昆虫杆状病毒表达系统-卡梅德生物
昆虫杆状病毒表达系统,是一种广泛用于昆虫杆状病毒蛋白表达的系统,涉及使用杆状病毒,这是一种昆虫特异性病毒,在昆虫细胞中传递和表达外源基因。以下是昆虫杆状病毒表达系统的一些特征:
1.杆状病毒作为载体:杆状病毒具有有效感染昆虫细胞并将外源基因引入其基因组的能力。这些病毒可以被改造成携带和表达感兴趣的基因,使其成为昆虫杆状病毒蛋白表达的有用载体。
2.昆虫细胞系:昆虫杆状病毒表达系统主要利用来源于秋粘虫(草地贪夜蛾)或卷心菜环蛾(Trichoplusia ni)的昆虫细胞系。这些细胞系,如Sf9和Sf21,由于其高转染效率和支持强大病毒复制的能力,通常用于蛋白表达:如昆虫sf9细胞表达、昆虫sf21细胞表达。
3.蛋白质折叠和翻译后修饰:昆虫细胞拥有一种真核细胞机制,能够进行适当的蛋白质折叠和译后修饰,如糖基化和磷酸化。该系统对于生产需要这些修饰以获得适当功能的复杂且具有生物活性的重组蛋白是特别有利的。
4.高蛋白产量:昆虫杆状病毒表达系统以其产生高产量重组蛋白的能力而闻名。杆状病毒可以有效地感染昆虫细胞并在其中复制,从而导致高水平的蛋白质表达。该系统对难以在其他系统(如细菌或哺乳动物细胞)中表达的蛋白质特别有益。
5.悬浮培养:昆虫细胞可以在悬浮培养中生长,从而可以大规模生产重组蛋白,悬浮培养系统为大量生产蛋白质提供了可扩展性和易操作性。
6.安全性:昆虫杆状病毒表达系统被认为是安全的,因为杆状病毒是昆虫特有的,不会感染脊椎动物,包括人类。昆虫杆状病毒表达系统在生物安全方面提供了额外的优势,并避免了与基于哺乳动物细胞的表达系统相关的潜在风险。
7.下游加工:昆虫杆状病毒表达系统中产生的重组蛋白通常分泌到培养基中,简化了下游加工。在收获培养基后,可以使用各种色谱和过滤技术来纯化蛋白质。
8. 蛋白质复合物和多聚体蛋白质:昆虫杆状病毒表达系统适用于生产蛋白质复合物或多聚体蛋白,允许多个亚基的共表达或融合蛋白的产生,促进生物相关复合物的产生。
9.灵活性:昆虫杆状病毒表达系统在启动子选择、载体设计和基因表达调控方面提供了灵活性,允许使用强启动子,如多面体启动子,来驱动高水平的蛋白质表达。
但是昆虫杆状病毒表达系统也有其不可忽视的缺点:过程复杂且耗时;由于容纳DNA量有限,会限制有效表达的基因或蛋白质的大小;尽管昆虫细胞为蛋白质表达提供了真核环境,但它们所进行的翻译后修饰可能与哺乳动物细胞中的不同等。
总的来说,昆虫杆状病毒表达系统是生产高产率和适当折叠的重组蛋白的有力工具,其进行翻译后修饰的能力及其生物安全特性使其被广泛选择。