钉螺体内血吸虫核酸检测试剂盒(环介导等温扩增技术)
钉螺体内血吸虫核酸检测试剂盒(环介导等温扩增技术)
钉螺体内血吸虫核酸检测试剂盒(环介导等温扩增技术)
试剂应避免反复冻融，所有试剂可在第一次溶解时分装冻存备用，分装的离心管需用消毒灭菌处理的0.5或1.5m离心管。
5。
配制反应体系时应将反应管置冰上操作。
配制所有反应体系后宜轻轻混匀，低速离心片刻(≤2000r/min,5s)避免振荡或用Tip反复吹打管内液体。
(五)操作步骤:
1)反应体系配制:按25ul反应体系进行环介导等温扩增(AMP)反应。按照设计，取无菌处理的0.2mLPCR 反应管，分别加入DNA模板3.0m1、2XLAMP反应缓冲液 12.5 μ1、靶序列扩增引物溶液1.0 μ1、、BStDNA 聚合酶(Bst)1.0 μl、1.0μl显色试剂(Calcein)、无核酸酶水(H0)6.5μl。同时每次实验均应设置1管阳性对照(PC-DNA)和1管阴性对照(NC)。
2)等温扩增反应:将反应管置浮标上,于65℃水浴锅,恒温孵育 60~90 min 后，室温静置 5-10min。
3)结果判定:肉眼观察反应管内液体颜色变化，液体变成绿色判定为阳性:阴性为(棕)黄色。若阴性对照反应管内液体显示绿色，说明实验室或检测系统可能受到其它 DNA 污染，需重新试验。
(六)试剂盒规格、产品号、有效期限、产品号:
试剂盒名称
钉螺体内血吸虫核酸检测试剂盒(环介导等温扩增技术)
产品号
规格
NIPD2015030150次/盒
储存方法
-20℃冻存
有效期
一年
(七)研发单位
中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所，