2-150 pg/ml的代表性人IFN-β标准曲线
人IFN-βELISA试剂盒部分引用文献:
1. Nagaoka, N., et al., (2022), "Effect of Casirivimab/Imdevimab Treatment on Serum Type I Interferon Levels in SARS-CoV-2 Infection", Viruses, 14(7):1399, DOI: 10.3390/v14071399
2. Dickey, L. et al., (2022), HIV-1-induced type I IFNs promote viral latency in macrophages, J. Leukoc. Biol. PMID:35588262, DOI:10.1002/JLB.4MA0422-616R
3. Steiner, A. et al., (2022), Deficiency in coatomer complex I causes aberrant activation of STING signalling, Nature Communications, 13:2321, PMID: 35484149, DOI: 10.1038/s41467-022-29946-6
4. Akoi, Y. et al., (2022), Evaluation of the Relationships between Intestinal Regional Lymph Nodes and Immune Responses in Viral Infections in Children, Int. J. Mol. Sci., 23:318, DOI: 10.3390/ijms23010318
人IFN-βELISA试剂盒相关产品:
人干扰素-β-中药ELISA,高灵敏度
人IFN-β(β1a,哺乳动物表达)
人IFN-α全亚型ELISA试剂盒,高灵敏度(血清、血浆、中药)
https://www.amyjet.com/featured/VeriKine-HS-IFN-%CE%B2-ELISA.shtml
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人IFN-αELISA试剂盒:确保实验结果的准确性与重复性
PBL Assay Science 人IFN-αELISA试剂盒:
货号:41100
基质兼容性:组织培养液(TCM)
检测范围:12.5 - 500 pg/ml 或 156 - 5000 pg/ml(扩展范围)
检测时长:3小时15分钟
特异性:人类干扰素α
变异系数(CVs):
跨批变异系数 ≤ 8%
批内变异系数 ≤ 8%
交叉反应性
不与以下发生交叉反应:
人类IFN-γ(干扰素-γ)、IFN-β(干扰素-β)或IFN-ω(干扰素-ω)
小鼠或大鼠IFN-α(干扰素-α)、IFN-β 或 IFN-γ
牛IFN-τ(干扰素-τ)
储存条件:2-8°C
运输条件:湿冰
艾美捷人IFN-αELISA试剂盒已被开发用于使用夹心酶联免疫测定法(ELISA)量化细胞或组织培养基(TCM)中的人IFN-γ水平。该试剂盒基于ELISA,具有与辣根过氧化物酶(HRP)缀合的抗检测抗体。四甲基联苯胺(TMB)是底物。该测定基于美国国立卫生研究院提供的人类IFN-α的国J参考标准。
这种经常被引用的ELISA测定法从12.5-500 pg/ml或从156-5000 pg/ml的扩展范围定量组织培养基(TCM)中的人IFN-α。
人IFN-αELISA试剂盒标准曲线:
代表性IFN-α标准曲线使用PBL的人从12.5pg/ml到500pg/mlIFN-αELISA(41100)。
人IFN-αELISA试剂盒部分引文:
Kondo, Yasuteru, et al. (2019). The reduction of miR146b-5p in monocytes and T cells could contribute to the immunopathogenesis of hepatitis C virus infection. Scientific Reports, 13 pgs. PMID: 31527804.
Loughran, Sinead, et al. (2018). Influenza infection directly alters innate IL-23 and IL-12p70 and subsequent IL-17A and IFN-γ responses to pneumococcus in vitro in human monocytes. PLOS One, 17 pgs. PMID: 30192848.
Moskwa, Sylwia, et al. (2018). Innate Immune Response to Viral Infections in Primary Bronchial Epithelial Cells is Modified by the Atopic Status of Asthmatic Patients. AAIR, 11 pgs. PMID: 29411555.
Svensson, Alexandra, et al. (2017). Maturation-Dependent Expression of AIM2 in Human B-Cells. PLOS One, 13 pgs. PMID: 28809949.
Wang, et al. (2017). Intracellular DNA sensing pathway of cGAS-cGAMP is decreased in human newborns and young children. Molecular Immunology. PMID: 28412547.
人IFN-αELISA试剂盒相关产品:
人IFN-α全亚型ELISA试剂盒,高灵敏度(中药)
人IFN-α全亚型ELISA试剂盒,高灵敏度(血清、血浆、中药)
https://www.amyjet.com/products/PBL-41100-1.shtml
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HMGBiotech-3S-HMGB1:高纯度、高稳定性的高迁移率族蛋白B1生物工程产品
HMGB1是一种核蛋白,由坏死细胞被动释放,被凋亡细胞保留,并且由炎症细胞主动分泌(Dumitriu等人,2005年,《免疫趋势》,HMGB1:从内部引导免疫,第26卷,381-387页)。HMGB1对生命至关重要:Hmgb1基因敲除的小鼠在出生后不久就会死亡。
HMGB1包含三个保守的半胱氨酸残基(C23、C45和C106),并且对氧化还原反应敏感(Yang等人,2012年)。趋化因子-HMGB1(具有趋化活性的形式)是完全还原的;细胞因子-HMGB1在C23和C45之间含有一个二硫键;进一步氧化成磺酸盐会取消这两种活性。
在3S-HMGB1中,所有的半胱氨酸都被丝氨酸所取代:这些取代在体外和体内都保留了趋化活性,消除了诱导细胞因子的活性,并使蛋白质对活性氧(ROS)的失活具有抵抗力(Venereau等人,2012年)。这种突变蛋白是在大肠杆菌中生产的。
艾美捷 HMGBiotech-3S-HMGB1(#HM-132)相关参数:
它具有以下序列:
MGKGDPKKPR GKMSSYAFFV QTSREEHKKK HPDASVNFSE FSKKSSERWK TMSAKEKGKF EDMAKADKAR YEREMKTYIP PKGETKKKFK DPNAPKRPPS AFFLFSSEYR PKIKGEHPGL SIGDVAKKLG EMWNNTAADD KQPYEKKAAK LKEKYEKDIA AYRAKGKPDA AKKGVVKAEK SKKKKEEEDD EEDEEDEEEE EEEEDEDEEE DDDDE
分子量:不可氧化的趋化因子-HMGB1由215个氨基酸残基组成,计算出的分子量大约为24.8 kDa。
结构:HMGB1由两个相当刚性的L形DNA结合域组成,每个称为“HMG盒”,以及一个以30个连续的负电荷氨基酸结尾的无结构尾部。
纯度:纯化的蛋白质>95%均一(电泳和质谱分析)。它不含核酸,也不含有IL-1beta。
内毒素水平:纯化的蛋白质不含LPS(Cambrex Limulus Amoebocyte Assay QCL-1000,每毫克蛋白质<0.4 ng LPS)。
活性:通过其诱导迁移的能力来测量。在细胞迁移实验中,1 nM时获得Z大活性。
缓冲液:不可氧化的趋化因子-HMGB1从50 mM HEPES缓冲液,pH 7.9和500 mM NaCl中冻干。
储存:2-8°C。一旦蛋白质重新溶解,可以冷冻储存(-20°C)。
本产品仅供研究使用,不能用于人体。
HMGBiotech-3S-HMGB1部分出版参考:
HO-1 attenuates testicular ischaemia/reperfusion injury by activating the phosphorylated C-jun-miR-221/222-TOX pathway
MicroRNA-146a gene transfer ameliorates senescence and senescence-associated secretory phenotypes in tendinopathic tenocytes
Therapeutic effects of anti-diabetic drugs on traumatic brain injury
ASSOCIATION BETWEEN HIGH MOBILITY GROUP BOX 1 PROTEIN GENE (rs41369348) POLYMORPHISM AND IMMUNOGLOBULIN A VASCULITIS IN CHILDREN
Venereau et al (2012) Mutually exclusive redox forms of HMGB1 promote cell recruitment or proinflammatory cytokine release. Journal of Experimental Medicine (2012).
Tirone et al (2017) High mobility group box 1 orchestrates tissue regeneration via CXCR4. J.Exp Med
艾美捷科技是HMGBiotech的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/HMGBiotech-new.shtml
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HMGBiotech-SDF1–迁移中检测的基质细胞衍生因子1Α活性研究
重组基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)是一种8kDa的趋化因子蛋白,在许多组织和细胞类型中表达。该蛋白在人、小鼠和大鼠中几乎相同(92%同源性)。
趋化因子SDF-1α与趋化因子受体CXCR4结合,在白细胞运输、造血、器官发生、细胞分化和组织再生的稳态调节中发挥重要而独特的作用(Murphy,2002)。
SDF-1α与危言耸听蛋白HMGB1(高迁移率组1)形成异源复合物,通过CXCR4受体促进细胞募集。
艾美捷 HMGBiotech-SDF1–迁移中检测的基质细胞衍生因子1Α(CXCL12)(#HM-172)相关参数:
它具有以下序列:
MKPVSLSYRCPCRFFESHVARANVKHLKILNTPNCALQIVARLKNNNRQVCIDPKLKWIQEYLEKALNK
分子量:基质细胞衍生因子1α(SDF-1α,CXCL12)由69个氨基酸残基组成,计算出的分子量大约为8 kDa。
纯度:纯化的蛋白质>95%均一(通过电泳和质谱分析)。它不含核酸。
内毒素水平:纯化的蛋白质不含LPS(Cambrex Limulus Amoebocyte Assay QCL-1000,每毫克蛋白质<0.1 ng LPS)。
活性:通过其诱导迁移的能力来测量。在细胞迁移实验中,1 nM时获得Z大活性。
缓冲液:基质细胞衍生因子1α(SDF-1α,CXCL12)是从不含钙和镁的DPBS中冻干的。
储存:冻干状态下在2-8°C下保存。一旦用水泡发,蛋白质可以冷冻储存(-20°C)。避免反复冻融。
本产品仅供研究使用,不能用于人体。
HMGB1·CXCL12:迄今为止报道的第一种模糊趋化因子异质复合体
HMGBiotech Srl参与了最近的一项研究,通过一种综合性的结构方法,揭示了HMGB1·CXCL12异质复合体形成的分子细节。
这种动态复合体是等摩尔比形成的,这与之前的假设相反。
结构化和非结构化的HMGB1区域与CXCL12的二聚化表面相互作用。这项工作阐明了酸性无序区域(IDR)是如何参与HMGB1·CXCL12复合体形成的。研究结果表明,干扰HMGB1·CXCL12复合体中的相互作用可能潜在地抑制其在炎症条件下的有害影响。
Mantonico等人。炎症介质HMGB1的酸性内在无序区域介导与趋化因子CXCL12的模糊相互作用。bioRxiv 2023。
HMGBiotech-SDF1–迁移中检测的基质细胞衍生因子1Α文献参考:
Schiraldi et al (2012) HMGB1 promotes recruitment of inflammatory cells to damaged tissues by forming a complex with CXCL12 and signaling via CXCR4. J Exp Med. 2012: 551–563.
艾美捷科技是HMGBiotech的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/HMGBiotech-new.shtml
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HMGBiotech-HMGB1的BOXA,人和老鼠:结构特征与免疫调节作用分析
BoxA是HMGB1蛋白(高迁移率族蛋白盒)中高度保守的DNA结合域之一,并且能在体内抑制HMGB1的作用。HMGBiotech的BoxA与人类或小鼠HMGB1的序列没有差异,并且作为一种自身抗原,引发非常低的免疫反应。
BoxA能在小鼠腹膜炎模型中保护免受败血症的影响(Yang等人。用内源性高迁移率族蛋白1的拮抗剂逆转已建立的败血症。美国国家科学院院刊,2004年,101: 296-301),以及在小鼠HBV感染模型中保护免受肝炎的影响(Sitia等人。用HMGB1抑制剂治疗可减少HBV转基因小鼠CTL诱导的肝病。白细胞生物学杂志,2007年,81:100-7)。
树突状细胞通过分泌HMGB1促进自身的成熟以及T细胞的增殖、存活和Th1分化,而BoxA抑制这些活动(Dumitriu等人。树突状细胞释放的HMGB1通过晚期糖化终产物受体(RAGE)控制T细胞激活。免疫学杂志,2005年,174:7506-15)。
BoxA还抑制HMGB1的趋化活性以及HMGB1对干细胞的有丝分裂活性。
来自HMGB1的BoxA是在大肠杆菌中从一个表达质粒生产的,该质粒编码未修改的哺乳动物序列,这在人类和小鼠中是完全相同的(Müller等人。HMGB1与双链DNA相互作用的热力学。生物化学,2001年,40: 10254-61)。
艾美捷 HMGBiotech-HMGB1的BOXA,人和老鼠(#HM-012)相关参数:
它的序列为:
["MGKGDPKKPR GKMSSYAFFV QTCREEHKKK HPDASVNFSE FSKKCSERWK TMSAKEKGKF EDMAKADKAR YEREMKTYIP PKGETKKKF"]
分子量:来自HMGB1的BoxA由89个氨基酸组成,计算出的分子量大约为10.4 kDa。
纯度:纯化的蛋白质>98%均一(电泳和质谱分析)。
内毒素水平:纯化的蛋白质不含LPS(Cambrex Limulus Amoebocyte Assay QCL-1000,每毫克蛋白质<0.4 ng LPS)。
缓冲液:50 mM HEPES-Na pH 7.9,500 mM NaCl,0.5 mM DTT。
储存:蛋白质是冻干发货的。一旦重新溶解,可以在-20°C下冷冻储存。
本产品仅供研究使用,不能用于人体。
HMGBiotech-HMGB1的BOXA,人和老鼠文献参考:
Andrassy et al (2008) HMGB1 in ischemia-reperfusion injuryof the heart. Circulation 117:3216-26
Dumitriu et al (2005) Release of HMGB1 by dendritic cellscontrols T cell activation via the receptor for advancedglycation endproducts (RAGE). J Immunol 174:7506-15
Maroso et al (2010) Toll-like receptor 4 and HMGB1 areinvolved in ictogenesis and can be targeted to reduceseizures. Nature Medicine 16:413-9
Muhammad et al (2008) The HMGB1 receptor RAGEmediates ischemic brain damage. J Neurosci 28:12023-31.
Sitia et al (2007) Treatment with HMGB1 inhibitorsdiminishes CTL-induced liver disease in HBV transgenicmice. J Leukoc Biol 81:100-7
Urbonaviciute et al (2008) Induction of inflammatory andimmune responses by HMGB1-nucleosome complexes:implications for the pathogenesis of SLE. J Exp Med 205:3007-18.
Yang et al (2004) Reversing established sepsis with antagonistsof endogenous HMGB1. Proc Natl Acad Sci USA 101: 296-301
艾美捷科技是HMGBiotech的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/HMGBiotech-new.shtml
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HMGBiotech高纯度BOXA 2D(BOXA WT的阴性对照)实例参考
BoxA 2D是BoxA(HMGB1蛋白的DNA结合结构域)的突变形式,其中两个半胱氨酸被天冬氨酸取代。它由89个氨基酸组成,计算分子质量约为10.4kDa。BoxA 2D迁移测定不能阻断HMGB1诱导的成纤维细胞迁移。它只含有微量的LPS(<0.4 ng/mg蛋白)。
艾美捷 HMGBiotech-BOXA 2D(BOXA WT的阴性对照)(#HM-012)相关参数:
它的序列为:
MGKGDPKKPR GKMSSYAFFV QTDREEHKKK HPDASVNFSE FSKKDSERWK TMSAKEKGKF EDMAKADKAR YEREMKTYIP PKGETKKKF
分子量:来自HMGB1的BoxA 2D由89个氨基酸组成,计算出的分子量大约为10.4 kDa。
纯度:纯化的蛋白质>98%均一(通过电泳和质谱分析)。
内毒素水平:纯化的蛋白质不含LPS(Cambrex Limulus Amoebocyte Assay QCL-1000,每毫克蛋白质<0.4 ng LPS)。
缓冲液:50 mM HEPES-Na pH 7.9,500 mM NaCl,0.5 mM DTT。
储存:蛋白质是冻干发货的。一旦重新溶解,可以冷冻储存在-20°C。
本产品仅供研究使用,不能用于人体。
图1. 使用Coomassie Blue染色的15% SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
图2. 使用3T3小鼠细胞的迁移实验。BoxA野生型和BoxA 2D变体均以10ng/mL的浓度使用。
HMGBiotech-BOXA 2D(BOXA WT的阴性对照)文献参考:
Inhibition of inflammatory liver injury by the HMGB1-A box through HMGB1/TLR-4/NF-κB signaling in an acute liver failure mouse model
High-Mobility Group Box 1 Inhibitor BoxA Alleviates Neuroinflammation-Induced Retinal Ganglion Cell Damage in Traumatic Optic Neuropathy
Use of an antagonist of HMGB1 in mice affected by malignant mesothelioma: a preliminary ultrasound and optical imaging study
High mobility group box 1 inhibition by BoxA attenuates ovalbumin-induced allergic rhinitis in mice
Disulfide HMGB1 acts via TLR2/4 receptors to reduce the numbers of oligodendrocyte progenitor cells after traumatic injury in vitro
High mobility group box-1 (HMGB1) antagonist BoxA suppresses status epilepticus-induced neuroinflammatory responses associated with Toll-like receptor 2/4 down-regulation in rats
Inhibition of Cerebral High-Mobility Group Box 1 Protein Attenuates Multiple Organ Damage and Improves T Cell-Mediated Immunity in Septic Rats
艾美捷科技是HMGBiotech的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
https://www.amyjet.com/news/HMGBiotech-new.shtml