产品介绍
人鸟苷酸环化酶激活因子2B(GUCA2B)酶联免疫试剂盒
英文名:Human Guanylate Cyclase Activator 2B (GUCA2B)ELISA KIT
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 人鸟苷酸环化酶激活因子2B(GUCA2B)水平。用纯化的 人鸟苷酸环化酶激活因子2B(GUCA2B)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 人鸟苷酸环化酶激活因子2B(GUCA2B),再与HRP标记的 人鸟苷酸环化酶激活因子2B(GUCA2B)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中 人鸟苷酸环化酶激活因子2B(GUCA2B)浓度。人鸟苷酸环化酶激活因子2B(GUCA2B)酶联免疫试剂盒
常用的酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AP),相应的底物分别是邻苯二胺(OPD)和对硝基苯磷酸盐,前者呈色反应为棕黄色,后者为蓝色。可用目测定性,也可用酶标仪测定光密度(OD)值以反映抗原含量。
实验目的
1、 熟悉酶免疫技术基本原理和方法、免疫荧光技术的基本原理。
2、 了解酶联免疫吸附实验(间接法)的基本过程及其作用。
目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),它是使抗原或抗体吸附于固相载体,使随后进行的抗原抗体反应均在载体表面进行,从而简化了分离步骤,提高了灵敏度,即可检测抗原,也可检测抗体。实验方法包括间接法、夹心法及竞争法。
为了检测抗原可用夹心法。将特异性抗体吸附在固相载体(聚苯乙烯制成的小管、小盘或小孔)上,然后加被测溶液,倘样品中有相应抗原,则与抗体在载体表面形成复合物。洗涤后加入酶标记的特异性抗体,后者通过抗原也结合到载体的表面。洗去过剩的标记抗体,加入酶的底物,在一定时间内经酶催化产生的有色产物的量与溶液中抗原含量成正比,可用肉眼观察或分光光度计测定。
为了检测抗体可用间接法。使抗原吸附于载体上,然后加入被测血清,如有抗体,则与抗原在载体上形成复合物。洗涤后加酶标记的抗球蛋白(抗抗体)与之反应。洗涤后加底物显色,有色产物的量与抗体的量成正比。
人鸟苷酸环化酶激活因子2B(GUCA2B)酶联免疫试剂盒 Human Guanylate Cyclase Activator 2B (GUCA2B)ELISA KIT
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