本试剂盒采用碱裂解法裂解细菌,再通过离心吸附柱在高盐和低pH条件下高效结合溶液中的DNA。离心吸附柱中采用的特制玻纤膜材料可高效、专一吸附DNA。本试剂盒适用于提取1-5 ml过夜培养的大肠杆菌,质粒提取得率和质量与宿主菌的种类和培养条件、细胞的裂解、质粒拷贝数、质粒的稳定性、抗生素等因素有关。使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化、文库筛选、体外翻译、转染一些常规的传代细胞等。(低内毒素型质粒抽提试剂盒参见MPD2100)
产品包装
50次/100次/250次
储存条件
试剂盒可置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于4℃。
注意:第一次使用前将RNase A加入Solution I中混匀后建议置于4℃保存;Solution III 建议置于4℃保存;
注意事项
1. Solution I 在使用前应先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A全部加入),混匀后4℃保存。
2. Solution II 如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。使用后应立即盖紧盖子,以避免空气中的CO2不Solution II 中的NaOH反应,从而造成溶液裂解效率下降。
3. DNA Wash Buffer 在使用前先加入无水乙醇(按试剂盒包装规定的体积加入)。
4. 所有离心步骤均为使用常规台式离心机室温下进行离心。
5. 去蛋白液PE可以有效去除残留的蛋白污染,当宿主菌为endA+(TG1、BL21、HB101、ET12567、JM系列)等核酸酶含量较高的菌株时,则推荐使用去蛋白液PE。
仅供研究,不得用于临床诊断