产品简介Taq plus DNA Polymerase是由pfu DNA Polymerase和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成,具有扩增效率高,错配率低的特点。与Taq DNA聚合酶相比,Taq plus DNA聚合酶具有扩增长度长,保真性好的优点;与pfu DNA聚合酶相比,具有扩增速度快,反应效率高的优点。此酶具有比Taq DNA聚合酶约3倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A,可以通过TA克隆法进行克隆。产品组成Taq plus DNA Polymerase(5U/μl) 100μl
10×Taq plus PCR buffer(含Mg2+) 1ml
活性定义 1单位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。酶贮存缓冲液 50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol适用范围适用于要求保真性和高效率的PCR反应,大多数情况下可以替代Taq DNA 聚合酶。使用说明1. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
成分 | 体积 | 终浓度 |
Template | 0.1-1μg | as you wish |
Primer 1(10 μM) | 1μl | 200nM |
Primer 2(10 μM) | 1μl | 200nM |
10×Taq plus PCR buffer | 5μl | 1× |
dNTP Mixture(10 mM) | 1μl | 200μM each |
Taq plus(5 U/μl) | 0.5-1μl | 2.5-5U |
ddH2O | up to 50μl | - |
2. 混匀后,离心快甩将反应液收集到管底。
3. PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
4. PCR仪上执行以下程序:
三步法:
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
初始变性 | 94℃ | 1-5 min | 1 |
变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
退火 | Tm-5℃* | 30 sec |
延伸 | 72℃ | 1 min/kb |
最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
其他详细资料 http://phygene.com/index.php/ph0105-taq-plus-dna-polymerase-5u-ul.html
*Important Note: This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
我们所提供的产品仅供科研使用,不得用于临床诊断、治疗、食品或者化妆品等用途!